基于HPLC指纹图谱结合化学模式识别辨析补中益气产品质量标志物

目的 建立补中益气产品HPLC指纹图谱,并结合化学模式识别对相关产品(口服液、合剂、水丸、蜜丸、浓缩丸)进行质量标志物分析。方法 以Kromasil 100-5-C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm)为色谱柱,流动相为乙腈-0.2%甲酸水溶液,体积流量0.80 m L/min,检测波长260 nm,梯度洗脱;对20批补中益气产品的HPLC指纹图谱进行相似度评价,结合层次聚类分析(hierarchical cluster analysis,HCA)、主成分分析(principal component analysis,PCA)和正交偏最小二乘法-判别分析(orthogonal partial least squares-discriminant analysis,OPLS-DA)对色谱峰进行综合处理和分析。结果 以补中益气产品HPLC指纹图谱中的16个色谱峰为共有峰,20批样品的相似度为0.799~0.933;指认其中10个共有峰。HCA、PCA、OPLS-DA分类结果显示,20批补中益气产品可聚为4类,补中益气浓缩丸聚为一类,补中益气水丸聚为一类,补中益气蜜丸聚为一类,补中益气合剂与11批口服液聚为一类。OPLS-DA筛选出变量投影重要性分析值(variable importance in projection,VIP)大于1的共有峰依次为峰2(肌苷)、3(胸苷)、10(橙皮苷)、15(甘草酸)、6(毛蕊异黄酮-7-O-葡萄糖苷),以上特征峰可作为补中益气产品的质量标志物。结论 建立的HPLC指纹图谱方法简便快捷,专属性、重复性良好;结合化学模式识别分析,为补中益气产品质量评价标准体系的建立提供参考。

咽痒咳合剂质量评价

目的评价咽痒咳合剂质量。方法建立HPLC指纹图谱,进行聚类分析、主成分分析和偏最小二乘判别分析。测定甘草苷、射干苷、迷迭香酸、异甘草苷、野鸢尾黄素、甘草酸单铵盐、次野鸢尾黄素、和厚朴酚、厚朴酚的含量,分析采用Agilent ZORBAX SB-C_(18)色谱柱(5μm,250 mm×4.6 mm);流动相0.1%磷酸-乙腈,梯度洗脱;体积流量1 mL/min;柱温35℃;多波长检测。结果12批样品指纹图谱中有10个共有峰,相似度均大于0.9。各批样品聚为3类,3种主成分累积方差贡献率达87.448%,峰5、14(和厚朴酚)、3(甘草苷)、11(甘草酸单铵盐)、15(细辛脂素)为质量标志物。9种成分在各自范围内线性关系良好(r=0.9999),平均加样回收率98.23%~101.63%,RSD 1.05%~2.92%。结论该方法稳定可靠,可为咽痒咳合剂质量控制提供依据。

热痹痛合剂HPLC指纹图谱的建立和芍药苷、柚皮苷、黄芩苷、川续断皂苷Ⅵ的测定

目的建立热痹痛合剂的HPLC指纹图谱和热痹痛合剂中芍药苷、柚皮苷、黄芩苷、川续断皂苷VI的HPLC测定方法。方法指纹图谱分析采用Agilent 1260 C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈–0.2%磷酸溶液为流动相,梯度洗脱;检测波长为212 nm;体积流量为1 mL/min;柱温30℃;进样量10μL。对指纹图谱进行相似度评价,并运用聚类分析、主成分分析、正交偏最小二乘法–判别分析分析热痹痛合剂样品图谱。采用HPLC法测定芍药苷、柚皮苷、黄芩苷、川续断皂苷VI,采用Agilent 1260 C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈–0.2%磷酸溶液,梯度洗脱;检测波长230 nm(芍药苷)、280 nm(柚皮苷、黄芩苷)、260 nm(川续断皂苷VI);体积流量1 mL/min;柱温30℃;进样量为10μL。结果10批热痹痛合剂样品的指纹图谱中有26个共有峰,相似度均大于0.99,化学模式识别将10批样品分为2大类,OPLS-DA分析筛选出4个对制剂质量差异影响较大的化合物。含量测定中芍药苷、柚皮苷、黄芩苷、川续断皂苷VI分别在27.238~272.384、38.207~382.066、77.864~778.642、51.015~510.015μg/mL线性良好,平均回收率分别为95.34%、103.51%、103.51%、102.68%,RSD值分别0.65%、1.12%、0.86%、2.41%。结论所建立的方法准确、合理,重复性好,可用于热痹痛合剂的质量控制和评价。

芪桂苓合剂质量控制方法研究

目的建立芪桂苓合剂的指纹图谱和毛蕊异黄酮葡萄糖苷等4种活性成分含量的测定方法,以控制芪桂苓合剂的质量。方法采用高效液相色谱(HPLC)法建立12批芪桂苓合剂的指纹图谱;采用SPSS 25.0软件进行聚类分析、主成分分析,采用SIMCA 14.1软件进行正交偏最小二乘法-判别分析,并以变量重要性投影(VIP)值大于1.0为标准,筛选差异性成分。以橙皮苷为内参物,采用一测多评法计算毛蕊异黄酮葡萄糖苷、甘草苷、甘草酸含量,并与外标法的测定结果进行比较。结果12批样品指纹图谱中共确认了17个共有峰,相似度均大于0.940;共指认出4个共有峰,分别为毛蕊异黄酮葡萄糖苷(6号峰)、甘草苷(8号峰)、橙皮苷(12号峰)和甘草酸(17号峰)。12批样品可聚类分为2类,其中S4、S7~S9、S11~S12聚为一类,其他聚为一类;6个主成分的累计方差贡献率为85.840%;15、14、4、8(甘草苷)、9号峰的VIP值均大于1.0。毛蕊异黄酮葡萄糖苷、甘草苷、甘草酸含量的一测多评法结果与外标法所得结果的相对误差均小于5%(n=3)。结论本研究建立的HPLC指纹图谱和含量测定方法,可用于芪桂苓合剂的质量控制;甘草苷等5种成分是其差异性成分。

一测多评法测定止血化痔合剂中6种黄酮类成分的含量

目的建立一种一测多评法(QAMS)同时测定止血化痔合剂中6种黄酮类成分的含量。方法采用高效液相色谱法,以黄芩苷为内参物,建立黄芩苷与芦丁、甘草苷、槲皮素、黄芩素、汉黄芩素的相对校正因子(f),再通过f计算出止血化痔合剂中6种黄酮类成分的含量。同时采用外标法(ESM)测定6种黄酮类成分的含量,并比较二者的差异,以验证一测多评法的准确性和可行性。结果芦丁、甘草苷、黄芩苷、槲皮素、黄芩素、汉黄芩素在一定范围内浓度与峰面积呈良好的线性关系(r>0.997);精密度、稳定性、重复性均符合方法学要求;平均加样回收率范围为95.72%~100.43%,RSD范围为1.97%~3.22%。芦丁、甘草苷、槲皮素、黄芩素、汉黄芩素的相对校正因子分别为6.426、3.939、3.215、41.140、0.555,且重现性良好。一测多评法的计算结果与外标法测定结果差异无统计学意义(P>0.05)。结论以黄芩苷为内参物建立的一测多评法,同时测定止血化痔合剂中6种黄酮类成分的含量,方法操作简便,准确可靠,可用于止血化痔合剂的质量评价。

外感止咳露质量标准提升研究

目的:建立外感止咳露TLC鉴别和多成分含量测定的HPLC“一测多评”法。方法:采用薄层色谱法对外感止咳露中的防风、前胡、薄荷进行定性鉴别;采用HPLC法,色谱柱为Welch Ultimate AQ-C_(18),流动相为乙腈-0.05%磷酸梯度洗脱,流速为1 mL·min^(-1),柱温为30℃,检测波长为254 nm,进样量为10μL。采用多点校正法建立5-O-甲基维斯阿米醇苷、升麻素苷与甘草酸的相对校正因子(f_(k/s)),计算各成分含量。并使用外标法测定各成分含量,与(f_(k/s))所得计算值相比较,对一测多评法的可靠性与准确性进行验证。结果:防风、前胡、薄荷三个药材薄层色谱鉴别专属性强,阴性对照无干扰,样品和对照品溶液在相同位置斑点清晰完整;HPLC法测定甘草酸与升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷的相对校正因子分别为3.229和3.286;检测限分别为6.64、4.00、22.94 ng·mL^(-1)。一测多评法在不同色谱柱和仪器上的计算结果与外标法的结果没有显著差异。结论:该实验开发的TLC鉴别方法和HPLC含量测定方法可靠、简便,提高了该制剂质量标准,可用于外感止咳露的质量控制。

酸枣仁合剂质量综合评价

目的提升酸枣仁合剂质量控制水平。方法采用一测多评(QAMS)法同时检测制剂中13个指标性成分的含量,色谱柱为InertSustain C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为0.05%磷酸水溶液-乙腈(梯度洗脱),流速为1.0 mL/min,检测波长为258 nm(新芒果苷、芒果苷、异芒果苷),210 nm(斯皮诺素、6′′′-阿魏酰斯皮诺素、酸枣仁皂苷A、酸枣仁皂苷B、去氢茯苓酸、茯苓酸),280 nm(洋川芎内酯H、洋川芎内酯I、洋川芎内酯A、藁本内酯),柱温为30℃,进样量为10μL。以斯皮诺素为内参物,计算其他12种待测成分的相对校正因子,测定含量并与外标法测定结果比较。建立灰色关联度和熵权优劣解距离(TOPSIS)模型对3个厂家12批样品质量进行综合评价。结果上述成分质量浓度依次在4.55~227.50μg/mL、2.46~123.00μg/mL、0.38~19.00μg/mL、1.79~89.50μg/mL、1.48~74.00μg/mL、1.35~67.50μg/mL、0.74~37.00μg/mL、0.46~23.00μg/mL、0.99~49.50μg/mL、0.62~31.00μg/mL、1.09~54.50μg/mL、2.15~107.50μg/mL、2.86~143.00μg/mL范围内与峰面积线性关系良好(r>0.9990);精密度、稳定性、重复性试验结果的RSD均小于2.0%;平均加样回收率为96.88%~100.12%,RSD为0.53%~1.55%(n=9)。上述12种待测成分的相对校正因子分别为0.7435,0.7981,4.1896,0.9173,1.1114,1.8832,2.9479,1.4835,2.1942,1.2689,0.8794,0.6918,12批样品13个待测成分采用外标法和QAMS法的含量测定结果无显著差异(P>0.05)。灰色关联度模型(分析法)所得相对关联度为0.3070~0.6141,熵权TOPSIS模型欧氏贴近度为0.2253~0.6306,2种模型对12批样品的综合质量评价结果基本一致,同一生产厂家样品质量相对稳定,不同生产厂家样品质量差异较大。结论所建立的QAMS法可用于酸枣仁合剂多组分定量检测;灰色关联度联合熵权TOPSIS模型可用于制剂质量的综合评价。

小青龙合剂质量控制方法研究

采用薄层色谱法鉴别了小青龙合剂中的麻黄碱、芍药甙、甘草酸、桂皮醛及细辛挥发油成分。运用高效液相色谱法测定了芍药甙含量，平均回收率９９．４２％，ＲＳＤ为０．２３％。

一测多评法测定丹参合剂中5种水溶性成分含量

目的:建立以丹参素钠为内参物,一测多评法同时测定丹参合剂中5种水溶性成分(丹参素钠、原儿茶醛、咖啡酸、迷迭香酸、丹酚酸B)的含量。方法:以丹参合剂为研究对象,以丹参素钠为内参物,确定原儿茶醛、咖啡酸、迷迭香酸、丹酚酸B相对于丹参素钠的相对校正因子。外标法测定丹参素的含量,通过相对校正因子对其他4个成分进行定量分析,并比较两法测定结果的差异。结果:各成分相对校正因子重现性良好。原儿茶醛、咖啡酸、迷迭香酸、丹酚酸B一测多评法与外标法测定结果无显著差异。结论:建立的一测多评法表明具有了良好的重现性,可用于丹参合剂中水溶性成分的质量评价。

高效液相色谱法测定荔大前合剂中的高车前苷含量

[目的 ]建立测定荔大合剂中高车前苷含量的高效液相色谱法。 [方法 ]色谱条件 :以KromasilODS( 2 5 0mm× 4 .6mm ,5 μm)为分析柱 ,流动相为甲醇 -水 -(pH3.5 ,1 .0mol·L- 1)磷酸盐缓冲液 ( 4 5∶5 0∶5 ) ;柱温 :4 5℃ ;检测波长 :335nm ;流速 :1 .0mL·min- 1,采用面积外标法。 [结果 ]线性范围 3.36× 1 0 - 3 ～ 0 .2 1 5μg ,平均回收率为 98.8% ,RSD为 2 .1 4 % (n=9)。 [结论 ]本法可作为该制剂的质量控制标准。

甲氨基阿维菌素苯甲酸盐·氟铃脲乳油制剂中甲氨基阿维菌素苯甲酸盐B_1a的高效液相色谱分析

以甲醇为溶剂 ,甲醇 + 0 .2 %三乙胺 +乙腈 (15 0 + 5 0 + 32 0 ,v/v)为流动相 ,采用 C18反相不锈钢色谱柱和波长 346 nm的紫外检测器对甲氨基阿维菌素苯甲酸盐·氟铃脲乳油中的甲氨基阿维菌素苯甲酸盐 B1a进行高效液相色谱定量分析。结果表明 ,甲氨基阿维菌素苯甲酸盐 B1a用该方法分析的标准差 0 .0 114 ,变异系数为 4 .4 5 % ,线性相关系数为 0 .9987,其平均回收率为 99.5 %。

高效液相色谱在过氧化氢异丙苯合成产物分析中的应用

研究了高效液相色谱 (HPLC)在过氧化氢异丙苯 (CHP)合成产物分析中的使用条件及其影响因素 .试验证明 ,以正己烷、二氧六环和甲醇 (体积比为 90∶8∶2 )的混合物作流动相 ,柱温 3 5℃ ,使用硅胶柱可对异丙苯和溴苯合成反应体系进行检测分析 ,该法有较好的分辨能力 。

胆安合剂药效物质的定性定量分析

目的应用薄层色谱、高效液相色谱-二极管阵列检测和气质联用技术定性定量分析胆安合剂(大黄、元胡、黄芩、厚朴、木香、金钱草、甘草等)中的药效物质。方法应用反相C18色谱柱,甲醇-0.1%磷酸(88∶12)为流动相,体积流量0.8 mL/min,紫外检测波长209 nm,220 nm,柱温40℃进行高效液相色谱分析;高纯氦气为载气,体积流量1 mL/min,EI离子源进行气质联用分析。结果胆安合剂提取物薄层层析有明显的特征斑点;延胡索乙素、厚朴酚、大黄素、大黄酚的质量浓度分别为10.68～10.88μg/mL,12.25～12.98μg/mL,2.56～2.71μg/mL,3.54～3.67μg/mL;气质联用分析鉴定相似比≥800的挥发性化合物54个。结论己醛、3,7-二甲基-1,6-辛二烯-3-醇、4-甲基-1-(1-异丙基)-3-环己烯-1-醇(R)、薄荷基-1-烯-8-醇、桉醇基-4(14)-烯-11-醇和巴西菊内酯6种挥发性物质可作为总挥发油的特征成分加以控制。

38%辛·甲对乳油的液相色谱分析

本文采用液相色谱法同时分析３８％辛·甲对乳油中辛硫磷和甲基对硫磷含量。辛硫磷平均回收率为９９８％，甲基对硫磷为１０１４％。辛硫磷标准偏差为０４７，甲基对硫磷为０３５。

高效氯氰菊酯的液相色谱分析

本文介绍了高效氯氰菊酯的液相色谱分析条件，用硅胶柱在合适的条件下使氯氰菊酯四个异构体完全分离。该法的变异系数为０５５％，回收率为９８８～１０２０％。

20%威·福种衣剂的分析

２０％威·福种衣剂用甲醇做溶剂，以甲萘威为内标物，乙腈和水为流动相，使用以μ－ＢｏｎｄａｐａｋＣ１８为填充物的不锈钢柱和紫外检测器，对试样中的克百威和福美双同时进行高效液相色谱分离和测定，其准确度、精密度高，是一种理想的分析方法。

高效液相色谱法分析胺胺黄隆

本文采用高效液相色谱法，选用ＳｐｈｅｒｉｓｏｂＣ（１８）柱，在适宜条件下对胺苯黄隆、乙草胺进行一次性分离。该法的变异系数按胺苯黄隆、乙草胺分别为０．４７％、０．２５％，回收率分别为９８．８７～１００．１％、９８．１～９９．７％。

复方天棘胶囊及药材质量标准研究

复方天棘胶囊由红景天、枸杞子等药组成，具有抗缺氧、抗疲劳、延缓衰老等功效。其主要有效成分之一为红景天中的红景天甙。本研究用高效液相色谱法测定成药及红景天中的红景天甙含量，结果表明：高效液相法测定复方天棘胶囊红景天甙含量方法简便、快速、准确。同时，对成药中枸杞进行薄层鉴别方法的研究。本研究可作为该药质控参考依据。

一测多评法和指纹图谱在维血宁合剂质量控制中的应用

目的:采用一测多评(QAMS)法测定维血宁合剂中8个有效成分的含量,建立“中间体-成品”的HPLC指纹图谱,为其质量控制提供参考和依据。方法:采用高效液相色谱法,使用Acclaim120 C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,以甲醇(A)-0.2%磷酸水溶液(B)-0.1%磷酸(C)为流动相,进行梯度洗脱,流速为1.0 mL·min-1,检测波长为210 nm,柱温为30℃。以虎杖苷为内参物,分别考察儿茶素、表儿茶素、白藜芦醇、槲皮素、木犀草素、染料木素和芒柄花素7个成分的相对校正因子。采用相对校正因子计算3批维血宁合剂提取液、清膏和成品中7个成分的含量和指纹图谱,与外标法(ESM)进行比较,验证QAMS法的准确性和可行性。结果:儿茶素、表儿茶素、虎杖苷、白藜芦醇、槲皮素、木犀草素、染料木素和芒柄花素的线性范围分别为1.066~53.300、1.062~53.100、4.384~219.200、1.118~55.900、1.036~51.800、1.110~55.400、1.040~52.000、0.530~53.000μg·mL^(-1)。以虎杖苷为参照物,其他7个成分的相对校正因子分别为0.3754、0.3486、0.5853、0.5972、0.5176、0.5887、0.6599,在不同的实验条件下重复性较好。9个批次提取液、清膏、成品中8个成分的含量范围:虎杖苷为45.26~90.45μg·mL^(-1),儿茶素为21.29~38.18μg·mL^(-1),表儿茶素为15.06~21.46μg·mL^(-1),白藜芦醇为6.26~8.57μg·mL^(-1),槲皮素为1.22~2.13μg·mL^(-1),木犀草素为3.35~4.44μg·mL^(-1),染料木素为1.97~3.17μg·mL^(-1),芒柄花素为0.65~1.13μg·mL^(-1)。3批维血宁合剂的指纹图谱有27个共有峰,并且指认了以上8个成分峰,绝大部分相似度在0.9以上。结论:以虎杖苷为内参物建立的QAMS法操作简单,省时高效,可为维血宁合剂的质量控制提供参考。

基于指纹图谱及多指标成分定量的健儿消食口服液质量评价

目的:建立健儿消食口服液指纹图谱及多指标成分含量测定方法,评价该制剂质量。方法:采用HPLC建立指纹图谱及多指标含量测定方法,并以液质联用法对特征峰进行指认。采用Welch Ultimate C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,以甲醇为流动相A,0.1%磷酸溶液为流动相B,梯度洗脱(0~60 min,10%A→95%A),流速1.0 m L·min^(-1),检测波长283 nm;采用电喷雾离子源正离子扫描模式,对10个特征峰进行指认。结果:建立了以汉黄芩苷为参照峰的HPLC指纹图谱,并指认了5-羟甲基糠醛、山梨酸钾、橙皮苷、黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素7个特征峰。35批样品的相似度值为0.66~1.00,橙皮苷、黄芩苷和汉黄芩苷的含量分别为0.02~0.46、0.73~2.62和0.02~0.45 mg·m L^(-1)。结论:通过研究,发现个别企业存在投料质量差、少投料或工艺过程控制不严等违规生产现象。本研究所建立的指纹图谱及多指标含量测定方法能较好地评价健儿消食口服液的质量,并可为提高该制剂的质量标准,保证产品质量奠定基础。