Application of purple nonsulphur bacterium Rhodopseudomonas sp．in spat rearing of Bay Scallop Argopecten irradians irradians

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外源添加物对海湾扇贝肉糜凝胶特性及营养品质的影响

为开发高品质扇贝肉糜制品,本文以冷冻海湾扇贝(Argopecten irradians)贝柱为原料,选取大豆分离蛋白、羟丙基木薯淀粉、卡拉胶、蛋清添加至扇贝肉糜,探讨外源添加物对扇贝肉糜凝胶特性及营养品质的影响。结果表明,5%大豆分离蛋白(B组)和羟丙基木薯淀粉(C组)能有效改善扇贝肉糜质构特性,且后者显著提高扇贝肉糜制品的持水性,但8%蛋清(D组)或0.6%卡拉胶(E组)会降低扇贝肉糜的硬度、内聚性、弹性和持水力;复配外源添加物[F组(7%羟丙基木薯淀粉+1.0%卡拉胶)和G组(8%羟丙基木薯淀粉+1.5%卡拉胶+5%蛋清+4%大豆分离蛋白)]对扇贝肉糜质构影响较小且能够提高持水性;F组感官评价较高;C、F、G组的扇贝肉糜制品均具有较优的氨基酸、脂肪酸配比,但氨基酸组成差异明显,不饱和脂肪酸含量显著高于饱和脂肪酸,EPA+DHA含量分别占总脂肪酸的45.04%、44.74%和30.87%。由此可知,外源添加物的种类和添加比例会显著影响海湾扇贝肉糜的凝胶特性和营养品质,为后续开发不同质构和成本等级的扇贝肉糜制品提供了理论数据。

海湾扇贝壳色与数量性状之间的关系

海湾扇贝北部亚种Argopecten irradians irradians的左右两枚贝壳均具有丰富多彩的颜色,它们不仅能够稳定地遗传,而且还与生长、存活等数量性状有关。为了查清海湾扇贝壳色与数量性状之间的关系,2005年11月中下旬,作者对河北、山东、辽宁三省的海湾扇贝养殖群体的壳色种类、分布频率及其数量性状进行了统计、测量和分析。这些养殖群体来自于相同的基础群体,均是1998-1999年引种繁殖的后代。三个养殖区都有橙、棕、黑、紫、白等壳色的个体,表明海湾扇贝的壳色具有多态性,且不受环境的影响,橙、棕、黑、紫、白等壳色的分布频率分别为17.8%、48.8%、32.5%、3.8%、1.1%。总重、闭壳肌重、出柱率、壳长、壳高、壳宽等数量性状间存在显著相关性,相关系数最大值出现在壳长与壳高之间,其次在全湿重与闭壳肌重之间,最小值在出柱率与壳高之间;壳长、壳高和壳宽都能显著地影响总重和闭壳肌重。海湾扇贝的壳色与数量性状之间有密切关系,棕色个体总重最大、紫色个体总是最轻最小。方差分析表明,壳色(遗传因素)和养殖区(环境因素)均能够单独地对数量性状产生显著的影响,而且它们的交互作用也是显著的。本研究结果对海湾扇贝遗传育种有重要意义。

海湾扇贝不同种群在磷酸葡萄糖变位酶基因位点的遗传结构与性状

1995年1月-1996年12月，采用水平淀粉凝胶电泳技术，对美国海湾扇贝5个野生种群和1个养殖种群在磷酸葡萄糖变位酶基因位点（Pgm）的遗传结构及相关性状进行了分析，共发现7个等位基因。MV（MarthasVineyardIsland）、NY（LongIsland）、CT（Stonington）种群间等位基因频率分布无显著差异，内湾封闭性环境和人工近亲繁殖分别使WF（Wellfleet）、CN（养殖种群）等位基因频率分布产生显著分化，杂合性降低。CN种群呈现遗传退化，仅4个等位基因。NC（Beaufort）等位基因频率分布显著区别其它种群，其肋条数和形态特征指数所H／L、H／Wd（H:壳高，L：壳长，Wd：壳宽）显著高于其它种群，Pgm等位基因频率存在南北向梯度分布。Pgm基因位点存在偏离Hardy－Weinberg遗传平衡现象，pgm83具显著的纯合子过剩现象，纯合子大于其它基因型。种群CT、NC、WF的pgm100，MV、CT、NC的pgm93及WF的pgm78存在显著纯合子过剩现象。NC、CN与其它种群具显著种群间遗传差异，NC种群杂合子的壳长、高、宽及体重普遍大于纯合子，且杂合子Pgm100／78壳长明显高于纯合子Pgm100／100。而其它种群杂合子个体的壳长、宽、高及体重普遍低于纯合子。

海湾扇贝微卫星标记开发及其分离方式分析

利用尼龙膜吸附杂交法构建了海湾扇贝的(AC)15、(AG)15微卫星富集文库,随机挑取3 000个克隆,经菌落原位杂交二次筛选共获得阳性克隆1 268个(42.3%)。经序列测定和生物信息学分析后得到521个独立的阳性克隆,其中微卫星506个,小卫星15个。微卫星中,完美型248个,占总数的49.0%;非完美型216个,占42.7%;复合型42个,占8.3%;其中AG/TC重复占70.4%(356个),AC/TG重复29.6%(150个)。选择其中的55条序列设计引物,筛选出其中的20对引物检测它们在海湾扇贝CC10家系的双亲和94个子代个体中的分离情况,结果表明:(1)其中6个位点在母本和子代中发生分离,10个位点在父本和子代中发生分离,4个为双亲共享位点;(2)2个位点存在无效等位基因;(3)16个位点符合孟德尔遗传定律,4个位点的子代个体基因型频率偏离孟德尔遗传定律。上述结果表明,这些微卫星引物可以用于构建海湾扇贝的遗传连锁图谱,并且所构建的富集文库适用于微卫星标记的大规模开发。

海湾扇贝病原菌—黑美人弧菌的分离与致病性

1997年8～9月,大连金州区大李家乡养殖场筏养海湾扇贝(Argopectenirradians)突发大面积死亡。其主要病症是外套膜收缩,重者全部脱落,鳃丝呈土黄色或糜烂,肠管空并伴有不同程度的肾肿胀。从病贝血淋巴液和鳃组织中分离的2株优势菌(h9701-1,g9701-2)分别做纯培养,采用肌注法感染健康贝,得到与原发病相同症状,证实是病原菌。经多项形态、生理生化测定,2株分离菌皆是黑美人弧菌(Vibrionigripulchritudo)。

扇贝氨基多糖的红外光谱分析

从海湾扇贝中提取出具有抗凝活性的氨基多糖，其中，氨基己糖含量为２２．６０％，己糖醛酸含量为２３．３０％，含硫量为６．６６％。样品经ＫＢｒ压片，于１０ＤＸ－ＦＴＩＲ红外光谱仪中进行光谱扫描，发现，该多糖具有典型的氨基多糖红外光谱，分子中含有－ＮＨ，－ＣＯＯ，－ＯＳＯ３＾－等氨基多糖特征基团。与氨基多糖标准品－肝素，６－硫酸软骨素和透明质酸的红外光谱进行比较分析，表明。

气相色谱法鉴别扇贝糖胺聚糖的中性糖基

从海湾扇贝中提取分离出糖胺聚糖,分子中除含有氨基己糖和己糖醛酸外,还含有中性糖基。样品经盐酸-甲醇试剂醇解成单糖,用六甲基二硅胺烷和三甲基氯硅烷(2:1)硅醚化成三甲基硅醚衍生物,于气相色谱仪中测定,并与标准单糖比较分析。结果发现,扇贝糖胺聚糖含有5种中性糖基,即葡萄糖、半乳糖、木糖、岩藻糖和鼠李糖。

不同温度下充氧包装的活品海湾扇贝品质变化

为延长海湾扇贝贮运过程中的存活期并保证其品质,将海湾扇贝平铺放入HDPE材质的包装袋(32 cm×25 cm),并充入体积分数为99.9%的氧气,密封后将充氧包装的海湾扇贝分别置于0、5、10、15℃4个不同温度下,探讨不同温度对其品质的影响。试验结果显示,密封充氧包装的海湾扇贝较低温条件下的存活率、感官评价分值和糖原明显高于同一时间的较高温条件,同时较高温条件下质量损失率、色度差、细菌总数上升速度均高于较低温条件。其中,0℃条件下无水保活效果最好,11 d出现死亡,15 d全部死亡。首次出现死亡时间比5、10、15℃组分别延长5、7、9 d;全部死亡时间比5、10、15℃组分别延长4、5、9 d。0℃条件下,其感官评价分值在0～4 d内接近满分,颜色变化最小,其色度差为3.98。综合各项指标变化,0℃条件下有利于延长充氧包装内海湾扇贝的保活时间,有效保持海湾扇贝活品品质。研究结果为活品海湾扇贝密封充氧保活保鲜技术提供数据参考。

海水贝类苗种循环水培育水处理技术的研究与应用

封闭循环水育苗作为一种高技术育苗模式,其核心是养殖废水的净化处理。对于循环水系统的每一道处理工序,都有大量可选择的工艺。本试验利用自建的100 m3的海湾扇贝苗种封闭循环水培育系统,通过用各个阶段的出水养殖扇贝幼体,以及测定出水指标等来判断水处理系统的处理效果。结果表明,封闭循环水处理系统的效果是成功的。

海湾扇贝亲贝、幼虫和稚贝对二氧化氯耐受性的研究

为确定二氧化氯对海湾扇贝(Argopecten irradians)亲贝、幼虫和稚贝的安全用量范围,研究海湾扇贝亲贝、D型幼虫、眼点幼虫和稚贝对不同浓度二氧化氯的耐受性。按照亲贝、D型幼虫、眼点幼虫和稚贝的先后顺序进行4个独立实验,每实验设6个不同的二氧化氯浓度,每浓度设三个重复,每实验持续时间为24h,分别在12h和24h测定二氧化氯对亲贝和幼虫死亡率的影响。结果表明,海湾扇贝亲贝、D型幼虫、眼点幼虫和稚贝对二氧化氯均具有较强的耐受性,其安全浓度分别为20mg/L、5mg/L、10mg/L和10mg/L。

影响海湾扇贝中间育成效果的因素探讨

影响海湾扇贝中间育成效果的主要因素有:育成器具种类(A)、换袋时间(B)、网孔大小(C)和装苗量(D)。正交试验和方差试验表明,A、C、D为提高保苗率的敏感因素,B、C、D为提高生长效果的显著因素。试验结果提出:网箱或圆锥形袋的保苗率明显优于扁袋;每隔15～30天更换一次网袋可显著加快贝苗的生长速度,网孔大小以2mm为适宜,每袋最终实际装苗量应在2000只以内。

海湾扇贝组织蛋白酶L基因编码区的克隆和分析

通过cDNA末端快速扩增技术(RACE),从海湾扇贝(Argopecten irradians)中克隆得到了组织蛋白酶L基因(AiCL)的编码区全长,为1 095 bp,推测编码364个氨基酸。经比对与分析发现蛋白序列中存在4个组织蛋白酶L活性位点保守氨基酸:Q164,C170,H309,N329;6个极为保守的半胱氨酸残基:C167,C201,C210,C243,C302,C351。预测其N端17个氨基酸为信号肽序列,C端ASYPTV可能也是分泌信号。AiCL成熟蛋白分子由219个氨基酸构成,前体肽的切割位点预计在A145和M146之间。序列同源性分析中,AiCL蛋白序列与软体动物同源蛋白最为相似,序列一致性在50%以上,在系统进化树中与其它无脊椎动物组织蛋白酶L聚合到一起。通过SWISS-MODEL构建的AiCL成熟蛋白三维模型表明该蛋白空间结构高度保守。根据其序列特征,推测AiCL可能具有水解多种肌蛋白的活性。

海湾扇贝晚苗池塘底播及在褐潮暴发海区筏式养殖效果

为有效避开河北地区褐潮暴发与海湾扇贝养殖时间的重叠,为海湾扇贝产业健康持续发展提供技术支持,对海湾扇贝进行晚苗培育(4月初种贝入室,以下称晚苗)及池塘底播和筏式养殖实验。结果显示,池塘底播海湾扇贝晚苗培育的稚贝(壳长5.0–6.1 mm),经过139 d的养殖,收获时平均壳长达59.7 mm,扇贝柱5.2 g。2012年筏式养殖海湾扇贝晚苗,收获时平均湿质量、鲜贝柱重和出贝柱率分别为28.7 g、3.8 g和13.8%。2013年,晚苗收获时平均壳高、湿质量、鲜贝柱重和出贝柱率分别为50.3 mm、24.4 g、3.1 g和12.7%。按1000 m3育苗水体计算,海湾扇贝晚苗培育可以节省燃煤45.5 t,节约成本6.75万元,养殖晚苗可以降低养殖成本11.6%。研究结果表明,海湾扇贝晚苗养殖技术可以有效规避褐潮暴发的不利影响,而且还可以节约养殖成本和节省能源。

逆转座子序列插入——海湾扇贝过氧化物还原酶V第1内含子分析

根据海湾扇贝(Argopecten irradians)过氧化物还原酶V(AiPrxV)的cDNA序列和部分基因组DNA序列设计引物,采用基因组步移方法扩增获得其第1内含子(I1)完整序列,并通过Blast比对、DNAMAN和RepFind搜索进行序列分析。AiPrxV I1长8 565bp,占AiPrxV基因全长的68%,AT%显著高于GC%。在5 900-6 700bp的区域中包含了不完整的编码区,经分析与文昌鱼、海胆的逆转录酶有极高的相似性,其N端与多种动植物逆转座子的逆转录酶C端具有相似特征。此外,发现AiPrxV I1中包含283个重复序列,在3 500-4 000bp和6 800-7 200bp区域尤为密集。以上特点提示海湾扇贝过氧化物还原酶V第1内含子可能是由一个非长末端重复元件逆转座子(non-LTR retrotransposons)插入,逐渐演变而形成的。

海湾扇贝韩国种群与海湾扇贝南部亚种杂交后代的高温耐受性研究

采用两种不同的升温起始温度(17.5℃和25℃)和两种不同的升温速率研究海湾扇贝韩国种群与海湾扇贝南部亚种杂交后代(以后均简称KM扇贝)的高温耐受性,试验结果表明:采用快升温策略,25℃为升温起始温度测得的高温敏感起始点为30℃,120hUILT_(50)为30.94℃,而17.5℃为升温起始温度测得的高温敏感起始点和120hUILT_(50)分别为26℃和27.66℃。采用慢升温策略,25℃为升温起始温度测得的高温敏感起始点为30℃,120hUILT_(50)为31.16℃,而17.5℃为升温起始温度测得的高温敏感起始点和120h UILT_(50)分别为28℃和29.52℃。采用不同的升温策略和升温起始温度所测得的高温敏感起始点和120hUILT_(50)存在明显差异。试验研究中,采用更为接近试验梯度的升温起始温度和符合KM扇贝养殖环境的升温速率更能反映其高温耐受性。

虾池暂养海湾扇贝稚贝试验报告

１９９２年在莱州湾畔利用虾池暂养出池海湾扇贝稚贝１１．１５亿粒，出商品苗２．４亿粒，保苗率为２１．５％，出苗规格３～５ｍｍ，比到外地购买商品苗提前１５～３０天下海养殖。