热反应牛骨香精酶解工艺优化及关键气味化合物鉴定

为研究制备热反应牛骨香精的较佳酶解工艺,以牛骨素为原料,选用复合酶,利用单因素实验和响应面试验考察酶解温度、酶解时间、复合酶加酶量及复合酶加酶比例对酶解液水解度和由酶解液与糖、氨基酸等原料经美拉德反应制备的热反应牛骨香精的感官评分的影响,并利用高效液相色谱法测定游离氨基酸质量比,利用全二维气相色谱-嗅闻-质谱技术分析牛骨素酶解前后制备的热反应牛骨香精关键气味化合物的质量比。结果表明,牛骨素的较佳酶解工艺为酶解温度50℃、酶解时间4 h、加酶量1250 U/g、复合风味蛋白酶与复合蛋白酶的加酶比例为3∶2,在此条件下感官评分为8.17分。与牛骨素相比,酶解液中有15种游离氨基酸的质量比显著增加;使用电子鼻和电子舌测定牛骨素和酶解液的气味轮廓和滋味轮廓,发现酶解液的氮氧化物气味特征增强,酶解液的鲜味、浓厚味、咸味特征更明显。使用固相微萃取结合全二维气相色谱-嗅闻-质谱技术,对牛骨素、酶解液分别制备的热反应牛骨香精的关键气味化合物进行分析,共鉴定出挥发性气味化合物164种,包含27种醛类、30种酮类、12种醇类、16种酸类、7种含硫化合物、10种酯类、18种吡嗪类、10种呋喃类、6种噻唑类、4种噻吩类和24种其他类化合物。通过气相色谱-嗅闻分析,嗅闻到74种气味活性化合物;气味活性值(OAV)大于1的关键气味化合物有22种,牛骨素与酶解液分别制备的热反应牛骨香精中最重要的关键气味化合物均为双(2-甲基-3-呋喃基)二硫醚(OAV值分别为13079和8053);与牛骨素制备的热反应牛骨香精相比,酶解液制备的热反应牛骨香精中出现了(E,E)-2,4-癸二烯醛、2-甲基-3-呋喃硫醇、甲基糠基二硫醚、己酸甲硫醇酯、β-石竹烯5种新的关键气味化合物。研究旨在为热反应牛骨香精工业化生产中的酶解工艺提供理论依据。

酶解方法对香菇风味物质的影响

为探究不同酶解方法对香菇风味物质的影响,选用2种单酶(纤维素酶、风味蛋白酶)和1种复合酶(纤维素酶+风味蛋白酶)酶解香菇,比较不同酶处理的香菇风味物质的差别。结果显示:与对照组相比,纤维素酶组、风味蛋白酶组和复合酶组酶解液中可溶性糖总量分别显著上升144.21%,114.24%和438.28%,有机酸总量分别显著上升9.06%,8.31%和13.77%(P<0.05),复合酶处理组显著高于单一酶处理组。复合酶组的呈味核苷酸含量分别显著高于对照组、纤维素酶组、风味蛋白酶组6.55%,4.90%和5.75%(P<0.05)。与对照组相比,风味蛋白酶和复合酶处理组的游离氨基酸含量显著上升了56.19%和58.95%(P<0.05)。采用气相色谱-质谱联用分析共检出62种挥发性风味物质,其中醇类物质和含硫化合物最丰富。复合蛋白酶处理组中1-辛烯-3-醇(蘑菇醇)和1,2,3,5,6-五硫杂环庚烷(香菇素)相对含量较高,分别达到68.27%和8.06%。结论:纤维素酶和风味蛋白酶复合酶解能促进香菇可溶性糖、有机酸、呈味核苷酸和游离氨基酸及1-辛烯-3-醇(蘑菇醇)和1,2,3,5,6-五硫杂环庚烷(香菇素)等风味物质的释放。

酶解前后牡蛎肉风味变化研究

该研究以牡蛎(Ostreae concha)为研究对象,蛋白酶与淀粉酶复合反应制备牡蛎肉酶解液,结合感官评价和顶空-固相微萃取-气相色谱-质谱联用法分析牡蛎肉酶解前后挥发性化合物的变化规律,解析牡蛎肉及其酶解液的关键风味化合物及主要腥味成分。利用相对气味活度值来量化评价各组分对牡蛎肉酶解液风味的贡献程度。添加淀粉酶将牡蛎肉中的糖原分解成小分子单糖,并在一定温度下促使酶解液发生美拉德反应,进而产生具有愉快风味的化合物以遮盖牡蛎的腥味。结果表明,酶解后呈现腥味、哈喇味的(E,E)-2,4-庚二烯醛、己醛、庚醛和壬醛等物质的含量降低,酶解脱除了牡蛎肉中的腥味,生成了具有浓郁果香味和青草味的2-戊基呋喃、苯甲醛和十六醛等物质,在多种挥发性化合物共同作用下,整体香气协调,风味持久。

轻度酶解联合美拉德反应对即食草鱼风味及体外消化特性的影响

【目的】探讨经过轻度酶解联合美拉德反应后草鱼(Ctenopharyngodon idellus)鱼块风味及营养消化特性的变化规律,为改善即食淡水鱼休闲食品风味提供参考。【方法】选用不同风味蛋白酶添加量(0.8%、1.0%和1.2%,质量分数)和不同酶解时间(1.5 h和3.0 h)处理的草鱼鱼块进行烤制,对其感官品质、挥发性风味物质、色泽、体外消化率、消化产物的分子质量分布以及氨基酸组成进行评价,结合蛋白质组学中的生物信息学分析方法进行消化产物的肽段鉴定。【结果】酶处理组的整体感官评分显著高于未添加风味蛋白酶组(P<0.05),其中当添加质量分数1.0%的风味蛋白酶并酶解3.0 h时感官总分最高,为77.7。其次,相较于未添加风味蛋白酶组,酶处理组检测到更多对感官品质有积极影响的醛类、含硫化合物、呋喃和吡嗪等特征风味组分,其中当添加1.0%的风味蛋白酶并酶解3.0 h时挥发性风味物质种类可达27种。随着酶解反应的进行,鱼块在体外模拟消化过程中产生的分子质量小于0.5 ku的消化产物占比上升2.9%~6.9%。酶处理组谷氨酸和精氨酸含量显著高于对照组(P<0.05)。【结论】草鱼鱼块经轻度酶解后形成分子质量更小的氨基化合物,这些小分子与葡萄糖发生的美拉德反应更为剧烈,可改善鱼块的风味和消化特性。

酶法制备螺蛳呈味基料及新型螺蛳粉汤料开发

以螺蛳肉为原料,以水解度为指标,通过蛋白酶筛选、单因素试验和响应面优化确定酶法制备螺蛳呈味基料工艺,并对螺蛳呈味基料的游离氨基酸、总氨基酸和感官风味进行分析,随后以螺蛳呈味基料为基础进行新型螺蛳粉汤料开发研究。结果表明,螺蛳呈味基料最优酶解工艺参数为:胰蛋白酶底质量比0.19%,料液比1:2 g/mL,酶解pH值8.0,酶解温度50℃,酶解时间3 h,此时水解度为26.82%,其最终固形物得率比传统水煮法提高了6.3倍。螺蛳肉呈味基料总体风味良好,鲜味(6.64)突出,鲜甜氨基酸含量占总氨基酸总量的57.48%。新型酶解型汤料配方为:以原汤作为溶解体系(质量分数),螺蛳呈味基料、食盐、白砂糖和味精的添加量分别为25 g/L、3%、1.25%和1.5%。新型酶解型汤料游离氨基酸总量(142.21 mg/100 g)和总氨基酸鲜甜氨基酸含量(17.28 g/100 g)较传统水煮型(14.25 mg/100 g和13.48 g/100 g)均显著提升。因此,酶解型螺蛳粉汤料具有更好的风味价值。该研究为螺蛳资源的高效利用及螺蛳粉汤料的品质提升和产业化制备提供了新思路和参考。

鸡血制备肉味香精前体物酶解工艺的优化

为建立和优化肉味香精前体物的最佳酶解工艺,该试验利用蛋白水解酶制备肉味香精前体物,以鸡血的理化分析为基础,以鸡血蛋白水解度为水解参考指标,通过单因素试验研究酶解时间、酶解温度、加酶量和酶种类4个因素对水解度的影响;在单因素试验的基础上,采用响应面法设计四因素三水平的优化方案,为避免试验条件下工艺参数在实际生产过程中缺乏适应性的问题,参考层次分析法确定酶解生产过程中模糊优选因素的权重值,通过模糊数学决策法结合响应面多元二次回归模型进行矩阵变换运算,建立多元回归模型,确定最佳的酶解工艺参数。结果表明,鸡血蛋白质含量为(16.53±0.41)%,经预处理后蛋白质含量高达(48.65±0.28)%,表明鸡血具有良好的制备肉味香精的应用潜力;层次分析得出权重集C=(生产效率0.32,原料利用率0.14,原料及设备成本0.24,能耗0.30),对多元二次回归模型得到的排名前20的工艺条件进行模糊数学决策法矩阵变换计算,得到最佳酶解工艺为酶解时间3 h、酶解温度37℃、加酶量3605 U/g、酶种类胰蛋白酶,此工艺条件下分数最高,为0.713分。通过验证,此最佳酶解工艺方案可行,对于鸡肉香精的制备具有良好的实践参考价值。

蛋白酶对羊肚菌水解液滋味和风味物质的影响

以游离氨基酸总量为指标,研究不同蛋白酶对羊肚菌的酶解效果,筛选羊肚菌酶解增鲜工艺最适蛋白酶,并采用单因素试验以及L9(34)正交试验,优化最适蛋白酶的水解工艺,在此基础上采用氨基酸分析仪及气质谱联用(gas chromatography-mass spectrometry,GC-MS)技术对羊肚菌酶解前后氨基酸组成与挥发性风味物质进行分析评价。结果表明:中性蛋白酶酶解后游离氨基酸总量显著高于其他处理组,可以保持其鲜味和滋味的丰富性,因此选择中性蛋白酶对羊肚菌进行酶解处理。中性蛋白酶最佳酶解工艺条件为pH6.5、酶解温度45℃、中性蛋白酶添加量0.20%、酶解时间2.5 h。相较于未经酶解处理样品,该工艺条件下所得水解液(游离氨基酸总量220.54 mg/g)鲜味氨基酸、甜味氨基酸、苦味氨基酸浓度增加;醇类、酮类、醛类等挥发性风味物质相对含量增加,可以作为羊肚菌调味品加工基料。

鸡肉酶解工艺对热反应鸡肉香精香气的影响

以鸡肉酶解液为原料,通过热反应制备鸡肉香精。以水解度和热反应香精的感官评价为综合指标,通过单因素试验和正交试验考察不同的酶解工艺对鸡肉香精香气的影响。结果表明:鸡肉不经加热预处理更有利于水解;优化的酶解条件为采用动物蛋白酶和复合蛋白酶进行质量比1:1复配、总加酶量1.100‰、底物质量比(肉和水的质量比)1:1、酶解温度50℃,采用分步加酶法(先用复合蛋白酶酶解1h后,不灭酶,再用动物蛋白酶酶解2h),水解度可达20.47%。用该酶解液制备的鸡肉香精香气浓郁、仿真度高。

酶解大豆蛋白制备风味增强肽

利用不同蛋白酶酶解大豆蛋白质，大豆蛋白酶解过程中氨基酸的释放规律表明，氨基酸的释放与蛋白酶的种类和酶解时间有关。在酶解产物中，以蛋白酶工酶解产物中鲜味氨基酸和含硫氨基酸含量最高，醇厚感强，更适合于酶解大豆蛋白制备风味基料。通过感官评定比较了酶解液及其Maillard反应产物的呈味差异，发现Maillard产物具有更好的醇厚感和鲜味。分析了酶解液中不同分子量级分Maillard反应产物的呈味特点，发现相对分子质量3000～5000的级分其Maillard产物能够明显地增强风味，包括鲜味、醇厚味以及后味。

低值鱼蛋白酶解产物对酱香型美拉德反应产物风味的影响

本文研究了低值鱼蛋白的不同酶解产物对酱香型美拉德反应产物风味的影响。结果表明:低值鱼蛋白水解液与适当的葡萄糖、木糖和生姜汁等通过美拉德反应不仅可以制备理想的酱香型产物,而且还可完全去除水解液中的鱼腥味;酶解24h的酶解产物获得的美拉德反应产物酱香较浓、风味纯正;美拉德反应后游离氨基酸的损失为9.93%,其中含硫氨基酸半胱氨酸的损失率达75.03%,碱性氨基酸损失率较大,如组氨酸为12.19%,赖氨酸为11.85%,而呈鲜味的天冬氨酸和谷氨酸损失相对比较小;气-质联用色谱仪分析鉴定结果表明,产物中含20种与酱香风味相关的化合物,其中主要由脂肪酸类(特别是乙酸)和少量含氮杂环物质构成的。

超滤对马氏珍珠贝肉蛋白酶解液特性的影响

分别采用凝胶过滤色谱法和高效液相色谱法研究了马氏珍珠贝肉蛋白酶解液超滤前后肽的相对分子质量分布以及氨基酸组成的变化，分析了超滤过程中膜通量及感官特性的变化，并对超滤膜的选择性及分离效果进行了评价．结果表明：随着超滤时间的延长，马氏珍珠贝肉蛋白酶解液膜通量不断减小；透过液的鲜味明显提高，腥味和苦味基本消失；透过液中含有相对分子质量大于截留相对分子质量（5000）的多肽，超滤膜实际有效截留相对分子质量约为7000～8000，相对分子质量小于4500的多肽在透过液中得到有效富集；超滤处理后，透过液肽态氨基酸中鲜味氨基酸占总氨基酸的比例高于原酶解液，而苦味氨基酸和疏水性氨基酸占总氨基酸的比例均低于原酶解液．

复合酶深度酶解牡蛎制备呈味基料的研究

以牡蛎为原料,选用胰蛋白酶和风味蛋白酶组成复合酶对其进行深度酶解,以水解度和感官评分为指标,通过单因素试验考察了胰蛋白酶与风味蛋白酶比例、酶添加量、酶解pH、酶解温度和酶解时间对牡蛎深度酶解的影响,对牡蛎深度酶解工艺进行优化,并对最优酶解条件下获得的牡蛎深度酶解产物的肽分子量分布和氨基酸组成进行分析。研究结果表明:牡蛎深度酶解最优工艺条件为胰蛋白酶与风味蛋白酶质量比为21、蛋白酶添加量0.1%([E]/[S])、酶解pH 7.5、酶解温度60℃、酶解时间24h,该条件下得到的牡蛎深度酶解产物中分子量<3ku的多肽占83.5%,其中含有33.4%的分子量为1~3ku的多肽和50.1%的分子量<1ku的多肽。牡蛎深度酶解产物游离氨基酸中必需氨基酸含量为40.51%,鲜味氨基酸含量为17.50%,甜味氨基酸含量为30.60%。

低值鱼蛋白酶解产物制备不同肉香型热反应物

以低值鱼蛋白酶解液为主要氨基酸来源,通过添加不同来源的动物水解蛋白制备不同肉香风味的美拉德反应物.研究表明：肉酶解液的添加对于肉香的形成具有非常重要的作用, 添加不同的肉酶解液能制备出不同肉香风味的调味料.用小杂鱼酶解液100 mL;肉酶解液10 mL;葡萄糖1.8 g;木糖0.4 g;半胱氨酸盐酸盐0.75 g;维生素B1 0.75 g;生姜汁2 g;调节pH值至6.5～7.0,120 ℃加热40 min能够形成逼真肉香,无鱼腥味的调味料.

不同分子质量段小麦面筋蛋白酶解液对美拉德反应物风味的影响

用超滤法将小麦面筋蛋白酶解液根据分子质量大小分为大于10 ku(M1),5～10 ku(M2),3～5 ku(M3),1～3 ku(M4),小于1 ku(M5)5个组分,研究这5个组分对美拉德反应产物风味的影响。结果表明,美拉德反应产物的主要风味物质是醛类,并且高分子量段美拉德反应产物中高级醛种类较多,而游离氨基酸和小分子寡肽参与美拉德反应主要生成吡嗪类风味物质。分子质量段为3～5 ku(M3)的膜分离组分,其美拉德反应产物鲜味氨基酸含量较高,苦味氨基酸含量较低,鲜味突出,醇厚味明显。

酶法水解鲢鱼蛋白及其水解液合成酱类香味料的研究

以内切酶和外切酶对鲢鱼蛋白进行了分步水解,得到较高水解度的水解蛋白,并以该水解物为原料,利用美拉德反应制取酱类香味料。结果表明,经酶解后的水解液能获得理想的酱类香味料,从而大大提高了水解动物蛋白的使用价值。

预处理对蓝莓NFC果汁品质和风味的影响

为研究预处理对蓝莓NFC果汁品质和风味的影响,以新鲜蓝莓为原料,探讨热水漂烫和酶解前处理对蓝莓果汁感官品质、过氧化物酶(POD)活性、多酚氧化酶(PPO)活性、出汁率、可溶性固形物、花色苷含量、挥发性香气成分的影响。结果表明:热水热烫可使蓝莓PPO、POD活性显著降低,蒸汽热烫可在60 s内使POD残余酶活力降至7.10%,80℃热烫2 min对蓝莓褐变酶活性的钝化效果最佳,花色苷损失较少,色泽较好;优选果胶酶和纤维素酶按4∶1酶解处理,出汁率高达(81.8±1.5)%,可溶性固形物相比对照组显著提高1.4°Brix,花色苷提高1.92倍;酶解后的果汁香气成分增加,酯类含量增加20%,其中乙酸乙酯、异戊酸乙酯和邻苯二甲酸二丁酯含量增加,同时增加了乙酸异戊酯和苯甲酸乙酯新成分,起到增香的效果。

不同酶水解马氏珍珠贝蛋白的特性研究

本研究采用Alcalase 2.4L、Protamex、Papain、PTN6.0S、Flavorzyme 500MG、Neutrase和内源酶水解马氏珍珠贝肉蛋白,探讨了各种酶的酶解特性、产物的氨基酸组成及肽相对分子质量分布规律和呈味特征的差异。结果表明,PTN6.0S酶解产物的蛋白质利用率、肽得率和水解度均较高,而内源酶均最低。各酶解产物中,谷氨酸、精氨酸和天冬氨酸的含量均较高。同一氨基酸在不同酶解产物中回收率存在较大差异,色氨酸、苏氨酸、脯氨酸和天冬氨酸在马氏珍珠贝蛋白酶解产物中主要以多肽的形式存在,各酶解产物中氨基酸的回收率和释放率较高的氨基酸与各酶的主要作用位点有很好的对应关系;各种酶均能不同程度地降解马氏珍珠贝肉蛋白和相对分子质量大于5000Da的肽断。各酶水解产物肽相对分子质量分布差异主要体现在3000以下。在各酶解产物中,Papain酶解产物风味最佳,鲜味最高,苦味和腥味最低。

虾头虾壳蛋白质酶解制备抗氧化肽的研究

以凡纳滨对虾(Penaeus vannamei)虾头、虾壳为原料,碱法提取蛋白质后,采用不同的蛋白酶(胃蛋白酶、胰蛋白酶、碱性蛋白酶、风味蛋白酶、木瓜蛋白酶)酶解,以抗氧化活性和水解度为指标,筛选最佳水解用酶,并对该酶的酶解条件进行优化,对优化所得酶解物的抗氧化活性进行初步研究。结果表明,风味蛋白酶为最佳水解用酶,虾头虾壳蛋白质水解制备抗氧化肽的最佳工艺条件为:温度54℃、时间10.5 h、pH 8、加酶量8 000U·g^(-1),此条件下酶解液11-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基清除率为96.58%,还原力为0.77,水解度为15.62%,氧化自由基吸收能力(ORAC)为15.50μmol·L^(-1)。5 mg·m L^(-1)该酶解物的DPPH自由基清除率为82.09%,相当于相同浓度维生素C(Vc)抗氧化活性的90.50%,0.5 mg·m L^(-1)时ORAC为126.16μmol·L^(-1),相当于相同浓度Vc活性的79.73%。

酶解对热反应番茄牛腩香精风味的影响

以牛肉酶解液为原料,通过热反应制备番茄牛腩风味香精。通过单因素实验和正交实验探讨了不同的酶解工艺对热反应番茄牛腩香精风味的影响,通过感官评价结合酶解液的水解度确定最佳的酶解条件为:风味蛋白酶在牛肉与水质量比为3∶4、加酶量为0.10%、酶解温度45℃、酶解时间3 h、自然pH下酶解牛肉。此时牛肉的水解度可达4.45%。以此制备的番茄牛腩香精风味最好,仿真性高,回味持久。

蚕蛹蛋白酶法水解及美拉德反应改良其产物风味的研究

对多种蛋白酶的酶解效果进行比较,确定了制备酶解脱脂蚕蛹粉短肽和氨基酸的最佳条件,最终确定Alcalase 2.4L和风味蛋白酶的组合为最优方案,酶解液氨基氮含量达到43.17mg/g,总肽氮含量为47.13mg/g,蛋白回收率67.72%,酶解液感官评价值最高。在同等的美拉德反应条件下,Alcalase 2.4L和风味蛋白酶复合酶解的酶解液的香气最为浓郁,腥味被掩盖。