Comparative Analyses of Proteome Complement Between Worker Bee Larvae of High Royal Jelly Producing Bees (A. m. ligustica) and Carniolian Bees (A. m. carnica)

This study is to compare the protein composition of the high royal jelly producing bee （A. m. ligustica） with that of Carniolian bee （A. m. carnica） during their worker larval developmental stage. The experiment was carried out by two- dimensional gel electrophoresis. The results showed that significant higher numbers of total proteins （283） were detected in larvae of high royal jelly producing bees （Jelly bee） than those of Carniolian bees （152） on 2-d-old larvae. Among them, 110 proteins were presented on both strains of bee larvae, whereas 173 proteins were specific to larvae of Jelly bees, and 42 proteins were exclusive to Carniolian larvae. However, on the 4th d, a significant higher number of total proteins （290） were detected in larvae of Jelly bees than those of Carniolian bees （240）, 163 proteins resolved to both bee larvae, and 127 proteins were specific to Jelly bees and 77 proteins to Camiolian bees. Until the 6th d, also a significant higher number of total proteins （236） were detected in larvae of Jelly bees than those of Carniolian bees （180）, 132 proteins were constantly expressed in two bee larvae, whereas 104 and 48 proteins are unique to Jelly bee and Carniolian bee larvae, respectively. We tentatively concluded that the metabolic rate and gene expression of Jelly bees larvae is higher than those of Carniolian bees based proteins detected as total proteins and proteins specific to each stage of two strains of bee larvae. Proteins constantly expressed on 3 stages of larval development with some significant differences between two bee strains, and proteins unique to each stage expressed differences in term of quality and quantity, indicating that larval development needed house keeping and specific proteins to regulate its growth at different development phage, but the expression mold is different between two strains of larval development.

意大利蜂工蜂幼虫和蛹的药理作用初探

从抗肿瘤、抗衰老、调节机体免疫功能三方面对工蜂幼虫、蛹的药理作用进行了研究，结果表 明，工蜂幼虫、蛹对小鼠Ｓ１８０肿瘤生长有明显的抑制作用，其抑瘤率分别达６０．９２％和６４．３７％，荷瘤小鼠的生命延长率分别达８０． ６５％和８１． ７４％；工蜂幼虫、蛹能提高大鼠脑、肝脏和血液中ＳＯＤ的活性，降低ＭＤＡ的含量，提高小鼠脑组织中ＲＮＡ和蛋白质的含量；工蜂幼虫、蛹能提高小鼠Ｔ淋巴细胞转化功能、碳廓清指数和胸腺指数，具有提高机体的细胞免疫和非特异性免疫功能的作用，工蜂幼虫、蛹的药理作用与蜂王幼虫相比，差异不显著。

意大利蜜蜂工蜂幼虫饲粮的适宜赖氨酸水平

本试验旨在研究意大利蜜蜂工蜂幼虫饲粮的适宜赖氨酸水平,为探明意大利蜜蜂工蜂幼虫发育阶段的赖氨酸营养需要提供理论依据。选用1日龄意大利蜜蜂工蜂幼虫1 200只,随机分为5个组,每个组5个重复,每个重复48只。5组工蜂幼虫分别饲喂赖氨酸实测水平为6.08(对照)、11.08、16.08、21.08和26.08 mg/g的饲粮,饲养至幼蜂羽化出房。分别于特定日龄测定工蜂幼虫化蛹率(6日龄)、虫体总蛋白含量(6日龄)、羽化率(21日龄)等生长指标以及血淋巴生化指标和免疫相关指标(6日龄)。结果表明:1)11.08 mg/g赖氨酸组的工蜂幼虫化蛹率和羽化率极显著高于其他各组(P<0.01)。2)与对照组相比,11.08~26.08 mg/g赖氨酸组6日龄工蜂幼虫虫体总蛋白含量和血淋巴中游离赖氨酸含量显著提高(P<0.05),其中饲粮赖氨酸水平为26.08 mg/g时6日龄工蜂幼虫虫体总蛋白含量和血淋巴中游离赖氨酸含量最高。3)6日龄工蜂幼虫血淋巴中甘油三酯含量随饲粮赖氨酸水平的升高呈先下降后上升的趋势,其中饲粮赖氨酸水平为16.08 mg/g时处于最低值,极显著低于其他各组(P<0.01)。4)11.08~21.08 mg/g赖氨酸组6日龄工蜂幼虫血淋巴中溶菌酶活性显著高于对照组(P<0.05),但随着饲粮赖氨酸水平由21.08 mg/g升高到26.08 mg/g,6日龄工蜂幼虫血淋巴中溶菌酶活性急剧下降,26.08 mg/g赖氨酸组显著低于其他各组(P<0.05)。5)饲粮赖氨酸水平为11.08 mg/g时,6日龄工蜂幼虫虫体溶菌酶基因的相对表达量最高,显著高于其他赖氨酸水平时(P<0.05)。与对照组相比,11.08~16.08 mg/g赖氨酸组6日龄工蜂幼虫虫体防卫素1基因的相对表达量显著增加(P<0.05)。由此得出,赖氨酸能够促进意大利蜜蜂工蜂幼虫生长,促进蛋白质和赖氨酸的沉积,提高羽化率,并在一定程度上对脂质代谢和幼虫免疫能力产生调节作用;综合考虑上述指标,推荐意大利蜜蜂工蜂幼虫饲粮的适宜赖氨酸水平为11.08~16.08 mg/g。

新疆苹果蠹蛾幼虫期及蛹期的寄生蜂调查初报

经 3年在新疆伊犁的调查 ,发现苹果蠹蛾幼虫和蛹的 5种寄生蜂 ,包括 1种重寄生蜂。它们是光点瘤姬蜂 ,蠹蛾玛姬蜂 ,红足微茧蜂 。

王浆高产蜜蜂(Apis mellifera L.)工蜂幼虫发育期蛋白质组分析

【目的】20世纪90年代中国成功培育出的王浆高产蜜蜂(Apis mellifera L.)是当今世界最优良的蜂种,使中国的王浆年产量高达2600多吨,占世界总产量的90%以上,稳居世界第一,通过对该蜂种不同发育日龄工蜂幼虫的蛋白质组进行研究,以探明其发育机理。【方法】采用双向电泳法对王浆高产蜜蜂(Apis mellifera L.)不同发育期的工蜂幼虫进行蛋白质组研究。【结果】在幼虫期6d的发育过程中,2日龄、4日龄、6日龄幼虫中分别检测到了262、418、194个蛋白点。这些蛋白的分子量在12.2～88.2kD的较大范围之间,等电点在pH4.00～9.24之间。有84个蛋白在幼虫期整个发育过程中均有表达,其中33%呈上调趋势,21%呈下调趋势,46%蛋白的表达没有规律。2日龄、4日龄、6日龄幼虫中分别有88、209、63个特异表达的蛋白。除此之外,有84个蛋白在幼虫发育的6日龄表达关闭,而在2日龄和4日龄幼虫中表达;有41个蛋白在2日龄表达关闭,而在4日龄和6日龄中表达;仅有6个蛋白在4龄日表达关闭,而在2日龄和6日龄表达。【结论】幼虫的发育过程有大量基因参与表达和调控,是一个复杂而动态有序的过程,且发育到4日龄的幼虫蛋白表达最为活跃。幼虫整个发育过程中的共有蛋白是发育必需的保守蛋白。幼虫不同的发育阶段由不同的特异蛋白进行调控。

高效液相色谱-荧光检测法测定蜂王幼虫中的色氨酸含量

采用一种简便、灵敏度高的高效液相色谱-荧光检测法（HPLC—FLD）测定蜂王幼虫中游离和总色氨酸的含量。以水（用0．1mol／L盐酸调节pH至6．3）和乙腈作为提取溶液，超声提取蜂王幼虫中的游离色氨酸；用4mol／LNaOH为水解溶液，在110℃、无氧条件下水解蜂王幼虫样品20h后用于总色氨酸含量分析。色谱条件：SymmetryC18柱（4．6×250，5μm）；水（含0．1％三氟乙酸）：甲醇（75：25，V／V）为流动相；流速0．9mL／min；柱温30℃；荧光检测器激发波长为280nm，发射波长为340nm。其线性范围为0．0625—1．0μg／mL，相关系数F2〉0．9998，精密度结果表明重现性和重复性的相对标准偏差RSD（％）均在可接受的范围内。蜂王幼虫中游离色氨酸和总色氨酸含量分别为（0．367±0．008）mg／g（0．037％）和（1．390±0．025）mg／g（0．139％）。

蜜蜂幼虫、蛹抗衰老作用的实验研究

用工蜂幼虫、蛹、蜂王幼虫灌胃老年Wristar大鼠10天后，分别测定大鼠脑、肝脏和血液中SOD活力和MDA含量。结果发现，SOD活力均显著提高，MDA含量均显著下降，这反映了工蜂幼虫、蛹与蜂王幼虫一样具有明显的抗衰老作用。

蜂王幼虫脂类活性物质的组成分析

对新鲜蜂王幼虫中脂类物质进行提取及柱层析分离,分析各分离组分脂肪酸组成和其他脂溶性活性化合物的组成和含量。结果表明:蜂王幼虫脂类物质中含有74.4%的甘油三酯,其脂肪酸以棕榈酸(43.16%)和油酸(40.70%)为主,其他中性脂和磷脂中含有较高含量的癸酸。同时,蜂王幼虫中甾醇组成为24-亚甲基胆甾醇57.67%、菜油甾醇4.76%、β-谷甾醇16.56%,Δ5-燕麦甾醇19.45%以及环阿屯醇1.56%。此外,蜂王幼虫含有丰富的辅酶Q10和磷脂类化合物,其中脑磷脂含量为(1299.65±50.12)mg/100g(以油脂计)。

蜂幼虫分离蛋白提取研究

研究采用"碱溶酸沉"原理,对蜂幼虫蛋白质进行提取。主要讨论料液比、浸提碱液pH值、浸提时间等条件对提取率及纯度的影响,确定最佳提取条件。结果表明:料液比1∶2,pH值10.5,温度20℃,浸提2.5h。各因素对提取率的影响强弱关系:提取时间>提取温度>浸提pH>料液比。所得产品蜂蛋白质粉液提取率42.03%,纯度为61.22%。

王浆高产蜜蜂(A. m. ligustica)与喀尼鄂拉蜂(A. m. carnica)幼虫期蛋白质组比较

【目的】对王浆高产蜜蜂(A.m.ligustica,浆蜂)与喀尼鄂拉蜂(A.m.carnica,喀蜂)工蜂幼虫期进行蛋白质组比较,以探明两蜂种幼虫期不同日龄蛋白质表达调控方面的异同。【方法】采用双向电泳对浆蜂与喀蜂工蜂幼虫期蛋白质组进行研究。【结果】在幼虫期2日龄,浆蜂的蛋白表达谱为283个蛋白,喀蜂为152个蛋白,两蜂种共有蛋白点为110个,其中24个点浆蜂表达量显著大于喀蜂,15个蛋白喀蜂表达量显著大于浆蜂,而浆蜂特异蛋白为173个,而喀蜂特异蛋白为42个;幼虫4日龄时,浆蜂总蛋白点数为290个,喀蜂总蛋白点数为240个蛋白,两蜂种共有蛋白点为163个,其中24个点浆蜂表达量显著大于喀蜂,15个蛋白喀蜂表达量显著大于浆蜂,而浆蜂特异蛋白为126个,喀蜂特异蛋白为77个;到达幼虫6日龄时,浆蜂蛋白组含236个蛋白,喀蜂蛋白质组含180个蛋白,两蜂种共有蛋白点为132个,其中22个点显示浆蜂表达量显著大于喀蜂,11个蛋白喀蜂表达量显著大于浆蜂,而浆蜂特异蛋白为104个,喀蜂特异蛋白为48个。【结论】在蜜蜂幼虫期浆蜂较喀蜂表达的蛋白总数和特有蛋白多,说明浆蜂较喀蜂幼虫的基因表达和代谢更加旺盛。在2蜂种幼虫期表达的共有蛋白中,其中一些蛋白的表达量存在差异,而2蜂种在3个日龄所表达的特有蛋白的数和量也存在一定差异,这些说明幼虫发育需要管家蛋白和不同发育阶段相应的特定蛋白来调控,但管家蛋白和特有蛋白在2蜂种的表达模式存在差异。

蜜蜂幼虫对大鼠机体脂质过氧化作用的影响

通过观察蜜蜂幼虫对大鼠机体脂质过氧化作用的影响，发现用含１０％蜜蜂幼虫干粉的饲料饲养大鼠１０周后，大鼠血液和肝脏ＳＯＤ和ＳｅＧＳＨＰｘ活性以及ＧＳＨ含量均明显升高，ＭＤＡ含量明显降低，心肌脂褐质含量也明显减少，而血Ｓｅ未出现改变。实验结果提示：蜜蜂幼虫可以提高大鼠机体的抗氧化能力，抑制机体的脂质过氧化作用，从而可望延缓机体衰老过程。

不同配比油菜花粉与黄豆粉饲料对意蜂工蜂幼虫虫体蛋白含量的影响

本文就5种不同配比油菜花粉与黄豆粉蛋白质饲料对3日龄和6日龄工蜂幼虫虫体的粗蛋白质含量影响进行了探讨。研究结果显示:⑴不同配比的蛋白质饲料对3日龄工蜂幼虫虫体粗蛋白含量无显著影响(P>0.05);但不同配比的蛋白质饲料对6日龄工蜂幼虫虫体粗蛋白含量影响显著(P<0.05);⑵饲料中黄豆粉含量高于50%时,6日龄工蜂幼虫虫体的粗蛋白质含量极显著高于黄豆粉含量低于50%的(P<0.01)。

蜜蜂幼虫增强老龄大鼠记忆力实验研究

采用穿梭箱被动回避反应及组织化学、图像分析等法 ,研究鲜蜜蜂 10 d龄幼虫浆对 2 4月龄老年大鼠记忆保持力和大脑边缘系统海马内胆碱能神经纤维形态学影响。结果显示老龄大鼠每 d灌服鲜蜂幼虫浆 2 5 0 mg/kg,2 1d后 ,记忆力保持功能明显增强 (P<0 .0 5 ) ,胆碱能神经纤维积分光密度明显增加 (P<0 .0 5 )。

不同配比黄豆粉饲料对意蜂6日龄工蜂幼虫血淋巴蛋白的影响

用5种不同配比油菜花粉与黄豆粉饲料饲喂意大利蜜蜂,就不同配比蛋白质饲料对意蜂6日龄工蜂幼虫血淋巴中蛋白质种类和含量的影响进行了探讨。实验结果显示:(1)饲喂不同蛋白质饲料培育的6日龄工蜂幼虫血淋巴中的蛋白质含量之间的差异不显著(P>0.05);(2)SDS-PAGE图谱表明,不同配比蛋白质饲料培育的6日龄工蜂幼虫血淋巴中蛋白质种类总体一致,个别蛋白存在量的差异。

不同配比花粉与黄豆粉饲料对意蜂6日龄工蜂幼虫血淋巴中游离氨基酸含量的影响

研究不同配比花粉与黄豆粉饲料对意蜂6日龄工蜂幼虫血淋巴中游离氨基酸含量的影响。采用5种不同配比油菜花粉与黄豆粉饲料饲喂意大利蜜蜂,就不同蛋白质饲料对意大利蜜蜂工蜂6日龄幼虫血淋巴中16种游离氨基酸含量的影响进行研究。饲喂不同蛋白质饲料培育的6日龄工蜂幼虫血淋巴中的16种游离氨基酸的含量之间的差异均不显著(P>0.05)。不同配比油菜粉和黄豆粉混合蛋白质饲料对6日龄工蜂幼虫血淋巴中的游离氨基酸含量均无影响。

蜂王幼虫人工哺育条件初探

以意大利蜂王幼虫为材料,在不同的孵化温度下人工哺育幼虫,并研究不同营养水平对蜂王幼虫生长发育的影响。结果显示:相对湿度为90%±2%,温度为35.5±0.1℃时比34.5±0.1℃时更有利于蜂王幼虫生长发育;在新鲜的蜂王浆中添加少量蜂蜜,有利于蜂王幼虫生长友育。

不同配比花粉与黄豆粉饲料对意蜂6日龄工蜂幼虫血淋巴中游离氨基酸含量的影响

本文采用5种不同配比油菜花粉与黄豆粉饲料饲喂意大利蜜蜂,就不同蛋白质饲料对意大利蜜蜂工蜂6日龄幼虫血淋巴中16种游离氨基酸含量的影响进行研究。试验结果显示,饲喂不同蛋白质饲料培育的6日龄工蜂幼虫血淋巴中的16种游离氨基酸的含量之间的差异均不显著(P>0.05)。说明不同配比油菜粉和黄豆粉混合蛋白质饲料对6日龄工蜂幼虫血淋巴中的游离氨基酸含量均无影响。

意蜂移虫、卵育王的王台接受率和蜂王初生重研究

研究意蜂移虫、卵育王的王台接受率和蜂王初生重。从王台接受率和蜂王的初生重2个方面,对采用幼虫和卵育王所培养蜂王质量进行了探讨。①采用移虫方式育王的王台接受率极显著高于采用移卵方式的(P<0.01);②采用卵培育的蜂王其初生重极显著高于采用幼虫的(P<0.01)。

壳聚糖澄清蜂王胎口服液的工艺研究

为了研究壳聚糖澄清法在复方蜂王胎口服液制备工艺中的除杂效果和有效成分的保留,通过正交回归试验研究了壳聚糖添加量、澄清温度、时间及药液pH等因素对多糖转移率的影响,并确定了最佳澄清条件:壳聚糖添加量为0.05%,澄清温度为47℃,时间为3.4h,药液pH值为4.8,枸杞多糖转移率可达72.43%。同时与醇沉方法进行了比较。结果表明,用壳聚糖澄清法能最大限度地保留有效成分,且成本比醇沉法低,工艺相对简单。

工蜂幼虫和蛹的急性毒性试验

对意大利蜂工蜂幼虫和蛹进行了急性毒性试验，结果未发现实验动物死亡，测定不出半致死量（ＬＤ５０值）；最大耐受量试验表明，其最大耐受倍数均超过正常剂量的６００ 倍，可认定工蜂幼虫和蛹属无毒性物质。