化瘀通络灸对血管性痴呆大鼠髓鞘再生相关蛋白表达的影响

目的观察化瘀通络灸对血管性痴呆(vascular dementia,VD)大鼠胼胝体髓鞘相关蛋白表达的影响,为艾灸治疗VD提供依据。方法Wistar大鼠经Morris水迷宫筛选后随机分为假手术组、模型组、艾灸组、西药组,每组12只。采用双侧颈总动脉永久结扎法制备VD大鼠模型。假手术组和模型组不作其他任何处理;艾灸组取“百会”“大椎”“神庭”悬灸20 min,每日1次;西药组用氯马斯汀(H1受体拮抗剂)溶液灌胃,每日2次。以上4组干预7 d为1个疗程,共3个疗程。采用Morris水迷宫检测干预前后大鼠学习记忆能力;免疫荧光染色和Western blot法检测大鼠胼胝体区髓鞘相关糖蛋白(myelin associated glycoprotein,MAG)、髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)表达水平。结果与假手术组比较,模型组大鼠逃避潜伏期延长(P<0.05);与模型组比较,艾灸组、西药组逃避潜伏期均显著缩短(P<0.05)。与假手术组比较,模型组胼胝体区MAG、MBP平均荧光强度显著降低(P<0.05);与模型组比较,艾灸组MAG、MBP平均荧光强度显著增强(P<0.05);与西药组比较,艾灸组MAG平均荧光强度显著增强(P<0.05),MBP平均荧光强度差异无统计学意义(P>0.05)。与假手术组比较,模型组胼胝体区MAG、MBP表达水平下降(P<0.05);与模型组比较,艾灸组MAG、MBP表达水平增加(P<0.05);与西药组比较,艾灸组MAG表达水平增加(P<0.05),MBP表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论化瘀通络灸可改善VD大鼠的学习记忆能力,促进VD大鼠髓鞘相关蛋白MAG、MBP的合成,促使髓鞘再生。

龈沟液Shh蛋白、DKK1、HC-gp39与重度牙周炎患者治疗后预后的关系

目的研究龈沟液Shh蛋白、dickkopf相关蛋白1(DKK1)、人类软骨糖蛋白-39(HC-gp39)与前牙区重度牙周炎患者牙周基础治疗后预后的关系。方法选取2019年1月至2022年1月核工业二一五医院收治的120例前牙区重度牙周炎患者作为研究对象。牙周基础治疗90 d后,将患者按照治疗后PD的差异分为预后不良组和预后良好组,比较两组患者龈沟液Shh蛋白、DKK1、HC-gp39水平以及基线资料。通过多因素Logistic回归分析前牙区重度牙周炎患者牙周基础治疗后预后不良的影响因素,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析龈沟液Shh蛋白、DKK1、HC-gp39预测前牙区重度牙周炎患者牙周基础治疗后预后的效能。结果预后不良组龈沟液Shh蛋白、DKK1、HC-gp39水平均高于预后良好组(P<0.05)。经多因素Logistic回归分析发现:有吸烟史、治疗前PD>7.60 mm、治疗前临床附着丧失(CAL)>7.00 mm、Shh蛋白>4.00μg/L、DKK1>9.00μg/L及HC-gp39>60.00 ng/mL均是前牙区重度牙周炎患者牙周基础治疗后预后不良的危险因素(P<0.05)。龈沟液Shh蛋白、DKK1、HC-gp39单项检测及3项联合检测预测前牙区重度牙周炎患者牙周基础治疗后预后不良的曲线下面积(AUC)分别为0.755、0.783、0.721、0.845,3项联合检测预测的效能优于单项检测。结论龈沟液Shh蛋白、DKK1、HC-gp39与前牙区重度牙周炎患者牙周基础治疗后的预后不良密切相关,可作为临床辅助判断患者预后的生物学指标。

高血压对糖尿病周围神经病大鼠坐骨神经MAG和MBG表达的影响

目的探讨高血压(HTN)对糖尿病周围神经病(DPN)大鼠模型坐骨神经中髓鞘相关糖蛋白(MAG)和髓鞘碱性蛋白(MBP)表达的影响。方法大鼠随机分为正常组、DPN组和DPN+HTN组。造模后4周检测各组血压、血糖及坐骨神经传导速度,RT-PCR检测坐骨神经MAG和MBPmRNA表达。结果与正常组比较,DPN组和HTN+DPN组血糖显著增高(P<0.01),神经传导速度显著降低(P<0.01),坐骨神经MBP和MAG mRNA表达显著上调(P<0.01),其中HTN+DPN组与DPN组比较收缩压显著增高(P<0.01),神经传导速度显著降低(P<0.01),坐骨神经MAG mRNA表达显著升高(P<0.01),MBP mRNA表达显著下降(P<0.01)。结论高血压能够上调MAG和下调MBP表达,抑制髓鞘形成,加剧糖尿病周围神经病的神经损伤。

不同磷脂肽段诱导的实验性自身免疫性脑脊髓炎模型病理特征多样性的研究

目的:探索是否不同磷脂肽段可以诱导Lewis大鼠产生不同的病理学表现。方法:采用髓鞘碱性蛋白82-99(MBP82-99)、MBP68-86、髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35-55(MOG35-55)免疫Lewis大鼠,每天进行神经功能评分。免疫后取各组大鼠大脑、小脑、脑干和脊髓组织,观察炎性细胞浸润部位和浸润程度、有无脱髓鞘和轴索损害。结果:MBP68-86和MBP82-99两组大鼠的大脑、脑干、小脑和脊髓组织均有炎性细胞浸润,脊髓炎症程度重于其他部位;MBP68-86和MBP82-99诱导的脊髓炎症程度无统计学差异;MOG35-55组大鼠仅脊髓组织受累,且炎症程度明显低于MBP组,其余各组未见炎性细胞浸润。各组大鼠神经组织均未见脱髓鞘和轴索受累。结论:不同磷脂肽段诱导Lewis大鼠神经组织炎性细胞浸润的分布和程度不同。

实验性自身免疫性脑脊髓炎动物模型的比较

目的比较两种不同品系大鼠及不同免疫原诱发的EAE模型特点。方法应用MOG35-55、同种脊髓匀浆(DA-SCH)、MBP68-86、豚鼠-MBP为免疫原,分别免疫DA大鼠或Lewis大鼠制备EAE动物模型。观察比较大鼠发病过程、临床评分及病理变化。结果应用MOG35-55或DA-SCH为免疫原致敏的DA大鼠病程呈现缓解-复发的双相病程,应用MBP68-86、豚鼠-MBP致敏Lewis大鼠而诱发的EAE模型为急性单相病程。豚鼠-MBP诱发的EAE模型发病时间匀齐、发病率最高、病情也最重,应用DA-SCH诱发的EAE模型病情其次重但发病时间不匀齐,MOG及MBP肽段引发的病情相对较轻。各实验组在发病高峰期组织病理变化以炎症反应为主。DA大鼠两个实验组第二次发病期炎症反应相对较轻而脱髓鞘较明显。结论不同免疫原制备的EAE模型具有不同的特点,可根据研究目的不同选取所需模型。

OCB、抗MBP抗体及抗MOG抗体在中枢神经系统炎性脱髓鞘疾病诊断中的意义

目的通过观察中枢神经系统炎性脱髓鞘疾病患者寡克隆区带(OCB)、抗髓鞘碱性蛋白(MBP)抗体及抗髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(MOG)抗体的阳性率,为临床诊断提供一定的参考。方法入组91例中枢神经系统炎性脱髓鞘疾病患者为观察组(其中MS 30例,NMO 61例)及50例神经系统非炎性病变患者为对照组。首先分析观察组与对照组间OCB、脑脊液及血清中抗MBP抗体、抗MOG抗体阳性率的差异,再分析观察组中MS亚组及NMO亚组间上述指标阳性率的差异。结果 2组比较,OCB、血清抗MBP抗体及血清抗MOG抗体阳性率比较差异有统计学意义(P<0.05),脑脊液抗MBP抗体及脑脊液抗MOG抗体阳性率比较差异无统计学意义(P>0.05)。MS亚组与NMO亚组,OCB、血清抗MBP抗体阳性率比较差异有统计学意义(P<0.05),脑脊液抗MBP抗体、血清抗MOG抗体及脑脊液抗MOG抗体阳性率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 OCB阳性对诊断MS具有重要意义。血清抗MBP抗体及抗MOG抗体可为中枢神经系统炎性脱髓鞘疾病的诊断提供重要实验室依据,血清抗MBP抗体在MS与NMO的鉴别诊断中具有一定价值。

非小细胞肺癌血管生成因子与耐药相关基因关系的研究

目的:探讨血管生成因子(VEGF、bFGF)和耐药相关基因(MDR1、MRP、LRP)在非小细胞肺癌(non-smallcelllungcancer,NSCLC)中的表达及相互关系。方法:应用免疫组化技术检测96例NSCLC组织中VEGF、bFGF、MDR1、MRP、LRP蛋白表达,其中36例应用RT-PCR技术检测上述基因mRNA表达。结果:VEGF、bFGF、MDR1、MRP、LRPmRNA表达率分别为69.5%(25/36)、52.8%(19/36)、33.3%(12/36)、52.8%(19/36)、50.0%(18/36);蛋白表达率分别为51.0%(49/96)、58.3%(56/96)、45.8%(44/96)、59.4%(57/96)、64.6%(62/96),各基因mRNA表达与蛋白表达基本一致。统计分析表明:VEGF表达与MDR1、LRP表达相关(P=0.025,P=0.022),与MRP表达无关(P=0.428);bFGF表达与MDR1、LRP表达相关(P=0.001,P=0.012),并与MRP+LRP共表达相关(P=0.001)。结论:在非小细胞肺癌中血管生成因子与耐药相关基因具有一定的相关性。

血脑脊液屏障上P-糖蛋白的研究进展

血脑脊液屏障是由脑微血管内皮细胞、星形胶质细胞和周皮细胞等组成的动态生理结构,对中枢神经系统内环境稳态的维持发挥至关重要的作用。P-糖蛋白作为血脑脊液屏障上一种常见膜蛋白,它在脑微血管内皮细胞中大量表达,限制毒性物质和大量治疗中枢神经系统的药物进入脑内。因此对P-糖蛋白在血脑脊液屏障中的外排转运机制的了解是神经系统疾病治疗的一个突破点。该文主要对P-糖蛋白的基本结构、转运途径、在生理与病理情况下P-糖蛋白的调节机制以及P-糖蛋白抑制剂研究进展等进行综述,对中枢神经系统药物研发以及提高血脑脊液屏障对治疗药物通透性研究提供参考。

口腔细菌表面糖苷酶的生物学功能研究

口腔细菌是引起龋齿的关键因素。口腔细菌和黏附在牙齿表面的唾液大分子相互作用,在牙齿表面形成早期牙菌斑生物膜,随后更多的细菌加入到生物膜中生长并最终导致龋齿和牙周炎等疾病。唾液为细菌的黏附提供配体,为细菌的生长提供碳源和氮源,但是细菌如何利用以及利用哪些唾液大分子进行生长还不清楚。许多口腔细菌细胞表面和细胞内有不同的糖苷酶水解糖链。本综述总结了笔者对口腔细菌的研究,揭示不同细菌利用人的唾液生长的能力不同,有的生长良好,有的甚至不能单独在唾液中生长;而口腔共生菌Streptococcus gordonii DL1在唾液中生长良好是依赖于细菌表面的3个糖苷酶,它们捕食唾液中富含脯氨酸的糖蛋白的N-糖链,是该细菌在唾液中生长关键的第一步;而且不同的糖苷酶对底物有严格的特异性,糖链只能被依次水解。不同细菌表面有不同的糖苷酶,能够合作水解糖链从而在唾液中相互喂养并在牙齿表面共生,是笔者下一步的研究方向。

新生猪缺氧缺血性脑损伤后脑内髓鞘相关蛋白表达的变化

目的探讨新生猪缺氧缺血性(HI)脑损伤后脑内髓鞘碱性蛋白(MBP)、髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(MOG)、髓鞘相关糖蛋白(MAG)在脑白质中表达的变化趋势。方法将28头3~5日龄新生猪随机为对照组(n=4)和HI模型组(n=24)。根据HI后的存活时间,将HI模型组分为6个亚组(n=4),分别为0~2 h、2~6 h、6~12 h、12~24 h、24~48 h、48~72 h亚组。采用免疫组化染色比较各组MBP、MOG、MAG含量的变化。结果HI后MBP的表达整体呈先降低后升高的趋势,6~12 h达到最低值,而后升高,24~48 h后再次降低;与对照组比较,HI模型组0~2 h、2~6 h、6~12 h、12~24 h、24~48 h、48~72 h亚组MBP的表达水平均降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。HI后MOG的表达整体呈先升高再降低再升高的趋势,6~12 h达到最高值,而后降低,24~48 h后再次升高;与HI模型组6~12 h亚组相比,HI模型组0~2 h、2~6 h、12~24 h、24~48 h、48~72 h亚组及对照组MOG的表达水平均降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。HI后MAG的表达整体呈先降低后升高再降低的趋势,12~24 h达到最低值,而后升高,24~48 h后再次降低;与对照组比较,HI模型组0~2 h、2~6 h、6~12 h、12~24 h、24~48 h、48~72 h亚组MAG的表达水平均降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论HI后MBP、MOG、MAG的表达变化提示HI脑损伤可引起髓鞘和少突胶质细胞损伤,少突胶质细胞损伤后会激活脑内自发性髓鞘再生机制。

丙烯酰胺染毒对大鼠坐骨神经MBP和MAG表达的影响

目的:通过检测染毒大鼠坐骨神经中髓鞘碱性蛋白(MBP)和髓磷脂相关糖蛋白(MAG)表达量的变化,探讨丙烯酰胺(ACR)对大鼠周围神经系统的毒性影响。方法:成年雄性SD大鼠32只,随机分为对照组、9、18、36 mg/kg ACR组,每组8只,灌胃染毒21 d后取材。每周一次步态评分,记录大鼠步态改变;利用HE染色和劳克坚牢蓝染色,观察坐骨神经及其髓鞘的改变;通过免疫组织化学方法检测蛋白MBP和MAG表达量的变化。结果:大鼠步态得分与染毒剂量和染毒时间呈正相关; HE染色显示随染毒剂量增大,坐骨神经神经纤维排列紊乱、髓鞘结构发生改变、轴突数目减少;劳克坚牢蓝染色结果显示与对照组相比,染毒组髓鞘染色较浅、着色不均,髓鞘变细;免疫组化结果显示,MBP和MAG在坐骨神经中的表达量均随染毒剂量增大而下降。结论:ACR染毒对大鼠坐骨神经髓鞘的毒性损伤,可能与MBP和MAG蛋白表达量的下降有关。

芦丁对丙烯酰胺致大鼠坐骨神经髓鞘损伤的保护作用

目的 通过观察芦丁(Rut)对丙烯酰胺(ACR)染毒大鼠坐骨神经髓鞘结构、髓鞘碱性蛋白(MBP)及髓鞘相关糖蛋白(MAG)表达的变化,探讨Rut对ACR致大鼠坐骨神经髓鞘损伤的保护作用。方法 成年SD雄性大鼠36只,随机分为4组:对照组(control,给予ddH;O)、20 mg/kg ACR染毒组(ACR)、100 mg/kgRut预保护ACR染毒组(R1+ACR)、200 mg/kg Rut预保护ACR染毒组(R2+ACR),每组9只,灌胃21 d后取材。后肢间距测量评估各组大鼠后支撑力的变化;HE染色和透射电子显微镜观察大鼠坐骨神经髓鞘结构的变化;免疫组织化学和Western blotting检测MBP和MAG表达量的变化。结果 后肢间距测量显示,与control组相比,ACR组大鼠后肢间距随染毒时间延长而增加(P<0.05),而给予Rut预处理后,R1+ACR和R2+ACR组的后肢间距明显低于ACR组;HE染色显示,ACR染毒后,神经纤维排列紊乱,髓鞘出现肿胀的现象,而R2+ACR组神经纤维排列有序,髓鞘肿胀减轻。透射电子显微镜结果显示,ACR组髓鞘出现肿胀和松解,板层间出现空泡,部分轴突空泡样变性;与ACR组相比,R2+ACR组髓鞘松解情况改善,空泡样变性不明显,髓鞘板层及轴突中仅有少量的空泡。免疫组织化学和Western blotting检测结果显示,与control组相比,ACR组坐骨神经MBP和MAG的表达量均明显减少(P<0.01),与ACR组相比,R1+ACR组及R2+ACR组MBP和MAG的表达量增加(P<0.05)。结论 芦丁对ACR致大鼠坐骨神经髓鞘损伤具有保护作用,其保护作用可能与Rut改善ACR引起的坐骨神经髓鞘蛋白MBP和MAG表达减少有关。

Autoantibodies against myelin antigens in patients with neuromyelitis optica

In this study, we investigated the clinical relevance of anti-myelin antibodies in patients with neuromyelitis optica (NMO);titers of antibodies against myelin oligodendrocyte glycoproteins, proteolipid proteins and myelin basic proteins were measured in the sera of patients with NMO and compared to healthy controls, as well as to patients with other diseases. The frequency of presence of anti-myelin antibodies in patients with NMO was significantly higher than that in healthy and diseased controls. The expanded disability status scale scores correlated with the titers of the anti-myelin antibodies. Patients with anti-myelin antibody exhibited other autoantibodies significantly more frequently than patients without the antibody. Anti-myelin antibodies may be useful markers for predicting severe clinical courses in patients with NMO.

碱性成纤维细胞生长因子单克隆抗体通过P-糖蛋白逆转乳腺癌MCF-7/ADM细胞多药耐药性的分子机制

目的:探讨碱性成纤维细胞生长因子单克隆抗体(monoclonal antibody to basic broblast growth factor,bFGF mAb)通过P-糖蛋白(permeability glycoprotein,P-gp)对人乳腺癌多柔比星(adriamycin,ADM)耐药细胞株MCF-7/ADM多药耐药(multidrug resistance,MDR)性的逆转机制。方法:CCK-8(cell counting kit-8)法检测bFGF mAb对MCF-7/ADM细胞增殖的影响及其对化疗药物耐药的逆转作用;bFGF mAb作用后,FCM检测MCF-7/ADM细胞的细胞周期、P-gp的表达及细胞内罗丹明(rhodamine,Rho)123的荧光强度,实时荧光定量PCR检测MCF-7/ADM细胞中MDR1和碱性成纤维细胞生长因子(basic broblast growth factor,bFGF)mRNA的表达。结果:1μg/mL bFGF mAb对MCF-7和MCF-7/ADM细胞的抑制率分别为(19.87±1.05)%和(27.34±2.79)%,差异有统计学意义(P<0.01)。bFGF mAb可有效逆转MCF-7/ADM细胞对ADM、吉西他滨(gemcitabine,GEM)和奥沙利泊(oxaliplatin,OXA)的耐药性,逆转指数分别为4.46、4.25和2.18。bFGF mAb作用MCF-7/ADM细胞后,细胞阻滞于G0/G1期,P-gp表达下调,细胞内Rho123的荧光强度增强,MDR1和bFGF mRNA的表达下调,与未作用组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:bFGF mAb能抑制MCF-7/ADM细胞增殖并逆转其MDR,该作用机制可能与bFGF mAb下调MDR1/P-gp表达、抑制P-gp功能以及增加细胞内化疗药物浓度有关。