金樱子通过增加Bcl-2/Bax表达比抑制大鼠糖尿病性白内障晶状体上皮细胞的凋亡

目的探讨金樱子对糖尿病性白内障大鼠晶状体上皮细胞(lens epithelial cells,LEC)凋亡的影响及机制。方法将60只SD大鼠随机分为对照组、模型组和治疗组,每组各20只。对照组常规饲料喂养,采用链脲佐菌素(60 mg·kg-1)诱发建立糖尿病性白内障模型,治疗组在糖尿病性白内障建立的同时按400 mg·kg-1体质量给予金樱子灌胃。STZ注射后4周、8周、12周时观察晶状体混浊度的变化情况,同时采用TUNEL检测LEC凋亡,免疫组织化学染色检测LEC Bcl-2、Bax蛋白的表达,RT-PCR检测Bcl-2、Bax基因的表达。结果 STZ注射后12周时,模型组、治疗组和对照组大鼠体质量分别为(151.90±2.38)g、(412.99±2.17)g和(464.01±2.47)g,模型组明显低于治疗组和对照组,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。STZ注射后4周时,治疗组、对照组、模型组血糖分别为(9.11±2.32)mmol·L-1、(3.83±0.79)mmol·L-1、(20.31±3.23)mmol·L-1,对照组与模型组、治疗组与模型组间差异均有统计学意义(均为P<0.05);12周时,治疗组和对照组血糖分别为(5.62±1.25)mmol·L-1、(4.12±1.09)mmol·L-1,较模型组(25.02±2.27)mmol·L-1明显下降,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。在STZ注射后4周、8周、12周时,治疗组大鼠晶状体混浊程度均高于对照组,但明显低于模型组,组间两两比较,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。STZ注射后4周、8周、12周时,模型组LEC凋亡率分别为(8.35±1.20)%、(13.05±1.39)%、(23.69±1.88)%,而治疗组分别为(4.78±1.41)%、(6.08±0.95)%、(10.06±1.66)%,对照组分别为(1.18±0.16)%、(2.15±0.25)%、(3.53±0.65)%,组间两两比较,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。与对照组比较,模型组LEC的Bcl-2蛋白和基因表达降低,Bax蛋白和基因表达上调,Bcl-2/Bax mRNA比值下降,两组间差异均有统计学意义(均为P<0.05)。与模型组比较,治疗组LEC的Bcl-2蛋白和基因表达增加,Bax蛋白和基因表达下调,Bcl-2/Bax mRNA比值明显增加,两组间比较差异均有统计学意义(均为P<0.05)。与对照组比较,治疗组Bcl-2蛋白表达降低,Bax蛋白表达升高(P<0.05);而Bcl-2基因、Bax基因、Bcl-2/Bax mRNA比值差异均无统计学意义(均为P>0.05)。结论金樱子通过增加Bcl-2/Bax表达比抑制大鼠糖尿病性白内障LEC的凋亡,延缓糖尿病性白内障的发生和发展。

THE OVEREXPRESSION OF APOPTOSIS-RELATED GENES OF P_53 AND BCL-2 IN CERVICAL CARCINOMA

Objective To investigate the significance of overexpression of p5s and bcl-2 protein in carcinogene- sis of cervix. Methods 10 cases of cervical intraepithelial neoplasis(CIN) and 57 cases of invasive cancer were in- vestigated with immunohistochemistry technique. Results The overexpresion or P53 protein ir CIN and cervical can- cer was significantly higher than that or control, respectively (P<0.01). But there was no significant difference be- tween CIN and cervical cancer(P>0.05). The immunoreactivity of bcl-2 in CIN was much more higher than that of control (P<0.05). The positive rate and immunoreactivity of bcl-2 in cervical carcinoma were both remarkably high- er than those of control (P<0.0l),but there was no significant difference between CIN and cervical carcinoma (P> 0.05). It was also found that there was a remarkably positive correlation between the overexpression of bcl-2 and P53 (P<0.01). Conclusion Because of the loss of wtP53 function,the expression of bcl-2 can not be down-reguated, which is associated with the pathogenesis and development of cervical carcinoma.

高压氧治疗新生儿期后缺氧缺血性脑病血清B淋巴细胞瘤-2蛋白的影响

目的探究高压氧治疗对新生儿期后缺氧缺血性脑病血清B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)蛋白的影响。方法随机选取2014年1月至2015年6月胜利油田中心医院儿科一病区收治的87例期后缺血缺氧性脑病患儿作为本次研究试验对象,根据入院时间先后将患儿分成观察组49例和对照组38例,对照组患儿采用常规治疗方案,观察组患儿在此基础上联合高压氧治疗,观察2组患儿治疗后临床疗效,记录并比较2组患儿治疗前、治疗7d、治疗10d后血清内Bcl-2和神经元特异性烯醇化酶(NSE)水平变化情况。结果2组患儿治疗前血清内Bcl-2水平相当,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后观察组患儿Bcl-2水平下降快,且明显低于对照组患儿,差异有统计学意义(P<0.05),组内差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前后2组患儿血清内NSE水平无明显变化,组间差异无统计学意义(P>0.05),组内差异也无统计学意义(P>0.05)。观察组显效患儿22例,总有效率为76%,对照组总有效率约为55%,2组差异有统计学意义(P<0.05)。结论高压氧治疗期后缺血缺氧性脑病患儿临床疗效显著,治疗后患儿血清内Bcl-2水平明显降低,改善脑循环,抑制神经细胞凋亡,促进脑细胞恢复,预后良好,但是治疗前后患儿血清内NSE没有明显变化。

萝卜硫素对心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌保护作用及色氨酸-犬尿氨酸通路的影响

目的探究萝卜硫素(SFN)对心肌缺血再灌注(I/R)损伤大鼠色氨酸(TRP)-犬尿氨酸(KYN)信号通路及心肌损伤的影响。方法研究于2019年7月至2020年6月进行,将SD雄性大鼠随机分为假手术组(Control)、模型组(I/R)、SFN低(I/R+L SFN)、高(I/R+H SFN)剂量组。术后24 h,ELISA检测各组大鼠血清中炎性因子白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量;HE染色观察各组大鼠心肌组织病理变化;TUNEL检测各组大鼠缺血心肌细胞凋亡情况;HPLC检测各组大鼠心肌组织中TRP、KYN浓度;蛋白质印迹法(Western blotting)检测各组大鼠心肌组织B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白(Bax)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、活化胱天蛋白酶3(cleaved-capase3)、吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)蛋白表达情况。结果与Control组相比,I/R大鼠心肌细胞破碎、坏死,细胞排列不规则,心肌纤维断裂,伴有炎性细胞浸润,血清中炎性因子IL-1β、IL-6、TNF-α含量、心肌细胞凋亡指数[(32.85±3.13)比(1.07±0.08)]、心肌组织TRP[(783.75±30.32)pmol/L比(402.23±23.55)pmol/L]、KYN浓度[(567.54±28.18)pmol/L比(215.31±20.03)pmol/L]、KYN/TRP比值、cleaved-capase3、Bax、IDO蛋白水平显著升高(P<0.05),Bcl-2蛋白水平显著降低(P<0.05);与I/R相比,I/R+L SFN、I/R+H SFN剂量组心肌细胞上述病理症状明显减轻,大鼠血清中炎性因子IL-1β、IL-6、TNF-α含量、心肌细胞凋亡指数、心肌组织TRP、KYN浓度、KYN/TRP比值、Bax、cleaved-capase3、IDO蛋白水平依次降低(P<0.05),Bcl-2蛋白水平显著升高(P<0.05)。结论SFN可减少心肌细胞凋亡,缓解机体炎症反应,对心肌损伤有保护作用可能与TRP-KYN信号通路有关。

益气化瘀方对缺血-再灌注大鼠心肌细胞凋亡相关蛋白表达的影响

目的观察益气化瘀方对缺血-再灌注(I/R)大鼠心肌细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3、Fas及P53表达的影响。方法采用结扎左冠状动脉前降支,心肌缺血30 min,再灌注2、4 h制作缺血-再灌注模型。将大鼠随机分为7组,即假手术组、模型2 h组(缺血-再灌注2 h)、模型4 h组(缺血-再灌注4 h组)、通心络2 h组(缺血-再灌注2 h)、通心络4 h组(缺血-再灌注4 h)、益气化瘀方2 h组(缺血-再灌注2 h)、益气化瘀方4 h组(缺血-再灌注4 h)。造模前连续灌胃相应药物1周。免疫组化法测定Bcl-2、Bax、Caspase-3、Fas、P53蛋白表达。结果益气化瘀方可提高缺血-再灌注大鼠心肌Bcl-2蛋白表达量(P<0.05)、降低缺血-再灌注大鼠心肌Bax、Caspase-3、Fas、P53蛋白表达量(P<0.05)。结论益气化瘀方可减轻大鼠心肌缺血-再灌注细胞凋亡,其机理可能与上调Bcl-2蛋白表达和下调Bax、Caspase-3、fas、P53蛋白表达有关。

大蒜素联合5⁃氟尿嘧啶对黏液表皮样癌MEC⁃1细胞增殖与凋亡的作用及机制

目的探讨大蒜素联合5⁃氟尿嘧啶(5⁃fluorouracil,5⁃FU)对黏液表皮样癌MEC⁃1细胞增殖抑制和凋亡的作用及机制,为临床药物应用提供相应基础。方法取对数生长期的MEC⁃1细胞,随机分成对照组和实验组,对照组为含有0.1%DMSO的PBS组,实验组为大蒜素组、5⁃FU组、联合用药组(大蒜素联合5⁃FU组)。用CCK8法检测不同浓度(0、25、50、75 mg/L)大蒜素、5⁃FU及大蒜素联合5⁃FU作用于MEC⁃1细胞24 h后细胞增殖抑制率并计算作用24 h后大蒜素及5⁃FU IC50值。用流式细胞仪检测不同浓度(0、25、50、75 mg/L)大蒜素、5⁃FU及大蒜素联合5⁃FU作用于MEC⁃1细胞24 h后细胞凋亡率。使用Western blot检测IC50浓度的大蒜素、5⁃FU单独及联合作用于MEC⁃1细胞24 h后Bax、Bcl⁃2蛋白表达量。结果联合用药组对MEC⁃1的增殖抑制率及凋亡率均强于大蒜素组和5⁃FU单独用药组(P<0.01)。大蒜素与5⁃FU单独及联合使用均可以下调Bcl⁃2蛋白和上调Bax蛋白表达量,且联合用药组Bax/Bcl⁃2比值最大(P<0.05)。结论大蒜素和5⁃FU单独及联合使用均对MEC⁃1细胞具有增殖抑制作用和诱导凋亡作用,且大蒜素增强了5⁃FU对MEC⁃1细胞的凋亡作用,其诱导MEC⁃1凋亡机制可能与Bax/Bcl⁃2信号通路相关。