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首次从新疆无名热病人分离到8株新环状病毒(BANNA) 被引量:18
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作者 李其平 谢杏初 +14 位作者 郅琦 马丽 阿不力克木.阿不都热西提 刘永德 乌守巴特.党正 张云君 也尔肯.哈山 王诚 斯拉木江.哈马太 染国栋 何英 赵子江 陈伯权 徐普庭 左建民 《地方病通报》 1992年第1期77-81,共5页
从新疆境内的生产建设兵团124团采集到不明原因发烧病人血清98份,分离到8株病毒。感染2~4日龄乳小白鼠和三周龄小白鼠不发病。可引起C6/36细胞病变。电镜观察病毒为球形无囊膜颗粒,直径63~69nm,核衣壳直径为49~54um。超薄切片在感染... 从新疆境内的生产建设兵团124团采集到不明原因发烧病人血清98份,分离到8株病毒。感染2~4日龄乳小白鼠和三周龄小白鼠不发病。可引起C6/36细胞病变。电镜观察病毒为球形无囊膜颗粒,直径63~69nm,核衣壳直径为49~54um。超薄切片在感染细胞中常见到大量颗粒状包涵体,磷钨酸负染可见到排列整齐的壳粒结构,显示了典型的环状病毒形态特征。该病毒对酸、氯仿、胰蛋白酶及热敏感;1.1MMgCl_2在50℃作用15分钟可使其感染力提高,在-30℃作用1小时可使其感染力丧失;抵抗乙醚和5-碘脱氧尿苷。血清学鉴定,新分离病毒与披膜病毒科(Togaviridae)、黄病毒科(Flaviviridae)及布尼亚病毒科(Banyaviridae)的某些病毒的免疫腹水及免疫血清都不发生反应。与新环病毒(BANNA)的免疫腹水及免疫血清发生反应。用新环病毒酶标单克隆抗体(McAb)做酶标中和试验为阳性,中和指数为1023.3~18620.9。经初步鉴定,分离的8株病毒的抗原性与近年从我国南方分离的新环状病毒(BANNA)相一致。 展开更多
关键词 无名热 新环状病毒 新疆
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北京某绿地蚊媒病毒的分离和鉴定
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作者 李金鑫 廖佳玮 +6 位作者 张越 任行 任志浩 施霁桢 毕玉海 谭丽琼 苏敬良 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2024年第1期52-58,共7页
为了解北京某绿地蚊媒病毒的分布情况,本试验使用诱蚊灯捕蚊采集到蚊虫标本19000余只,利用蚊子细胞C6/36培养进行病毒分离,利用高通量测序和逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)鉴定分离株;RT-PCR测定分离株病毒的序列,并与国内外相应病毒序... 为了解北京某绿地蚊媒病毒的分布情况,本试验使用诱蚊灯捕蚊采集到蚊虫标本19000余只,利用蚊子细胞C6/36培养进行病毒分离,利用高通量测序和逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)鉴定分离株;RT-PCR测定分离株病毒的序列,并与国内外相应病毒序列进行比对分析。结果显示,样本经病毒分离获得2株可引起明显细胞病变的分离株,分别命名为BJ2021/01和BJ2021/02。高通量测序和RT-PCR检测结果显示,BJ2021/01分离株含有版纳病毒(BAV)、忍者病毒(SHTV)、沙捞越病毒(SWKV)和库蚊源类芜菁黄花叶病毒科病毒(CuTLV),为4种病毒的混合物;BJ2021/02为BAV。基因序列分析结果显示,BAV分离株BJ2021/02的12个片段与国内外BAV分离株的核苷酸同源性为58.1%~98.7%,编码氨基酸的同源性为54.4%~98.9%。系统进化分析结果显示,BJ2021/02分离株属基因A型。本试验结果丰富了我国BAV的基因组序列,为开展北京市BAV的流行病学研究提供了参考,为虫媒病毒病的预防和控制提供了病原学依据。 展开更多
关键词 蚊媒病毒 版纳病毒 忍者病毒 沙捞越病毒 库蚊源类芜菁黄花叶病毒科病毒
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Genome sequencing and phylogenetic analysis of Banna virus(genus Seadornavirus,family Reoviridae)isolated from Culicoides 被引量:9
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作者 Song Song Yuanyuan Li +13 位作者 Shihong Fu Wenwen Lei Xiaofang Guo Yun Feng Xiaoyan Gao Xiaolong Li Zhonghua Yang Ziqian Xu Ying He Huanyu Wang Hongning Zhou Bin Wang Xiaoqing Lu Guodong Liang 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS CSCD 2017年第12期1372-1382,共11页
In an investigation of blood-sucking insects and arboviruses, a virus(YN12243) was isolated from Culicoides samples collected in the Sino-Burmese border region of Yunnan Province, China. The virus caused cytopathic ef... In an investigation of blood-sucking insects and arboviruses, a virus(YN12243) was isolated from Culicoides samples collected in the Sino-Burmese border region of Yunnan Province, China. The virus caused cytopathic effect(CPE) in C6/36 cells and passaged stably. Polyacrylamide gel analysis showed that the genome of YN12243 was composed of 12 segments of double-stranded RNA(dsRNA), with a distribution pattern of 6-6. The nucleotide and amino acid sequences of the coding region(1.12 segments) were17,803 bp and 5,925 amino acids in length, respectively. The phylogenetic analysis of VP1 protein(RdRp) revealed that YN12243 belonged to genus Seadornavirus of family Reoviridae, and further analysis indicated that YN12243 belongs to the Banna virus(BAV) genotype A2. Additionally, YN12243 was located in the same evolutionary cluster as BAV strains isolated from different mosquito species, suggesting that the BAV isolated from Culicoides does not have species barriers. These results indicate that Culicoides can also be a vector for BAV. In view of the hematophagous habits of Culicoides on cattle, horses, deer, and other large animals, as well as the possibility of spreading and causing a variety of animal arboviral diseases, it is important to improve infection detection and monitor the BAV in large livestock. 展开更多
关键词 banna virus Seadornavirus Reoviridae MOSQUITO CULICOIDES
原文传递
猪睾丸Dickkopf样顶体蛋白1基因的转录调控分析
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作者 许静 代红梅 +6 位作者 张霞 刘志朋 杨忠 李卫真 付仕颖 克比努尔·库尔班 霍金龙 《福建农林大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期79-88,共10页
【目的】Dickkopf样顶体蛋白1(DKKL1)是一种重要的顶体蛋白,为发掘其重要功能及潜在的临床价值,以版纳微型猪近交系(BMI)为对象,研究其睾丸组织中DKKL1的分子结构、转录调控特征和蛋白质功能。【方法】通过全转录组测序获得BMI DKKL1的... 【目的】Dickkopf样顶体蛋白1(DKKL1)是一种重要的顶体蛋白,为发掘其重要功能及潜在的临床价值,以版纳微型猪近交系(BMI)为对象,研究其睾丸组织中DKKL1的分子结构、转录调控特征和蛋白质功能。【方法】通过全转录组测序获得BMI DKKL1的表达量,使用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)获得DKKL1编码区序列并分析其基因结构和蛋白质特征,使用UniProt数据库对DKKL1进行功能注释并分析DKKL1与微小RNA(miRNA)、长链非编码RNA(lncRNA)间的竞争性内源RNA(ceRNA)转录调控。【结果】获得的BMI DKKL1编码区全长为702 bp,位于基因第6号染色体上,有5个外显子和4个内含子;蛋白质功能分析表明,DKKL1包含233个氨基酸,具有疏水性,含磷酸化位点、信号肽和较多的无规则卷曲亚结构;系统进化和同源性分析表明,DKKL1氨基酸序列在哺乳动物间高度保守;蛋白互作分析显示,DKKL1与含螺旋结构域的蛋白155(CCDC155)、转录增强缔合域蛋白2(TEAD2)、RAS癌基因家族成员11B(RAB11B)等多种蛋白互作;基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析表明,这些蛋白富集在典型Wnt信号等通路上;GO功能注释表明,DKKL1在睾酮生物合成过程的负向调控、透明带穿透、顶体泡生成等方面具有重要功能;ceRNA转录调控网络分析表明,DKKL1被miR-15a和miR-15b靶向调控。【结论】本研究获得了BMI睾丸全转录数据,阐明了DKKL1的分子特征、蛋白质功能并构建了转录调控网络。 展开更多
关键词 版纳微型猪近交系 Dickkopf样顶体蛋白1 分子特征 蛋白互作 调控网络
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版纳微型猪1型糖尿病模型的构建方法初探
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作者 刘凯 胡毓琦 +8 位作者 耿亚田 程文杰 王晶 魏太云 赵红芳 李加宇 角德灵 赵红业 魏红江 《实验动物与比较医学》 CAS 2024年第4期384-392,共9页
目的构建1型糖尿病微型猪模型,并探索有效延长模型猪生存周期的术后护理方案。方法选取7头版纳微型猪进行胰腺切除手术。术后3~5 d通过补充葡萄糖、维生素及抗生素等方法帮助其恢复。每日早晚两次检测血糖、尿糖水平,据此调整胰岛素补... 目的构建1型糖尿病微型猪模型,并探索有效延长模型猪生存周期的术后护理方案。方法选取7头版纳微型猪进行胰腺切除手术。术后3~5 d通过补充葡萄糖、维生素及抗生素等方法帮助其恢复。每日早晚两次检测血糖、尿糖水平,据此调整胰岛素补充量。每日巡视模型猪并记录其饮食欲、精神状态、虚弱程度、皮肤破损情况、粪尿量等数据,每周称量体重,直至动物死亡。根据模型猪状态及时给予葡萄糖注射液和乳酸林格氏液等以补充营养并纠正电解质失衡。结果7头版纳微型猪在胰腺切除术后均表现为随机血糖浓度大于11.1 mmol/L,远超正常猪的平均血糖值(6.0 mmol/L),尿糖阳性,且其体重呈渐进性下降等典型的糖尿病临床表征,提示1型糖尿病模型构建成功。此外,存活时间超过8周的1型糖尿病猪还出现了渐进性被毛脱落及皮肤破溃的情况;在模型猪无法站立乃至无法自主进食时进行安乐死,并采集其肝脏、肾脏及皮肤等受累及的器官组织进行病理组织切片及HE染色,病理组织切片也可见长期高血糖导致的肝脏淤血、肝糖原大量蓄积、肝细胞气球样变和渐进性肝脏纤维化,肾小球淤血、肾小管上皮细胞空泡变性和蛋白尿,真皮层出现淤血、血管壁变薄以及不同程度的角化不全和角化不良等肝脏、肾脏及皮肤组织病变。本研究构建的版纳微型猪糖尿病模型平均生存期为44 d,最长可生存121 d。结论通过胰腺切除术可成功建立版纳微型猪的1型糖尿病模型,进一步通过术后精心护理可获得并发症明显的长期1型糖尿病微型猪模型,这为1型糖尿病治疗策略研究提供了稳定的大动物模型。 展开更多
关键词 版纳微型猪 1型糖尿病模型 胰腺切除术 术后护理 糖尿病并发症
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改进YOLO v4模型在版纳微型猪只行为识别中的研究
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作者 杨宏宇 陈立畅 +1 位作者 谢小龙 张佳进 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2024年第19期46-54,118,119,共11页
为了能够在猪只重叠、遮挡等复杂场景中实现版纳微型猪只行为的准确、高效识别,试验通过改进YOLO v4模型的方法来识别猪只行为,通过视频捕获的方式截取不同角度猪只行为图片,构建行为特征数据集;采用嵌入CBAM注意力机制的Res Net50残差... 为了能够在猪只重叠、遮挡等复杂场景中实现版纳微型猪只行为的准确、高效识别,试验通过改进YOLO v4模型的方法来识别猪只行为,通过视频捕获的方式截取不同角度猪只行为图片,构建行为特征数据集;采用嵌入CBAM注意力机制的Res Net50残差网络结构作为改进YOLO v4模型的主干网络,并引入由深度可分离卷积、批标准化(BN)、Hard Swish激活函数组成的CH模块,代替主干网络中的传统卷积,提升模型检测精度的同时降低参数量;在PANet多尺度特征融合结构中引入双重3层1×1和3×3交替卷积运算替代上、下原采样方式,构成DPANet网络结构,增强对猪只行为图片中细节特征的提取,提高计算效率;基于参数共享理念与二阶段训练的迁移学习方法,优化训练过程以显著缩短训练时间,加速模型的收敛速度。结果表明:改进YOLO v4模型对猪只行为数据集的训练时间仅为6 h,而原模型训练时间则需要19 h;改进YOLO v4模型识别平均精度为93.97%,召回率为96.27%、参数量为0.26×10^(8),与Faster-RCNN、SSD、YOLO v4模型相比,平均精度与召回率分别提升8.88,15.36,8.68个百分点及16.09,41.34,30.40个百分点,参数量最大减少1.11×10^(8)。改进YOLO v4模型对识别爬栏探究、站立行走、进食、躺卧4种行为的准确率达到了98%、88%、92%、97%,与其他3种模型相比,站立行走、进食两种行为的识别效果远大于其他模型。说明改进YOLO v4模型在复杂场景下具有良好的准确性和有效性,能够精准识别猪只的不同行为。 展开更多
关键词 卷积神经网络 图像识别 多目标检测 YOLO v4模型 版纳微型猪
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猪DAZL启动子克隆、转录表达及蛋白功能特性分析
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作者 许静 张霞 +5 位作者 刘志朋 王淑燕 李洪林 李小伟 王配 霍金龙 《四川农业大学学报》 CSCD 北大核心 2023年第6期1098-1106,共9页
【目的】研究猪类无精症缺失基因DAZL在版纳微型猪近交系(Banna mini-pig inbred line,BMI)中的启动子特征、转录表达及蛋白功能。【方法】使用PCR技术克隆DAZL启动子序列,并分析其结构;使用RNA测序技术获得BMI睾丸组织中DAZL的表达量,... 【目的】研究猪类无精症缺失基因DAZL在版纳微型猪近交系(Banna mini-pig inbred line,BMI)中的启动子特征、转录表达及蛋白功能。【方法】使用PCR技术克隆DAZL启动子序列,并分析其结构;使用RNA测序技术获得BMI睾丸组织中DAZL的表达量,并构建转录调控网络;分析DAZL的氨基酸同源性与蛋白功能特性,并构建互作蛋白网络。【结果】成功扩增了DAZL长度为2378 bp的启动子序列,含1个CpG岛、3个核心启动子以及Oct-1、Sp1、Pit-1a等10种转录因子结合位点;DAZL在BMI睾丸组织中有较高的正表达;ceRNA调控网络分析表明DAZL被sscmiR-199a-5p、ssc-miR-199b-5p、ssc-miR-17-5p、ssc-miR-103、ssc-miR-24-3p和ssc-miR-107等6个miRNAs靶向调控;功能注释发现其主要在精子发生、生殖细胞发育、翻译调控中发挥重要功能。DAZL及其邻近基因分析发现其在各物种中高度保守,且具有较为保守的邻近基因;蛋白互作网络、GO和KEGG富集分析显示DAZL与PUM2、DAZAP2和SYCE1等多个蛋白互作,主要参与精子发生、卵子发生、有性生殖等重要生殖相关通路;转录组数据与蛋白编码基因之间的表达量相关性显示DAZL的表达量与SOHLH1显著相关。【结论】本研究从DNA、RNA和蛋白质角度全面分析了猪DAZL的启动子结构、转录表达和蛋白功能,结果为更进一步研究DAZL在精子发生中的作用奠定了基础。 展开更多
关键词 版纳微型猪近交系 DAZL 启动子 转录组测序 蛋白互作
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版纳微型猪近交系用于镇痛类经皮吸收药物体外渗透性评价
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作者 王晶 史海琼 +5 位作者 程雯 张大妹 师亚玲 高艺 柴文英 魏红江 《云南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期929-936,共8页
【目的】通过比较版纳微型猪近交系皮肤(以下简称“猪皮肤”)和人皮肤的组织形态学以及镇痛类经皮吸收药物的体外渗透试验,验证猪皮肤在镇痛类经皮吸收药物评价方面的应用价值。【方法】通过HE染色、Masson染色、弹力纤维染色和透射电... 【目的】通过比较版纳微型猪近交系皮肤(以下简称“猪皮肤”)和人皮肤的组织形态学以及镇痛类经皮吸收药物的体外渗透试验,验证猪皮肤在镇痛类经皮吸收药物评价方面的应用价值。【方法】通过HE染色、Masson染色、弹力纤维染色和透射电镜观察比较2种皮肤组织结构形态;选择水杨酸溶液、双氯酚酸二乙胺乳膏和利多卡因凝胶贴膏3种药物作为模型药物,通过Franz扩散池进行药物渗透试验,采用酶标仪和高效液相色谱仪检测透过皮肤的药物质量浓度。【结果】HE染色、Masson染色以及透射电镜结果显示:猪皮肤与人皮肤的分层和细胞构成相似,但是猪皮肤的表皮层极显著厚于人皮肤表皮层(P<0.01),人皮肤的真皮层极显著厚于猪皮肤真皮层(P<0.01)。版纳微型猪身体各部位皮肤从厚到薄依次是肩胛、臀部、背部和腹部。3种药物渗透的0~24 h内,大部分时间点3种药物透过猪皮肤和人皮肤的药物质量浓度均无显著差异(P>0.05)。【结论】猪皮肤和人皮肤组织结构相似,3种镇痛药物在2种皮肤中的渗透性相似,猪皮肤可用于镇痛类经皮吸收药物的体外渗透性评估。 展开更多
关键词 镇痛类经皮吸收药物 版纳微型猪近交系 猪皮肤 皮肤渗透试验
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东南亚十二节段RNA病毒荧光定量qRT-PCR和常规RT-PCR检测方法的建立
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作者 杨振兴 李占鸿 +3 位作者 李卓然 李华春 廖德芳 杨恒 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2023年第1期98-105,共8页
东南亚十二节段RNA病毒属为呼肠孤病毒科中的一个新属,该属包括版纳病毒(BAV)、芒市病毒(MSV)、卡皮罗病毒(KDV)和辽宁病毒(LNV)四种病毒。为建立上述四种病毒的群特异性核酸检测方法,本研究根据BAV、MSV、KDV和LNV毒株VP12基因序列的... 东南亚十二节段RNA病毒属为呼肠孤病毒科中的一个新属,该属包括版纳病毒(BAV)、芒市病毒(MSV)、卡皮罗病毒(KDV)和辽宁病毒(LNV)四种病毒。为建立上述四种病毒的群特异性核酸检测方法,本研究根据BAV、MSV、KDV和LNV毒株VP12基因序列的保守区,设计特异性引物和TaqMan探针,建立了荧光定量qRT-PCR和常规RT-PCR检测方法,并分别进行了特异性、灵敏性和重复性的检测。实验结果表明,两种检测方法分别对四种病毒均有特异性的扩增和荧光信号检出,而对流行性出血病病毒(EHDV)、蓝舌病病毒(BTV)、中山病病毒(CHUV)、广西环状病毒(GXOV)、阿卡斑病毒(AKAV)、云南环状病毒(YUOV)等病毒无扩增和无有效荧光信号检出,具有较好的特异性。灵敏性实验结果显示,荧光定量qRT-PCR检测四种病毒核酸的下限可达10 copies/μL,常规RT-PCR的检测下限为10^(2) copies/μL,荧光定量方法灵敏度是常规方法的10倍。四种病毒荧光定量qRT-PCR方法的组内和组间重复试验标准差均小于0.8,变异系数均小于3%,表明该方法均具有良好的稳定性。以上结果表明,本研究建立的BAV、MSV、KDV和LNV四种病毒的荧光定量qRT-PCR和常规RT-PCR方法具有快速、准确、稳定等优点,可为四种病毒的早期诊断、快速检测、流行病学调查和实验研究等提供有效的技术方法。 展开更多
关键词 版纳病毒 芒市病毒 卡地皮诺病毒 辽宁病毒 RT-PCR 病毒检测
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甘肃省天水及陇南部分地区虫媒病毒调查 被引量:33
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作者 翟友刚 王焕琴 +4 位作者 许海魁 孟维珊 曹玉玺 付士红 梁国栋 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期95-99,共5页
目的对甘肃省天水陇南部分地区的吸血蚊虫进行病毒分离与鉴定。方法2006年8月在当地采集蚊虫标本,分离病毒和对病毒分离物进行血清学和分子生物学鉴定,以软件进行病毒的核苷酸序列比对和系统发生分析。结果分离到19株病毒,鉴定结果显示... 目的对甘肃省天水陇南部分地区的吸血蚊虫进行病毒分离与鉴定。方法2006年8月在当地采集蚊虫标本,分离病毒和对病毒分离物进行血清学和分子生物学鉴定,以软件进行病毒的核苷酸序列比对和系统发生分析。结果分离到19株病毒,鉴定结果显示分离株GS10-2为盖塔病毒,GS42-2为版纳病毒,其余分离株为一种基因组约8 000核苷酸的未知RNA病毒。盖塔病毒分离株3’UTR中具有与已往中国分离株相同的缺失序列和3个特异核苷酸位点。版纳病毒分离株基因组第12片段的进化关系同其它中国分离株有明显差异,位于一条独立的进化枝中。结论在该地区分离到1株盖塔病毒、1株版纳病毒和17株未知RNA病毒;盖塔病毒与以往我国分离株的遗传关系密切,版纳病毒与我国其它地区分离株有明显差异,在进化上相对独立。 展开更多
关键词 虫媒病毒 盖塔病毒 版纳病毒 序列分析 系统发生
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从云南省无名热病人和脑炎病人分离到新环状病毒 被引量:55
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作者 徐普庭 王逸民 +2 位作者 左建民 林静雯 徐丕模 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 1990年第1期27-33,共7页
从云南省西双版纳傣族自治州3家医院采集到发热病人血清106份,脑炎病人脑脊液5份,从中分离到27株病毒。经血清学鉴定,该类病毒与披膜病毒科、黄病毒科、布尼亚病毒科某些病毒的免疫腹水,以及呼肠孤病毒科环病毒属M14、YN187病毒的免疫腹... 从云南省西双版纳傣族自治州3家医院采集到发热病人血清106份,脑炎病人脑脊液5份,从中分离到27株病毒。经血清学鉴定,该类病毒与披膜病毒科、黄病毒科、布尼亚病毒科某些病毒的免疫腹水,以及呼肠孤病毒科环病毒属M14、YN187病毒的免疫腹水,都不发生反应。电镜观察病毒为球形无囊膜颗粒,直径65.49±3.11nm,其核衣壳直径为51.79±2.01nm。在感染细胞中常见到大量颗粒状包涵体。负染中可见排列整齐的壳粒结构,显示了典型的环状病毒形态特征。该类病毒对酸和热敏感,抵抗5—Id?和乙醚。27株病毒的基因组均由12条RNA片段组成,其带形均相同,分子量约为0.25×10~6~2.5×10~6道尔顿。该类病毒的带形与文献报道的任何一种环状病毒的RNA带形都不同。病人双份血清中对该环状病毒特异IgM抗体滴度显示4倍以上升高。对该类病毒在分类学上的地位和对无名热和脑炎的病原学意义进行了讨论,目前暂定名为BANNA病毒。 展开更多
关键词 环状病毒 无名热 分离 鉴定
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版纳微型猪近交系心脏的解剖观察 被引量:14
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作者 张伟 应大君 +1 位作者 孙建森 曾养志 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 2003年第1期69-72,共4页
目的 观察中国版纳微型猪近交系心脏的大体解剖和组织学 ,为转基因猪心和异种移植提供形态学基础。 方法 应用灌注固定对 10头版纳微型猪近交系进行大体形态观察 ,测量心脏径线、心壁厚度、心脏的腔室、心脏大血管直径。使用苏木精 ... 目的 观察中国版纳微型猪近交系心脏的大体解剖和组织学 ,为转基因猪心和异种移植提供形态学基础。 方法 应用灌注固定对 10头版纳微型猪近交系进行大体形态观察 ,测量心脏径线、心壁厚度、心脏的腔室、心脏大血管直径。使用苏木精 -伊红染色进行组织学观察。结果 版纳微型猪近交系心脏外形、各腔室及内部结构等与人心脏基本匹配 ,但是微型猪奇静脉直接开口于右心房 ;组织学观察微型猪心脏各部分结构组成及其细胞种类与人心脏相似 ,但是心肌闰盘较人的少 ,心室内膜下的蒲肯野氏纤维较人的粗大。结论 从解剖形态学及组织学观察 ,版纳微型猪近交系心脏与人心脏形态和结构相似 ,有成为异种移植供体的可能性。 展开更多
关键词 异种移植 版纳微型猪近交系 心脏 解剖学 组织学 转基因
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甘肃省分离的版纳病毒具有显著地域特征 被引量:8
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作者 翟友刚 王焕琴 +7 位作者 于德山 李国太 蒋建祥 贾玉新 阎峻 何英 付士红 梁国栋 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期304-309,共6页
目的对2007年在甘肃省平凉地区农村人房、猪舍和牛棚采集的蚊虫中分离的版纳病毒进行鉴定并对病毒基因组第12片段进行测序和分析。方法2007年8月在平凉市采集蚊虫标本,对标本进行病毒分离并对分离物进行系统鉴定,测定分离到的版纳病毒... 目的对2007年在甘肃省平凉地区农村人房、猪舍和牛棚采集的蚊虫中分离的版纳病毒进行鉴定并对病毒基因组第12片段进行测序和分析。方法2007年8月在平凉市采集蚊虫标本,对标本进行病毒分离并对分离物进行系统鉴定,测定分离到的版纳病毒第12片段序列,以软件进行病毒的序列比对、同源性和系统发生分析。结果共采集到蚊虫标本2926只,从中分离到11株致C6/36细胞产生规律病变的分离物,其中3株能引起BHK-21细胞病变。鉴定结果显示共分离到9株版纳病毒。RNA-PAGE结果显示9株版纳病毒基因组带型与对照株BJ95-75的一致,但第6片段与对照相比稍小。新分离版纳病毒第12片段核苷酸序列同源性在99.5%~100%之间,与其他分离株的同源性为88.6%~97.6%(核苷酸)和85.5%~97.1%(氨基酸)。基于版纳病毒第12片段核苷酸序列的系统发生分析显示,甘肃省分离株处于中国株进化支中的一个独立分支,与其它地区分离株具有明显的差异。结论再次从甘肃省的蚊虫标本中分离到多株版纳病毒,基因序列和系统发生分析显示甘肃省分离株在进化上相对独立,具有显著的地域特征,可能属于版纳病毒中的一个新亚型。 展开更多
关键词 版纳病毒 VP12 序列分析 系统发生
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西双版纳小耳猪群体遗传结构的RFLP分析 被引量:9
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作者 陈丙波 周建华 +1 位作者 魏泓 曾养志 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2001年第1期15-19,共5页
目的 对西双版纳小耳猪的群体遗传结构进行RFLP分析。方法 采用ECL核酸直接标记和检测系统 ,以HRP标记浕 -珠蛋白 - 3’HVR多基因座小卫星探针 ,对西双版纳小耳猪的HinfⅠ或HaeⅢ酶切片段进行Southern杂交 ,以化学发光法进行检测 ,获... 目的 对西双版纳小耳猪的群体遗传结构进行RFLP分析。方法 采用ECL核酸直接标记和检测系统 ,以HRP标记浕 -珠蛋白 - 3’HVR多基因座小卫星探针 ,对西双版纳小耳猪的HinfⅠ或HaeⅢ酶切片段进行Southern杂交 ,以化学发光法进行检测 ,获得了清晰可辨的、具有高度多态性的DNA指纹图谱。结果  2kb以上的谱带数在 6~ 1 5条之间 ,HinfⅠ酶切产生的图带数低于HaeⅢ。JB亚系内 80 5、 80 7家系和JS亚系内 1 1 1、 1 2 1、1 2 1、 1 51家系不同个体间的相似系数分别为 0 94± 0 0 9、 0 85± 0 0 8、 0 84± 1 7、 0 78±1 6、 0 83± 0 42、 0 87± 0 0 7,显著高于各家系间的相似系数 ,JB亚系内的 80 5家系和JS亚系内的 1 51家系不同个体间相似系数较大 ,分别为 0 94和 0 87。结论 西双版纳小耳猪近交程度较高 ,个体间差异较小 。 展开更多
关键词 家系 珠蛋白 RFLP分析 多基因 HRP 化学发光法 标记 西双版纳 猪群 相似系数
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体外培养版纳微型猪近交系骨髓基质干细胞的生物学特性 被引量:6
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作者 李胜富 卢晓风 +5 位作者 孙明菡 万琳 步宏 曾养志 周宏治 李幼平 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 2002年第5期354-358,共5页
目的 分离培养成年版纳微型猪近交系骨髓基质干细胞并探讨其体外生物学特性。方法 成年版纳微型猪骨髓基质干细胞通过密度梯度离心法分离获得 ,用含 15 %小牛血清的 DMEM在 37℃ ,5 % CO2 条件下培养 ;通过克隆生长特性、特异抗原表... 目的 分离培养成年版纳微型猪近交系骨髓基质干细胞并探讨其体外生物学特性。方法 成年版纳微型猪骨髓基质干细胞通过密度梯度离心法分离获得 ,用含 15 %小牛血清的 DMEM在 37℃ ,5 % CO2 条件下培养 ;通过克隆生长特性、特异抗原表达和成骨分化能力鉴定其干细胞特性。结果 版纳微型猪近交系骨髓分离获得的基质干细胞具有多种形状 ,但主要为梭形。其具有很强的增殖能力 ,在体外培养条件下可以观察到明显的克隆样生长 ;表达 SH2、SH3、SH4、SB10和 SB2 1等骨髓基质干细胞的特异标记 ;经成骨添加剂诱导培养之后能分化为成骨细胞 ,碱性磷酸酶活性增强并具有细胞外基质矿化能力。 展开更多
关键词 体外培养 骨髓基质干细胞 成骨细胞 版纳微型猪近交系 组织工程 生物学特性
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成年版纳微型猪近交系克隆猪的制备 被引量:11
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作者 叶雷 李红 +13 位作者 魏红江 许成盛 卿玉波 潘伟荣 李鸿辉 成文敏 富国文 信吉阁 李思 魏太云 李小兵 张崇义 汪霞 曾养志 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期1491-1498,共8页
本研究以版纳微型猪近交系成年母猪为材料,采用冷胰酶消化法获得成年猪成纤维细胞后,进行细胞的生物学特征检测,研究其作为供体细胞对体细胞核移植效果的影响。结果表明,版纳微型猪近交系成年猪的成纤维细胞呈典型的成纤维细胞形态,细... 本研究以版纳微型猪近交系成年母猪为材料,采用冷胰酶消化法获得成年猪成纤维细胞后,进行细胞的生物学特征检测,研究其作为供体细胞对体细胞核移植效果的影响。结果表明,版纳微型猪近交系成年猪的成纤维细胞呈典型的成纤维细胞形态,细胞冻存前和复苏后存活率分别为97.2%和92.6%(P>0.05),生长曲线呈"S"形,细胞群体倍增时间为36h,体外培养14代后仍能保持正常核型。以其作为核移植供体细胞,核移植重构胚卵裂率、囊胚率及囊胚细胞数分别为61.9%、13.0%和37枚,移植了重构胚的3头代孕母猪均妊娠,并且有1头母猪产下1头正常的克隆猪。综上所述,利用版纳微型猪近交系成年猪能建立稳定的成纤维细胞系,该细胞系作为核移植供体细胞可获得版纳微型猪近交系克隆猪。 展开更多
关键词 版纳微型猪近交系 成年猪成纤维细胞 细胞培养 生物学特征 体细胞核移植
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中国版纳猪MHCI类P1分子全长的原核表达与纯化 被引量:7
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作者 唐军 陈福祥 +4 位作者 李宁丽 王颖 沈伯华 周洪 周光炎 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期264-267,共4页
目的:获得原核表达的中国版纳猪SLAI类P1蛋白质分子。方法:PCR扩增去信号肽的SLAI类P1cDNA序列,亚克隆至pGEMT载体,测序。将亚克隆的P1 cDNA片段插入表达载体pET42b(+),构建重组表达质粒... 目的:获得原核表达的中国版纳猪SLAI类P1蛋白质分子。方法:PCR扩增去信号肽的SLAI类P1cDNA序列,亚克隆至pGEMT载体,测序。将亚克隆的P1 cDNA片段插入表达载体pET42b(+),构建重组表达质粒pET-42b(+)/sla-pl,转化E·coli表达菌 BL21-CodonPlus(DE3)-RIL,IPTG诱导 P1-8 x his融合蛋白表达,经包涵体洗涤,8 mol/L尿素变性溶解,Ni2+亲和层析,梯度透析后,定量保存。SDS-PAGE、western-blotting鉴定目的蛋白的表达与纯化。结果:目的蛋白(分子量39.5 kD)表达量占细菌总蛋白 15%,每升表达菌获得纯度95%的目的蛋白 40 mg~60mg。结论:成功建立猪 SLA分子全长原核表达、纯化体系,为建立间接识别猪移植抗原SLAI类分子的人T细胞系及表位分析打下基础。 展开更多
关键词 版纳猪 猪白细胞抗原 大肠杆菌 原核表达 蛋白纯化
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版纳小型猪近交系椎骨、肋骨的形态及生物力学研究 被引量:5
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作者 董世武 孙建森 +3 位作者 应大君 寿建国 姚远 曾养志 《四川动物》 CSCD 2002年第2期69-71,共3页
本研究观察了版纳小型猪近交系椎骨、肋骨的解剖学、组织学形态 ,并对其腰椎进行轴向载荷压缩试验。小型猪椎骨及肋骨在解剖学、组织学方面与人近似 ,其腰椎能承受人类正常生理载荷。因此 ,版纳小型猪椎骨、肋骨可以作为异种骨移植的材料。
关键词 版纳小型猪 近交系 椎骨 肋骨 形态 生物力学
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版纳微型猪近交系新生猪成纤维细胞的体外培养及其生物学特征研究 被引量:7
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作者 许成盛 魏红江 +6 位作者 李红 汪霞 杨朝霞 卿玉波 潘伟荣 信吉阁 曾养志 《云南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期323-327,共5页
试验以版纳微型猪近交系新生猪耳部皮肤组织为材料,采用胰蛋白酶消化法培养成纤维细胞,并对其进行细胞形态观察、细胞冻存前和复苏后存活率测定、生长曲线绘制和染色体核型分析等生物学特征检测。结果表明:版纳微型猪近交系新生猪成纤... 试验以版纳微型猪近交系新生猪耳部皮肤组织为材料,采用胰蛋白酶消化法培养成纤维细胞,并对其进行细胞形态观察、细胞冻存前和复苏后存活率测定、生长曲线绘制和染色体核型分析等生物学特征检测。结果表明:版纳微型猪近交系新生猪成纤维细胞呈典型的成纤维细胞形态;细胞冻存前和复苏后存活率分别为98.0%和94.07%;生长曲线呈"S"型,倍增时间为33 h;对所制备的染色体核型分析显示2n=38(XY),并在体外培养14代后仍能保持正常核型。本研究建立了稳定的版纳微型猪近交系新生猪成纤维细胞的培养方法,将为体细胞克隆、转基因和异种器官移植等相关的研究提供技术基础。 展开更多
关键词 版纳微型猪近交系 成纤维细胞 细胞培养 生物学特征
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版纳微型猪近交系肾脏的应用解剖研究 被引量:5
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作者 朱楚洪 糜建红 +5 位作者 应大君 孙建森 张伟 朱星红 姚远 曾养志 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 2002年第6期432-434,共3页
目的 了解版纳微型猪近交系肾脏的解剖结构 ,为异种肾移植提供基础资料。 方法 版纳微型猪近交系 2 0头处死后 ,解剖显微镜及游标卡尺检测新鲜及灌注固定的原位和离体肾脏、肾血管及输尿管 ,将肾脏组织标本石蜡包埋行 HE染色。 结... 目的 了解版纳微型猪近交系肾脏的解剖结构 ,为异种肾移植提供基础资料。 方法 版纳微型猪近交系 2 0头处死后 ,解剖显微镜及游标卡尺检测新鲜及灌注固定的原位和离体肾脏、肾血管及输尿管 ,将肾脏组织标本石蜡包埋行 HE染色。 结果 猪肾脏组织、出入的肾血管及输尿管类似人的相应结构 ,猪肾脏皮质厚度为 (2 0 .0±2 .4) mm,肾动脉平均直径与人髂内动脉直径平均值 5.1 mm相接近 ,所有被测肾均为单支动脉。肾被膜与人肾相似 ,均为纤维层、脂肪层及肾筋膜。左右输尿管直径分别为 5.1 mm和 4.7mm。 展开更多
关键词 异种移植 版纳微型猪近交系 肾脏 应用解剖
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