中药狼疮定对SLE患者外周血淋巴细胞Bax/Bcl-2基因表达的影响

[目的]研究中医中药狼疮定对系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血淋巴细胞Bax/Bcl-2基因的影响。[方法]临床选择SLE患者45例,随机分单用激素组和并用中药组,利用RT-PCR法检测各组治疗前后Bax/Bcl-2基因mRNA表达情况。[结果]SLE患者的Bax/Bcl-2基因表达比值明显低于正常人(P<0.001);活动期低于缓解期(P<0.05);治疗后两组Bax/Bcl-2基因表达比值明显上升,而并用中药组治疗后明显高于单用激素组(P<0.05)。[结论]并用中药狼疮定治疗,能明显提高SLE患者外周血淋巴细胞Bax/Bcl-2基因表达比值,这可能与其诱导淋巴细胞调亡、调节免疫内环境的作用有关。

解毒祛瘀滋阴药对SLE患者Bax/Bcl-2基因mRNA表达的影响

目的:研究解毒祛瘀滋阴药对系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血淋巴细胞Bax/Bcl-2基因mRNA的影响。方法:临床选择SLE患者45例,随机分单用激素组和并用中药组,利用RT-PCR法检测各组治疗前后Bax/Bcl-2基因mRNA表达情况。结果:SLE患者的Bax/Bcl-2基因表达比值明显低于正常人(P<0.001);活动期低于缓解期(P<0.05);治疗后两组Bax/Bcl-2基因表达比值明显上升,而并用中药组治疗后明显高于单用激素组(P<0.05)。结论:激素合解毒祛瘀滋阴药治疗,能明显提高SLE患者外周血淋巴细胞Bax/Bcl-2基因mRNA表达比值,这可能与其诱导淋巴细胞凋亡、调节免疫内环境的作用有关。

尿道内放射与Bax/Bcl-2基因表达及细胞凋亡关系的实验研究

目的探讨103Pd支架对雄性新西兰白兔尿道组织Bax/Bcl-2基因表达的影响及与细胞凋亡的关系。方法分别将普通支架和103Pd同位素支架置入兔的尿道内,术后30d取尿道标本,采用免疫组化、Tunel方法检测尿道组织Bax/Bcl-2基因表达及细胞凋亡情况。结果放射性支架组尿道组织Bax蛋白表达明显上调,其阳性率为83.3%,明显高于普通支架组的16.7%(P﹤0.05);Bcl-2蛋白表达降低,其阳性率为33.3%,明显低于普通支架组的83.3%(P﹤0.05)。放射性支架组成纤维细胞、平滑肌细胞等凋亡明显,细胞凋亡数为161.93±26.21,尿道无明显狭窄;普通支架组细胞凋亡不明显,细胞凋亡数为65.27±13.39,尿道出现不同程度的狭窄。结论103Pd放射性支架通过增强Bax基因表达、降低Bcl-2基因表达,可促进兔尿道组织细胞凋亡,抑制尿道损伤愈合过程中管腔的再狭窄。

应用RNAi沉默STAT3基因促裸鼠移植瘤细胞凋亡及对Bax/Bcl-2基因表达的影响

目的应用RNAi技术沉默信号转导子与转录活化子3(STAT3)基因,探讨其对人乳腺癌裸鼠移植瘤的细胞凋亡及其对Bax/Bcl2基因表达的影响。方法于雌裸鼠皮下种植MCF7细胞,肿瘤长至一定大小时,随机分为盐水对照(A)组、空质粒对照(B)组及实验(C)组。于肿瘤局部分别注射盐水、psilencer1.0U6空质粒和psilencer1.0U6STAT3siRNA重组质粒。当A组肿瘤长至足够大时处死全部动物,取肿瘤,测其大小及重量,行HE及免疫组化染色,同时用Westernblot检测STAT3,Bax,Bcl2基因的表达水平。结果C组肿瘤瘤块的体积和重量明显小于A,B组(P<0.01)。免疫组化及HE显示C组肿瘤中心区出现大面积细胞坏死及细胞凋亡征象,STAT3免疫组化呈阴性,而A,B组无此现象。Westernblot显示C组STAT3的表达明显低于A,B组(P<0.01),而Bax的表达明显高于A,B组(P<0.05),各组Bcl2的表达水平差异无显著性(P<0.05)。结论应用RNAi技术沉默STAT3基因可以降低人乳腺癌裸鼠移植瘤中STAT3的表达,同时引起Bax基因的表达上调,导致细胞凋亡进而抑制肿瘤的生长。

bFGF对大鼠脑出血血肿周围组织SOD活力、MDA含量和Bax、Bcl-2基因表达的影响

目的观察碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)对大鼠脑出血后血肿旁大脑皮质超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活力、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量和Bax、Bcl-2基因表达的影响。方法采用脑内注射胶原酶建立大鼠脑出血模型,脑出血模型建立成功的大鼠分为脑出血组、生理盐水(normal saline,NS)对照组和bFGF治疗组,每组又分为1d、3d、7d三个时间点。bFGF治疗组按8μg/kg剂量肌内注射,1次/d,各组分别于相应时间点取血肿旁大脑皮质,采用RT-PCR检测凋亡调控基因Bax mRNA、Bcl-2 mRNA的表达,以及SOD活力、MDA含量。结果bFGF治疗组与NS对照组相比,血肿旁大脑皮质SOD活力增高(P<0.05),而MDA含量均下降(P<0.05)。bFGF组血肿旁大脑皮质Bax mRNA表达比NS对照组均明显减少(P<0.05),而Bcl-2 mRNA表达比NS对照组明显增高(P<0.05)。结论bFGF能提高大鼠脑出血后大脑皮质SOD活力,降低MDA含量;提高Bcl-2 mRNA的表达,降低Bax mRNA的表达,从而对脑出血后脑损伤具有保护作用。

基于Caspase-3/Bcl-2/Bax信号通路探究加味旋覆代赭汤治疗食管癌前病变的作用机制

目的:探究加味旋覆代赭汤对食管癌前病变大鼠Caspase-3/Bcl-2/Bax信号通路的调控作用机制。方法:将48只雄性SD大鼠随机分为4组,空白组、模型组、中药组、西药组,每组各12只。除空白组外均采用复合造模法制作食管癌前病变大鼠模型,造模成功后,分别进行药物灌胃干预,空白组、模型组用生理盐水灌胃,中药组和西药组分别给予加味旋覆代赭汤、西药(雷贝拉唑+莫沙必利)灌胃,给药8周取材。利用光学显微镜观察食管上皮组织的形态学变化;分别应用蛋白质印迹法(Western-blot)及聚合酶链式反应(PCR)检测食管上皮组织Caspase-3、Bcl-2及Bax的表达水平。结果:与空白组比较,模型组大鼠食管上皮病理积分升高(P<0.01);与模型组比较,中药组、西药组大鼠食管上皮病理积分均降低(P<0.01)。PCR及Western-blot检测结果显示,与空白组比较,模型组大鼠Caspase-3、Bax mRNA、蛋白表达均降低(P<0.01);与模型组比较,中药、西药组大鼠Caspase-3、Bax mRNA、蛋白表达均增高(P<0.05)。与空白组比较,模型组大鼠食管组织中Bcl-2 m RNA及蛋白表达水平均升高(P<0.05);与模型组比较,中药组和西药组Bcl-2 mRNA及蛋白表达水平均降低(P<0.05)。结论:加味旋覆代赭汤可能通过下调Bcl-2/Bax比值,增加线粒体外膜通透性,释放凋亡因子,激活Caspase-3,使病变组织发生凋亡,扭转食管上皮异型增生,从而起到治疗食管癌前病变的作用。

黄芪多糖调控Bcl-2/Bax信号通路抑制卵巢腺癌Caov-3细胞生长的实验研究

目的研究黄芪多糖调控Bcl-2/Bax信号通路对卵巢腺癌Caov-3细胞生长的影响。方法将黄芪多糖分为低、中、高剂量组,分别加入10、50、100 mg/mL黄芪多糖,流式细胞术检测10、50、100 mg/mL黄芪多糖作用Caov-3细胞后对细胞周期的影响,显微镜下观察Caov-3细胞凋亡情况和形态变化,Western blot法检测3组药物作用Caov-3细胞后对Bcl-2、Bax蛋白表达水平及对Bcl/Bax的影响;同时,比较阿司匹林联合黄芪多糖与单用黄芪多糖对Caov-3细胞的抑制率。结果黄芪多糖低、中、高剂量组对Caov-3细胞的抑制率分别为40%、50%、65%,黄芪多糖的IC_(50)为50 mg/mL,与对照组比较,黄芪多糖高剂量组对Caov-3细胞的抑制效果最为明显,差异具有统计学意义(P<0.05);黄芪多糖联合阿司匹林的抑制效果优于单纯使用黄芪多糖(P<0.05)。与对照组比较,黄芪多糖高剂量组对Caov-3细胞周期的影响更为显著,差异具有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,黄芪多糖高剂量组Caov-3细胞凋亡的数目显著增加,Bcl-2蛋白表达水平显著降低,Bax蛋白表达水平显著升高,Bcl-2/Bax降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论黄芪多糖能有效抑制Caov-3细胞的生长,联合阿司匹林效果更好。其机制可能与黄芪多糖调控Bcl-2/Bax信号通路,促进细胞凋亡有关。

迷迭香精油诱导肝癌HepG2细胞凋亡后bcl-2和bax基因表达变化的研究

目的:探讨凋亡相关基因bcl-2和bax在迷迭香精油诱导肝癌HepG2细胞凋亡后表达的变化。方法:水蒸气蒸馏法提取迷迭备精油,GC-MS鉴定其成分。采用免疫组化法检测bcl-2蛋白和bax蛋白表达。结果:不同浓度的迷迭香精油处理细胞12、24、48 h后bcl-2蛋白的表达降低,bax蛋白的表达升高,与对照组比较均有显著性差异,并且均现时间和剂量依赖性。结论:迷迭香精油诱导肝癌HepG2细胞凋亡与凋亡调控基因bax表达增强,bcl-2表达减少有关。

六味地黄丸对OLETF大鼠胰腺凋亡相关基因bcl-2和Bax表达的影响

目的:探讨六味地黄丸对自发性2型糖尿病大鼠胰腺组织凋亡相关基因bcl-2和Bax表达的影响。方法:OLETF大鼠(自发性2型糖尿病)40只,随机分为六味地黄丸治疗组和模型组,每组20只;另同系LETO大鼠(非糖尿病)10只作为正常对照组。六味地黄丸治疗组于大鼠8周龄起,用六味地黄丸按2.4 g.kg-1.d-1灌胃,余组用等量蒸馏水灌胃。每周记录大鼠体质量;采用口服葡萄糖耐量试验监测血糖;定期处死大鼠,分离胰腺并称重;采用逆转录-聚合酶链反应检测bcl-2和Bax在胰腺组织中的表达。结果:大鼠40周龄时,六味地黄丸治疗组bcl-2 mRNA的表达水平为(1.25±0.07),较模型组(1.01±0.16)明显增高(P<0.01);Bax mRNA的表达水平为(0.57±0.11),较模型组(1.18±0.28)有明显降低(P<0.01)。六味地黄丸治疗组的胰腺/体重比,较模型组增高,但差异无统计学意义。六味地黄丸治疗组的糖负荷能力明显高于模型组(P<0.05或P<0.01)。结论:六味地黄丸在转录水平可上调bcl-2 mRNA的表达,下调Bax mRNA的表达,可能具有抗细胞凋亡的作用。

湿润烧伤膏对糖尿病足患者溃疡创面凋亡基因Bcl-2和Bax的影响

目的观察采用湿润烧伤膏(MEBO)治疗糖尿病足溃疡患者的临床疗效及对创面凋亡基因Bcl-2和Bax的影响。方法 70例糖尿病足溃疡患者,随机分为两组,每组35例。由于治疗中部分病例脱失,故有效病例为63例,其中治疗组33例,对照组30例。治疗组外用MEBO,对照组外科常规换药,每日换药2次,共21 d。观察其疗效并检测创面肉芽组织中Bcl-2和Bax蛋白含量的表达。结果治疗21 d后,治疗组总有效率为93.94%,对照组总有效率为76.67%,两者有显著性差异(P<0.05);换药后21 d,与对照组比较,治疗组创面组织中Bcl-2蛋白的含量显著升高,Bax蛋白的含量明显降低,差异有显著性(P<0.05)。结论 MEBO能够有效治疗糖尿病足溃疡,其作用机制与抑制糖尿病创面的细胞凋亡有关。

黄芪对小鼠病毒性心肌炎细胞凋亡及bcl-2/bax基因转录的影响

目的 :探讨黄芪对实验性病毒性心肌炎细胞凋亡及 bcl- 2 / bax基因的影响。方法 :Balb/ c小鼠 2 4只腹腔感染柯萨奇病毒 B3(CVB3)后随机分成 2组 :黄芪治疗组 (每天腹腔注射黄芪注射液 1 0 g/ kg)及对照组 ,第 8天取心脏标本 ,进行病理学检查、细胞凋亡 TUNEL 法检测以及逆转录聚合酶链反应 (RT- PCR)分析 bcl- 2和 bax m RNA的表达水平。结果 :1黄芪治疗组病变积分明显低于对照组 (P <0 .0 1 ) ;2黄芪治疗组心肌细胞凋亡指数 (AI)明显低于对照组 (P <0 .0 1 ) ;3黄芪治疗组心肌组织 bcl- 2的 m RNA的相对表达量明显高于对照组 (P <0 .0 1 ) ,bax m RNA的相对表达量无明显改变 (P >0 .0 5 ) ,bcl- 2m RNA/ bax m RNA比值则明显增高 (P <0 .0 5 )。结论 :黄芪可通过上调病毒性心肌炎小鼠心肌组织 bcl- 2的基因转录 ,抑制细胞凋亡 。

米非司酮对人早孕期蜕膜细胞凋亡及其调控基因bcl-2/bax的影响

目的 :探讨米非司酮对早孕期蜕膜组织细胞bcl 2 /bax的影响及与妊娠终止的关系。方法 :用琼脂糖凝胶电泳、TUNEL法检测凋亡的发生及凋亡细胞的定位 ,用免疫组化法检测bcl 2 /bax蛋白的表达和相互关系。结果 :(1)正常早孕 4 0 + 天蜕膜组织细胞大量凋亡 ,bcl 2蛋白表达量较低 ,bax蛋白有较强表达 ;(2 )正常早孕 5 0 + 天 ,凋亡细胞明显减少 ,bcl 2的表达显著增强 ,bax蛋白表达减弱 ;(3)早孕 5 0 + 天应用米非司酮 ,蜕膜组织出现大量凋亡细胞及明显凋亡带 ,bcl 2蛋白表达明显降低 ,bax蛋白表达较前明显增强。结论 :早孕期米非司酮流产的机制可能与蜕膜组织细胞凋亡异常相关 ,bcl 2 /bax途径可能是其诱导早孕期蜕膜细胞凋亡的重要因素。

阿魏酸钠对大鼠晶状体上皮细胞凋亡相关基因bcl-2和bax的调控

目的 :本研究旨在探讨阿魏酸钠 (SF)对实验性氧化损伤大鼠晶状体上皮细胞 (LEC)凋亡相关基因bcl- 2和bax的调控。方法 :将SD大鼠双眼随机分成空白对照组、过氧化氢 (H2 O2 )组、吡诺克辛 (PS)组和SF组。无菌操作摘除眼球并在手术显微镜下分离晶状体 ,使晶状体孵育在 30 0 μmol·L- 1 H2 O2 培养液中复制LEC凋亡模型 ,同时加入终浓度为 5mmol·L- 1 的SF ,置二氧化碳培养箱共同孵育 2 4h。取晶状体前囊膜采用免疫组化法检测凋亡相关基因bcl- 2和bax的蛋白表达并进行比较。结果 :(1 )正常SD大鼠LEC中Bcl- 2和Bax均有表达 ,Bcl- 2表达较Bax表达强。 (2 )H2 O2 组Bcl- 2表达显著下调 ,Bax表达显著上调 (Ridit检验 ,P <0 0 1 ) ;Bcl - 2 /Bax比率下降。(3)与H2 O2 组比较 ,SF可明显上调Bcl- 2表达 ,下调Bax表达 (P <0 0 1 ) ,Bcl- 2 /Bax比率上升。 (4)PS与SF的调节作用相似 ,但SF的作用强于PS(P <0 0 5)。结论 :本研究结果表明 ,SF调控凋亡相关基因bcl-

电针对大鼠脑缺血再灌注损伤后细胞凋亡相关基因Bcl-2、Bax表达的影响

目的探讨电针对脑缺血再灌注大鼠皮质细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax及其mRNA表达的影响。方法雄性清洁级SD大鼠72只,采用随机数字表法分为假手术组、模型组和电针组各24只。用改良Longa线栓法制作大鼠右侧大脑中动脉脑缺血模型,缺血2 h,于再灌注开始后电针组针刺"百会"和"大椎"穴。各组于缺血再灌注24 h后行神经行为学评分和脑含水量测定,免疫组化染色法检测缺损侧皮层组织Bcl-2、Bax的蛋白表达,qRT-PCR检测Bcl-2 mRNA、Bax mRNA表达的变化。结果模型组、电针组神经行为学评分均低于假手术组(P<0.01),与模型组比较,电针组的神经行为学评分升高(P<0.05)。与假手术组比较,模型组脑含水量明显增高(P<0.01),电针组的差异无统计学意义(P>0.05),较之模型组,电针组的脑含水量显蓍降低(P<0.01)。与假手术组比较,模型组、电针组Bcl-2蛋白及mRNA的表达均显著增多(P<0.05或P<0.01),电针组又高于模型组(P<0.05);较之假手术组,模型组Bax蛋白及mRNA表达显著上升(P<0.01),电针组无明显差异(P>0.05),电针组较模型组显著降低(P<0.01);Bcl-2/Bax及Bcl-2 mRNA/Baxm RNA的比值,模型组降低而电针组升高(P<0.01)。结论电针可以通过提升Bcl-2/Bax的比值使抗凋亡基因占据优势,从而抑制缺血再灌注区的细胞凋亡,减轻脑水肿,促进神经功能恢复。

凋亡相关基因bcl-2,bax在人类大肠腺癌中的表达意义

目的 探讨ｂｃｌ２ 和ｂａｘ 在人类大肠腺癌中的表达及其意义．方法 运用ＨＥ 染色和免疫组织化学方法对７２ 例人类大肠腺癌进行研究，并采用５ 例正常人类结肠组织作为对照．结果 ①大肠腺癌的细胞凋亡随肿瘤分化的不同，而有显著的差异（ Ｐ＜ ０－０１） ，肿瘤的分化程度越高，凋亡指数ＡＩ 值越大．②ｂｃｌ２ 和ｂａｘ 基因在大肠腺癌中均具有较高程度的表达． ③ｂｃｌ２ 和ｂａｘ 基因均与大肠腺癌的分化程度有关（ Ｐ＜ ０－０５） ，肿瘤分化越低，其表达也就越低． ④ｂｃｌ２ 和ｂａｘ 基因在大肠腺癌组织中阳性反应呈显著正相关（ Ｐ＜ ０－０５ ，γ＝ ０－５２３） ．结论 ＨＥ 染色切片可以识别典型的凋亡细胞，大肠腺癌中的细胞凋亡与肿瘤的恶性程度有关，恶性程度越大，细胞凋亡越少；ｂｃｌ２ 与ｂａｘ 基因均与大肠腺癌的细胞凋亡的调控有关，在此过程中二者也相互作用，并且可能在大肠腺癌分化的中晚期共同调控，以抑制细胞凋亡作用为主．

L-精氨酸对肺缺血/再灌注损伤时bcl-2、bax基因表达的影响

目的:探讨L-精氨酸对肺缺血-再灌注损伤(PIR I)时bcl-2、bax基因表达的影响。方法:采用在体兔单肺原位缺血-再灌注模型。实验兔36只,随机分为假手术对照组(sham,12只)、肺缺血-再灌注组(I/R,12只)和肺缺血-再灌注加L-精氨酸组(L-Arg,12只)。分别于再灌注5 h取左肺组织,观察bcl-2、baxmRNA定位表达、凋亡指数(AI)、肺组织湿干重比(W/D)、肺损伤组织学定量评价指标(IQA)及光镜、电镜下的组织形态学改变。结果:在肺小动脉内(外)膜、肺小静脉内膜、肺泡上皮及细支气管上皮,L-Arg组bcl-2 mRNA的表达及bcl-2/baxmRNA的比值显著高于I/R组(均P<0.01),baxmRNA的表达明显低于I/R组(P<0.01);AI、W/D和IQA值显著低于I/R组(P<0.01和P<0.05);肺组织形态学异常改变不同程度减轻。结论:L-精氨酸可上调肺组织bcl-2 mRNA的表达、下调肺组织baxmRNA的表达、调控bcl-2/baxmRNA之间的平衡而减轻细胞凋亡,对PIR I发挥积极的防治作用。

紫杉醇对人骨肉瘤细胞凋亡及对bcl-2、bax基因表达的影响

目的了解紫杉醇诱导人骨肉瘤细胞的凋亡效果,以及凋亡与bcl-2和bax表达之间的关系。方法用不同浓度的紫杉醇作用于骨肉瘤细胞MG63。采用胎盼蓝染色法,于细胞记数板进行活细胞率检测计算。采用光镜和电子显微镜对细胞形态改变进行观测,采用原位缺口末端标记凋亡检测法(TUNEL)和流式细胞术(Annexin-V-FITC&PI)对细胞凋亡进行检测。采用免疫组织化学法对凋亡调节基因bcl-2和bax表达进行检测。结果骨肉瘤活细胞率随着紫杉醇作用时间延长和浓度增高而降低。紫杉醇诱导骨肉瘤细胞MG63凋亡表现为典型的凋亡特征,包括:细胞形态学改变,细胞染色质浓聚,染色质新月形变,胞核碎裂等。TUNEL法检测到了细胞DNA片段的断裂。随着细胞凋亡的发生,开始出现G2/M期阻滞。紫杉醇可以降低凋亡相关基因bcl-2的表达和增加bax基因的表达。结论紫杉醇可以通过时间依赖性和剂量依赖性方式,促使细胞G2/M期阻滞和抑制细胞有丝分裂,从而诱导人骨肉瘤细胞凋亡。这种凋亡可能受到凋亡相关基因bcl-2低表达和bax高表达的调控。

参附注射液对大鼠缺血再灌注心肌Bcl-2、Bax与c-fos基因蛋白表达的影响

目的观察大鼠急性缺血再灌注损伤与凋亡相关基因Bcl-2、c-fos和Bax蛋白表达的关系及参附注射液(SF)的影响。方法采用整体缺血再灌注(ischem ia-reperfusion,IR)模型,35只大鼠分为假手术组(C组)、生理盐水30 m in对照组(IR 30)、生理盐水120 m in对照组(IR 120)、SF 30 m in组(SF 30)和SF 120 m in组(SF 120),心肌缺血40 m in再灌注30 m in或120 m in后,用免疫组化法检测Bcl-2、Bax和c-fos在心肌中的表达量。结果与C组比较,IR组心肌Bcl-2、Bax和c-fos蛋白表达显著升高(P<0.01),Bcl-2/Bax比值显著下降(P<0.01);与IR组比较,SF组Bcl-2蛋白表达显著升高(P<0.01),Bax和c-fos蛋白表达显著降低(P<0.01),Bcl-2/Bax比值显著升高(P<0.01)。结论SF对IR心肌保护效应可能与其促进Bcl-2蛋白高表达、抑制Bax与c-fos蛋白表达、增加Bcl-2/Bax比值,从而抑制心肌细胞凋亡有关。

Bax和Bcl-2基因在单纯和放射复合伤口中的表达及与细胞凋亡和愈合延迟的关系

目的 :研究 Bax、Bcl 2基因在单纯和放射复合伤口愈合中的表达规律及与细胞凋亡和愈合延迟的关系。方法 :用原位末端标记法 (TU NEL )检测细胞凋亡 ,用核酸原位杂交方法检测 Bax、Bcl 2 m RNA表达并定量分析。结果 :1照射后细胞凋亡出现的频度及延续的时间明显高于单伤组 ;2伤口愈合过程中 Bax、Bcl 2表达随着细胞凋亡的增加呈规律性改变 :Bax表达明显增强 ,且与细胞凋亡发生有良好的相应关系 ;而 Bcl 2呈明显下降趋势。结论 :Bax和 Bcl