Bcl-2相关转录因子-1在肝细胞癌组织中的表达及其临床意义

目的:探讨Bcl-2相关转录因子-1(BCLAF1)在肝细胞癌(HCC)组织中的表达及临床意义。方法:免疫组织化学染色法检测104例HCC癌组织及配对的癌旁组织中BCLAF1的表达水平。根据染色结果,将患者分为高表达组和低表达组。生存分析用Kaplan-Meier法,多因素分析用COX比例风险回归模型。结果:癌组织中BCLAF1高表达率为65.38%(68/104),明显高于癌旁组织的14.42%(15/104),差异有统计学意义(P<0.05)。高表达组AFP>400 ng/mL、TNM分期为Ⅲ-Ⅳ、组织学分级为G_(3)-G_(4)的占比均高于低表达组(P均<0.05)。多因素分析结果显示,肿瘤直径>5 cm、血管侵犯、TNM分期为Ⅲ-Ⅳ、组织学分级为G_(3)-G_(4)和BCLAF1高表达是HCC患者OS和PFS较短的影响因素(P均<0.05)。高表达组5年总体生存率和无进展生存率分别为41.17%和36.76%,明显低于低表达组的80.56%和58.33%,差异有统计学意义(P均<0.05)。结论:BCLAF1与HCC的发生和发展有关,对评价患者的生存预后有一定价值。

丁苯酞对溴化乙锭诱导的脱髓鞘大鼠胼胝体Bcl-2和Bax表达的影响

目的观察丁苯酞(Dl-3-n-butylphthalide,NBP)对溴化乙锭(ehidium bromide,EB)诱导的脱髓鞘大鼠脑胼胝体凋亡因子B淋巴细胞瘤2基因(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达水平的影响,并探讨NBP对脱髓鞘大鼠脑白质保护作用的可能机制。方法将18只SD大鼠随机分为模型组、治疗组、对照组,每组各6只,给予模型组及治疗组大鼠侧脑室注射EB制备脱髓鞘模型,对照组以相同方法注射等体积生理盐水。造模后,治疗组每天经腹腔注射NBP注射液,模型组及对照组腹腔注射等体积生理盐水,10 d后取脑组织制作石蜡切片,行HE染色、LFB髓鞘染色观察大鼠侧脑室周围胼胝体脱髓鞘情况,免疫组化法检测侧脑室周围胼胝体Bcl-2、Bax表达的情况。结果模型组HE染色示胼胝体结构不清、完整性破坏、大量空泡形成,LFB染色示大片区域髓鞘未被蓝染(提示脱髓鞘),与模型组相比,治疗组胼胝体空泡形成较少,髓鞘脱失率明显降低(17.36%vs. 42.05%,P<0.05);免疫组化结果显示,治疗组胼胝体Bcl-2阳性表达率较模型组明显增高(69.47%vs. 29.95%,P<0.05),Bax阳性细胞表达率明显降低(33.52%vs. 68.61%,P<0.05)。结论 NBP可对脱髓鞘大鼠脑白质产生保护作用,减少髓鞘的脱失,其机制可能与上调脑Bcl-2、下调Bax的表达有关。

Bcl-2、Bag-1、Bax在乳腺浸润性导管癌中的表达

目的探讨Bcl-2、Bag-1、Bax表达对乳腺浸润性导管癌影响。方法采用SP免疫组化染色法检测收集128例患者癌组织和癌旁组织中的Bcl-2、Bag-1、Bax表达情况。结果经过检测,癌组织中Bcl-2、Bag-1、Bax表达的阳性率分别为73.4%、89.8%、80.5%,明显高于癌旁组织中Bcl-2、Bag-1、Bax的表达率57%、59.4%、65.6%。经过统计学检验后差异具有统计学意义(P<0.05);经过卡方检验Bcl-2、Bag-1、Bax阳性表达与各个病理参数的相关性检验,得出Bcl-2、Bag-1与肿瘤的直径有关(P<0.05)。相关性分析得出,Bcl-2、Bag-1呈现正相关性(r=0.63,P<0.05)。结论 Bcl-2、Bag-1在乳腺浸润性导管癌中高表达,起着重要的作用。

乳腺浸润性导管癌组织中Bag-1、Bcl-2、Bax的表达变化及意义

目的观察乳腺癌浸润性导管癌(IDC)组织中Bag-1、Bcl-2、Bax的表达变化,并探讨其意义。方法采用免疫组化SP法检测85例IDC及其癌旁组织中的Bag-1、Bcl-2、Bax。结果 DC组织中Bag-1、Bcl-2、Bax阳性表达率分别为92.9%(79/85)、78.8%(67/85)、74.1%(63/85),癌旁组织中分别为58.8%(50/85)、58.8%(50/85)、67.1%(57/85)。IDC组织中Bag-1、Bcl-2阳性表达率与癌旁组织比较,P均<0.05。Bag-1表达与IDC肿瘤直径有关(P<0.05)。IDC组织中,Bag-1、Bcl-2表达呈正相关(r=0.512,P<0.05)。结论 IDC组织中Bag-1、Bcl-2高表达,二者在乳腺癌的发生发展中发挥作用。

正畸微型种植体对安氏Ⅱ类错颌畸形患者MMP-2 MMP-9及Bcl-2/Bax水平的影响

目的:分析正畸微型种植体对安氏Ⅱ类错颌畸形患者基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)及B淋巴细胞瘤-2蛋白(Bcl-2)与Bcl-2相关X蛋白(Bax)比值Bcl-2/Bax水平的影响。方法:选取2018年1月至2019年12月110例医院收治安氏Ⅱ类错颌畸形患者,随机数字表法简单随机分为观察组与对照组。对照组采取传统正畸治疗方案,观察组则采取微型种植体治疗。观察两组患者治疗前后MMP-2、MMP-9及Bcl-2/Bax水平的变化,并统计两组患者治疗期间并发症发生率差异。结果:重复测量方差分析显示,MMP-2、MMP-9不同组间、不同时点间的差异及分组与时点的交互作用均有统计学意义(均P<0.05),且对照组治疗前后MMP-2、MMP-9值升高较观察组显著(P<0.05);重复测量方差分析显示,Bcl-2/Bax值不同组间、不同时点间的差异及分组与时点的交互作用均有统计学意义(均P<0.05),且对照组治疗前后Bcl-2/Bax值降低较观察组显著(P<0.05);观察组治疗期间并发症发生率为5.45%和18.18%,两组间的比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:微型种植体在安氏Ⅱ类错颌畸形患者正畸治疗中所引起的炎症因子水平要低于传统正畸治疗方案,有助于减小正畸治疗对牙周组织造成的损伤,且并发症更少,值得推广使用。

The Expression of Apoptosis-Related Genes Bcl-2 and Bax Protein and Apoptosis Positivity in Cervical Carcinoma during Irradiation

To evaluate the apoptosis positivity, the expression of Bcl-2, bax proteinsin 30 patients with squamous cell cervix carcinoma before and after radiotherapy. Methods: By usingimmuno-histochemical and TDT-dUTP nick end labelling techniques, 30 cases of squamous cell cervicalcarcinoma were analyzed. Results: The apoptosis positivity before and after irradiation was 76.7%and 100% respectively, with the difference being significant (P 【 0.05); The positive rates of Bcl-2protein before and after irradiation were 73.3% and 46.7% respectively, with the difference beingsignificant (P 【 0.05); The positive rates of bax protein before and after irradiation were 86% and100% respectively, with the difference being significant (P 【 0.05). Conclusion: bax and Bcl-2protein play an important role in apoptosis induced by fractionated radiation therapy. Apoptosisinduced by irradiation is contributed to upregulation of bax protein or downregulation of Bcl-2protein.

新疆90例贲门癌中IGF-IR、bcl-2、PCNA的表达及其意义

目的:探讨胰岛素样生长因子-Ⅰ受体(IGF-IR)、细胞凋亡相关基因-2(bcl-2)及增殖细胞核抗原(PCNA) 的异常表达在新疆3个不同民族贲门癌发生发展中的作用及其病理生物学意义,为此病的防治提供实验资料。方法:应用免疫组化LSAB法检测90例贲门腺癌和21例非癌组织的IGF-IR、bcl-2、PCNA蛋白的阳性表达情况。结呆:(1)IGF-IR、bcl-2蛋白、PCNA在90例贲门腺癌中的检出率分别为84．44％(69/90)、87．78％(79/90)、97．78％ (88/90),在贲门非癌良性组织中的阳性检出率分别为47．62％(10/21)、52．38％(11/21)、0％(0/21)。IGF-IR、bcl- 2、PCNA的阳性率在癌和非癌组织间均具有统计学的差异(P<0．01)。(2)哈萨克族(哈族)、维吾尔族(维族)、汉族各民族之间IGF-IR、bcl-2、PCNA阳性率的差异均无统计学意义(P>0．05)。(3)IGF-IR、bcl-2、PCNA在贲门腺癌不同分化程度中阳性率的差异均无统计学意义(P>0．05)。(4)贲门腺癌中bcl-2,与IGF-IR间、bcl-2与PC- NA间无相关关系(P>0．05)。结论:(1)IGF-IR蛋白、癌基因bcl-2和PCNA的异常表达在贲门癌变过程中具有重要作用。(2)贲门癌组织中IGF-IR、bcl-2、PCNA表达在肿瘤不同分化程度和不同民族间无显著差别。

苯乙酸联合化疗药物对Hep-2细胞凋亡及Bax表达的影响

目的初步探讨苯乙酸联合化疗药物促喉癌细胞凋亡的可能机制。方法体外培养Hep-2细胞,将苯乙酸(phenylacetate,PA)、5-氟尿嘧啶(5-Fu)、顺铂(CDDP)及PA分别联合5-Fu、CDDP,5组药物作用于Hep-2细胞24小时,以无用药Hep-2细胞做为对照组,进行吖啶橙染色,分别检测喉癌细胞凋亡百分率,同时通过Bax免疫组织化学染色,观察Hep-2细胞中Bax的表达。结果①单一用药组及联合用药组与对照组相比,细胞凋亡百分率明显高于对照组(P<0.05),联合用药组与单一用药组相比,细胞凋亡百分率高于单一用药组(P<0.05);②单一用药组及联合用药组与对照组相比,Bax蛋白表达水平明显高于对照组(P<0.05),联合用药组与单一用药组相比,Bax蛋白表达水平明显高于单一用药组(P<0.05)。结论①PA联合5-Fu、CDDP对喉癌细胞的作用与单一化疗药物组比,具有明显促进细胞凋亡的作用;②PA联合CDDP、5-Fu抗喉癌细胞的机制与凋亡有关;③PA联合5-Fu、CDDP促进Hep-2细胞凋亡的机制可能与促进促凋亡基因Bax蛋白的表达有关。

Bax在14-3-3γ对抗脂多糖诱导的心肌细胞损伤中的作用

目的:探讨14-3-3γ对脂多糖(LPS)所致心肌损伤的作用与抑制Bax向线粒体移位的关系。方法:采用原代SD乳鼠心肌细胞,随机分为4组:对照组;LPS组,LPS10mg/L加至培养基中6h;pFLAG+LPS组,空载质粒pFLAG转染至心肌细胞,24h后处理同LPS组;pFLAG-14-3-3γ+LPS组,重组质粒pFLAG-14-3-3γ转染至心肌细胞,24h后处理同LPS组。四唑盐(MTT)比色法检测各组细胞存活率,全自动生化分析仪检测乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸磷酸酶(CPK)值,流式细胞仪检测细胞凋亡率,Western blotting检测细胞14-3-3γ蛋白水平、细胞浆及线粒体的Bax蛋白水平。结果:LPS致心肌细胞损伤,与对照组相比,LPS处理使细胞存活率明显下降(P<0.01),LDH、CPK值明显升高(P<0.01),细胞凋亡率增加(P<0.01),促使Bax蛋白从胞浆向线粒体移位,转染重组质粒pFLAG-14-3-3γ使14-3-3γ在心肌细胞内高表达后可明显逆转LPS所致的损伤,上述各指标均有所改善,并抑制Bax蛋白向线粒体的移位。结论:14-3-3γ对抗LPS所致心肌细胞损伤与抑制Bax从胞浆向线粒体移位有关。

凋膜止崩液对体外培养人子宫内膜腺上皮细胞Bcl-2/Bax蛋白及基因表达的影响

目的 观察凋膜止崩液对体外培养人子宫内膜增生症患者内膜腺上皮细胞Bcl-2/Bax蛋白及mRNA表达的影响。方法 收集病理诊断为子宫内膜增生症患者的子宫内膜组织，经分离、培养、鉴定后，按照随机数字表法将腺上皮细胞分为分为空白对照组，凋膜止崩液低、中、高剂量组。空白对照组加入含10%FBS培养液，凋膜止崩液低、中、高剂量组在含10%FBS的细胞培养液中分别加入12.5、25、50 μg/ml的凋膜止崩液。干预后48 h，采用蛋白免疫印迹法及RT-PCR法检测腺上皮细胞Bcl-2、Bax蛋白及mRNA表达。结果 与空白对照组比较，凋膜止崩液低、中、高剂量组Bcl-2 mRNA[（1.51±0.07）、（1.09±0.06）、（0.93±0.07）比（1.92±0.08）]及蛋白[（0.91±0.02）、（0.72±0.03）、（0.62±0.03）比（1.28±0.02）]表达降低（P＜0.05），Bax mRNA[（5.73±0.37）、（8.00±0.23）、（10.72±0.40）比（3.27±0.34）]及蛋白[（0.45±0.02）、（0.63±0.02）、（0.78±0.03）比（0.32±0.02）]表达升高（P＜0.05）。与低剂量组比较，中、高剂量组Bcl-2 mRNA及蛋白表达明显降低（P＜0.05），Bax mRNA及蛋白表达明显升高（P＜0.05）。结论 凋膜止崩液可增加腺上皮细胞对凋亡的易感性，促进细胞凋亡。

ox-LDL对内皮细胞凋亡基因Bcl-2、Bax表达的影响及k-877的干预作用

目的观察氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)对所诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡基因Bcl-2、Bax mRNA表达的影响及高选择性过氧化物酶体增生物激活受体α(PPARα)激动剂k-877的干预作用。方法体外培养人脐静脉内皮细胞,采取ox-LDL刺激,应用k-877干预,逆转录聚合酶链反应检测凋亡基因Bcl-2、Bax mRNA的表达。结果与对照组比较,ox-LDL组Bcl-2 mRNA表达下降,Bax mRNA表达增加(P<0.05);与ox-LDL组比较,k-877组Bcl-2 mRNA表达增加,Bax mRNA表达降低(P<0.05);与k-877组比较,k-877联合多聚肌甘酸组Bcl-2 mRNA表达增加,Bax mRNA表达降低更加明显(P<0.05)。结论 k-877可抑制ox-LDL诱导人脐静脉内皮细胞凋亡基因Bax mRNA表达、促进抗凋亡基因Bcl-2 mRNA的表达,血凝素样氧化型低密度脂蛋白受体1参与了该表达过程。

左归降糖解郁方对糖尿病并发抑郁症大鼠海马Bcl-2,Bax,Caspase 8蛋白表达的影响

目的:探讨左归降糖解郁方(ZJJF)对糖尿病并发抑郁症(diabetes mellitus with depression,DD)大鼠海马B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax),半胱-天冬氨酸蛋白酶8(Caspase 8)蛋白表达的影响。方法:采用高脂乳剂灌胃、尾静脉注射链脲佐菌素(STZ,38 mg·kg-1)与慢性应激联合的方法复制DD模型,并随机分为3组:模型组,阳性药(二甲双胍0.18 g·kg-1+氟西汀0.0018 g·kg-1)组,ZJJF(32.82 g·kg-1)组,ig给药4周后,采用旷场实验(OFT)实验,观察各组大鼠行为学改变;采用蛋白免疫印迹法(Western blotting)检测模型大鼠海马Bcl-2,Bax,Caspase 8蛋白的表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠OFT实验中活动总数明显减少(P<0.01);与模型组比较,阳性药和ZJJF(32.82 g·kg-1)组大鼠自主活动次数明显增多(P<0.01)。与正常组比较,模型组大鼠海马Bcl-2蛋白表达下降(P<0.05),Bax,Caspase8蛋白表达显著升高(P<0.01)。与模型组比较,阳性药组海马Bcl-2蛋白表达升高(P<0.05),Bax,Caspase 8蛋白表达显著降低(P<0.01)。与模型组比较,ZJJF(32.82 g·kg-1)组海马Bcl-2表达升高(P<0.05),Bax,Caspase 8表达降低(P<0.05,P<0.01)。结论:ZJJF可改善糖尿病并发抑郁症大鼠抑郁行为异常,该作用可能与抑制神经细胞凋亡,保护海马有关。

基于Bcl-2/Bax信号通路探讨湿生扁蕾乙酸乙酯提取物治疗溃疡性结肠炎作用机制

目目的的:探讨藏族医药湿生扁蕾乙酸乙酯提取物通过B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)与Bcl-2相关X蛋白(Bax)介导的凋亡通路防治复发型大鼠大肠湿热型溃疡性结肠炎(UC)的作用机制。方法:采用“病证结合”法构建复发型大鼠大肠湿热UC模型,将70只SPF级SD雄性大鼠随机分为空白组、模型组、湿生扁蕾乙酸乙酯提取物高、中、低剂量组(150、75、37.5 mg·kg^(-1))及美沙拉嗪组(135 mg·kg^(-1)),连续灌胃给药14 d,记录大鼠一般状态,观察大鼠结肠长度及肠黏膜损伤情况,测定结肠湿质量指数,计算肝脏、脾脏、胸腺脏器系数。酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测各组大鼠血清中白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-1β(IL-1β)的水平,苏木素-伊红(HE)染色观察结肠病理变化,原位末端标记法(TUNEL)检测结肠上皮细胞的凋亡情况,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测结肠组织中Bcl-2、Bax、胱天蛋白酶-3(Caspase-3)、胱天蛋白酶-9(Caspase-9)、闭锁连接蛋白-1(ZO-1)、紧密连接蛋白3(Claudin3)、闭合蛋白(Occludin)的表达,免疫组化法(IHC)观察结肠上皮细胞中Bax、Caspase-3的表达。结果:与空白组比较,模型组大鼠疾病活动指数(DAI)评分、结肠黏膜损伤指数(CMDI)、肠上皮凋亡、肝脏、脾脏指数及血清中炎症因子IL-1β和IL-6水平均显著升高(P<0.01),肠黏膜保护蛋白ZO-1、Claudin3、Occludin表达显著降低(P<0.01),促凋亡蛋白Bax、Caspase-3、Caspase-9表达显著升高(P<0.01),抑制凋亡蛋白Bcl-2表达显著降低(P<0.01);与模型组比较,湿生扁蕾乙酸乙酯提取物高、中、低剂量均能够显著改善大鼠的一般状态,减轻结肠病变,降低肠上皮细胞凋亡、肝脏、脾脏指数,上调ZO-1、Claudin3、Occludin及Bcl-2蛋白表达,下调Bax、Caspase-3、Caspase-9蛋白表达,以湿生扁蕾高、中剂量效果明显(P<0.05,P<0.01)。结论:湿生扁蕾乙酸乙酯提取物能够通过调节Bcl-2/Bax信号通路,减轻肠黏膜损伤,发挥治疗UC作用。

CREB1对血管性痴呆大鼠认知功能障碍的影响及机制研究

目的探讨环腺苷酸反应成分结合蛋白1(CREB1)对血管性痴呆大鼠认知功能障碍的影响及机制研究。方法将40只大鼠根据随机数字表法分为对照组、模型组、阴性对照组及CREB1过表达组,每组10只。采用四血管阻断法复制血管性痴呆模型,采用水迷宫实验和旷场实验测定大鼠的认知功能,Western blotting测定海马组织CREB1、Caspase-3、Bcl-2、Bax、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(p-PKB)及蛋白激酶B(PKB)蛋白水平。结果与对照组比较,模型组、阴性对照组及CREB1过表达组大鼠旷场实验活动次数减少,活动距离缩短(P <0.05),逃避潜伏期延长(P <0.05),穿越原平台次数减少(P <0.05);海马组织Bcl-2、PI3K及p-PKB蛋白水平降低(P <0.05),海马组织Caspase-3、Bax蛋白水平升高(P <0.05);与模型组和阴性对照组比较,CREB1过表达组大鼠旷场实验活动次数增加,活动距离延长(P<0.05),逃避潜伏期缩短(P<0.05),穿越原平台次数增加(P<0.05);海马组织CREB1、Bcl-2、PI3K及p-PKB蛋白水平升高(P<0.05),海马组织Caspase-3、Bax蛋白水平降低(P<0.05)。结论血管性痴呆大鼠脑组织CREB1水平降低,过表达CREB1可通过激活PI3K/PKB信号通路,抑制海马神经细胞凋亡,改善血管性痴呆大鼠的认知功能。

山药多糖抗神经细胞缺氧性凋亡机制研究

目的探讨山药多糖抗神经细胞缺氧性凋亡作用机制。方法运用SD胎鼠大脑皮层神经细胞建立缺氧性神经细胞损伤体外模型,再使用不同质量浓度山药多糖处理,Rh-123染色检测线粒体损伤,RT-PCR及免疫细胞化学测定Caspase-3、Bax、Bcl-2 mRNA及蛋白表达。结果山药多糖抑制缺氧的神经细胞线粒体损伤,下调Caspase-3蛋白及mRNA的表达,下调Bax mRNA及蛋白的表达,上调Bcl-2 mRNA及蛋白的表达,提高Bcl-2/Bax mRNA及蛋白的比例(P<0.05)。结论山药多糖在一定发范围内能有效地抑制神经细胞缺氧性凋亡,其机理是降低凋亡基因及蛋白产生,上调抗凋亡基因及蛋白产生。

丹酚酸F调控Bax/Caspase-3/GSDME信号通路改善肾小管上皮细胞焦亡作用机制

目的:基于B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)相关X蛋白(Bax)/胱天蛋白酶-3(Caspase-3)/消皮素E(GSDME)通路探讨丹酚酸F改善高糖诱导的肾小管上皮细胞(HK-2)损伤的机制。方法:细胞增殖与活性检测(CCK-8)法检测不同浓度(2.5、5、10、20μmol·L^(-1))丹酚酸F对高糖诱导的HK-2细胞相对活力的影响及给予丹酚酸F不同干预时间条件下HK-2细胞的相对活力;乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒和酶联免疫吸附测定法(ELISA)试剂盒分别检测细胞培养基上清中LDH和白细胞介素-1β(IL-1β)的含量;流式细胞术结合异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)/碘化丙啶(PI)和Hoechst 33342/PI染色检测丹酚酸F对高糖诱导的HK-2细胞PI阳性率的影响;蛋白免疫印迹法(Western blot)评价丹酚酸F对高糖诱导的HK-2细胞中Bax、Bcl-2、细胞色素C(Cyt C)、胱天蛋白酶-9(Caspase-9)、Caspase-3、GSDME蛋白表达及激活情况的影响。2,7-二氯二氢荧光素二乙酸酯荧光探针法(DCFH-DA)及线粒体膜电位(JC-1)考察丹酚酸F对高糖诱导的HK-2细胞中活性氧(ROS)产生及线粒体膜电位的影响。结果:与空白组比较,模型组细胞活力显著降低(P<0.01),乳酸脱氢酶、炎症因子IL-1β、PI阳性细胞比例均显著升高(P<0.01);Bax、Cyt C、Caspase-9、Caspase-3、GSDME蛋白表达显著升高(P<0.01),Bcl-2蛋白表达显著降低(P<0.01),HK-2细胞线粒体膜电位的降低,ROS产生过量蓄积。与模型组比较,丹酚酸F组有效改善高糖诱导所致HK-2细胞的损伤(P<0.05),明显降低细胞培养基上清中LDH及IL-1β含量(P<0.05,P<0.01),显著减少PI阳性细胞的比例(P<0.01);丹酚酸F组降低Bax、Cyt C、Caspase-9、Caspase-3、GSDME蛋白表达,明显升高Bcl-2蛋白表达(P<0.05,P<0.01),HK-2细胞线粒体膜电位的升高,ROS的过量蓄积减少。结论:丹酚酸F通过减少ROS的产生,改善线粒体膜电位失衡,抑制Bax/Caspase-3/GSDME信号通路介导的细胞焦亡发挥改善高糖诱导所致HK-2细胞损伤的作用。

桃叶珊瑚苷通过TGF-β/p38MAPK信号通路调节皮肤损伤修复

目的探讨桃叶珊瑚苷通过转化生长因子-β/p38 有丝分裂原激活蛋白激酶(transforminggrowth factor-beta/P38 mitogen-activated protein kinases, TGF-β/P38MAPK)信号通路促进皮肤损伤修复的作用机制。方法将毛囊干细胞(hair follicle stem cells, HFSCs)按随机数字表法分为空白组、阳性组及10-10、 10-9、 10-8、 10-7、 10-6、 10-5、 10-4、 10-3 mol/L 桃叶珊瑚苷组,相应药物干预 24 h 后,采用 MTT法检测各组细胞增殖率;将 HFSCs 细胞分为空白组,阳性组,桃叶珊瑚苷低、中、高剂量组。阳性组加入 5 mol/L 的碱性成纤维生长因子溶液,桃叶珊瑚苷低、中、高剂量组分别加入 10-7、 10-6、 10-5 mol/L 桃叶珊瑚苷溶液进行干预。采用 Western blot 检测细胞中 TGF-β、磷酸化 P38(p-p38)、 p38、 Bax、 Bcl-2 蛋白表达,采用实时定量 PCR 检测各组细胞中 Bax、 Bcl-2 mRNA 表达。结果与空白组比较, 10-7、 10-6、10-5 mol/L 桃叶珊瑚苷组细胞增殖率[(0.418±0.031)、(0.412±0.014)、(0.468±0.024)比(0.353±0.006)]升高(P<0.01);与空白组比较,桃叶珊瑚苷低、中、高剂量组细胞 TGF-β[(0.377±0.027)、(0.338±0.021)、(0.322±0.017)比(0.557±0.017)]、 p-p38[(0.270±0.020)、(0.228±0.013)、(0.216±0.012)比(0.461±0.012)]、 Bax[(0.450±0.017)、(0.365±0.011)、(0.279±0.006)比(0.551±0.015)]蛋白表达下调,Bcl-2[(0.450±0.017)、(0.365±0.011)、(0.279±0.006)比(0.358±0.011)]蛋白表达升高(P<0.01);Bcl-2mRNA[(1.714±0.028)、(2.514±0.054)、(3.382±0.084)比(1.000±0)]表达升高, Bax mRNA[(0.415±0.020)、(0.353±0.090)、(0.235±0.114)比(1.000±0)]表达下降(P<0.01)。结论桃叶珊瑚苷可通过调节 TGF-β/p38MAPK 信号通路减少下游凋亡因子蛋白及基因的表达,从而促进损伤皮肤修复。

手捻针针刺对糖尿病神经源性膀胱大鼠膀胱细胞凋亡的抑制作用

目的:通过测量膀胱组织中B细胞淋巴瘤白血病基因(Bcl)-2、Bcl-2-相关X蛋白(Bax)和caspase-3的蛋白和mRNA,以及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、转化生长因子(TGF)-β蛋白表达,探讨手捻针针刺对糖尿病神经源性膀胱(DNB)大鼠膀胱细胞凋亡的抑制作用。方法:腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立DNB大鼠模型。大鼠随机分为对照组、模型组和针刺组(MA组),每组10只。针刺组在造模后应用手法针刺。测量大鼠体质量、空腹血糖(FBG)、膀胱湿重,观察膀胱组织形态学;测定膀胱组织中Bcl-2、Bax和caspase-3的蛋白和mRNA,以及α-SMA和TGF-β蛋白的表达水平,并评估膀胱细胞凋亡指数。结果:注射STZ后,与对照组相比,模型组和MA组均从第3周开始显示出较高的FBG,从第9周开始显示出较低的体质量(P<0.05),且膀胱湿重较高(P<0.05)。与模型组比较,MA组显示出较低的膀胱湿重(P<0.05)。组织病理学评估表明,针刺改善了膀胱组织中肌纤维排列紊乱和逼尿肌细胞代偿性肥大。此外,与对照组相比,模型组和MA组凋亡指数均显著升高(P<0.05);模型组和MA组大鼠膀胱组织中Bax和caspase-3蛋白及mRNA、TGF-β蛋白表达量显著升高(P<0.05),大鼠膀胱组织中Bcl-2蛋白及mRNA、α-SMA蛋白表达量显著降低(P<0.05)。与模型组比较,MA组凋亡指数显著降低(P<0.05);大鼠膀胱组织Bax和caspase-3蛋白及mRNA、TGF-β蛋白表达量显著降低(P<0.05);Bcl-2蛋白及mRNA、α-SMA蛋白表达量显著升高(P<0.05)。结论:手捻针针刺可以通过抑制膀胱细胞过度凋亡保护DNB大鼠膀胱,这可能与其下调Bax和caspase-3蛋白和mRNA以及TGF-β蛋白表达,上调Bcl-2蛋白和mRNA以及α-SMA蛋白表达有关。

桔梗白散治疗非小细胞肺癌小鼠的作用研究

目的观察中药复方桔梗白散对Lewis肺癌小鼠皮下移植瘤生长及组织中B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、胱天蛋白酶(caspase)-3、caspase-9表达的影响。方法建立Lewis肺癌移植瘤小鼠模型,将70只SPF级雄性C57BL/6小鼠随机分为空白组、模型组、低剂量实验组、中剂量实验组、高剂量实验组、对照组、联合组。空白组、模型组灌胃0.9%NaCl 0.2 mL;对照组给予等量0.9%NaCl灌胃的同时腹腔注射顺铂25 mg·kg^(-1);高、中、低剂量实验组分别给予193、96、48 mg·kg^(-1)·d^(-1)桔梗白散0.2 mL灌胃;联合组以96 mg·kg^(-1)·d^(-1)桔梗白散0.2 mL灌胃,同时腹腔注射顺铂25 mg·kg^(-1),隔日1次。以流式细胞术检测小鼠骨髓髓源性抑制细胞(MDSCs),以免疫荧光法观察肿瘤细胞中Bcl-2、Bax、caspase-3、caspase-9的表达。结果空白组、模型组、低剂量实验组、中剂量实验组、高剂量实验组、对照组、联合组小鼠骨髓中MDSCs百分比分别为(32.50±2.76)%、(63.13±3.14)%、(48.43±2.23)%、(42.53±1.28)%、(32.93±3.56)%(51.30±4.25)%和(19.90±6.21)%;模型组、低剂量实验组、中剂量实验组、高剂量实验组、对照组、联合组Bax荧光强度分别为10.42±0.68、12.40±1.23、15.14±0.65、22.95±1.76、27.18±1.62和31.61±1.28,Bcl-2荧光强度分别为36.85±0.80、33.92±4.20、28.88±1.01、20.04±2.21、15.69±2.36和6.05±0.73,caspase-3荧光强度分别为5.28±0.44、7.63±0.55、9.66±0.85、14.73±1.18、17.95±1.29和22.92±1.95,caspase-9荧光强度分别为9.48±0.90、11.57±0.72、13.45±0.93、15.73±1.44、19.20±0.96和23.21±1.51。中、高剂量实验组的上述指标与模型组比较,在统计学上差异均有统计学意义(均P<0.05);联合组的上述指标与对照组相比,在统计学上差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论桔梗白散能够通过上调Bax、caspase-3、caspase-9表达,下调Bcl-2表达,抑制MDSCs,促进肿瘤细胞凋亡,抑制肿瘤生长。

尼可地尔预处理对深低温低血流小鼠的神经保护作用及其可能机制

目的：探讨尼可地尔对深低温低流量（deep hypothermic low flow, DHLF）小鼠缺血再灌注模型的神经保护作用及其可能机制。方法105只3周龄雄性C57/BL-6小鼠随机分为假手术组、模型组、尼可地尔5 mg/kg 组、尼可地尔10 mg/kg 组、尼可地尔20 mg/kg 组、尼可地尔20 mg/kg ＋LY294002组以及 LY294002组,每组15只。建立 DHLF 模型,在再灌注24 h后取小鼠脑组织进行 HE和 TUNEL 染色,观察大脑皮质神经元病理学改变和细胞凋亡,应用蛋白质印迹法检测总 Akt、磷酸化Akt（phospho-Akt, p-Akt）、Bcl-2和 Bax 蛋白表达。结果 HE 病理学染色显示,尼可地尔组皮质神经元损伤减轻,胞膜凹陷、胞核固缩、浓染、核仁模糊不清等现象明显减少,神经元细胞形态基本恢复正常。 TUNEL 染色显示,各剂量尼可地尔组凋亡指数均较模型组显著降低（P 均〈0．05）。蛋白质印迹分析显示,与模型组相比,各剂量尼可地尔组 p-Akt 和 Bcl-2蛋白表达水平显著升高（P 均〈0．05）,而Bax 蛋白表达水平则显著降低（P 均〈0．05）。加入磷脂酰肌醇3激酶（phosphatidylinositol 3-kinase, PI3K）特异性抑制剂 LY294002后,脑皮质神经元病理学损伤较模型组无明显差异,凋亡指数和p-Akt、Bcl-2和 Bax 蛋白表达水平较模型组差异无统计学意义。结论尼可地尔对 DHLF 小鼠模型具有一定的神经保护作用,其机制可能与激活 PI3K/Akt 信号通路进而调控下游蛋白 Bcl-2和 Bax 表达有关。