1,25(OH)_(2)D_(3)及VDR敲除对山羊附睾头上皮细胞β防御素家族表达的影响

旨在研究1,25(OH)_(2)D_(3)是否通过VDR途径调节山羊附睾头上皮细胞β防御素基因表达。本试验选取3只6月龄太行黑山羊,分别采集附睾头组织。采用差速贴壁法分离山羊附睾头上皮细胞,用细胞免疫荧光鉴定上皮细胞纯度。添加100 nmol·L^(-1)1,25(OH)_(2)D_(3)处理附睾头上皮细胞以及筛选出敲除效率最高的pCas9/gRNA1质粒载体进行细胞转染,同时设置阴性对照组和空白对照组,每组3个重复孔。附睾头上皮细胞经1,25(OH)_(2)D_(3)处理以及VDR基因敲除后,分别用qRT-PCR检测VDR和17种β防御素基因的表达,用Western blot检测VDR蛋白和3种β防御素蛋白的表达。结果表明,1,25(OH)_(2)D_(3)能极显著提高VDR、gBD124、gBD126和gBD104a的mRNA和蛋白表达(P<0.01),同时极显著提高gBD104、gBD 109tr1、gBD 109tr2、gBD113、gBD116、gBD120、gBD 121以及gBD 123基因的表达(P<0.01),显著提高gBD106、gBD127、gBD 129以及gBD 134基因的表达(P<0.05),而对gBD 110like和gBD 128基因没有显著影响(P>0.05);3个基因敲除载体进行细胞转染后,pCas9-VDR-V1组VDR蛋白表达极显著降低(P<0.01)。VDR基因敲除极显著降低gBD124的mRNA和蛋白表达(P<0.01),显著降低gBD126和gBD104a的mRNA和蛋白表达(P<0.05),同时VDR基因敲除组gBD 109tr1、gBD 109tr2、gBD116、gBD123、gBD127、gBD 128以及gBD 134基因的表达极显著低于其他组(P<0.01),VDR基因敲除组gBD104、gBD106、gBD 120以及gBD 129基因的表达显著低于其他组(P<0.05),而对gBD121、gBD 110like以及gBD 113的相对表达则无显著影响(P>0.05)。综上所述,1,25(OH)_(2)D_(3)可以上调VDR和部分β防御素表达;VDR基因敲除后降低部分β防御素表达,结果表明1,25(OH)_(2)D_(3)通过上调VD/VDR信号通路关键基因VDR的表达调控山羊附睾头上皮细胞部分β防御素表达。

泛癌分析揭示SREK1在低级别胶质瘤中促进CD274表达

目的剪接调节谷氨酸和富赖氨酸的蛋白质1(SREK1)在多种肿瘤中的泛癌分析,揭示SREK1在泛癌中的作用。方法利用在线数据库GEPIA 2、TIMER 2.0、TISIDB和cBioPortal分析SREK1表达对肿瘤患者预后的影响、在低级别胶质瘤(LGG)肿瘤组织中的表达、遗传变异的特征及其表达对肿瘤组织中免疫细胞的浸润和免疫—肿瘤靶基因的相关性分析。结果LGG肿瘤组织中,SREK1表达与记忆B细胞、活化的CD4+T细胞、Th2细胞、中性粒细胞、NKT细胞以及单核细胞和CD56dimNK细胞的浸润存在相关性(P均<0.05)。SREK1与免疫—肿瘤靶基因如信号传导及转录激活蛋白3(STAT3)、Ⅰ型干扰素受体1(IFNAR1)、核受体亚家族3C组成员1(NR3C1)和表皮生长因子受体(EGFR)、表面抗原分化簇274(CD274)等表达在LGG中均呈正相关(P均<0.05)。结论SREK1是LGG患者的危险因子之一,可能通过促进CD274的表达来加剧LGG的进展。

β_3肾上腺素能受体基因Trp64Arg多态性与蒙古族原发性高血压病相关性分析

目的检测蒙古族原发性高血压人群中β3肾上腺素能受体基因Trp64Arg多态性,探讨其与蒙古族人群原发性高血压病(EH)和其他心血管病危险因素的关系。方法应用PCR技术检测原发性高血压病患者102例,健康体检者93例。比较两组Trp64Arg突变基因型和临床特征。结果高血压病组与对照组β3-AR基因突变频率两者差异无统计学意义(P>0.05),基因Trp64Arg突变者的体质量指数显著高于正常基因型(P<0.05),突变者在三酰甘油、血糖、胰岛素、尿酸方面差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Trp64Arg基因突变可能不是蒙古族原发性高血压病发生的决定因素,但该基因变异可能与肥胖、脂代谢、糖代谢等危险因素有关。

β_3-肾上腺素能受体基因与2型糖尿病关系的研究

目的 探讨 β3 -肾上腺素能受体 (β3 -AR)基因Trp64Arg突变与 2型糖尿病 (NIDDM )有无关联。 方法 对130例糖尿病患者和 130例健康对照者 ,采用聚合酶链反应 -限制性酶切酶片段长度多态性技术检测 β3 -AR基因型 ,并测定BMI、WHR、血压、TC、TG、HDL -C、载脂蛋白A、载脂蛋白B和Lp(a)。结果 (1)糖尿病病例组β3 -ARArg等位基因频率 (14 7% )略高于对照组 (14 2 % ) ,两组基因型和等位基因频率分布差异无显著性 (P >0 0 5 )。 (2 )糖尿病病例组中Trp64Arg与BMI相关。女性糖尿病人群中 ,肥胖与体重正常者Arg64等位基因频率分别为 19 8%和 5 7% ,该突变与BMI呈显著正相关 (P =0 0 10 )。结论 2型糖尿病 (NIDDM)患者β3

β_3-肾上腺素能受体基因与肥胖关系

目的 探讨β3-肾上腺素能受体 (β3- AR)基因 Trp6 4Arg突变与肥胖的关系。方法 采用聚合酶链反应 -限制性酶切片段长度多态性技术检测β3- AR基因型 ;同时检查体质指数 (BMI)等指标 ,观察在 147例肥胖患者和 10 6例健康对照者中 ,β3- AR基因型与 Arg6 4等位基因的频率分布以及不同体质指数的人群中 ,其突变基因的分布情况。结果 肥胖组 Arg6 4等位基因的频率(2 0 .3% )显著高于对照组 (10 .2 % ) (χ2 =10 .14,P =0 .0 0 1) ,突变基因型 Trp6 4Arg、Arg6 4Arg的分布频率 (38.7%和 0 .9% )也高于对照组 (19.0 %和 0 .7% )。在女性人群中 ,肥胖者 Trp6 4Arg基因型及 Arg6 4等位基因频率 (4 0 .6 %和 2 0 .3% )显著高于非肥胖者 (16 .7%和 9.5 % ) ,且差异有显著性 (P <0 .0 1)。结论 β3-肾上腺素能受体基因 Trp6

β_3-肾上腺素受体基因多态性与冠心病支架植入术后再狭窄相关性研究

目的探讨β3-肾上腺素受体基因多态性与冠心病支架植入术(PCI)后支架内再狭窄的相关性。方法 2003—2009年我院冠心病PCI术后患者经造影复查证实支架内再狭窄者(再狭窄组)41例,再选取经造影复查无支架内再狭窄者(非再狭窄组)50例,采用聚合酶链反应-限制片段长度多态性技术对β3-肾上腺素受体基因Trp64Arg多态性位点基因型进行检测,比较两组患者基因型分布及等位基因有无差异。结果非再狭窄组患者基因型分布及等位基因频率与再狭窄组比较,差异均无统计学意义(P>0.05),多因素Logistic回归分析显示PCI术后冠状动脉再狭窄与高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的偏回归系数为-1.452(P<0.05),相对危险度为0.234〔95%可信区间(0.06,0.99)〕。结论β3-肾上腺素受体基因多态性与冠心病PCI术后支架内再狭窄无关,HDL-C是冠状动脉再狭窄的独立保护因素。

肾上腺素β3受体基因W64R多态性与苯那普利疗效之间的关系

目的 探讨肾上腺素β3受体基因W6 4R多态性与原发性高血压患者苯那普利降压疗效之间是否存在相关性。方法 在安徽省安庆及霍邱地区人群中筛选原发性高血压患者 1170名 ,所有患者予苯那普利 10mg每日一次口服 15d ,测定其用药前后的血压 ,并进行肾上腺素 β3受体基因W6 4R基因型测定 ,观察其血压下降情况与基因型的关系。结果 (1)在中国南方汉族原发性高血压患者中 ,ADRβ3W6 4R多态性位点的基因型频率是 :WW基因型 72 .8%、WR基因型 2 5 .4 %、RR基因型 1.8%。 (2 )苯那普利 10mg每日一次口服 15d ,女性患者收缩压下降水平在ADRβ3W6 4R多态性位点各基因型之间差异具显著性 ,WR RR基因型者比WW基因型者收缩压下降少3.4 9mmHg(P =0 .0 3)。 (3)药物治疗 15d后女性患者第 16天收缩压降至 14 0mmHg以下、舒张压降至 90mmHg以下或下降幅度≥ 15 %的达标率 ,WR RR基因型低于WW基因型 (OR =0 .6 5 ,P <0 .0 5 )。结论 在女性原发性高血压患者肾上腺素 β3受体基因W6 4R多态性与原发性高血压患者苯那普利降压疗效之间存在相关性 ,可能为预测苯那普利降压疗效的一个预报因子 ,指导临床用药。

5岁以下喘息患儿ADRβ2、ORMDL3基因SNP与API的相关性研究

目的探讨肾上腺素能受体β2(ADRβ2)、血清类黏蛋白1样蛋白3(ORMDL3)基因单核苷酸多态性(SNP)与哮喘预测指数(API)阳性婴幼儿喘息的相关性。方法将124例5岁以下喘息患儿分为API阳性组(66例)与API阴性组(58例)。选取儿童哮喘易感基因SNP位点:ADRβ2 R16G、ORMDL3 rs12603332,采用TaqMan探针法对2组患儿进行基因分型,分别比较上述SNP位点在2组间的分布差异。结果ORMDL3 rs12603332基因型在API阳性组与API阴性组之间的分布差异无统计学意义(χ^(2)=2.524,P>0.05)。ADRβ2 R16G基因型在API阳性组以AA占比最高,AG次之,GG最少;在API阴性组以AG占比最高,GG次之,AA最少;API阳性组AA占比高于API阴性组(χ^(2)=25.358,P<0.05)。ADRβ2基因型AG和GG是API阳性的保护因素,与AA比较,AG、GG是API阳性的概率分别为18.8%和6.4%。结论ADRβ2 R16G基因型分布在API阳性与阴性的5岁以下喘息患儿中存在差异,携带基因型AA的喘息患儿或更具进展为哮喘的危险性。ADRβ2或可联合API作为预测儿童哮喘的临床指标。ORMDL3 rs12603332基因型或与API预测哮喘发生无一致性。

β3-肾上腺能受体基因Trp64Arg突变对中国人体脂、血糖与血脂水平、胰岛素分泌及作用的影响

目的明确β３－肾上腺能受体（ＡＤＲＢ３）基因Ｔｒｐ６４Ａｒｇ突变对中国人体脂含量与分布、血糖脂水平、胰岛素分泌及作用有无影响。方法在３０８例中国人［非糖尿病（ＮＤ）１６１例，２型糖尿病（ＤＭ）１４７例］中检测ＡＤＲＢ３基因Ｔｒｐ６４Ａｒｇ突变基因型，并测体块指数（ＢＭＩ）、理想体重百分数（ＰＤＷ）、葡萄糖兴奋前后血糖、胰岛素、Ｃ肽、游离脂肪酸以及空腹血脂谱和血压。结果（１）中国人ＡＤＲＢ３基因Ｔｒｐ６４Ａｒｇ突变中Ａｒｇ６４等位基因频率与日本人相近，略高于高加索人。（２）ＮＤ组中Ｔｒｐ６４Ａｒｇ突变与各临床情况变异均无相关。（３）ＤＭ者中Ｔｒｐ６４Ａｒｇ突变与ＢＭＩ（Ｐ＝０．０１９）、ＰＤＷ（Ｐ＝０．００１）、腰围（Ｐ＝０．０４５）相关。在女性ＤＭ中，该突变与ＢＭＩ（Ｐ＝０．００１）、ＰＤＷ（Ｐ＝０．００１）、腰围（Ｐ＝０．０２３）相关更明显，尚与腹部及皮下脂肪面积（Ｐ＝０．０３２及Ｐ＝０．０２３）相关。女性ＤＭ伴肥胖、超重及体重正常者中Ａｒｇ６４等位基因频率分别为２１％、１４％及４％（Ｐ＝０．０２６）。Ｌｏｇｉｓｔｉｃ回归分析表明，与Ｔｒｇ６４Ａｒｇ突变唯一独立相关的临床变量是ＢＭＩ（Ｐ＝０．００２７）。?

中国人群β_3肾上腺素能受体基因Trp64Arg突变与冠心病关系的研究

目的 研究中国人群 β3肾上腺素能受体 (β3AR)基因Trp64Arg突变频率以及该突变对冠心病患者临床特征的影响。方法 应用PCR/RFLP技术检测 2 52例中国人 (健康体检者 1 2 0例 ,冠心病患者 1 32例 )的 β3AR基因Trp64Arg突变基因型 ,并比较两组的临床特征。结果 (1 )冠心病组与对照组 β3AR基因Trp64Arg突变频率分别为 1 5 9%与 1 6 7% ,两者差异无显著性 (P >0 0 5)。β3AR基因Trp64Arg突变者的体重指数显著高于正常基因型 (P <0 0 5)。 (2 )突变与否间的临床特征差异无显著性 (P >0 0 5)。结论 β3AR基因突变杂合子型 (Trp/Arg)可能不是冠心病发生的决定因素。但Trp/Arg杂合子与Trp/Trp纯合子人群间体重指数差异有显著性 。

β3肾上腺素能受体基因多态性与糖尿病足的相关性研究

目的 探讨中国人群β3肾上腺素能受体（β3-AR）基因Trp64Arg突变与糖尿病足的关系.方法 应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）方法检测110例2型糖尿病患者（T2DM组）[其中糖尿病足患者58例（DFU组）,单纯2型糖尿病患者52例（N-DFU组）]和42例正常人（正常对照组）β3-AR基因的Trp64Arg突变,比较各组的基因型（TT型,TA型或AA型）和基因频率（T或A）；并进行人体测量学和代谢指标的检测.结果 （1）β3-AR基因Trp64Arg基因型频率符合Hardy-Weinberg平衡定律,T2DM组β-AR基因64位Arg突变患者,其体重指数和稳态模型评估-胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）显著高于无突变组（P=0.007 2,P=0.038 6）.（2）在T2DM组,Arg64携带者血高密度脂蛋白-胆固醇水平明显低于非携带者（P =0.047 5）.（3）DFU组Arg64等位基因频率明显高于N-DFU组（x2=5.147,P＜0.05）,而T2DM组与正常对照组β3-AR基因型及等位基因频率无统计学意义（x2=0.067,P ＞0.05）.结论 β3-AR基因多态性与糖尿病足存在相关性,Ar64等位基因可能是糖尿病足的危险因素之一.