反义miR-21抑制U251人脑胶质瘤细胞株增殖的体外研究

目的探讨敲低miR-21表达抑制U251人脑胶质瘤细胞株增殖能力的效果和机制。方法脂质体介导转染反义寡聚核苷酸（AS—miR-21）下调U251人脑胶质瘤细胞株miR-21的表达。使用实时定量PCR和原位杂交法鉴定转染后U251细胞miR-21表达水平下调；MTF法评价AS—miR-21抑制U251细胞生长效果；流式细胞术检测转染后U251细胞周期分布和凋亡；采用细胞免疫荧光技术（PCNA、CyclinDl、Bcl-2、PTEN和Septin-7）评价转染后U251细胞肿瘤生物学性状改变。结果MTY结果显示AS—miR-21转染组肿瘤细胞生长速度小于对照组与无义寡核苷酸（F=78．926，P=0．000）组；实时定量PCR法：AS—miR-21转染组miR-21表达下调为对照组0．0424-0．012；LNA—miR-21原位杂交显示AS—miR-21转染组miR-21表达水平较对照组与无义寡核苷酸组下调；流式细胞术检测可见AS—miR-21转染组细胞周期存在G0／G1期阻滞（Х^2=14．160，P=0．007）且凋亡比例高于对照组与无义寡核苷酸组（F=23341．25，P=0．000）；细胞免疫荧光法表明AS—miR-21治疗后U251细胞PCNA、CyclinDl、Bcl-2表达下调，PTEN、Septin-7表达上调。结论以miR-21作为靶点抑制U251人脑胶质瘤细胞株生长结果肯定，miR-21可以作为人脑胶质瘤基因治疗的侯选靶点。

碱性成纤维细胞生长因子反义寡核苷酸抑制胶质瘤细胞增殖的体外试验

目的探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)反义寡核苷酸抑制胶质瘤细胞生长的作用。方法以脂质体介导将硫代磷酸修饰的bFGF反义寡核苷酸转染人脑胶质瘤细胞系TJ905,采用原位杂交和MTT对bFGF mRNA表达水平及细胞存活率进行检测。结果经bFGF反义寡核苷酸转染,TJ905细胞bFGF mRNA表达水平显著降低,细胞存活率明显下降。结论 bFGF反义寡核苷酸可抑制胶质瘤细胞增殖。可进一步研究将bFGF基因作为反义治疗的目的基因。