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天蓝色链霉菌M145中bldA依赖性突变的遗传定位与分析
1
作者
赵丽云
CHATER K F
陶美凤
《华中农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第4期341-346,共6页
bldA编码天蓝色链霉菌中识别UUA密码的tRNA,大部分菌株的生长不需要bldA功能。M145菌株发生了突变,使bldA成为必需基因。本研究以M145和1258等菌株为亲本,通过3轮杂交筛选构建了菌株LY3,作为遗传定位bldA依赖性(bldA-dependent,bad)突...
bldA编码天蓝色链霉菌中识别UUA密码的tRNA,大部分菌株的生长不需要bldA功能。M145菌株发生了突变,使bldA成为必需基因。本研究以M145和1258等菌株为亲本,通过3轮杂交筛选构建了菌株LY3,作为遗传定位bldA依赖性(bldA-dependent,bad)突变的亲本之一。用LY3与1258杂交,筛选了217个重组子并鉴定其基因型。对217个重组子的基因型进行遗传分析,将bad突变定位于天蓝色链霉菌染色体SCO3934与SCO4659基因之间的758 kb区域。
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关键词
天蓝色链霉菌M145
BLDA
遗传定位
bad突变
bad
^+
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职称材料
酵母DNA修复基因RAD16温度敏感突变株的分离及人类互补基因的鉴定
被引量:
2
2
作者
朱应葆
韩云
孙艳
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第5期357-362,共6页
用PCR介导的基因重组法敲除酵母RAD16基因,用羟胺处理酵母RAD16基因表达质粒,获得RAD16基因突变库,并将其转化RAD16基因敲除的酵母细胞.用平皿复制法获得温度敏感突变株rad16-ts2,经互补试验证实,该突变表型为RAD16基因突变所致.将人cDN...
用PCR介导的基因重组法敲除酵母RAD16基因,用羟胺处理酵母RAD16基因表达质粒,获得RAD16基因突变库,并将其转化RAD16基因敲除的酵母细胞.用平皿复制法获得温度敏感突变株rad16-ts2,经互补试验证实,该突变表型为RAD16基因突变所致.将人cDNA表达文库转化rad16-ts2后筛选温度敏感拯救(rescue)表型,回收拯救表型酵母细胞中的质粒.测序结果表明,所获得的人cDNA克隆为HLTF/Zbu1/SMACA3基因.比较分析显示,人类该基因编码蛋白质氨基酸序列与酵母Rad16的同一性为32%,相似性则达50%.人HLTF/Zbu1/MACA3基因在HeLa细胞中过表达,可显著抑制过氧化氢损伤和UV照射诱导的细胞凋亡.
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关键词
bad
16温度敏感
突变
株
分离与鉴定
遗传互补
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职称材料
题名
天蓝色链霉菌M145中bldA依赖性突变的遗传定位与分析
1
作者
赵丽云
CHATER K F
陶美凤
机构
华中农业大学农业微生物国家重点实验室
John Innes Centre Norwich Research Park Colney Norwich NR
出处
《华中农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第4期341-346,共6页
基金
国家自然科学基金项目(30200005)资助
文摘
bldA编码天蓝色链霉菌中识别UUA密码的tRNA,大部分菌株的生长不需要bldA功能。M145菌株发生了突变,使bldA成为必需基因。本研究以M145和1258等菌株为亲本,通过3轮杂交筛选构建了菌株LY3,作为遗传定位bldA依赖性(bldA-dependent,bad)突变的亲本之一。用LY3与1258杂交,筛选了217个重组子并鉴定其基因型。对217个重组子的基因型进行遗传分析,将bad突变定位于天蓝色链霉菌染色体SCO3934与SCO4659基因之间的758 kb区域。
关键词
天蓝色链霉菌M145
BLDA
遗传定位
bad突变
bad
^+
Keywords
Streptomyces coelicolor M145
bldA
genetic mapping
bad
mutation
bad
^+
分类号
Q754 [生物学—分子生物学]
下载PDF
职称材料
题名
酵母DNA修复基因RAD16温度敏感突变株的分离及人类互补基因的鉴定
被引量:
2
2
作者
朱应葆
韩云
孙艳
机构
北京大学第三医院中心实验室分子生物室
出处
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第5期357-362,共6页
基金
国家自然科学基金资助项目(No.30470976)~~
文摘
用PCR介导的基因重组法敲除酵母RAD16基因,用羟胺处理酵母RAD16基因表达质粒,获得RAD16基因突变库,并将其转化RAD16基因敲除的酵母细胞.用平皿复制法获得温度敏感突变株rad16-ts2,经互补试验证实,该突变表型为RAD16基因突变所致.将人cDNA表达文库转化rad16-ts2后筛选温度敏感拯救(rescue)表型,回收拯救表型酵母细胞中的质粒.测序结果表明,所获得的人cDNA克隆为HLTF/Zbu1/SMACA3基因.比较分析显示,人类该基因编码蛋白质氨基酸序列与酵母Rad16的同一性为32%,相似性则达50%.人HLTF/Zbu1/MACA3基因在HeLa细胞中过表达,可显著抑制过氧化氢损伤和UV照射诱导的细胞凋亡.
关键词
bad
16温度敏感
突变
株
分离与鉴定
遗传互补
Keywords
RAD16 temperature-sensitive mutant
isolation and characterization, genetic complementation
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
天蓝色链霉菌M145中bldA依赖性突变的遗传定位与分析
赵丽云
CHATER K F
陶美凤
《华中农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006
0
下载PDF
职称材料
2
酵母DNA修复基因RAD16温度敏感突变株的分离及人类互补基因的鉴定
朱应葆
韩云
孙艳
《中国生物化学与分子生物学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007
2
下载PDF
职称材料
已选择
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