儿童哮喘糖皮质激素受体基因bcl-Ⅰ多态性及其对激素疗效的影响

目的探讨儿童哮喘糖皮质激素受体基因bcl-Ⅰ多态性及其对激素疗效的影响。方法选择哮喘患儿285例(哮喘组)、健康儿童223例(对照组),采用Taqman探针法对糖皮质激素受体基因bcl-Ⅰ进行多态性分析;选取哮喘患儿120例进行激素治疗,比较不同基因型患者的治疗有效率。结果儿童哮喘糖皮质激素受体基因bcl-Ⅰ共有3种基因型:CC纯合型、GG纯合型和CG杂合型,其中哮喘组GG纯合型基因型频率、G等位基因频率高于对照组(P均<0.05)。CC型哮喘患者治疗高效率高于GG型、CG型(P均<0.05)。结论儿童哮喘存在糖皮质激素受体基因bcl-ⅠG等位基因突变,此突变会导致激素疗效降低;CC基因型患儿对于激素治疗的敏感性高于GG与CG基因型。

Bcl-Ⅰ基因多态性与哮喘患儿糖皮质激素治疗后复发的关系

目的探讨Bcl-Ⅰ基因多态性对哮喘患儿糖皮质激素治疗后复发的影响。方法选取2018年4月—2020年12月收治的小儿哮喘80例设为观察组,另外选取同期体检健康的儿童80例设为对照组。观察组入院后行糖皮质激素治疗。2组均行Bcl-Ⅰ基因多态性检测。观察组治疗结束后行3个月随访,依据患儿是否复发分为未复发组59例与复发组21例。收集观察组临床资料,对比观察组与对照组Bcl-Ⅰ基因多态性检测结果,复发组与未复发组Bcl-Ⅰ基因多态性的基因型检出率差异。影响复发的因素采用多因素Logistic回归分析。结果观察组Bcl-Ⅰ基因多态性为GG基因型检出率高于对照组,CC基因型检出率低于对照组(P<0.01)。年龄≤6岁、过敏原暴露、合并鼻窦炎、合并过敏性鼻炎、哮喘严重程度为重度、Bcl-Ⅰ基因多态性为GG是哮喘患儿糖皮质激素治疗后复发的危险因素(P<0.05,P<0.01)。结论哮喘患儿Bcl-Ⅰ基因多态性为GG基因型检出率高,且GG基因型为糖皮质激素治疗后复发的危险因素。

善胃Ⅰ号方对胃癌前病变大鼠胃粘膜Bcl-2和Bax蛋白表达的影响

目的:通过观察善胃Ⅰ号方对胃癌前病变模型大鼠胃粘膜Bcl-2和Bax蛋白表达的影响,从细胞凋亡角度探讨该方干预胃癌前病变的作用机制。方法:将80只健康Wistar大鼠随机分为4组,即空白对照组、模型对照组、阳性药物组和善胃Ⅰ号方组,每组20只,造模24周后开始给予药物干预,给药6周后,采用免疫组化法检测大鼠胃粘膜Bcl-2和Bax蛋白的表达水平。结果:善胃Ⅰ号方组Bcl-2蛋白的阳性表达率较模型对照组及阳性药物组均明显降低(P<0.05),而其Bax蛋白的阳性表达率较模型对照组及阳性药物组明显增高(P<0.05)。结论:善胃Ⅰ号方可能通过抑制胃癌前病变模型大鼠胃粘膜Bcl-2蛋白的表达,且促进Bax蛋白的表达,从而促进癌前病变细胞的凋亡,对胃癌前病变的发生、发展进行干预。

bcl-2、mtp53在Ⅰ型神经纤维瘤病中的表达及意义

目的了解bcl-2、突变型p53(mtp53)在Ⅰ型神经纤维瘤病(NF-Ⅰ)中的表达及意义,探讨它们在NF-Ⅰ中的作用。方法对9例孤立性神经纤维瘤、10例NF-Ⅰ及10例正常皮肤进行免疫组化(SP法)染色,观察bcl-2、mtp53在不同组织中的表达。结果bcl-2、mtp53在正常皮肤中均表达阴性。bcl-2在NF-Ⅰ中表达(100%)与孤立性神经纤维瘤(55·6%)之间的差异有统计学意义(P<0·01)。mpt53在NF-Ⅰ(70·0%)和孤立性神经纤维瘤(44·4%)之间的阳性表达差异无统计学意义,两者与正常皮肤之间的差异有统计学意义(P<0·01)。结论bcl-2、mtp53在NF-Ⅰ的发生及发展中起重要作用。推测bcl-2可能与细胞核膜上相应受体结合,并在其它多种细胞因子的作用下抑制瘤细胞的凋亡,造成肿瘤细胞生存延长,细胞数目增多而使瘤体持续的增大和复发。而在NF-Ⅰ中野生型p53(wild-type p53,wtp53)可能已突变成mtp53,从而转化细胞,抑制凋亡,加速肿瘤细胞生长。

胰岛素样生长因子-Ⅰ对重症急性胰腺炎大鼠小肠黏膜上皮细胞bax和bcl-2mRNA表达的影响

目的:研究外源性胰岛素样生长因子-Ⅰ(insulin-like growth factor-Ⅰ,IGF-Ⅰ)对重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)大鼠小肠黏膜上皮细胞凋亡及凋亡相关基因bax、bcl-2mRNA表达的影响,探讨其对肠道屏障保护作用的机制.方法:72只♂Wistar大鼠按照随机数字表法分为假手术组(SO组,n=24)、重症急性胰腺炎组(SAP组,n=24)、IGF-Ⅰ治疗组(IGF-Ⅰ组,n=24).各组动物分别于术后6、12、24h各处死8只,检测血浆淀粉酶,观察小肠组织病理学变化,TUNEL法检测小肠黏膜上皮细胞凋亡,RT-PCR检测小肠上皮细胞中bax和bcl-2mRNA的表达.结果:与SAP组各时相点相比,IGF-Ⅰ治疗组大鼠小肠黏膜上皮细胞凋亡指数显著降低(6h:13.88±1.73vs19.00±2.78;12h:10.13±1.55vs17.63±1.60;24h:9.50±1.07vs17.25±2.76;均P<0.05),小肠组织病理变化明显改善;小肠组织中baxmRNA的表达在IGF-Ⅰ组的各时相点较SAP组明显减弱(6h:1.10±0.02vs1.19±0.04;12h:0.97±0.04vs1.16±0.02;24h:0.87±0.03vs1.14±0.03,均P<0.05);bcl-2mRNA的表达在IGF-Ⅰ组各时相点与SAP组相比明显增强(6h:0.65±0.02vs0.57±0.02;12h:0.69±0.04vs0.57±0.01;24h:0.72±0.02vs0.58±0.01,均P<0.05).结论:外源性IGF-Ⅰ可以减轻SAP时肠黏膜的损伤.

Bcl Ⅰ位点在血友病A携带者检测中的应用

目的探索一种更简便、更特异的方法用于血友病A的基因诊断。方法采用聚合酶链反应-限制性片断多态性方法对8个血友病A家系进行BclI位点检测。结果 BclI位点杂合率为24%(4/17)。可以为其中3个血友病A家系提供诊断信息,信息率为3/8。结论 BclI位点为血友病A基因多态性遗传标志之一,用于血友病A基因诊断有较大价值。

IGF-I和Bcl-2在脑胶质瘤中的表达及相关性研究

目的 探讨胰岛素样生长因子I(IGF I)和抑制凋亡蛋白 (Bcl 2 )在人脑胶质瘤中的表达及相关性 ,以研究IGF I与胶质瘤细胞凋亡的关系。方法 应用免疫组织化学S P法检测 45例胶质瘤组织和 10例正常脑组织中IGF I和Bcl 2的表达情况。结果 IGF I在正常脑组织中不表达 ,胶质瘤中的表达阳性率为 71 1% (3 2 / 45 ) ,随病理分级 (WHO分级 )的增高而增高 ,Ⅰ～Ⅱ级与Ⅲ～Ⅳ级的表达差异有显著性 (P <0 0 5 ) ;随凋亡相关蛋白Bcl 2表达升高而升高 (rs =0 698,P <0 0 1)。结论 IGF I作为神经胶质细胞的有丝分裂因子 ,其表达随脑胶质瘤恶性程度的增高而升高 ;它还通过调节抑制凋亡蛋白Bcl 2的水平而发挥抗凋亡的作用。

含碘中药对甲亢大鼠细胞凋亡基因bcl-2及bax表达的影响

目的:观察不同浓度含碘中药对甲亢大鼠模型甲状腺组织bcl-2、baxmRNA表达的影响。方法:制作大鼠甲状腺机能亢进模型,灌服不同浓度含碘中药复方及其他对照药物进行治疗,然后RT-PCR法检测各组大鼠甲状腺组织bcl-2、baxmRNA水平。结果:含碘较低的中药复方较之含碘高的中药复方在增加bcl-2mRNA表达及减少baxmRNA表达上具有显著性的差异。结论:小剂量含碘中药复方对实验性甲亢大鼠甲状腺细胞具有保护作用。

重组腺病毒Ad-hBNP对慢性心衰大鼠心肌细胞凋亡因子及Ⅰ、Ⅲ型胶原表达的影响

目的观察外源基因人B型利钠肽对慢性心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡因子及Ⅰ、Ⅲ型胶原表达的影响。方法 30只慢性心力衰竭模型大鼠,随机分为携带人B型利钠肽基因重组腺病毒组(Ad-hBNP组,14只)、重组空白腺病毒组(Ad-Track组,8只)、生理盐水组(NS组,8只),分别给予腹腔注射人B型利钠肽基因重组腺病毒、重组空白腺病毒及生理盐水1mL,每周1次,共4周。另设10只未造模但实行了假手术的大鼠为假手术组;4周后处死大鼠,行RT-PCR检测心肌组织Bcl-2、Bax、Caspase-3及Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA含量。结果 Ad-hBNP治疗后,Ad-hBNP组大鼠心肌组织Bcl-2mRNA表达较Ad-Track组及NS组升高;BaxmRNA表达较假手术组升高;Caspase-3mRNA表达较Ad-Track组、NS组及假手术组均升高。Ad-hBNP组Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA表达较Ad-Track组降低。结论间断给予Ad-hBNP能够影响慢性心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡相关基因的表达,减少心肌细胞间质Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达。

应用PCR技术对凝血因子Ⅷ基因内HindⅢ和BelⅠ多态性的研究

在甲型血友病携带者诊断和产前诊断中．目前多采用PCR／RFLPs分析，酶解彻底性问题是酶谱分析的关键。在本研究中，我们应用PCR技术选择扩增凝血因子Ⅷ（FⅧ）基因内含HindⅢ和BclⅠ多态性酶切位点的特异片段，酶解后分析它们的多态信息量（PIC）。结果HindⅢ的PIC为0．385，BclⅠ为0．365，而且两者存在高度连锁不平衡关系。其中HindⅢ扩增片段中含两个酶切位点，一个是固定的，可作为内参照，另一个是多态性，因有自身对照，酶解就不存在不彻底问题，结果准确可靠。在30名受检女性中，HindⅢ杂合率为43．3％，Bcll为40％；15个家系中有4个既可用Bcll又可以用HindⅢ多态位点进行分析，对其中8名可疑携带者进行基因分析诊断出基因携带者3个。我们的研究表明，HindⅢ多态性酶切位点是PCR／RFLPs方法中值得首先考虑的一个酶切位点。

Bcl-2和IGF-ⅠmRNA在正常和增生前列腺组织中表达及意义

为探讨bcl 2和IGF ⅠmRNA在良性前列腺增生发病过程中所起的作用。本文采用斑点杂交技术研究正常和增生前列腺组织中bcl 2和IGF ⅠmRNA表达情况并加以比较。结果表明 :IGF ⅠmRNA在增生前列腺组织中表达明显高于在正常前列腺组织中的表达 ,增生组织中平均表达值是正常组织的 2 .5 1倍 (P <0 .0 1) ;bcl 2mRNA在增生前列腺组织中表达也明显高于在正常前列腺组织中的表达 ,增生组织中的平均表达值是正常组织的 1.71倍 (P <0 .0 1)。表明增生前列腺上皮细胞促增殖和抗凋亡作用强于正常组织 ,提示bcl 2和IGF Ⅰ参与前列腺细胞增殖与凋亡过程 ,增生前列腺中bcl 2和IGF

姜黄素对体外培养的增生性瘢痕成纤维细胞的生物学作用

目的:观察姜黄素体外抗增生性瘢痕的作用.方法:以增生性瘢痕成纤维细胞为靶细胞,分别用不同浓度的姜黄素培养液培养,MTT法测定细胞的增殖情况,透射电镜进行形态学检测,流式细胞仪技术结合PI及Annexin V双标记染色检测姜黄素的促凋亡作用,实时荧光定量聚合酶链反应检测Ⅰ,Ⅲ型前胶原及Bcl-2 mRNA的表达情况.结果:姜黄素对增生性瘢痕成纤维细胞的增殖有抑制作用;透射电镜观察发现,处理组凋亡细胞增多,凋亡细胞表现出典型的超微结构特征;流式细胞仪检测发现,随着药物浓度的增加,增生性瘢痕成纤维细胞的凋亡率也在逐渐升高;实时荧光定量聚合酶链反应检测结果显示,姜黄素处理后Ⅰ、Ⅲ型前胶原及Bcl-2 mRNA的表达水平均下调.结论:姜黄素具有一定的体外抗增生性瘢痕的作用.

宝藿苷-I联合5-FU对食管癌Eca-109细胞增殖及凋亡的影响

目的：研究宝霍苷-I与5-FU联合应用对食管癌Eca-109细胞增殖和凋亡的影响。方法：实验设联合用药组（12.5mg/L宝霍苷-I＋12.5mg/L5-FU）、阴性对照组（0.1%DMSO）、25mg/L宝藿苷-I组和12.5mg/L5-FU组,共4组,每组均设3个复孔,每孔100μl（含Eca-109细胞数为1×10~4个）。作用24、48、72h时,采用四甲基偶氮唑盐（MTT）法分别检测各组Eca-109细胞的增殖;并在作用48h后,用流式细胞术检测Eca-109细胞凋亡率;用Western blot技术检测Bcl-2、Bax蛋白的表达。结果：宝霍苷-I、5-FU单用及其联合应用在24、48和72h时均可明显抑制Eca-109细胞的增殖,与阴性对照组比较,差异均有统计学意义（P均〈0.05）,联合应用的抑制作用显著优于单独应用（P〈0.05）。宝霍苷-I、5-FU单独及其联合作用48h后,均可诱导Eca-109细胞凋亡,均可下调Bcl-2蛋白的表达,上调Bax蛋白的表达,与对照组相比差异均有统计学意义（P均〈0.05）,且联合用药组较单独用药组作用明显（P〈0.05）。结论：宝霍苷-I与5-FU联合应用对Eca-109细胞的增殖抑制和凋亡诱导有协同作用,可能与下调Bcl-2蛋白的表达、上调Bax蛋白的表达有关。

黄芪甲苷与人参皂苷Rg1配伍对PC12细胞氧糖剥夺复糖复氧后细胞自噬和PI3K信号通路的影响

目的:探讨黄芪甲苷和人参皂苷Rg1配伍对PC12细胞氧糖剥夺后再复糖复氧(oxygen glucose deprivation/reoxygenation,OGD/R)诱导的细胞自噬的影响及作用机制。方法:以PC12细胞建立OGD/R自噬性损伤模型,观察黄芪甲苷与人参皂苷Rg1配伍对细胞自噬的影响,并通过PI3KⅠ/Akt/m TOR和PI3KⅢ/beclin-1/Bcl-2信号通路研究黄芪甲苷与人参皂苷Rg1配伍的作用机制。结果:氧糖剥夺2 h复糖复氧24 h后,PC12细胞内LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白比值增加。黄芪甲苷、人参皂苷Rg1及黄芪甲苷与人参皂苷Rg1配伍均能下调OGD/R后PC12细胞LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白比值,且配伍组的效应强于药物单用组。机制研究表明,人参皂苷Rg1单用及黄芪甲苷和人参皂苷Rg1配伍能升高PI3KⅠ、Akt、m TOR蛋白磷酸化水平,配伍的效应强于药物单用;黄芪甲苷单用及黄芪甲苷和人参皂苷Rg1配伍均能抑制PI3KⅢ、beclin-1蛋白表达,而配伍还能上调Bcl-2蛋白表达,且配伍的效应强于药物单用组。结论:PC12细胞在缺糖缺氧2 h再复糖复氧24 h后,细胞出现自噬;黄芪甲苷和人参皂苷Rg1均能减轻OGD/R诱导的PC12细胞自噬,且2者配伍对细胞自噬具有协同抑制作用,其机制可能与调节PI3KⅠ/Akt/m TOR和PI3KⅢ/beclin-1/Bcl-2信号通路有关。

胰岛素样生长因子-Ⅰ对重症急性胰腺炎大鼠小肠黏膜上皮细胞凋亡的影响

目的研究外源性胰岛素样生长因子-Ⅰ（IGF—Ⅰ）对重症急性胰腺炎（SAP）大鼠肠黏膜上皮细胞凋亡及凋亡相关基因bax，bcl-2，easpase-3mRNA表达的影响。方法72只雄性Wistar大鼠按照随机数字表法分为假手术组（SO组）、重症急性胰腺炎组（SAP组）、IGF—Ⅰ治疗组（IGF-Ⅰ组）共三组。通过胰胆管逆行注射5％牛磺胆酸钠制作大鼠SAP模型，SO组用同样方法经胰胆管逆行注射生理盐水；IGF-Ⅰ组分别于术后30min和术后3h经后肢内侧皮下注射IGF-Ⅰ。各组动物分别于术后6，12，24h处死8只，检测血浆淀粉酶，TUNEL法检测小肠黏膜上皮细胞凋亡，观察小肠组织病理学变化并进行病理评分，逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法检测小肠黏膜上皮细胞中bax，bcl-2和caspase-3mRNA的表达。数据采用SPSS11．0统计软件分析，多组间比较采用单因素方差分析。结果IGF-Ⅰ治疗组与SAP组各时相点相比，血浆淀粉酶和小肠病理评分均低于各相应时相点，于12h和24h差异有统计学意义，均P〈0．05；小肠黏膜上皮细胞凋亡指数IGF～Ⅰ组与SAP组各相应时相点相比均显著降低[6h：（13．88±1．73）vs．（19．00±2．78）；12h：（10．13±1．55）vs．（17．63±1．60）；24h：（9．50±1．07）vs．（17．25±2．76）]，P〈0．05；电镜示小肠组织病理变化较SAP组明显改善。bax mRNA表达在SAP组各时点较SO组相应时相点明显增高[6h：（1．35±0．18）vs．（0．85±0．12）；12h：（1．21±0．21）vs．（0．86±0．24）；24h：（1．14±0．24）vs．（0．95±0．22）]，6h即达高峰，而在IGF-Ⅰ组的表达与SAP组相应时相点比较则明显减弱，在12h和24h差异具有统计学意义（P〈0．05），于24h即接近SO组；easpase．3mRNA表达在SAP组各时相点较SO组相应时相点明显增高[6h：（0．78±0．01）vs．（0．55±0．04）；12h：（0．79±0．04）vs．（0．57±0．05）；24h：（0．81±0．06）vs．（0．55±0．01）（P〈0．01）]，而在IGF-Ⅰ组的表达与SAP组相应时相点比较则明显减弱，在12h和24h差异具有统计学意义（P〈0．05）；bcl-2mRNA的表达在SO组和SAP组均较弱且差异无统计学意义，P〉0．05，而在IGF—Ⅰ组各时相点的表达则明显增强[6h：（0．65±0．07）vs．（0．54±0．04）vs．（0．57±0．06）；12h：（0．69±0．04）vs．（0．56±0．05）VS．（0．53±0．05）；24h：（0．72±0．05）vs．（0．54±0．07）vs．（0．58±0．08），P〈0．05]。结论外源性IGF-Ⅰ通过拮抗SAP大鼠小肠黏膜上皮细胞的凋亡从而可以减轻SAP大鼠肠黏膜损害，其机制可能与其上调bcl-2mRNA表达及下调bax，easpase-3 mRNA表达有关。

益气清热方对I型幽门螺杆菌感染裸鼠胃黏膜p53、bcl-2表达的影响

目的观察益气清热方对Ⅰ型幽门螺杆菌(Hp)感染的干预作用及机制。方法将100只雄性裸鼠随机分为正常组、模型组、黄芪组、黄芩组、益气清热方组,每组20只。正常组及模型组予生理盐水,其余分别给予黄芪、黄芩及益气清热方药液,每日0.2ml/10g。第14天,除正常组外,其余各组予浓度108cfu/ml的Hp菌液灌胃,每天1.3ml,两周后处死,观察胃黏膜p53、bcl-2的表达情况。结果与正常组比较,模型组胃黏膜p53、bcl-2表达明显增加(P<0.01);与模型组比较,3个药物组均能显著降低p53、bcl-2表达(P<0.05或P<0.01),而3个药物组间比较,益气清热方组明显为优(P<0.05或P<0.01)。结论益气清热方对I型Hp感染裸鼠胃黏膜p53、bcl-2表达有一定的抑制作用,可能是通过对凋亡基因的调控,降低过高的细胞凋亡率,减轻Hp对胃上皮细胞的损害。

白术内酯Ⅰ对人胃癌细胞SGC-7901裸鼠移植瘤生长及凋亡的影响

目的:研究白术内酯Ⅰ(atractylenolideⅠ)对人胃癌细胞SGC-7901裸鼠移植瘤生长及凋亡相关蛋白Bax、cleaved caspase-3、p53、Bcl-2表达的影响。方法:建立SGC-7901裸鼠移植瘤模型,观察白术内酯Ⅰ对肿瘤生长的影响;TUNEL法检测移植瘤组织中的细胞凋亡;Western blotting检测瘤组织中Bax、Bcl-2、cleaved caspase-3及p53蛋白表达。结果:白术内酯Ⅰ不同程度抑制裸鼠SGC-7901移植瘤的生长,与对照组比较,给药后肿瘤体积(TV,tumor volume)、相对肿瘤体积(RTV,relative tumor volume)和相对肿瘤增殖率[T/C(%),TRTV/CRTV]明显下降;移植瘤组织中凋亡细胞明显增多;白术内酯Ⅰ上调移植瘤组织中Bax、cleaved caspase-3及p53的蛋白表达,下调Bcl-2的蛋白表达。结论:白术内酯Ⅰ能明显抑制人胃癌细胞SGC-7901裸鼠移植瘤的生长,分子机制主要包括增加Bax、cleaved caspase-3、p53蛋白表达,减少Bcl-2蛋白表达,最终导致肿瘤细胞凋亡。