酶解法与乙醇渗漉法制备颠茄流浸膏的比较研究

目的比较研究酶解法与乙醇渗漉法提取颠茄草有效成分的提取效率。方法采用酶解法对颠茄草进行提取,筛选纤维素酶、淀粉酶、果胶酶和植物提取复合酶,用高效液相色谱法(HPLC)测定颠茄流浸膏中硫酸天仙子胺和东莨菪内酯的含量,以乙醇渗漉法为对照,比较2种方法的提取效果。结果筛选出植物提取复合酶为最适酶,采用植物提取复合酶的酶解法提取硫酸天仙子胺和东莨菪内酯的收率分别为95.57%和94.50%,乙醇渗漉法提取硫酸天仙子胺和东莨菪内酯的收率分别为85.43%和85.98%,酶解法提取收率优于乙醇渗漉法。结论酶解法制备颠茄流浸膏的提取效率优于乙醇渗漉法,且适用于不同产地的颠茄草,可降低成本,对提升颠茄流浸膏的制备工艺有一定价值。

高效液相色谱法应用于消炎镇痛膏中颠茄流浸膏的质量控制

目的:建立高效液相色谱法用于消炎镇痛膏中颠茄流浸膏的质量控制,为科学评价及有效控制消炎镇痛膏中颠茄流浸膏真实投料提供可靠方法。方法:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(Intersil ODS-SP C18色谱柱,柱长为25cm,内径为4.6mm,粒径为5μm);以乙腈为流动相A,以0.4%磷酸溶液为流动相B,进行梯度洗脱;检测波长为344nm;柱温为25℃;流速为每分钟1.0ml。结果:采用高效液相色谱法,能够容易、快速地鉴别消炎镇痛膏中颠茄流浸膏特征性成分。结论:该方法简便、准确、阴性无干扰,可有效地提高消炎镇痛膏质控水平,控制方中颠茄流浸膏真实投料。

颠茄片中非法添加阿托品的快速检查方法

目的:建立能快速检查颠茄片中非法添加阿托品的经济、实用方法,提高颠茄片的质量控制标准。方法:以浓氨溶液-水-丙酮(3∶7∶90)为展开剂,以稀碘化铋钾试液、亚硝酸钠试液为显色剂,运用薄层色谱法对颠茄片进行定性分析。结果:对20余批不同生产企业颠茄片的鉴别检查中,有11批次样品检出非法添加阿托品,鉴别特征明显。结论:该方法专属性强、操作简便,可为颠茄片的质量控制提供依据。

HPLC色谱法测定颠茄浸膏片中硫酸阿托品的含量

目的:建立用高效液相色谱法测定颠茄浸膏片中硫酸阿托品的含量。方法:以乙腈-甲醇-0.006 mol/L庚烷基磺酸钠的0.01 M磷酸盐(磷酸二氢钾-磷酸氢二钾:(1∶1)溶液(25∶10∶65)为流动相;流速为:1.0 mL/min;检测波长为211 nm。结果:线性范围为0.4-2.0μg,r=0.9998;平均回收率为99.45%,RSD%为0.60%。结论:本法简便、准确、灵敏,适用于本制剂质量监控。

仿生胃液对颠茄草中阿托品溶出率影响

目的应用仿生胃液-超声提取颠茄草中阿托品,观察其对溶出率的影响,为颠茄草建立最佳提取方法提供参数。方法用仿生胃液-超声法提取颠茄草,以渗漉提取法和超声提取法作对照,用高效液相色谱法测定各组提取液中阿托品的含量,比较溶出率。结果仿生胃液-超声提取60 min溶出率为2.83 mg·g-1,渗漉提取法溶出率为2.16 mg·g-1,超声提取60 min溶出率为2.14 mg·g-1。结论仿生胃液-超声提取颠茄草,阿托品溶出率分别比渗漉提取法高31.0%、比超声提取法高32.2%,能显著提高颠茄草中阿托品的溶出率。

环境因子及提取方法对颠茄有效成分影响研究综述

颠茄的有效成分主要是莨菪类生物碱,主要用于解痉、镇痛、抑制胃酸过多等病症,本文从不同环境因子(病虫害、海拔、栽培条件、生长环境)及提取方法对颠茄生长和有效成分的影响进行总结,提出颠茄种植时的注意事项、种植环境的选择以及提取颠茄有效成分的方法对比,以期为颠茄的种植及有效成分提取等方面的研究提供参考。

高效液相色谱法同时测定莨菪浸膏片中的4种活性组分

目的建立高效液相色谱法(HPLC)同时测定莨菪浸膏片中东莨菪碱、山莨菪碱、硫酸阿托品和东莨菪内酯的含量。方法采用Welch C1(8150 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,甲醇-0.05%磷酸溶液梯度洗脱,流速1.0 mL/min,进样量20μL,检测波长215 nm。结果4种组分分别在0.501~20.059μg/mL,0.988~19.761μg/mL,0.468~9.361μg/mL和0.502~10.030μg/mL浓度范围内线性关系良好,平均回收率在98.3%~100.0%之间,RSD小于2.8%。结论该方法简单准确,灵敏度高,可用于莨菪浸膏片真伪辨析和质量控制。

复方颠茄氢氧化铝散质量标准提高

目的:对复方颠茄氢氧化铝散质量标准进行提高。方法:采用薄层色谱法对颠茄浸膏进行定性鉴别;采用高效液相色谱法对碳酸氢钠进行含量测定,色谱柱为Merck ZIC~-HILIC(4.6 mm×150 mm,5μm),以0.02 mol·L^(-1)醋酸铵缓冲液(用冰醋酸调节p H至4.8)-乙腈(80∶20)为流动相,用蒸发光散射检测器检测(参考条件:飘移管温度70℃),流量0.5 m L·min^(-1)。结果:薄层色谱鉴别方法斑点清晰,重现性好;Na^+进样量在0.39~3.96μg范围内线性关系良好(r=0.999 8),平均回收率为99.3%(n=9)。结论:所建立的方法简便、准确,可更好地控制该制剂的质量。

颠茄中毒生物检材中莨菪碱微波提取-气质联用检验

利用气相色谱-质谱联用仪建立一种方法,可以有效检验颠茄中毒案件生物检材中莨菪碱。采用超声波提取法速度快的特点解决了莨菪碱在长时间光照条件下消旋变成阿托品造成莨菪碱回收率低的难题;探索一种对莨菪碱检验相适应的气相-质谱条件。得到在生物检材中莨菪碱4ug-200ug/ml范围内与峰面积呈良好线性关系,最低检出限2ug/ml。通过空白添加后微波提取,莨菪碱的回收率超过80%。经过实验验证该方法真实可靠,且灵敏度高,易于操作,能用于颠茄中毒案件生物检材中莨菪碱的检验。

陇马陆胃药片质量标准的改进

目的改进陇马陆胃药片(陇马陆和颠茄浸膏)的质量标准。方法显微鉴别法鉴定陇马陆,TLC法鉴定颠茄浸膏(以硫酸阿托品为指标成分),滴定法对制酸力和钙含有量测定进行改进。结果通过显微鉴别,可鉴别出陇马陆的横纹肌纤维、体壁碎片;TLC斑点清晰;制酸力显色剂改进后与原方法比较,颜色变化明显,终点易判断;钙含有量测定时采用三乙醇胺作为掩蔽剂,以掩蔽镁离子等其他金属离子存在的干扰,并采用钙紫红素指示终点,近终点时显色剂变色灵敏,平均加样回收率100.2%,RSD 1.1%。结论本实验改进了陇马陆胃药片原标准,可用于其质量控制。

基于多成分定量分析结合薄层色谱检查的颠茄流浸膏质量评价

目的建立颠茄流浸膏中同时测定4种指标成分含量的方法,结合薄层色谱检查,为其质量评价提供依据。方法采用HPLC,色谱柱:Agilent Kromesil 100-5 C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为甲醇-0.05%甲酸溶液,梯度洗脱,流速1.0 mL·min^-1,柱温为30℃。采用薄层色谱法进行阿托品检查。结果 4种活性成分东莨菪苷在0.065 76~0.657 6μg(r=1.000 0)、山柰酚-3-O-半乳糖-(6→1)鼠李糖-7-O-葡萄糖苷在0.082 16~0.821 6μg(r=0.999 9)、东莨菪内酯在0.049 84~0.498 4μg(r=1.000 0)和芦丁在0.010 00~0.099 98μg(r=0.999 9)内,均呈良好线性关系;东莨菪苷、山柰酚-3-O-半乳糖-(6→1)鼠李糖-7-O-葡萄糖苷、东莨菪内酯和芦丁的加样回收率分别为100.6%,99.8%,99.9%和97.9%,RSD分别为1.4%,1.6%,1.4%和1.5%。部分批次指标成分含量低且检出硫酸阿托品。结论建立的含量测定方法灵敏度高,结果准确,适用于颠茄流浸膏的质量评价。

酵母提取物对颠茄毛状根氮代谢及次生代谢影响的机制探究

以颠茄毛状根为试验材料,向培养基中添加酵母提取物（yeast extract,YE）,测定颠茄毛状根氮代谢关键酶的活性,各形态氮的含量,次生代谢前体物质含量,次生代谢途径中关键酶基因相对表达量以及主要托品烷类生物碱（tropane alkaloids,TAs）莨菪碱和东莨菪碱的产量,初步探究YE诱导合成颠茄毛状根次生代谢产物的机制。结果表明：较对照组而言,氮代谢关键酶硝酸还原酶（NR）和谷氨酰胺合成酶（GS）活性显著升高,谷氨酸脱氢酶（GDH）活性变化不显著。硝态氮,铵态氮含量显著下降,而可溶性蛋白,游离氨基酸,总氮含量均显著升高。此外,YE处理颠茄毛状根提高了次生代谢途径中的前体氨基酸（鸟氨酸和精氨酸）的含量以及代谢前体腐胺的含量,3个关键酶基因1,4-丁二氨-氮-甲基转移酶基因（putrescine N-methyl transferase,pmt）、托品酮还原酶-Ⅰ基因（tropinone reductase-Ⅰ,tr I）和莨菪碱6-β-羟化酶基因（hyoscyamine 6-β-hydroxylase,h6h）的相对表达量也呈现不同幅度的上升,最终导致莨菪碱和东莨菪碱产量的增多,在处理16 d后分别是对照组的3.09,1.85倍。这说明YE诱导氮代谢关键酶活性升高使氮代谢加速,为次生代谢中含氮化合物的合成提供更多原料,同时通过调控次生代谢途径中关键酶基因的表达,使莨菪碱和东莨菪碱产量提高。