乙型肝炎病毒c基因启动子变异与血清HBeAg及HBV DNA的关系

目的 :研究乙型肝炎病毒 (HBV ) c基因启动子 (BCP)变异与 e抗原及 HBV DNA含量的关系。方法 :采用错配引物聚合酶链反应 (PCR) -限制性片段长度多态性 (RFL P)分析及荧光定量 PCR(FQ- PCR)对 10 5例血清 HBV DNA阳性 HBV感染者进行 HBV BCP基因变异及 HBV DNA定量测定。结果 :BCP变异组 HBe Ag阴性率为 84 .4 % (5 4 / 6 4 ) ,非 BCP变异组为2 6 .8% (11/ 4 1)。 BCP变异组 HBV DNA含量在 HBe Ag+ 病例 (10 8.79± 0 .85vs 10 7.4 8± 0 .39copy/ ml,P <0 .0 1)及 HBe Ag- 病例(10 8.0 5± 1 .1 6 vs10 6 .55± 0 .91 copy/ ml,P<0 .0 1)中均较非 BCP变异组高。结论 :HBV BCP变异在下调前 c/ c基因表达的同时可能促进 HBV复制 ,对 HBs Ag+ / HBe Ag- 患者需要进一步检测 HBV DNA,以免由于基因变异导致将 HBe

中国献血人群感染乙型肝炎病毒PreC/BCP区的新变异

目的了解中国献血人群感染乙型肝炎病毒(HBV)基因组的PreC/BCP区变异特征。方法从参加REDS-Ⅱ中国项目的 5家血液中心(或中心血站)收集的HBsAg阳性标本中选取245份,提取HBV DNA,根据HBVDNA PreC/BCP区保守序列设计引物,采用巢式PCR法扩增HBV DNA的PreC/BCP区,双向测序后用Clustal X软件将其序列与标准株序列比对,分析其变异特征,用SPSS 11.0统计软件分析其变异与献血者人口地理特征和血清学特征的关系。结果 245份献血者标本中有228份成功扩增了HBV PreC/BCP区,其中16例(7.02%)发现了1825～1 826位核苷酸之间的片段缺失或插入,突变标本中仅1例HBeAg阳性,其余均为阴性,突变标本的病毒载量明显高于未突变标本。结论在中国献血人群中发现感染HBV PreC/BCP区的1种新变异,它可能与抑制HBeAg的表达和促进病毒复制有关。

乙肝患者血清中HBVC基因启动子变异与病毒含量及前S1抗原的关系(英文)

目的 研究HBVC基因启动子 (BasicCorePromoter,BCP)基因变异与前S1(Pre -S1)抗原的关系以及BCP基因变异与HBVDNA含量的关系。方法 用PCR -微板核酸杂交ELISA技术检测 94例HBeAg阳性乙肝患者的BCP中nt 176 2A -T和nt 176 4G -A的基因突变 ,酶联免疫吸附分析 (ELISA)检测Pre -S1抗原 ,PCR荧光定量技术检测HBVDNA。结果 在 94例HBeAg阳性乙肝患者的血清中 ,Pre-S1抗原阳性有 6 5例 ,其中BCP阳性 5 1例 ,BCP变异率为 78.5 % ;Pre -S1抗原阴性有 2 9例 ,其中BCP阳性 2 3例 ,BCP变异率为 79.3%。BCP基因突变血清中HBVDNA拷贝数明显高于非BCP基因突变血清中HBV含量。结论 在e抗原阳性乙肝患者中 ,Pre -S1抗原的存在与BCP的变异无相关性 ,但BCP基因变异与HBVDNA拷贝数明显相关 ,可反映乙肝病情的严重程度及其愈后、转归。

乙肝患者血清中HBV C基因启动子变异与病毒含量及前S_1抗原的关系

目的 研究HBVC基因启动子(BasicCorePromoter,BCP)基因变异与前S1(Pre-S1)抗原的关系,以及BCP基因变异与HBVDNA含量的关系。方法 94例HBeAg阳性乙肝患者,用PCR-微板核酸杂交ELISA技术检测BCP中nt1762A-T和nt1764G-A的基因突变,酶联免疫吸附分析(ELISA)检测Pre-S1抗原,PCR荧光定量技术检测HBVDNA。结果 在94例HBeAg阳性乙肝患者血清检测中,Pre-S1抗原阳性者65例,其中BCP阳性51例,BCP变异率为78.5%;Pre-S1抗原阴性者29例,其中BCP阳性23例,BCP变异率为79.3%。BCP基因突变血清中HBVDNA拷贝数明显高于非BCP基因突变血清中HBV含量。结论 在e抗原阳性乙肝患者中,Pre-S1抗原的存在与BCP的变异无相关性,但BCP基因变异与HBVDNA拷贝数明显相关,可反映乙肝病情的严重程度及其愈后、转归。

乙型肝炎病毒前C区和BCP区突变及基因型对HBeAg表达的影响

研究乙型肝炎病毒前C区和BCP区突变及基因型对HBeAg表达的影响。分别用基因芯片和基因测序的方法检验HBV DNA阳性的乙型肝炎病毒前C区和BCP区突变及基因型,应用时间分辨免疫荧光法检测HBeAg含量,按照有无HBV前C区1896、BCP区1762、1764双突变、基因型等指标进行分组分析。无前C区1896和BCP区1762/1764双突变组、单纯1762、1764双突变和1896突变组以及1896、1762、1764联合突变组之间相互比较,HBeAg含量相差显著,F=6.47,P<0.01;B、C基因型间HBeAg含量相比,相差无显著性,t=0.1394,P>0.05。乙型肝炎病毒前C区和BCP区突变能显著影响HBeAg量的表达,从而导致乙型肝炎病毒致病能力的变化。

乙型肝炎病毒C基因启动子双变异患者中医证型特点研究

目的:探讨HBVC基因启动子(BCP)双变异慢性乙型肝炎患者的中医证型特点。方法:选择HBsAg阳性慢性乙型肝炎患者168例进行观察。中医证型分为湿热中阻、肝郁脾虚、肝肾阴虚、瘀血阻络、脾肾阳虚5型;BCP双变异检测,采用微板核酸杂交法。结果:BCP双变异的总检出率为36·31%(61/168),其中,湿热中阻型BCP双变异检出率最高(54·24%),与其他各型比较差异均有显著性意义(P<0·052);肝郁脾虚型BCP双变异检出率(36·36%)虽低于湿热中阻型(P<0·025),但却明显高于肝肾阴虚型(13·04%)及瘀血阻络型(10·53%),且差异有显著性意义(P<0·05);肝肾阴虚与瘀血阻络两型BCP双变异检出率均较低,两者比较差异有显著性意义(P>0·05)。结论:HBVBCP双变异的慢性乙型肝炎患者中医证型特点以湿热中阻为主,肝郁脾虚居次,临床治疗要重视清热利湿,舒肝健脾治法或方药的选用。

C型乙型肝炎病毒的全基因组序列分析

目的 探索乙型肝炎病毒 (HBV)全基因组的结构特点。方法 应用直接PCR基因分型法确定HBV基因型 ,然后随机选择 1例单纯HBVC基因型感染的患者血清 ,分 3个相互重叠片段扩增HBV基因并分别克隆测序。利用VectorNTISuite 7 0软件包、GeneDoc 2 6和TreeView 1 5,将该 3个基因片段拼接为全基因组序列 ,命名为BD HB1,并进行基因进化树分析和同源性比较。结果 HBVC基因型序列全长为 3 2 15bp ,其中A占 2 2 2 % ,G占2 2 4% ,C占 2 6 8% ,T占 2 8 6% ;有S、C、P和X区 4个开放读码框架 (ORFs) ;HBsAg亚型为adr ;HBVRT区 549～552aa为YMDD ,未发生变异 ;未发现前C区nt1896G变异 :BCP区nt1762、1764发生双突变。对HBV分段序列及全基因组序列进行基因进化树分析显示 ,BDHB1与HBVVC基因型的同源性最高。结论 BDHB1基因组符合HBVC基因型结构特点 ,在BCP区存在双突变。

乙型肝炎病毒基因型与肝细胞癌的关系

目的研究乙型肝炎病毒(HBV)基因型与肝细胞癌(HCC)相关性的病毒分子基础。方法应用PCR-RFLP法或测序法测定回顾性随机配对的124例HBsAg阳性HCC患者和124例慢性HBV感染者的HBV基因型;比较HCC患者中不同HBV基因型的临床资料;检测HBV的HBx、Enh2与Bcp基因序列的变异。结果慢性HBV感染者中HBV基因型B型占62.1%,C型占37.9%,HCC患者中基因B型占41.5%,C型占58.5%,未见其他基因型。基因B、C型的HCC患者平均年龄均在50岁左右。在≤35岁的HCC患者,感染的HBV以B型为主;在36～50岁组中,C型比例明显大于B型;而在50岁以上组中二者无明显差别。感染HBV基因B型HCC患者的血清总胆红素水平高于C型[分别为(56.3±79.5)μmol/L和(23.7±18.3)μmol/L,P=0.015];感染C型者HBeAg阳性率高于B型(分别为34.1%和9.74%,P=0.024);所有发生肝外转移的HCC患者的HBV基因型均为B型。在整个HBx、Enh2与Bcp区,基因B、C型HBV株氨基酸水平变异无明显差别。70.0%基因B型和96.2%C型HBV株发生nt1762/1764的双位点变异。此外,在反式激活区和增强子II区,B型HBV的基因变异明显,C型HBV株共有64个氨基酸发生热点变异,而B型HBV株仅有23个氨基酸发生热点变异。结论福建省HCC患者HBV基因型以C型为主。C型HBV株在反式激活区的基因变异较大,这可能与感染C型HBV株者更易发生HCC有关。感染基因B型HBV的HCC患者较易发生肝外转移的现象值得进一步探讨。

我国常见乙型肝炎病毒基因型与基本核心启动子及前C区突变关系的初步研究

收集81份HBV DNA阳性血清标本,经PCR扩增和序列测定确定其中有50份属于基因型C,31份属于基因型B;C基因型的基本核心启动子BCP T1762/A1764的突变率(38%)明显高于B基因型(12.9%,P<0.05);前C区A1896的突变在B、C两基因型间无显著性差异,B基因型为9.7%,C基因型为12%,P>0.05;HBeAg的表达与否与BCP双突变或前C区A1896突变均无明显相关性。经定量PCR检测证明,HBeAg阳性组中的HBV DNA含量明显高于抗-HBe阳性组,P<0.05。组内BCP双突变株和野生株及前C1896突变株和野生株的HBV DNA含量无显著性差异。

乙型肝炎病毒核心基因启动子变异与血清HBeAg及病毒载量关系的探讨

目的研究乙型肝炎病毒(HBV)核心基因启动子(BCP)变异与e抗原(HBeAg)及病毒载量的关系。方法(1)研究对象为176例HBV慢性感染者(轻、中、重度慢性乙型病毒性肝炎,肝炎肝硬化,慢性重型肝炎和原发性肝癌)。(2)研究方法:①采用PCR微板核酸杂交结合ELISA检测显示技术,对患者血清进行检测HBVBCP区核苷酸(nt)1762碱基A→T和1764G→A联合突变。②采用PCR结合荧光探针检测技术,检测患者血清乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸(HBVDNA)含量。③采用ELISA检测技术,检测患者血清HBV标志物(HBsAg、HBeAg、抗-HBs、抗-HBe及抗-HBc)。结果(1)在176例HBV慢性感染者中检出HBVBCP区T1762A1764变异者73例,HBVBCP变异的阳性率为41.5%。HBVBCP变异在HBeAg阴性病例的阳性率为49.4%(44/89),显著高于HBeAg阳性病例的阳性率33.3%(29/87)(P=0.03)。(2)HBVBCP变异阳性组的HBVDNA含量显著高于HBVBCP变异阴性组的含量(P=0.000)。BCP阳性组HBVDNA含量在HBeAg阳性病例及HBeAg阴性病例中均较BCP阴性组高(P=0.000)。结论(1)HBVBCP变异可引起HBV感染者的HBeAg阴转。(2)HBVBCP变异可使HBV致病力增强,病毒复制水平提高。(3)对HBsAg阳性/HBeAg阴性患者需要进一步检测HBVDNA,以免由于基因变异导致将HBeAg阴性者误认为病毒的免疫清除或静息而延误抗病毒治疗时机。

乙型肝炎病毒基本核心启动子T^(1762)A^(1764)联合突变的临床意义

目的 :研究乙型肝炎患者乙型肝炎病毒 (HBV)基本核心启动子 (BCP) T1 76 2 A1 76 4联合突变情况及其临床意义。方法 :采用聚合酶链反应 (PCR)与限制性长度片段多态性分析 (RFL P)相结合 ,检测 130例乙型肝炎患者 BCP区核苷酸 (nt) 176 2碱基 A→ T和 176 4碱基 G→ A联合突变。结果 :HBe Ag(+)和 HBe Ab(+)两组患者中 BCP T1 76 2A1 76 4联合突变率的不同频率分别为慢性乙型肝炎患者 (Chronic hepatitis B,CHB) 4 0 .0 %和 85 .7% ,无症状携带者(Asym ptom atic carrier,ASC) 2 2 .2 %和 6 5 .0 % ,献血员为 5 %。BCP T1 76 2 A1 76 4双点联合突变组 HBV- DNA≥ 10 5cps/ml检出例数 81例 (96 .4 % ) ,非突变组 HBV- DNA≥ 10 5cps/ml检出例数 2 5例 (5 4 .3% )。结论 :BCP T1 76 2 A1 76 4联合突变与乙型肝炎的发生、发展以及预后有关 ,可能是 CHB与 ASC患者 HBe Ag(- )的原因之一 ,可促进乙肝病毒繁殖。对慢性乙型肝炎患者检测 HBV BCP T1 76 2 A1 76