应用NB4细胞株建立SCID beige小鼠急性早幼粒细胞白血病病理模型

目的:本研究旨在建立稳定、有效、重复性好的人急性早幼粒白血病重度联合免疫缺陷(SCID)小鼠移植瘤模型,观察模型的病程特点和生物学行为。方法:将3-5周龄SCID beige小鼠随机分为实验组和对照组;实验组鼠尾静脉注射对数生长期的NB4细胞5×106个/只,动态监测小鼠外周血白细胞数和外周血涂片中人早幼粒细胞阳性率;应用形态学和组织病理学方法确认白血病细胞浸润肝、脾、肺、肾、脑等器官情况,Western blot检测组织中PML-RARa融合蛋白表达情况。结果:接种NB4细胞2周内的实验组SCID小鼠外周血白细胞计数与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05);同时,血涂片姬姆萨染色后镜检未见到NB4细胞;接种第21天和第28天实验组SCID小鼠外周血白细胞计数分别为(4.79±1.13)×109/L和(7.62±2.24)×109/L,显著高于对照组(P<0.05);血涂片吉姆萨染色后可见NB4细胞比例分别占(2.14±0.63)%和(6.6±2.76)%;形态学观察显示,接种21 d后实验组SCID小鼠体内出现单个或多个肿瘤实体包块;同时,组织切片HE染色表明,肝、脾、肺、肾、脑组织均有不同程度的瘤细胞浸润;细胞免疫荧光结果显示,实验组小鼠骨髓细胞CD33表达呈阳性(P<0.05);Western blot数据证实,肝、肾、脑组织中检测到不同水平的PML-RARa融合蛋白表达。结论:SCID小鼠鼠尾静脉注射NB4细胞可成功构建人急性早幼粒细胞白血病小鼠模型,该模型能模拟临床白血病累及骨髓和弥漫生长特点,是研究人类白血病发病机理及实验治疗的良好模型。

应用JAR细胞株建立SCID beige小鼠绒毛膜癌移植瘤病理模型

目的建立稳定有效的绒毛膜癌SCID beige小鼠移植瘤模型,观察模型的病程特点和生物学行为。方法将3-5周龄SCID beige雌性小鼠随机分为实验组和对照组;实验组12只小鼠分为A（皮下移植瘤模型）/B（肺转移瘤模型）两组,分别皮下注射或尾静脉注射JAR细胞5×10^6/只,应用形态学、放射性免疫分析法测定β-HCG、小动物活体成像系统（IVIS）和组织学HE染色方法明确JAR细胞皮下移植瘤及肺转移瘤形成等情况。结果实验组接种28 d后,A组小鼠皮下形成质硬肿瘤结节,HE染色符合绒毛膜癌细胞形态学表现;B组小鼠应用IVIS检测显示体内出现单个或多个肿瘤实体包块,HE染色表明肺组织均有不同程度的瘤细胞浸润。接种第14天,实验组β-HCG水平显著高于对照组（P〈0.05）;其中B组β-HCG水平明显高于A组（P〈0.05）。结论 SCID beige小鼠皮下/尾静脉注射JAR细胞可成功构建人绒毛膜癌移植瘤病理模型,该模型能模拟临床绒毛膜癌上皮性实体瘤特性及肺转移特点,是研究人类绒毛膜癌发病机理及实验治疗的良好模型。

SCIDBeige小鼠繁殖性能、脏器重量、血液生理生化指标和免疫细胞的测定

目的测定SCIDBeige小鼠的繁殖性能、主要脏器重量、血液生理生化指标和免疫细胞比例。方法（1）选取10周龄SCIDBeige小鼠15雌15雄进行配种，测定其繁殖性能；（2）选取4周龄、8周龄和16周龄SCIDBeige小鼠各30只（雌雄各半），称体质量，依次剖取各脏器并称重；（3）使用毛细管眼眶采血，测定血液生理生化指标；（4）利用流式细胞仪检测其T细胞及其亚群、B细胞、NK细胞。结果（1）SCIDBeige小鼠妊娠率、窝产仔数和离乳率随胎次逐渐下降；（2）三个日龄段SCIDBeige小鼠的脾脏重量随日龄的增加而减小，其余脏器重量随日龄的增加而增加，同日龄不同性别间肝脏和心脏重量呈显著性差异，脑重量无显著性差异；（3）SCIDBeige小鼠112日龄雄鼠的白细胞计数（WBC）、红细胞计数（RBC）、血红蛋白（HGB）、血细胞压积（HCT）、淋巴细胞（LYM）及LYM％与同日龄雌鼠和其他日龄小鼠差异明显；（4）SCIDBeige小鼠的CD3＋T细胞、CD4＋T细胞、CD8＋T细胞、CD19B细胞，B220B细胞和NK细胞含量极低，雌鼠T细胞含量低于雄鼠，不同性别间淋巴细胞含量无显著性差异。结论SCIDBeige小鼠表现为T、B、NK细胞联合免疫功能缺陷，且不存在渗漏现象，该小鼠在肿瘤移植的应用方面具有一定优势。

雷公藤红素对人急性早幼粒细胞白血病SCID小鼠移植瘤模型凝血功能的影响

目的观察雷公藤红素对人急性早幼粒细胞白血病重度联合免疫缺陷(SCID)小鼠移植瘤模型凝血功能的影响。方法 SCID beige小鼠30只,将其中20只采用尾静脉注射对数生长期的NB4细胞5×106个/只的方法建立人急性早幼粒细胞白血病SCID小鼠移植瘤模型,并随机均分为模型组和实验组,各10只。另10只不造模作为对照组。3周后实验组腹腔注射雷公藤红素治疗14 d,对照组和模型组腹腔注射生理盐水对照。观察治疗前后3组小鼠外周血涂片中人早幼粒细胞阳性率、外周血白细胞数及凝血指标并统计生存时间。结果实验组治疗后外周血白细胞计数和人早幼粒细胞阳性率较治疗前和模型组降低、生存时间延长(P <0.05);凝血指标中凝血时间(CT)、出血时间(BT)和凝血激活酶时间(APTT)均延长(P <0.05),D-二聚体(DD)、纤维蛋白原(FIB)和内、外源性凝血因子Xa降低(P <0.05),与模型组和治疗前比较差异均有统计学意义。结论雷公藤红素可明显改善人急性早幼粒细胞白血病凝血功能,延长小鼠生存时间。