水飞蓟素通过调控miR-124-3p/WEE1轴影响胶质瘤细胞恶性生长的机制研究

目的探讨水飞蓟素(SM)对胶质瘤细胞恶性生长的影响以及对miR-124-3p/WEE1轴的调控机制。方法将胶质瘤U87细胞分为对照组,SM低、中、高浓度组,SM高浓度+miR-124-3p抑制剂组(SM高+miR-124-3p inhibitor组)。采用CCK-8法检测细胞增殖活性,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,流式细胞术检测细胞周期变化,Western blotting检测细胞中细胞周期蛋白D1(cyclin D1)及凋亡相关蛋白的表达,实时定量PCR检测细胞中miR-124-3p和WEE1 mRNA水平,荧光素酶活性实验验证miR-124-3p和WEE1之间的靶向关系,建立NOD/SCID小鼠颅内移植瘤模型并进行给药和分析。结果与对照组比较,不同浓度SM处理组的细胞增殖活性、迁移和侵袭细胞数、cyclin D1蛋白表达、WEE1 mRNA表达水平降低,G0/G1周期细胞数、cleaved caspase-8、cleaved caspase-9、cleaved caspase-3及miR-124-3p表达升高(P<0.05);进一步转染miR-124-3p inhibitor后发现,SM对胶质瘤细胞恶性行为的抑制作用被逆转。小鼠体内实验显示,SM处理组肿瘤的质量和体积均低于模型组(P<0.05),且小鼠体质量无显著变化(P>0.05)。结论SM可通过上调miR-124-3p靶向下调WEE1抑制胶质瘤细胞的恶性生长。

miR-124通过抑制TLR4/NF-κB/CCL2对脑梗死大鼠神经元凋亡的影响

目的探讨微小RNA(miR)-124通过抑制Toll样受体(TLR)4/核因子(NF)-κB/CC类趋化因子配体(CCL)2对脑梗死(CI)大鼠神经元凋亡的影响。方法通过线栓闭塞大脑中动脉法建立CI大鼠模型60只,以随机数表法平均分为5组:模型组、miR-124激活剂(miR-124 agomir)组、TLR4过表达质粒组、miR-124 agomir阴性对照+空载质粒组、miR-124 agomir+TLR4过表达质粒组,另取12只大鼠只分离颈动脉,作为假手术组。分组干预后,评测大鼠神经功能缺损情况,比较各组神经功能缺损评分;采用三苯基氯化四氮唑(TTC)染色检测大鼠CI情况,比较各组CI面积;采用TUNEL染色检测海马神经元凋亡情况,比较各组海马神经元凋亡率;采用试剂盒测量各组血清活性氧(ROS)及炎症因子环氧合酶(COX)-2、白细胞介素(IL)-17水平;采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)实验检测各组脑组织miR-124表达;采用Western印迹实验检测各组脑组织凋亡及TLR4/NF-κB/CCL2通路蛋白表达。结果与假手术组比较,模型组、miR-124 agomir阴性对照+空载质粒组、miR-124 agomir+TLR4过表达质粒组脑组织miR-124与B淋巴细胞瘤-2蛋白(Bcl-2)蛋白表达水平显著降低(P<0.05),神经功能缺损评分、CI面积、海马神经元凋亡率、血清ROS及炎症因子COX-2、IL-17水平、脑组织Bcl-2相关X蛋白(Bax)、TLR4、核内NF-κB p65、CCL2蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。与模型组、miR-124 agomir+TLR4过表达质粒组分别比较,miR-124 agomir组脑组织miR-124与Bcl-2蛋白表达水平均显著升高(P<0.05),神经功能缺损评分、CI面积、海马神经元凋亡率、血清ROS及炎症因子COX-2、IL-17水平、脑组织Bax、TLR4、核内NF-κB p65、CCL2蛋白表达水平均显著降低(P<0.05),而TLR4过表达质粒组脑组织miR-124与Bcl-2蛋白表达水平均显著降低(P<0.05),神经功能缺损评分、CI面积、海马神经元凋亡率、血清ROS及炎症因子COX-2、IL-17水平、脑组织Bax、TLR4、核内NF-κB p65、CCL2蛋白表达水平均显著升高(P<0.05)。与模型组相比,miR-124 agomir阴性对照+空载质粒组各指标水平无显著变化(P>0.05)。结论miR-124可通过下调TLR4/NF-κB/CCL2通路蛋白表达,抑制炎症,减轻脑组织梗死及海马神经元凋亡,修复CI大鼠神经功能。

二甲双胍联合炔雌醇环丙孕酮片对多囊卵巢综合征患者血清miR-124及Th1/Th2细胞因子平衡偏移的影响

目的探讨二甲双胍联合炔雌醇环丙孕酮片对多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)患者血清miR-124水平及Th1/Th2细胞因子平衡偏移的影响。方法纳入2022年1月至2023年2月在攀枝花市妇幼保健院接受治疗的200例PCOS患者,分为观察组(n=100)和对照组(n=100);观察组给予二甲双胍联合炔雌醇环丙孕酮片治疗,对照组给予炔雌醇环丙孕酮片治疗,连续治疗3个月;收集两组患者临床资料,治疗前后血脂[总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)]水平、空腹血糖(fasting plasma glucose,FPG)、空腹血清胰岛素(fins insulin,FINS)水平及胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);检测血清miR-124、白细胞介素(IL)-2、IL-6、γ干扰素(interferon-γ,INF-γ)。结果治疗后观察组TG、TC、LDL-C水平显著降低(P<0.05);治疗后观察组TG、TC、LDL-C水平低于对照组(P<0.05);治疗前两组患者FPG、FINS、HOMA-IR比较差异无统计学意义(P>0.05),治疗后观察组FPG、FINS、HOMA-IR水平显著降低(P<0.05);且治疗后观察组FPG、FINS、HOMA-IR水平低于对照组(P<0.05);治疗前两组患者IL-2、IL-6、INF-γ及miR-124水平比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗后观察组IL-6、INF-γ水平低于治疗前,IL-2、miR-124水平高于治疗前(P<0.05);治疗后观察组IL-6、INF-γ水平低于对照组,IL-2、miR-124水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论二甲双胍联合炔雌醇环丙孕酮片能够明显改善PCOS患者胰岛素抵抗,调节糖脂代谢,改善Th1/Th2细胞因子平衡偏移状态。

Ku70作为RNA解旋酶调节miR-124的加工成熟及神经细胞的分化

目的Ku70蛋白主要通过其DNA结合特性参与双链DNA断裂(DSB)的非同源端连接(NHEJ)修复,有报道称其具有RNA结合功能,本文探索Ku70是否具有RNA解旋酶活性并影响miRNA加工成熟。方法利用RNA免疫共沉淀(RIP)测序结合生物信息学分析Ku蛋白结合的RNA;蛋白质印迹法(Western blot,WB)结合定量反转录PCR(qRTPCR)检测Ku蛋白与miRNAs的表达关系;生物膜干涉技术(BLI)实验分析Ku蛋白与RNA的结合能力;电泳迁移率变动分析(EMSA)实验确定Ku70及Ku80的RNA解旋酶活性;形态学检测结合WB分析Ku70调节miR-124引起的神经细胞功能变化;免疫荧光结合形态学分析寨卡病毒(ZIKV)感染后Ku70及miR-124的变化与神经元分化关联。结果研究发现,Ku70蛋白具有RNA解旋酶活性,并通过其RNA解旋酶活性影响miRNA加工成熟。Ku70缺失引起许多miRNAs上调,其中包括神经细胞特异的miR-124。在人神经前体细胞(h NPCs)和人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)中敲低Ku70可促进miR-124的成熟,从而导致上述细胞向神经元分化。本文进一步发现,ZIKV感染影响了Ku70及miR-124的表达,导致细胞形态的分化。结论本研究揭示了Ku70的一种新功能,即Ku70有可能参与miRNA的成熟调控和神经细胞的分化,并且可能是ZIKV病毒致小头症的原因之一。

microRNA-124在阿尔兹海默症中的作用及针刺干预研究进展

阿尔兹海默症(AD)是老年人常见的神经退行性疾病。目前认为AD的病因大多与大脑中β-淀粉样蛋白(Aβ)的异常沉积、相关蛋白Tau的过度磷酸化以及各种细胞因子、补体的释放有关。microRNA-124在中枢神经系统中高度表达,与许多神经生理和病理过程相关。microRNA-124通过Aβ沉积、Tau蛋白过度磷酸化、神经炎症、氧化应激、神经元兴奋性和神经分化等多种方式在AD中发挥作用。它还可能通过调节细胞凋亡对突触可塑性和轴突生长产生不利影响,进而影响AD。因此,探讨microRNA-124在AD中的表达变化以及靶向治疗至关重要。针刺治疗AD疗效明确,可能与microRNA-124调控相关。文章就AD所具有的几个典型组织病理学特征与microRNA-124的相关性进行综述,包括老年斑中Aβ的积累、Tau过度磷酸化、神经炎症和突触丧失。综述了microRNA-124通过靶向不同的基因与调节下游信号在AD中发挥作用,以及针刺治疗AD的可能干预机制,为未来治疗提供新思路。

LINC00240调节miR-124-3p/UHRF1轴对食管癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的探讨LINC00240调节miR-124-3p/环指域泛素样蛋白1(UHRF1)轴对食管癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法qRT-PCR检测食管鳞状癌(ESCC)组织与癌旁组织,ESCC细胞系(ECA109、TE-13、EC9706和KYSE-150)与正常食管上皮HET-1A细胞中LINC00240、miR-124-3p、UHRF1 mRNA表达水平;以ECA109细胞为研究对象,分组分别为shRNA-NC组(转染shRNA阴性对照)、sh-LINC00240组(转染LINC00240 shRNA)、sh-LINC00240+miR-124-3p-inhibitor组(共转染sh-LINC00240与miR-124-3p-inhibitor)、sh-LINC00240+inhibitor-NC组(共转染sh-LINC00240与inhibitor-NC),并以未经处理的ECA109细胞为对照组,Western Blot检测P21、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、UHRF1蛋白表达;CCK-8检测细胞增殖;Transwell检测细胞侵袭及迁移;双荧光素酶验证miR-124-3p与LINC00240、UHRF1关系。通过裸鼠注射ECA109细胞建立裸鼠移植瘤实验,单细胞悬液(4×10^(6)细胞/ml)用一次性无菌注射器皮下注射到裸鼠背部,并依次分为模型组、NC组、干扰LINC00240组,分离肿瘤,分析肿瘤质量及成瘤个数。结果ESCC组织及细胞中LINC00240、UHRF1 mRNA表达显著增加,miR-124-3p表达显著降低(P<0.05)。sh-LINC00240组增殖率、侵袭与迁移数、LINC00240、MMP-2、UHRF1 mRNA及蛋白表达较对照组、shRNA-NC组显著降低,P21、miR-124-3p表达显著增加(P<0.05);sh-LINC00240+miR-124-3p-inhibitor组增殖率、侵袭与迁移数、MMP-2、UHRF1 mRNA及蛋白表达较sh-LINC00240+inhibitor-NC组显著增加,P21、miR-124-3p表达显著降低(P<0.05),LINC00240表达差异无统计意义(P>0.05)。miR-124-3p与LINC00240、UHRF1具有靶向关系。干扰LINC00240组较模型组、NC组肿瘤质量、成瘤个数显著减少(P<0.05)。结论干扰LINC00240可抑制食管癌细胞增殖、迁移和侵袭,可能与上调miR-124-3p/UHRF1轴有关。

miR-124在抑郁症中的作用机制

抑郁症是世界范围内最常见的精神疾病之一,发病机制复杂,研究仍处于探索阶段。微RNA(miRNA)作为表观遗传机制的重要调控因子,在抑郁症的发生发展中起着重要作用。miR-124是神经系统中表达最丰富的miRNA之一,参与了神经元分化、小胶质细胞激活等生物事件。近年研究表明,miR-124在抑郁症患者和动物模型中表达异常,并参与了病理生理机制。然而,miR-124的表达异常情况及其相关机制的研究结果是较复杂的、甚至矛盾的。故本文对此进行梳理,总结了miR-124在抑郁症中的研究进展。

miR-124在常见神经退行性疾病中的作用

miR-124作为脑内占比较高的miRNA,广泛参与中枢神经系统生理和病理过程。近期研究发现,miR-124通过靶向调节神经退行性疾病相关的信号通路和蛋白参与阿尔茨海默病和帕金森病的病理过程。因此,本文综述了miR-124在常见神经退行性疾病中作用的研究进展,旨在为神经退行性疾病机制研究提供参考,为药物治疗靶点提供新思路。

新生儿缺氧缺血性脑病血清miR-124与miR-126的表达及临床意义

目的探讨新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)血清微小核糖核酸(miR)-124、miR-126的表达及临床意义。方法选取2019-01—2023-02湘南学院附属医院收治的92例HIE患儿为HIE组,根据病情严重程度分为轻度组44例,中度组27例,重度组21例,另选取同期31名健康新生儿为对照组。采用Spearman相关性分析HIE患儿血清miR-124、miR-126表达与S100B、NSE水平的相关性,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-124、miR-126水平对新生儿HIE的诊断价值。结果与对照组比较,HIE组血清miR-124、miR-126表达降低,S100钙结合蛋白B(S100B)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)水平升高(P<0.05)。轻度组、中度组、重度组血清miR-124、miR-126表达依次降低,S100B、NSE水平依次升高(P<0.05)。Spearman相关性分析显示,HIE患儿血清miR-124、miR-126表达与S100B、NSE水平呈负相关(rs=—0.757、—0.781、—0.800、—0.785,P<0.001)。ROC曲线分析显示,血清miR-124、miR-126表达单独和联合诊断新生儿HIE的曲线下面积分别为0.872、0.882、0.946。结论新生儿HIE血清miR-124、miR-126低表达,可能通过神经细胞损伤参与新生儿HIE过程,血清miR-124、miR-126表达联合诊断新生儿HIE的价值较高。

不同认知障碍程度和疗效青少年抑郁症患者miR-381-3p、miR-124检测的临床意义

目的探讨不同认知障碍程度和疗效的青少年抑郁症患者miR-381-3p、miR-124检测的临床意义。方法选取2020年1月至2022年4月绍兴市第七人民医院收治的86例青少年抑郁症患者为研究对象,其中存在认知障碍31例,包括轻度14例、中度12例和重度5例;无认知障碍55例。所有患者接受心理干预、认知疗法、重复经颅磁刺激疗法联合草酸艾司西酞普兰、奥氮平口服治疗3个月,治疗前采用简易精神状态检查量表评估认知障碍程度,并检测miR-381-3p、miR-124相对表达量;治疗3个月后采用汉密尔顿焦虑量表和汉密尔顿抑郁量表评估疗效。比较认知障碍组与无认知障碍组、不同程度认知障碍以及不同疗效患者miR-381-3p、miR-124相对表达量,采用ROC曲线分析miR-381-3p、miR-124单独或联合检测对临床疗效的预测效能。结果认知障碍组患者miR-381-3p相对表达量明显低于无认知障碍组(P<0.05),miR-124相对表达量则明显高于无认知障碍组(P<0.05)。不同程度认知障碍患者miR-381-3p、miR-124相对表达量比较,差异均有统计学意义(均P<0.05),其中miR-381-3p相对表达量为轻度>中度>重度(均P<0.05),miR-124相对表达量为重度>中度>轻度(均P<0.05)。治疗3个月后疗效良好66例,疗效不佳20例。疗效不佳组miR-381-3p相对表达量明显低于疗效良好组(P<0.05),miR-124相对表达量则明显高于疗效良好组(P<0.05)。miR-381-3p、miR-124单独预测患者临床疗效的AUC分别为0.719、0.695,两者联合预测的AUC为0.782,两者联合检测的效能明显高于单独检测(均P<0.05)。结论miR-381-3p与miR-124联合检测有助于青少年抑郁症患者认知障碍严重程度的评估和临床疗效预测。

过表达miR-124-1基因的骨髓间充质干细胞外泌体调控小胶质细胞M2型极化对脑卒中的影响

目的探讨骨髓间充质干细胞(bone marrow derived mesenchymal stem cells,BMMSCs)外泌体(exosomes,Exo)过表达miR-124-1基因(Exo/124-1)调控小胶质细胞(microglia,MG)的M2型极化对脑卒中的影响。方法分离培养大鼠BMMSCs,收集其Exo(BMMSCs-Exo),采用流式细胞术、Western blot与透射电子显微镜(transmission electron microscope,TEM)分别对其进行检测鉴定。30只大鼠简单随机分为假手术组(Sham组)、模型组(MCAO/R组)、Exo移植组(Exo组)、空病毒(Empty lentivirus,Elv)转染Exo移植组(Exo-Elv组)及Exo/124-1移植组(Exo/124-1组),每组6只。Sham组仅行假手术,其余各组均复制大脑中动脉栓塞/再灌注(middle cerebral artery occlusion and reperfusion,MCAO/R)模型。模型复制1 d与14 d后,各移植组动物于右侧脑室植入相应移植物,Sham组、模型组注入相同剂量生理盐水作对照。术后2 h及1、3、7、14、21、28 d,分别对各组动物行改良神经系统严重程度评分(modified neurological severity scores,mNSS)。三苯基四氮唑(triphenyl tetrazolium chloride,TTC)染色检测其梗死体积。在基因与蛋白水平分别检测各组28 d脑组织MG的M1型分子[肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)]、M2型分子(CD206)的表达情况。结果成功获取并鉴定了BMMSCs及其Exo。Exo/124-1显著表达miR-124-1。所有动物(假手术组除外)术后出现神经功能缺损。术后7~28 d,Exo/124-1组的mNSS明显低于MCAO/R组(P<0.05)与Exo组、Exo-Elv组(P<0.01);术后28 d,Exo/124-1组的脑梗死体积、TNF-α的表达明显小于MCAO/R组(P<0.01)与Exo组、Exo-Elv组(P<0.01),CD206的表达显著高于MCAO/R组(P<0.01)与Exo组、Exo-Elv组(P<0.01)。结论BMMSCs-Exo携带miR-124-1基因可能调控MG的M2型极化,抑制M1型介导的炎症反应,促进脑卒中大鼠神经功能的恢复。

miR-124-3p调控激素性股骨头坏死患者骨髓间充质干细胞成骨分化作用的研究

目的探讨miRNAs和CTNNB1在激素性股骨头坏死患者中的表达水平,以及miR-124-3p对骨髓间充质干细胞成骨分化的影响。方法选择2020年9月至2022年5月就诊于新疆医科大学第五附属医院行髋关节置换术的患者30例,激素性股骨头坏死患者15例作为实验组,股骨颈骨折患者15例作为对照组。术中扩髓时收集患者的骨髓组织,提取总mRNA,应用qRT-PCR检测各组miR-322-5p、miR-124-3p、miR-125a-3p及CTNNB1的表达量,用Western Blot检测CTNNB1蛋白的表达量。在骨髓间充质干细胞(BMSCs)中转染miR-124-3p的模拟物和抑制剂来检测其对BMSCs分化的影响作用,并验证miR-124-3p与CTNNB1的靶标关系。结果在实验组BMSCs中miR-125a-3p、CTNNB1表达量高于对照组(P<0.05);miR-124-3p的表达量低于对照组(P<0.001),miR-322-5p的表达量在两组中无明显差异。转染miR-124-3p+mimics组的miR-124-3p表达量高于其他组,CTNNB1表达量低于其他组(P<0.001),转染miR-124-3p inhibitor组的结果则相反。分化能力评估发现过表达miR-124-3p可以促进BMSCs成骨分化能力,抑制表达则结果相反。双荧光素酶报告系统结果显示,miR-124-3p与CTNNB1有靶向结合关系。结论miR-124-3p可以靶向CTNNB1,并且miR-124-3p可以调控骨髓间充质干细胞并促进其成骨分化。

乌头汤调控IncRNA MALAT1/miR-124途径抑制软骨细胞焦亡的机制研究

目的:探讨乌头汤是否通过调控Lnc RNA MALAT1/mi R-124途径抑制软骨细胞焦亡。方法:使用LPS(1μg/mL)24h+ATP(5.5mmol/L)4h诱导软骨细胞发生细胞焦亡反应;构建lncRNA MALAT1沉默细胞株;将软骨细胞随机分为空白对照组(Lenti-control组)、病毒沉默组(sh-MALAT1)、模型对照组(LPS+ATP+Lenti-control组)、模型沉默组(LPS+ATP+sh-MALAT1)。制备乌头汤含药血清,再将细胞再随机分为空白组、模型组(LPS+ATP)、乌头汤组(LPS+ATP+WTD含药血清)进行干预。Real-time PCR检测各组软骨细胞中的lncRNA MALAT1、miR-124基因水平变化;Western Blot检测各组软骨细胞中中NLRP3、caspase-1、GSDMD、IL-1β、IL-18的蛋白含量表达。结果:lncRNA MALAT1在LPS+ATP诱导的细胞焦亡软骨细胞核中表达增高。与空白对照组相比,模型沉默组中NLRP3、caspase-1、GSDMD、IL-1β、IL-18蛋白含量下降(P<0.05),而与模型对照组相比,病毒沉默组中上述指标蛋白含量下降(P<0.05)。与模型组相比,乌头汤组中lncRNA MALAT1及上述指标表达降低(P<0.05),miRNA-124 mRNA表达升高(P<0.05)。结论:乌头汤可通过调控lnc RNA MALAT1/miR-124途径抑制软骨细胞焦亡。

膀胱癌患者血清miR-124、miR-320a水平与临床病理特征及生存预后的关系

目的探讨膀胱癌患者血清miR-124、miR-320a水平与临床病理特征及生存预后的关系。方法将该院2018年2月至2020年2月收治的100例膀胱癌患者纳入研究作为研究组,另选取100例同期体检的健康志愿者作为对照组。采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测血清miR-124和miR-320a水平。比较研究组和对照组血清miR-124和miR-320a水平。对膀胱癌患者随访3年,记录生存情况。采用受试者工作特征(ROC)曲线评估血清miR-124和miR-320a水平对膀胱癌患者生存预后的评估价值。采用Spearman法分析膀胱癌患者血清miR-124和miR-320a水平高低的相关性。采用Kaplan-Meier法分析血清miR-124和miR-320a水平与患者生存预后的关系。采用多因素Cox回归分析膀胱癌患者生存预后的影响因素。结果研究组血清miR-124和miR-320a水平低于对照组(P<0.05)。ROC曲线分析显示,血清miR-124和miR-320a联合检测评估膀胱癌患者生存预后的曲线下面积(AUC)大于单独检测(P<0.05)。Spearman相关性分析显示,膀胱癌患者血清miR-124和miR-320a水平高低呈正相关(r=0.432,P<0.05)。TNM分期为T_(a)+T_(1)期、肿瘤最大径≤3 cm、淋巴结未转移的膀胱癌患者血清miR-124和miR-320a高水平比例分别高于TNM分期为T2~T4期、肿瘤最大径>3 cm、淋巴结转移患者(P<0.05)。Kaplan-Meier法分析表明,miR-124高水平患者3年累积生存率高于miR-124低水平患者;miR-320a高水平患者3年累积生存率高于miR-320a低水平患者(P<0.05)。多因素Cox回归分析表明,miR-124、miR-320a、TNM分期、淋巴结转移是膀胱癌患者生存预后的影响因素(P<0.05)。结论血清miR-124和miR-320a水平在膀胱癌患者中下调,二者联合检测对评估膀胱癌生存预后有重要价值。

循环miR⁃124作为铅神经毒性标志物的灵敏性、稳定性和组织特异性研究

目的:验证循环微小核糖核酸(microRNA,miRNA)⁃124的稳定性、组织特异性及其检测铅神经毒性的灵敏性,为循环miR⁃124用于铅神经毒性评价提供依据。方法:采用Zea⁃Longa线栓法建立大鼠大脑中动脉闭塞模型,采集血液样本离心、分装后立即检测或在室温、2~8℃和-70~-90℃条件下储存不同时间后,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real⁃time polymerase chain reaction,RT⁃qPCR)检测miR⁃124的表达;分别使用对乙酰氨基酚(1250 mg/kg)、异丙肾上腺素(2.5 mg/kg)和庆大霉素(80 mg/kg)建立大鼠肝毒性、心脏毒性和肾毒性模型,采集血液样本检测并比较造模前后循环miR⁃124的变化;使用醋酸铅(300、600 mg/kg)建立大鼠神经毒性模型,采用酶联免疫吸附测定方法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测白细胞介素(interleukin,IL)⁃10、IL⁃1β和肿瘤坏死因子⁃α(tumor necrosis factorα,TNF⁃α)的变化,比较检测到细胞因子和循环miR⁃124含量变化的时间评估其灵敏性。结果:以新鲜血液样本作为对照,血液样本室温保存6 h,2~8℃保存24 h,-70~-90℃保存36 d以及3次冻融后循环miR⁃124仍保持稳定,稳定性可以支持实验室需求;循环miR⁃124在大鼠肝毒性、心脏毒性和肾毒性模型中均无明显改变,具有良好的组织特异性;与细胞因子相比,循环miR⁃124可以更灵敏地检测铅暴露引起的神经炎症。结论:循环miR⁃124具有良好的稳定性、组织特异性和灵敏性,可作为评价铅神经毒性的潜在的生物标志物。

LncRNA NEAT1通过调节miR-124-3p/KLF4轴改善过敏性鼻炎

目的长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)已被证明在过敏性鼻炎(allergic rhinitis,AR)发展中发挥重要作用。本研究旨在探究lncRNA NEAT1(nuclear enriched abundant transcript 1)在AR中的功能和分子机制。方法构建了卵清白蛋白(ovalbumin,OVA)诱导的AR小鼠模型和IL-13诱导的人鼻上皮细胞(human nasal epithelial cells,HNECs)模型。结果NEAT1在AR小鼠体内高表达。敲低NEAT1显著抑制了AR小鼠和HNECs中炎性因子的产生,并减少了细胞凋亡。进一步的研究表明,NEAT1的下调能够逆转miR-124-3p的上调和KLF4的下调,进而调节了IL-13诱导的HNECs中的炎性反应和细胞凋亡。此外,miR-124-3p过表达显著提高了HNECs细胞活力,抑制了细胞凋亡、炎症因子的产生和KLF4的表达。而NEAT1过表达显著逆转了这一现象。结论本研究发现NEAT1在AR中的高表达,并揭示了其通过miR-124-3p/KLF4信号通路调控炎性反应和细胞凋亡的机制。这些发现不仅为深入理解AR的分子机制提供了新的视角,还为进一步研究和治疗AR提供了潜在的靶点。

微RNA-124-3p在溃疡性结肠炎病人外周血中的表达及意义

目的检测溃疡性结肠炎(UC)病人外周血中微RNA-124-3p(miR-124-3p)的表达水平,并讨论其临床意义。方法选择121例UC病人(UC组)和60例健康体检者(对照组)作为研究对象进行前瞻性研究,UC组来源于2019年8月至2021年8月期间武汉市蔡甸区人民医院住院治疗的病人,对照组为同期来院进行健康体检的个体。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-124-3p在各组外周血中的表达水平,酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测C-反应蛋白(CRP)在各组外周血中的表达水平。UC活动期病人外周血miR-124-3p表达水平与CRP水平的相关性采用Pearson法,与UC内镜严重指数(UCEIS)评分、改良梅奥(Mayo)评分的相关性分析采用Spearman法。结果与对照组相比,UC组病人外周血中miR-124-3p的表达水平显著降低(0.84±0.22比0.52±0.17,P<0.05),CRP水平显著升高[(7.08±2.52)mg/L比(9.83±2.91)mg/L,P<0.05]。与UC缓解期病人相比,活动期病人外周血中miR-124-3p的表达水平显著降低(0.67±0.22比0.44±0.14,P<0.05),CRP水平显著升高[(9.06±2.85)mg/L比(10.25±2.94)mg/L,P<0.05]。UC不同临床活动度病人外周血miR-124-3p表达水平由高至低依次为轻度(0.53±0.16)、中度(0.45±0.13)、重度(0.30±0.09),CRP表达水平及UCEIS评分、改良Mayo评分由高至低依次为重度[(12.03±3.02)mg/L、(5.97±1.82)分、(11.53±0.46)分]、中度[(10.35±2.79)mg/L、(4.82±1.51)分、(7.70±1.64)分)]、轻度[(8.74±2.83)mg/L、(3.03±0.90)分、(3.98±0.95)分],组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。UC活动期病人外周血miR-124-3p表达水平与CRP、UCEIS评分及改良Mayo评分均呈负相关(r=−0.57、−0.44、−0.59,P<0.05)。结论UC病人外周血miR-124-3p表达水平降低,其水平变化与UC疾病活动和病情程度密切相关。

miR-124与心肌缺血再灌注损伤的相关性研究及其靶基因分析

目的探讨血清miR-124对急性ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的预测价值,并分析其可能作用的靶基因。方法选取2020年1月—2020年6月于武汉市第三医院首次诊断为STEMI并行急诊经皮冠状动脉介入(PCI)治疗的患者168例为研究对象,采用实时定量PCR技术测定其入院即刻的血清miR-124表达水平。根据患者PCI治疗后是否发生MIRI将其分为MIRI组(n=76)和对照组(n=92),分析两组患者的临床资料和miR-124水平。利用生物信息学方法分析miR-124可能作用的靶基因。结果MIRI组患者的血清miR-124水平(2.26±0.79)显著高于对照组(1.48±0.45),差异具有统计学意义(P<0.001)。多因素Logistic回归分析表明,血清miR-124水平是预测STEMI患者发生MIRI的独立因素(OR=1.37,95%CI=1.06~1.78;P=0.017)。ROC曲线分析结果提示,miR-124预测MIRI的曲线下面积为0.81(95%CI=0.74~0.88,P<0.001),其预测最佳截点的敏感性为76.3%,特异性为75.0%。通过生物信息学的方法共预测到326个miR-124的靶基因,而其中22个与MIRI相关,这些基因可能参与视黄醇代谢、胶原纤维重构和炎症反应。结论血清miR-124水平与STEMI患者发生MIRI有关,可能涉及视黄醇代谢、胶原纤维重构和炎症反应等生物学过程。

血浆miR-132、miR-134联合miR-124对抑郁症患者的预测价值及疗效评估

目的探讨血浆微小核糖核酸(miR)-132、miR-134联合miR-124对抑郁症患者的预测价值及疗效评估。方法选取2021年6月至2023年7月在该院精神病科确诊抑郁症患者75例作为研究组,另选取同期于该院体检的健康者75例作为对照组。检测两组血浆miR-132、miR-134及miR-124相对表达水平,并对两组治疗8周前后miR-132、miR-124、miR-134、脑源性神经营养因子(BDNF)、炎症因子[白细胞介素(IL)-6、IL-18、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]水平进行比较。采用多元线性回归分析构建联合预测模型。采用受试者工作特征(ROC)曲线评估血浆miR-132、miR-134、miR-124及联合预测在诊断抑郁症患者中的应用价值。结果研究组血浆miR-132、miR-124相对表达水平显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);研究组血浆miR-134相对表达水平显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线分析显示,血浆miR-132、miR-134、miR-124及联合预测诊断抑郁症的曲线下面积分别为0.8588、0.8519、0.7631、0.9714。与治疗8周前比较,治疗8周后血浆miR-132、miR-124、IL-6、IL-18、TNF-α水平明显下调,miR-134、BDNF水平明显上调。结论miR-132、miR-134及miR-124与抑郁症的发生密切相关,三者联合可用于预测、早期诊断抑郁症患者及评估抑郁症患者的药物疗效。

血清LncRNA MALAT1和microRNA-124水平检测对非小细胞肺癌患者预后的评估价值

目的:探究长链非编码RNA-转移相关肺腺癌转录本1(LncRNA MALAT1)和微小RNA-124(microRNA-124)对非小细胞肺癌(NSCLC)患者预后的预测效能。方法:选取2020年06月至2022年06月我院收治的124例NSCLC患者作为研究对象,入院后,收集患者的病历资料,检测入院时外周血LncRNA MALAT1、microRNA-124的相对表达量。电话随访12个月记录患者的死亡率,分为生存组和死亡组,分析NSCLC患者预后的影响因素,评估血清LncRNA MALAT1、microRNA-124对NSCLC患者预后的预测效能。结果:死亡组患者的IV期占比及LncRNA MALAT1相对表达量高于生存组,microRNA-124相对表达量低于生存组。Logistic遂步分析显示,病理分期IV期(OR=12.342,95%CI:4.295~36.765)、LncRNA MALAT1(OR=5.371,95%CI:1.836~15.714)及microRNA-124(OR=0.257,95%CI:0.089~0.752)是NSCLC患者死亡的影响因素(P<0.05)。LncRNA MALAT1与microRNA-124呈负相关(P<0.05)。受试者工作特性曲线(ROC)分析显示,LncRNA MALAT1及microRNA-124单一及联合预测NSCLC患者预后的灵敏度分别为0.741(95%CI:0.601~0.846)、0.759(95%CI:0.621~0.861)、0.815(95%CI:0.682~0.903),特异度分别为0.825(95%CI:0.705~0.906)、0.762(95%CI:0.635~0.856)、0.841(95%CI:0.723~0.917),曲线下面积(AUC)分别为0.781、0.760、0.839。联合预测效能更高(P<0.05)。结论:LncRNA MALAT1及microRNA-124可用于预测NSCLC患者的预后,且预测效能良好。