蜂胶黄酮对衰老小鼠胸腺bcl-2、bax基因mRNA表达的影响

目的:研究蜂胶黄酮对D-半乳糖致衰老小鼠胸腺bcl-2、bax基因mRNA表达的影响,探讨蜂胶黄酮的抗衰老机制。方法:用D-半乳糖建立衰老小鼠模型,以蜂胶黄酮治疗,RT-PCR法观察小鼠胸腺bcl-2、bax基因mRNA表达。结果:与正常对照组比较,模型组bcl-2基因表达降低,bax基因表达升高,差异有统计学意义(P<0.01);与模型组比较,治疗组bcl-2基因表达升高,bax基因表达降低,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:蜂胶黄酮能增加衰老小鼠bcl-2基因表达,降低bax基因表达,具有抗衰老作用。

奶牛妊娠中后期胎盘mRNA差异表达基因分析

奶牛的繁殖问题是制约我国奶业快速发展的瓶颈。为了研究奶牛妊娠中后期胎盘差异基因表达情况,探索mRNA在奶牛妊娠过程中的调控作用,本研究以奶牛妊娠中后期胎盘、非妊娠对照组子宫为对象,使用RNA-seq测序技术进行转录组分析。结果发现,与非妊娠对照组相比,妊娠中期和后期胎盘分别有4333和4354个基因的表达出现显著变化,其中上调的基因分别有2328和2519个,下调的基因分别有2005和1835个;778个差异基因只存在于妊娠中期,757个差异基因只存在于妊娠后期。GO分析结果显示,妊娠中后期差异表达的基因主要在定位、生物粘附、细胞连接、生殖等过程。KEGG分析结果显示,妊娠中后期差异表达的基因在ECM-受体相互作用、细胞粘附分子、细胞周期、粘着斑、PI3KAkt信号通路、癌症的途径以及蛋白质的消化吸收等通路。与非妊娠奶牛相比,妊娠中后期胎盘基因存在明显的差异表达,其中PLET1、CSH1、SULT1E1、PRP1、LPAR2、CSF1R、PDCD1等基因表达明显上调,推测其可能参与奶牛的妊娠调控,在一定程度上影响着妊娠的发生。本研究结果为深入挖掘奶牛妊娠中后期的分子调控机制提供了理论基础。

子宫内膜癌组织中IGF2BP1mRNA,PEG10mRNA表达及与增殖基因表达的相关性和预后研究

目的研究子宫内膜癌(endometrial carcinoma,EC)组织中胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白1(insulinlike growth factor 2 mRNA binding protein 1,IGF2BP1)mRNA,父系表达遗传印记基因10(patrilineal expression of genetic imprinting gene 10,PEG10)mRNA表达及与增殖基因表达的相关性及预后。方法选取2017年1月~2019年1月湖北理工学院附属妇幼保健院诊治的100例EC患者。实时荧光定量PCR检测EC癌组织和癌旁组织中IGF2BP1 mRNA,PEG10 mRNA及增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)mRNA,细胞周期素D1(cyclin D1)mRNA,细胞周期蛋白依赖激酶4(cyclin dependent kinase 4,CDK4)mRNA表达。免疫组织化学检测IGF2BP1,PEG10蛋白表达。相关性采用Pearson相关分析。Kaplan-Meier曲线分析不同IGF2BP1,PEG10表达组EC患者的预后差异。COX回归分析EC患者的预后影响因素。结果EC癌组织中IGF2BP1 mRNA(1.84±0.33),PEG10 mRNA(2.12±0.40),PCNA mRNA(3.14±0.42),cyclinD1 mRNA(2.81±0.36),CDK4 mRNA(2.37±0.34)高于癌旁组织(0.78±0.21,0.91±0.25,0.74±0.13,0.67±0.21,0.59±0.18),差异具有统计学意义(t=25.652~54.588,均P<0.05)。癌组织中IGF2BP1(70.00%),PEG10(72.00%)蛋白阳性率高于癌旁组织(100%,9.00%),差异具有统计学意义(χ^(2)=75.000,82.363,均P<0.05)。EC中IGF2BP1 mRNA,PEG10 mRNA表达与PCNA mRNA,cyclinD1 mRNA,CDK4 mRNA表达呈正相关(r=0.562~0.625,均P<0.05)。EC中IGF2BP1 mRNA与PEG10 mRNA表达呈显著正相关(r=0.663,P<0.05)。FIGO分期Ⅲ期、并发淋巴结转移EC癌组织中IGF2BP1(86.49%,87.50%),PEG10(89.19%,90.63%)阳性率高于FIGO分期Ⅰ~Ⅱ期(60.32%,61.90%)、无淋巴结转移(61.77%,63.24%),差异具有统计学意义(χ^(2)=6.863~8.608,均P<0.05)。IGF2BP1阳性组患者三年总体生存率70.00%(49/70)低于阴性组的90.00%(27/30);PEG10阳性组患者三年总体生存率为69.44%(50/72),低于阴性组的92.86%(26/28),差异具有统计学意义(Log-rankχ^(2)=4.133,5.491,P=0.042,0.019)。FIGO分期Ⅲ期(OR=1.449,95%CI:1.148~1.830)、并发淋巴结转移(OR=1.442,95%CI:1.124~1.850),IGF2BP1阳性(OR=1.637,95%CI:1.239~2.163)及PEG10阳性(OR=1.576,95%CI:1.136~1.187)是影响EC患者生存预后的独立危险因素(均P<0.05)。结论EC中IGF2BP1,PEG10表达升高,两者与增殖基因表达呈正相关,是EC预后评估的肿瘤标志物。

PRELID3B基因mRNA在不同品种乌骨鸡肌肉组织中的表达规律研究

PRELID3B基因(PRELIP Domain Containing 3B)是调控乌骨鸡黑色素沉积的重要候选基因。为探讨PRELID3BmRNA在不同品种乌骨鸡肌肉发育中的表达情况,以丝羽乌骨鸡和余干乌骨鸡为材料,采用实时荧光定量PCR技术,检测出雏后不同发育时期胸肌和腿肌中PRELID3BmRNA的表达情况,并将基因表达量与肌肉色度L值进行相关性分析。结果发现,2个品种胸肌和腿肌的肌肉色度L值都随日龄的增长呈逐渐下降的趋势;2周龄后,2个品种的胸肌和腿肌L值出现差异(P<0.05)。丝羽乌骨鸡胸肌和腿肌PRELID3B mRNA表达变化趋势基本一致,都是前高后低;余干乌骨鸡胸肌和腿肌PRELID3BmRNA表达变化趋势不一致,其中胸肌在10周龄之后呈升高的趋势。14周龄之后,2个品种的胸肌和腿肌PRELID3BmRNA表达都出现差异(P<0.05)。品种间比较,14周龄之后胸肌PRELID3BmRNA表达在品种间出现差异(P<0.05);腿肌则是在2周龄、6周龄和14周龄时品种间出现差异(P<0.05)。肌肉色度L值与基因表达的相关性结果显示,2个品种的腿肌色度L值都与基因表达量呈负相关(P<0.05)。结果提示PRELID3B基因mRNA表达在不同品种乌骨鸡腿肌中的变化规律基本一致,基因表达量与腿肌色度变化具有相关性,PRELID3B基因可能在调控乌骨鸡腿肌黑色素沉积方面具有重要作用。

碘对大鼠甲状腺细胞凋亡及bax、bcl-2基因mRNA表达的影响

目的探讨碘对甲状腺细胞凋亡及凋亡相关基因表达的影响。方法Wistar大鼠分为6组,即低碘组(LI)、正常碘组(NI)、5倍碘组(5HI)、10倍碘组(10HI)、50倍碘组(50HI)、100倍碘组(100HI),用含不同碘的自来水喂养,6个月后取甲状腺。末端标记法(TUNEL)进行原位细胞凋亡检测,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法对甲状腺细胞凋亡相关基因bax、bcl-2进行半定量测定。结果原位细胞凋亡检测结果表明,LI组细胞凋亡明显,而NI组与其他组均未见凋亡细胞。baxmRNA表达水平以bax/β-actin光密度比表示,LI组为1.096±0.089,NI组为0.647±0.062,5HI组为0.638±0.191,10HI组为0.676±0.081,50HI组为0.644±0.092,100HI组为0.751±0.152;同样方法表示,bcl-2mRNA表达水平分别为0.273±0.185、0.172±0.115、0.236±0.107、0.235±0.071、0.267±0.065、0.313±0.062。结果表明,在LI组大鼠甲状腺bax、bcl-2mRNA表达水平均明显增加(P<0.05);在其他组,bcl-2mRNA表达水平随给碘量增加而增加,而bax无明显变化。但bax/bcl-2比值随摄入碘量增加而呈降低趋势。结论碘缺乏易诱发大鼠甲状腺细胞凋亡;而碘过量不易引起细胞凋亡,甲状腺细胞对碘过量有一定耐受能力。bcl-2家族参与甲状腺细胞凋亡过程。

大鼠孕期暴露DBP对子代睾丸mRNA差异表达的影响

目的探讨大鼠孕期暴露DBP对子代睾丸mRNA差异表达的影响。方法选取清洁级SD成年鼠,雌雄比例12交配,确定怀孕后行DBP染毒,试验组灌胃剂量为500 mg/kg,同时设置对照组,每组8只;试验组老鼠染毒至哺乳期结束,饲养子代雄鼠60 d,解剖取睾丸组织,采用二代高通量测序技术对睾丸样本进行基因差异表达分析及筛选,对差异表达基因进行GO富集分析和KEGG富集分析。结果差异表达的基因共有1421个,其中,上调基因722个,下调基因699个。筛选出的差异表达基因GO功能富集分析显示,生物过程(Biological Process BP)中,差异表达基因与老化、细胞增殖、炎症反应等密切相关;细胞成分(Cellular Component CC)中,差异表达基因主要富集在内质网膜、细胞膜等部分;分子功能(Molecular Function MF)中,差异表达基因主要与钙离子结合、趋化因子活性等密切相关。KEGG富集结果显示,孕期暴露DBP对子代雄鼠的影响集中分布在TNF信号传导途径、类固醇生成、细胞黏附分子(CAMs)、醛固酮合成和分泌等通路。结论大鼠孕期DBP暴露可致雄性子代睾丸mRNA差异表达,影响生殖系统的通路主要有TNF信号传导途径、类固醇生成、细胞黏附分子(CAMs)、醛固酮合成和分泌等。

胃癌组织线粒体基因组不稳定与Bcl-2和BaxmRNA表达的关系

目的 探讨胃癌及其癌前病变线粒体DNA微卫星不稳定 (mtMSI)与Bcl 2、BaxmRNA表达的关系。方法 采用PCR SS CP方法检测mtMSI,并采用RT PCR方法检测了Bcl 2和BaxmRNA的表达。结果 胃黏膜肠化 (5 3 3% )、异型增生 (70 % )组织Bcl 2mRNA表达率显著高于浅表性胃炎组(10 % ) (P <0 0 5 ) ,而慢性萎缩性胃炎 (5 0 % )和胃癌 (30 % )Bcl 2mRNA表达率与浅表胃炎组相比差异无统计学意义 (P >0 0 5 ) ;胃黏膜异型增生组织Bcl 2mRNA表达率显著高于胃癌组织 (P <0 0 5 )。异型增生 (6 0 % )组BaxmRNA表达率显著高于浅表胃炎组 (P <0 0 5 ) ,而慢性萎缩性胃炎(5 0 % )、肠化 (4 6 7% )和胃癌 (33 3% )的BaxmRNA表达率与浅表性胃炎组 (10 % )比较差异无统计学意义 (P >0 0 5 )。mtMSI(+)组Bcl 2mRNA表达率为 5 0 % ,mtMSI(- )组为 4 0 5 % ;mtMSI(+)组BaxmRNA表达率为 4 4 4 % ,mtMSI(- )组为 4 0 5 % ,mtMSI(+)组Bcl 2和BaxmRNA表达率与mtMSI(- )组相比差异无统计学意义 (P >0 0 5 )。结论 mtMSI可能在部分胃癌的发生中起重要作用 ;胃癌发生过程中出现的mtMSI与Bcl 2。

桂枝对MRL小鼠心肌细胞凋亡及Bax mRNA基因表达的影响

目的:探讨中药桂枝对MRL小鼠心肌细胞凋亡的作用及机理。方法:将MRL小鼠分为空白组、强的松组和桂枝组,检测MRL小鼠心室肌组织凋亡细胞,计算心肌细胞凋亡指数(AI),RT-PCR法检测心肌细胞凋亡基因Bax mRNA表达,观察桂枝对MRL小鼠心肌细胞凋亡的影响。结果:桂枝能够调控心肌细胞凋亡基因Bax mRNA表达,即抑制Bax mRNA表达,明显抑制心肌细胞凋亡(心肌细胞凋亡指数显著下降)。其疗效明显优于空白组(P<0.01),有显著性差异,与强的松组疗效相当(P>0.05)。结论:桂枝可能通过调控凋亡基因而抑制心肌细胞凋亡,从而延缓或部分逆转MRL心肌损害的发生、发展。

基于mRNA-seq数据筛选Mn2+调控小鼠巨噬细胞的差异表达基因

目的对Mn^(2+)调控的小鼠巨噬细胞mRNA进行测序和生物信息学分析,筛选出差异表达的基因并分析其生物学功能,探究Mn^(2+)对小鼠巨噬细胞的调控作用。方法采用MnCl2和NaCl分别处理小鼠腹腔巨噬细胞24 h,利用m RNA-seq方法筛选出Mn^(2+)调控巨噬细胞的差异表达基因,对差异表达基因进行基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析,并采用qPCR对关键的差异表达基因进行验证。结果通过整合数据库信息和分析获得1637个差异表达基因,包括表达上调的基因912个、表达下调的基因725个,GO富集分析表明这些差异表达基因具有免疫吞噬、细胞增殖和分化、转录因子调控等生物活性,KEGG通路主要富集在PI3K-Akt、NF-κB等信号通路。其中与免疫相关且差异最显著的10个基因为免疫球蛋白G Fc段受体Ⅰ(Fcgr1)、含不育α基序结构域蛋白11(Samd11)、活性调节的细胞骨架相关蛋白(Arc)、G蛋白偶联受体35(Gpr35)、富含脯氨酸的小蛋白2H(Sprr2h)、Wnt家族成员4(Wnt4)、整合膜蛋白2A(Itm^(2)a)、无调性bHLH转录因子8(Atoh8)、泛素结合酶E2C(Ube2c)及富含脯氨酸的小蛋白2B(Sprr2b),qPCR验证结果与mRNA测序分析趋势一致。结论通过mRNA-seq数据筛选Mn^(2+)调控小鼠巨噬细胞的差异表达基因及GO和KEGG富集分析结果表明Mn^(2+)对巨噬细胞具有免疫调节作用。

IL-1α、Bax、Bcl-2等基因mRNA在帕金森病小鼠模型中的表达

目的 :探讨细胞因子IL 1α和IL 10与凋亡相关基因Bcl 2家族中Bax和Bcl 2在 1 甲基 4 苯基 1,2 ,3,6 四氢吡啶(MPTP)致C5 7BL6J小鼠帕金森病模型中黑质和纹状体内的表达意义及关系。方法 :利用RT PCR的方法检测对照组 (NS组 )C5 7BL6J小鼠及皮下注射MPTP后第 6天C5 7BL6J小鼠的左右侧脑内黑质、纹状体、下丘脑内的IL 1α ,IL 10 ,Bax和Bcl 2的mRNA的表达。结果 :与对照组相比 ,IL 1αmRNA在帕金森小鼠模型纹状体内表达显著增加 ;除对照组 1只外 ,对照组和MPTP组均未检测到IL 10mRNA的表达 ;BaxmRNA和Bcl 2mRNA在黑质内的表达均显著低于对照组。结论 :黑质和纹状体在MPTP所致的小鼠帕金森病中受累 ,表现为有不同基因的消长。促进炎症发生的细胞因子IL

胃癌组织线粒体基因组不稳定与Bcl-2和Bax mRNA表达

目的 为探讨胃癌及其癌前病变线粒体DNA微卫星不稳定(mtMSI)与Bcl-2、Bax mRNA的表达的关系。方法 采用PCR—SSCP方法检测mtMSI，并采用RT—PCR方法检测了Bcl-2和Bax mRNA的表达。结果 胃黏膜肠化(53．3％)、异型增生(70％)以及癌旁组织(63．3％)Bcl-2 mRNA表达率显著高于浅表性胃炎组(10％)(P<0．05)，而慢性萎缩性胃炎(50％)和胃癌(30％)Bcl-2 mRNA表达率与对照组相比则无明显差异(P>0．05)；胃黏膜异型增生组织Bcl-2 mRNA表达率显著高于胃癌组织(P<0．05)。异型增生(60％)组Bax mRNA表达率显著高于对照组(P<0．05)，而慢性萎缩性胃炎(50％)、肠化(46．7％)和胃癌(33．3％)组的Bax mRNA表达率与浅表性胃炎组(10％)比较无显著差异(P>0．05)。mtMSI(+)组Bcl-2 mRNA表达率为50％，mtMSI(-)组为40．5％；mtMSI(+)组bax mRNA表达率为44.4％，mtMSI(-)组为40．5％，mtMSI(+)组Bcl-2和Bax mRNA表达率与mtMSI(-)组相比无显著差异(P>0．05)。结论 mtMSI可能在部分胃癌的发生中起重要作用；胃癌发生过程中出现的mtMSI与Bcl-2、Bax mRNA的异常表达可能无关。

大鼠肝再生时肝PBR、Bcl-2、Bax基因mRNA的表达

目的:探讨肝细胞线粒体通透性转换(permeabilitytransition,PT)的主要调节蛋白外周型苯二氮类受体(PBR)、Bcl2家族成员Bcl2、Bax在肝再生过程中的表达情况,探讨上述基因表达与线粒体PT的关系。方法:健康成年雄性SD大鼠,随机分为3组:肝切除组,切除肝左叶和中叶部分约全肝的70%;假处理组,同样麻醉和开腹,但不切肝;正常组。手术后3、6、12、24、48、72、120和168h分别以半定量RTPCR法检测PBR、Bcl2、Bax在肝再生过程中mRNA表达的动态变化。结果:肝再生过程中PBR基因表达降低,但与假处理组无显著差异;Bcl2在肝切除后3h和120h表达显著高于对应的假处理组和正常组(P<0.05);BaxmRNA表达低于正常组和假处理组,其中在肝切除后12h和72h时显著低于相应的假处理组(P<0.05)。结论:PBR、Bax、Bcl2在肝再生过程中表达变化可能与线粒体PT时相变化有关。

利用mRNA差别显示技术分析枸杞体细胞胚发生早期基因的差别表达

本研究选用枸杞体细胞胚发生体系中的继代愈伤组织（对照）、胚性愈伤组织和早期胚体为实验材料，提取细胞总ＲＮＡ，在１２种锚定真核生物ｍＲＮＡ３′末端的ＯｌｉｇｏｄＴ１２ＶＮ中，随机选用ＯｌｉｇｏｄＴ１２ＧＡ为引物合成了以上三种材料的ｃＤＮＡ第一链，以此ｃＤＮＡ为模板，用随机引物进行ＰＣＲ扩增，选择差别表达的片段。我们选用了ＯＰＡ、ＯＰＨ、ＯＰＫ和ＯＰＢ四组的６０个随机引物对所得的ｃＤＮＡ进行了ＰＣＲ扩增，得到了三个在体细胞胚发生早期组织中基因特异表达的片段。结果表明，在体细胞胚发生早期有胚胎发生特异性基因的表达，而且这种特异表达的基因在继代愈伤组织中没有表达。

电针刺激对心脏手术病人心肌热休克蛋白mRNA基因表达的影响

观察电针刺激对心脏手术病人心肌细胞热休克蛋白mRNA基因表达的影响。 2 8例ASD病人 ,随机分为针麻组 (组Ⅰ ,n =6 ) ,针刺加全麻组 (组Ⅱ ,n =10 ) ,和全麻组 (组Ⅲ ,n =9) ,于转流前 10min ,停转流 ,停转流 30min ,停转流 1h测定CK MB。结果 :① 3组病人停转流和转流后1hCK MB均较转流前明显增加 ,但组Ⅲ的升幅明显高于组Ⅰ和组Ⅱ ;②针刺组HSP70 mRNA表达高于对照组 (P <0 0 5)。因此针刺有增加缺血心肌细胞HSP70

胰腺癌细胞凋亡与bcl-2,bax基因的表达

目的 探讨胰腺癌组织中的bcl 2和bax的表达及bcl 2 /bax比值与胰腺癌细胞凋亡的关系。方法 对 30例胰腺癌标本应用免疫组化SP方法测定胰腺癌切片中的凋亡抑制基因bcl 2和凋亡促进基因bax的表达 ;同时应用TUNEL法测定胰腺癌细胞原位凋亡情况。结果 高分化腺癌的凋亡指数 (AI)为 ( 5 .70± 1.2 1) % ;中低分化腺癌为 ( 6 .80± 2 .0 1) %。AI与bcl 2 /bax比值呈负相关关系 (r =-0 .5 5 83,P <0 .0 5 )。结论 bcl 2和bax在胰腺癌细胞凋亡调节过程中起着重要作用。

胃癌癌前病变中医证候与凋亡相关癌基因mRNA表达的关系

【目的】 探讨胃癌癌前病变(PLGC)中医证候与bcl-2癌基因和p53抑癌基因mRNA表达的关系。【方法】经胃镜及病理证实为PLGC病例共40例,其中中度异型增生24例,重度异型增生9例,不完全性结肠化生7例;兼气滞证10例,兼胃热证12例,兼血瘀证18例。采用原位分子杂交的方法检测胃粘膜活检标本bcl-2癌基因和p53抑癌基因mRNA表达。【结果】本组PLGC中,bcl-2癌基因和p53抑癌基因在转录水平均有过度表达,并随病变的进展而表达逐渐增高。在不同的兼证中,bcl-2癌基因和p53抑癌基因mRNA的表达强度依次为兼气滞证<兼胃热证<兼血瘀证。【结论】bcl-2癌基因和p53抑癌基因在PLGC中有异常表达,其表达与不同兼证有关且可能有一定的证候特异性。

绵羊LPIN1基因的克隆和mRNA表达研究

本研究旨在克隆绵羊的LPIN1基因,分析其mRNA在2个不同脂尾型绵羊品种的7种脂肪组织中的发育性表达规律,以揭示该基因在绵羊脂肪代谢中的作用。利用RT-PCR技术克隆LPIN1基因,生物信息学方法分析Lipin1蛋白的理化性质和结构域;利用Real-time PCR技术检测广灵大尾羊和小尾寒羊2、4、6、8、10和12月龄共96个个体(每品种公、母各半)在大网膜、小网膜、肠系膜、腹膜后、皮下、肾周和尾部脂肪中的mRNA表达。结果表明,LPIN1基因CDS区长2 688bp,编码985个氨基酸。Lipin1是1种不稳定的亲水性蛋白,含有10个潜在的糖基化位点和88个磷酸化位点,但无跨膜域和信号肽。在其氨基酸序列的氨基端和羧基端各含有一段高度保守的序列,分别为Lipin-N和LNS2(Lipin/Ned1/Smp2)超家族特征序列。LPIN1mRNA在所研究的脂肪组织中都表达,其中肾周脂肪中表达最高,肠系膜脂肪中表达最低。品种、组织和月龄及其二阶互作对该基因的表达均有显著影响。LPIN1基因直接参与并间接调节脂肪代谢,对绵羊肉质性状的遗传改良具有重要意义。

不同毛色山羊皮肤组织Agouti基因mRNA及其编码ASIP差异表达研究

旨在探讨Agouti基因调控山羊毛色机制,采用SYBR Green real-time PCR和蛋白免疫印迹方法分别检测了不同毛色山羊皮肤组织中Agouti基因mRNA及其所编码ASIP蛋白的差异表达。结果表明,Agouti基因mRNA在白色、黑色、棕色山羊皮肤组织中的表达量依次为白色>黑色>棕色;mRNA表达量在棕色和白色、棕色和黑色山羊皮肤之间均存在显著差异(P<0.05),在白色和黑色山羊皮肤之间差异不显著(P>0.05)。ASIP在白色、黑色、棕色山羊皮肤组织中的表达量:白色>棕色>黑色;ASIP表达量在白色和黑色山羊皮肤组织之间存在显著差异(P<0.05),但在白色和棕色、棕色和黑色山羊皮肤组织之间差异均不显著(P>0.05)。研究结果提示,Agouti基因在不同毛色山羊皮肤组织中可能存在不同调控机制。

鹅Perilipin基因部分片段的克隆、不同品种及填饲对组织mRNA表达水平的影响

本研究旨在克隆鹅围脂滴蛋白(Perilipin)基因,并探讨填饲对其在四川白鹅和朗德鹅肝脏中表达的影响,为从脂滴角度研究鹅肥肝分子机理提供依据。试验选取12只朗德鹅和12只四川白鹅为研究对象,通过RT-PCR方法扩增鹅Perilipin基因部分序列,采用实时定量技术研究了该基因在皮脂、腹脂、肝脏等10个组织中的表达情况,最后检测填饲后两品种鹅肝脏总脂质含量、甘油三酯(TG)水平、肝质量以及Perilipin基因表达变化。结果表明:获得的鹅Perilipin基因序列与原鸡的同源性最高,与哺乳动物的同源性也达到70%以上;从组织表达上看,该基因主要表达于腹脂和皮脂,而在其他组织几乎不表达;填饲引起鹅肝脏Perilipin mRNA表达丰度的极显著增加(P<0.01),且与肝质量、肝内TG和总脂质呈显著正相关;此外,填饲导致其在朗德鹅肝脏中的表达丰度显著高于四川白鹅(P<0.05)。结果提示:填饲会引起Perilipin mRNA在鹅肝脏中表达丰度的极显著增加(P<0.01),且其增加幅度存在着品种间差异(P<0.05)。

电针调节脑缺血再灌注大鼠大脑皮层Bcl-2和Bax mRNA的表达

目的:探讨电针是否通过干预Bax/Bcl-2 mRNA的表达,来调控缺血再灌注大鼠大脑皮层细胞凋亡,发挥电针对脑神经元保护作用。方法:将清洁级健康雄性SD大鼠19只,按随机数字表随机分成假手术组(n=5)和用于造模动物14只,采用改良Longa线栓大脑中动脉法制作局灶性脑缺血再灌注模型。在成功制作出脑缺血再灌注模型并作神经缺损综合评分为2分以上后随机分为模型组、电针组,每组各7只。取电针组大鼠"百会"及"大椎"穴,采用疏密波刺激30min,电流强度1～3mA,频率20Hz/80Hz,疏、密波交替时间各为1.5s。用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)技术分别检测大鼠大脑皮层组织Bcl-2和Bax mRNA的表达。结果:与假手术组相比,模型组Bcl-2、Bax mRNA表达均显著升高,而Bcl-2/Bax比值显著下降;与模型组相比,电针组Bax mRNA表达降低,Bcl-2 mRNA表达虽无统计学差异,但Bcl-2/Bax比值显著上升,形成以Bcl-2占优势的Bcl-2/Bax二聚体。结论:电针可以通过调控内源性凋亡途径,抑制Bax的促凋亡作用,降低缺血再灌注区的细胞凋亡,促进细胞的存活,这可能是电针拮抗局灶性脑缺血再灌注损伤后的神经细胞凋亡,保护脑神经元的分子生物学机制之一。