多剂量装双价HPV疫苗中防腐剂含量反相-高效液相色谱法的建立及验证

目的建立反相-高效液相色谱(reverse phase-high-performanceliquidchromatography,RP-HPLC)法检测双价人乳头状瘤病毒(humanpapillomavirus,HPV)疫苗中3种候选防腐剂(尼泊金甲酯、苯甲醇和间甲酚)的含量,并对方法进行验证及初步应用。方法采用WatersAcquityPeptideBEHC18300A(150mm×2.1mm,1.7μm)色谱柱;流动相A(0.1%三氟乙酸水溶液),流动相B(0.1%三氟乙酸乙腈溶液)进行梯度洗脱;流速为0.2mL/min;柱温为40℃,检测波长为254nm。对建立的方法进行专属性、线性、准确性、精密性、稳定性验证,并采用该方法检测含3种防腐剂的双价HPV疫苗中各防腐剂的浓度。结果在选定的条件下,尼泊金甲酯、苯甲醇和间甲酚有不同的出峰时间(分别为14.6、7.2和15.3min),不受样品中其余组分和检测试剂的影响。尼泊金甲酯在0.005%~0.020%范围内线性关系良好(R²=0.9973),平均回收率为99.60%,RSD为2.31%(n=5);苯甲醇在0.1%~0.5%范围内线性关系良好(R²=0.9999),平均回收率为100.46%,RSD为2.70%(n=5);间甲酚在0.4%~2.0%范围内线性关系良好(R^(2)=0.9994),平均回收率为100.12%,RSD为0.74%(n=5)。尼泊金甲酯和间甲酚于2~8℃放置3d,苯甲醇放置2d,检测结果的RSD均<5%,稳定性良好。使用建立的方法检测HPV双价疫苗样品中的3种防腐剂浓度,均满足±20%的误差范围内。结论建立的RP-HPLC法操作简便,专属性强,准确性、精密性、稳定性良好,能有效对双价HPV疫苗中尼泊金甲酯、苯甲醇和间甲酚3种防腐剂进行检测和质控。

10岁学龄儿童尿中对羟基苯甲酸酯浓度与肥胖的关系

[背景]对羟基苯甲酸酯(PBs)是一类广泛使用的防腐剂,作为新型环境内分泌干扰物,具有一定生殖毒性和发育毒性,被怀疑为环境致肥因子。[目的]评估10岁学龄儿童尿中5种PBs暴露负荷及其与肥胖指标的关联。[方法]以“射阳小型出生队列”参与10岁随访的471名儿童作为研究对象。问卷调查儿童的人口学信息、运动情况、膳食摄入等信息,采集儿童尿样并测量儿童身高、体重和腰围等体格指标,计算经年龄性别校正的体重指数Z评分(BMI-Z评分)。应用气相色谱-串联质谱法(GC-MS/MS)测定儿童尿样中对羟基苯甲酸甲酯(MeP)、对羟基苯甲酸乙酯(EtP)、对羟基苯甲酸丙酯(PrP)、对羟基苯甲酸丁酯(BuP)和对羟基苯甲酸苄酯(BzP)5种PBs浓度。采用广义线性模型(GLM)和贝叶斯核函数回归模型(BKMR)分别分析PBs单一/混合暴露与儿童BMI-Z评分和腰围的关联。[结果]儿童尿中5种PBs检出率范围为78.98%~98.94%,浓度几何均值范围为0.31~5.43μg·L^(-1)。10岁儿童BMI-Z评分和腰围的均值(标准差)分别为0.56(1.40)和67.62(10.07)cm。GLM结果显示儿童尿中BzP浓度与其腰围(b=–0.08,95%CI:–0.14~–0.02,P=0.01)呈负相关。性别分层分析发现,男童尿中BzP分别与BMI-Z评分(b=–0.59,95%CI:–0.88~–0.30,P<0.001)以及腰围(b=–0.80,95%CI:–1.23~–0.37,P<0.001)呈负相关;未在女童中观察到显著关联。BKMR结果同样发现儿童尿中BzP浓度与其BMI-Z评分和腰围呈负相关,与GLM结果具有一致性。[结论]本研究发现PBs在研究地区10岁儿童体内暴露普遍,PBs暴露对10岁儿童肥胖指标存在潜在影响并具有性别差异。