Efficacy of Biejiajian Pill on Intestinal Microbiota in Patients with Hepatitis B Cirrhosis/Liver Fibrosis:A Randomized Double-Blind Controlled Trial

Objective:To analyze the efficacy of Biejiajian Pill(BJJP)on intestinal microbiota in patients with hepatitis B cirrhosis/liver fibrosis,and explore its relationship with liver fibrosis.Methods:This was a prospective,randomized double-blind controlled trial.Using the stratified block randomization method,35 patients with hepatitis B liver cirrhosis/liver fibrosis were randomly assigned(1:1)to receive entecavir(0.5 mg/d)combined with BJJP(3 g/time,3 times a day)or placebo(simulator as control,SC group,simulator 3 g/time,3 times a day)for 48 weeks.Blood and stool samples were collected from patients at baseline and week 48 of treatment,respectively.Liver and renal functions as well as hematological indices were detected.Fecal samples were analyzed by 16S rDNA V3-V4 high-throughput sequencing,and intestinal microbiota changes in both groups before and after treatment were compared,and their correlations with liver fibrosis were analyzed.Results:Compared with the SC group,there was no significant difference in liver function,renal function and hematology indices in the BJJP group,however,the improvement rate of liver fibrosis was higher in the BJJP group(94.4%vs.64.7%,P=0.041).Principal coordinate analysis(PCoA)based on weighted Unifrac distance showed significant differences in intestinal microbiota community diversity before and after BJJP treatment(P<0.01 and P=0.003),respectively.After 48 weeks'treatment,the abundance levels of beneficial bacteria(Bifidobacteria,Lactobacillus,Faecalibacterium and Blautia)increased,whereas the abundance levels of potential pathogenic bacteria,including Escherichia coli,Bacteroides,Ruminococcus,Parabacteroides and Prevotella decreased,among which Ruminococcus and Parabacteroides were significantly positively correlated with degree of liver fibrosis(r=0.34,P=0.04;r=0.38,P=0.02),respectively.The microbiota in the SC group did not change significantly throughout the whole process of treatment.Conclusion:BJJP had a certain regulatory effect on intestinal microbiota of patients with hepatitis B cirrhosis/liver fibrosis(ChiCTR1800016801).

鳖甲煎丸抑制肝星状细胞激活减轻肝纤维化的作用机制

目的:研究鳖甲煎丸调节AMP依赖的蛋白激酶(AMPK)、抑制肝星状细胞(HSC)激活和肝纤维化的作用机制。方法:将24只健康雄性SPF级C57BL/6小鼠随机分为对照、肝纤维化模型和鳖甲煎丸治疗组,每组8只。采用高脂高糖饮食联合腹腔注射四氯化碳制备小鼠肝纤维化模型。自第6周始,鳖甲煎丸治疗组给予鳖甲煎丸(1.365 g/kg)灌胃,1次/d,至第12周检测血清三酰甘油(TG)、胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)和碱性磷酸酶(ALP)水平,取肝组织行HE染色、天狼星红染色和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)免疫组织化学染色,分别观察肝组织病理学改变、胶原纤维增生和HSC活化状态,并用Western blot检测AMPK蛋白表达和活性。结果:与对照组比较,肝纤维化模型组小鼠血清ALT、AST、ALP和LDL升高,TG、TC及HDL降低(P<0.05);与肝纤维化模型组比较,鳖甲煎丸治疗组小鼠血清ALT、AST和ALP降低(P<0.05),而TG、TC、HDL和LDL差异无统计学意义。肝纤维化模型组HE染色可见肝细胞排列紊乱、有严重脂肪变性和部分气球样变,并伴有炎症细胞浸润和点片状坏死灶;天狼星红染色可见明显的纤维组织增生,α-SMA表达阳性;总AMPK和p-AMPK蛋白表达较对照组升高;与肝纤维化模型组比较,鳖甲煎丸治疗组肝病理改变、纤维组织增生和α-SMA阳性表达程度降低,AMPK和p-AMPK蛋白表达均降低(P<0.05)。结论:鳖甲煎丸能抑制HSC激活、减缓肝纤维化进程,其作用机制与抑制AMPK蛋白表达和活性有关。

鳖甲煎丸含药血清通过miR-140调控肝癌干细胞增殖能力及干性的机制研究

目的 研究miR-140在肝癌干细胞(liver cancer stem cells,LCSCs)中的生物学功能,以及鳖甲煎丸含药血清抑制肝癌干细胞特性的干预效应。方法 以人肝癌细胞株(Huh7)为研究对象,无血清培养基分选法分选LCSCs,用流式细胞仪鉴定富集的LCSCs,并转染miR-140慢病毒。分为Cin组、Control组、BJJP组、miR-140 mimics NC组、miR-140 mimics组、BJJP+miR-140 inhibitor组。用CCK-8法测定细胞增殖能力,RTPCR检测miR-140、CD133、CD24、EpCAM、AFP表达,Western blot法检测CD133、CD144、EpCAM、AFP蛋白表达。结果 检测显示Con组与Control组细胞增殖能力、CD133、CD24、EpCAM、AFP的蛋白及RNA表达无统计学意义(P>0.05);与miR-140 mimics NC组相比,miR-140 mimics组的肝癌干细胞的增殖能力、CD133、CD24、EpCAM、AFP的RNA及蛋白表达水平均明显减少(P<0.01),但miR-140表达明显增强(P<0.05);与Control组相比,BJJP组和BJJP+miR-140 inhibitor组的细胞增殖能力、CD133、CD24、EpCAM、AFP的RNA及蛋白表达水平显著降低(P<0.01),且BJJP组的细胞增殖能力、CD133、CD24、EpCAM、AFP的RNA及蛋白表达水平低于BJJP+miR-140inhibitor组(均P<0.05)。结论 鳖甲煎丸能抑制LCSCs的增殖能力及干性,其机制可能通过上调miR-140的表达发挥作用。

基于EGFR/MAPK/ERK信号通路探讨鳖甲煎丸对MHCC-97H肝癌细胞皮下瘤的抑瘤作用

目的基于表皮生长因子受体(epidermal growth factior receptor,EGFR)/丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)/细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)信号通路探究鳖甲煎丸对MHCC-97H肝癌细胞皮下瘤的抑瘤作用及作用机制。方法选取30只雄性BLAB/c裸鼠,建立MHCC-97H肝癌细胞皮下瘤模型。造模成功后随机分为模型组,鳖甲煎丸低、中、高剂量组(0.55、1.1、2.2 g/kg),西药组(乐伐替尼4 mg/kg+吉非替尼80 mg/kg),每组6只。鳖甲煎丸低、中、高剂量组灌胃2次/d,西药组每周灌胃5 d,模型组予以等量生理盐水2次/d灌胃,每组连续干预2周。观察大鼠一般情况;计算各组大鼠抑瘤率;HE染色观察病理形态学变化;RT-qPCR检测瘤体组织中EGFR、丝裂原活化蛋白质激酶激酶(mitogen-activated protein kinase kinase,MEK)、ERK1、ERK2 mRNA表达水平;Western blot检测EGFR、磷酸化的EGFR(p-EGFR)、MEK、磷酸化的MEK(p-MEK)、ERK1、ERK2、磷酸化的ERK1/2(p-ERK1/2)、基质金属蛋白酶-1(matrix metalloproteinase-1,MMP-1)、细胞周期蛋白D1(cell cycle protein D1,Cyclin D1)、神经型钙黏附蛋白(N-cadherin)、上皮型钙黏附蛋白(E-cadherin)相对表达水平。结果与模型组比较,鳖甲煎丸低、中、高剂量组及西药组精神、反应、进食饮水等情况均明显改善。与第0天比较,各组第14天体质量明显降低(P<0.01)。与模型组、鳖甲煎丸低剂量组比较,鳖甲煎丸中、高剂量组和西药组瘤体质量减轻(P<0.05,P<0.01)。鳖甲煎丸低、中、高剂量组和西药组抑瘤率分别为20%、47.73%、55.91%、75.45%。与模型组比较,鳖甲煎丸低、中、高剂量组及西药组肿瘤细胞排列疏松,边界模糊,细胞核固缩、破裂,其中西药组最明显。与模型组比较,鳖甲煎丸低、中、高剂量组和西药组EGFR、MEK、ERK1、ERK2 mRNA表达水平明显下降(P<0.01);与鳖甲煎丸低剂量组比较,鳖甲煎丸高剂量组和西药组EGFR、MEK、ERK1、ERK2 mRNA表达水平显著降低(P<0.01),鳖甲煎丸中剂量组ERK1 mRNA表达水平显著降低(P<0.01);与鳖甲煎丸中剂量组比较,西药组EGFR、ERK2 mRNA表达水平降低(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,鳖甲煎丸中、高剂量组和西药组p-EGFR/EGFR、p-MEK/MEK、p-ERK1/ERK1、p-ERK2/ERK2、MMP-1、Cyclin D1、N-cadherin蛋白相对表达水平下降(P<0.05,P<0.01),E-cadherin蛋白相对表达水平明显升高(P<0.01)。与鳖甲煎丸高剂量组比较,西药组p-EGFR/EGFR、p-ERK1/ERK1、MMP-1、Cyclin D1、N-cadherin蛋白相对表达水平明显下降(P<0.01),E-cadherin蛋白相对表达水平升高(P<0.05)。结论鳖甲煎丸可能通过抑制EGFR/MAPK/ERK信号通路激活,从而下调MMP-1、Cyclin D1、N-cadherin蛋白,上调E-cadherin蛋白表达,进而对MHCC-97H肝癌细胞皮下瘤产生显著的抑制作用。

鳖甲煎丸联合恩替卡韦治疗乙型肝炎肝硬化的效果及对肝功能、影像学检查参数的影响

目的探讨鳖甲煎丸联合恩替卡韦对乙型肝炎肝硬化患者肝功能及影像学检查参数的影响。方法选取2022年12月至2023年6月扬州市第三人民医院感染病科收治的78例乙型肝炎肝硬化患者作为研究对象,按照随机数字表法将其分为Ⅰ组(39例)和Ⅱ组(39例)。Ⅰ组采用恩替卡韦治疗,Ⅱ组采用恩替卡韦联合鳖甲煎丸治疗。比较两组治疗后的临床疗效、治疗前后的影像学检查参数以及肝功能。结果治疗后,Ⅱ组的总有效率高于Ⅰ组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组脾静脉内径、门静脉内径、脾脏长度、脾脏厚度均小于本组治疗前,且Ⅱ组上述各指标小于Ⅰ组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组血清总胆红素(TBil)、天冬氨酸转氨酶(AST)水平均低于本组治疗前,且Ⅱ组上述各指标低于Ⅰ组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组血清白蛋白(ALB)、凝血酶原活动度(PTA)水平均高于本组治疗前,且Ⅱ组上述各指标高于Ⅰ组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论鳖甲煎丸联合恩替卡韦治疗乙型肝炎肝硬化患者可提升临床疗效,改善患者肝脏纤维化、脾脏形态,保护肝功能,延缓疾病进展。

鳖甲煎丸联合富马酸替诺福韦二吡呋酯片治疗乙型肝炎肝硬化的疗效及对肝功能的影响

目的观察鳖甲煎丸联合富马酸替诺福韦二吡呋酯片治疗乙型肝炎(乙肝)肝硬化的疗效及对肝功能的影响。方法选取2022年6月—2023年6月九江市第三人民医院收治的乙肝肝硬化患者90例,采用随机数字表法分为观察组和对照组,每组45例。在常规治疗基础上,对照组予富马酸替诺福韦二吡呋酯片治疗,观察组在对照组基础上予鳖甲煎丸治疗,2组疗程均为6个月。比较2组治疗效果,治疗前后肝功能指标[血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBil)]、肝纤维化指标[血清层粘连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、透明质酸(HA)]、乙肝病毒定量[乙肝病毒DNA(HBV-DNA)、乙肝病毒核心抗体(HBcAb)]水平变化,以及不良反应。结果观察组治疗总有效率为88.89%,高于对照组的68.89%(χ^(2)=5.404,P=0.020);治疗6个月后,2组ALT、AST、TBil、LN、PCⅢ、HA水平及HBV-DNA、HBcAb均较治疗前降低,且观察组低于对照组(P均<0.01);观察组与对照组不良反应总发生率(13.33%vs.17.78%)比较差异无统计学意义(χ^(2)=0.338,P=0.561)。结论鳖甲煎丸联合富马酸替诺福韦二吡呋酯片治疗乙肝肝硬化的疗效较好,可促进患者的肝功能恢复,降低肝纤维化程度,且可降低乙肝病毒定量,安全可靠。

鳖甲煎丸联合阿德福韦酯治疗乙型肝炎肝硬化患者的效果

目的:观察鳖甲煎丸联合阿德福韦酯治疗乙型肝炎肝硬化患者的效果。方法:选取2020年5月至2023年5月该院收治的86例乙型肝炎肝硬化患者进行前瞻性研究,按照随机数字表法将其分为研究组和对照组各43例。对照组采用阿德福韦酯治疗,研究组在对照组基础上联合鳖甲煎丸治疗,比较两组临床疗效,治疗前后中医证候积分、肝功能指标[总胆红素(TBIL)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)]水平、肝纤维化指标[IV型胶原蛋白(C-IV)、层粘连蛋白(LN)、透明质酸(HA)]水平、T细胞亚群指标水平,以及不良反应发生率。结果:研究组治疗总有效率为95.35%(41/43),高于对照组的79.07%(34/43),差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,两组腹大胀满、纳少神疲、胁腹攻痛等中医证候积分均低于治疗前,且研究组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组TBIL、ALT、AST水平均低于治疗前,且研究组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组C-IV、LN、HA水平均低于治疗前,且研究组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组CD3^(+)、CD4^(+)水平均高于治疗前,且研究组高于对照组,两组+CD8水平均低于治疗前,且研究组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:鳖甲煎丸联合阿德福韦酯治疗乙型肝炎肝硬化患者可提高治疗总有效率,改善T细胞亚群指标水平,降低中医证候积分、肝功能指标水平和肝纤维化指标水平,其效果优于单纯阿德福韦酯治疗。

基于氨基酸分析仪测定鳖甲煎丸中氨基酸的含量测定

建立测定鳖甲煎丸中氨基酸含量测定的方法,为提高鳖甲煎丸质量标准提供参考。鳖甲煎丸样品在6 mol/L盐酸中110℃水解22 h,采用氨基酸分析仪对不同批次鳖甲煎丸中氨基酸组分及含量进行分析。鳖甲煎丸中含有17种常规氨基酸,其中谷氨酸、甘氨酸、脯氨酸、天冬氨酸、丙氨酸含量较高,含量达0.017%~1.38%。该法测定鳖甲煎丸中氨基酸含量具有操作简便、准确、专属性强、重现性好的优点,可用于提高鳖甲煎丸质量标准,具有较好的应用推广价值。

鳖甲煎丸联合替诺福韦酯治疗乙型肝炎肝硬化失代偿期临床研究

目的:观察鳖甲煎丸联合替诺福韦酯治疗乙型肝炎肝硬化失代偿期气滞血瘀证的临床疗效。方法:选择98例乙型肝炎肝硬化失代偿期气滞血瘀证患者,按照随机数字表法分为鳖甲煎丸组、对照组各49例。鳖甲煎丸组剔除6例,对照组剔除7例,最终纳入研究鳖甲煎丸组43例、对照组42例。2组均给予保肝、退黄、降低门静脉压力等对症治疗,对照组在此基础上给予富马酸替诺福韦二吡呋酯片治疗,鳖甲煎丸组在对照组基础上给予鳖甲煎丸治疗。2组均治疗6个月。比较2组临床疗效,肝功能指标、肝纤维化指标水平,趋化因子受体(CCR)阳性表达率及不良反应发生率。结果:治疗后,总有效率鳖甲煎丸组95.35%,高于对照组78.57%,差异有统计学意义(P<0.05)。2组谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、总胆红素(TBil)水平均较治疗前降低(P<0.05),鳖甲煎丸组AST、 ALT、 TBil水平均低于对照组(P<0.05)。2组透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)水平均较治疗前降低(P<0.05),鳖甲煎丸组HA、LN、PCⅢ、Ⅳ-C水平均低于对照组(P<0.05)。2组CCR4、CCR6阳性表达率均较治疗前降低(P<0.05),鳖甲煎丸组CCR4、CCR6阳性表达率均低于对照组(P<0.05)。对照组不良反应发生率7.14%,鳖甲煎丸组不良反应发生率9.30%,2组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:鳖甲煎丸联合替诺福韦酯治疗乙型肝炎肝硬化失代偿期气滞血瘀证临床疗效显著,可有效改善患者的肝功能及肝纤维化指标,其作用机制可能与降低CCR表达有关,且治疗安全性好。

鳖甲煎丸对肝纤维化小鼠肝脏PPARγ表达的影响

目的:探究鳖甲煎丸对肝纤维化小鼠的治疗作用及其对PPARγ表达的影响,以此阐述鳖甲煎丸治疗肝纤维化的分子机制。方法:将40只小鼠随机分为空白组、模型组、鳖甲煎丸低剂量组、鳖甲煎丸中剂量组和鳖甲煎丸高剂量组。除空白组小鼠腹腔注射橄榄油外,其余各组小鼠予四氯化碳(CCl4)腹腔注射,每周2次,连续6周。建模成功后鳖甲煎丸低、中、高剂量组小鼠给予相应剂量的鳖甲煎丸灌胃,空白组和模型组灌胃等体积生理盐水,1次/d,连续4周。实验结束后,通过Masson染色和Col-Ⅰ免疫组化观察小鼠肝脏胶原沉积,采用免疫组化检测肝脏α-SMA表达,采用蛋白质印迹法检测肝脏PPARγ表达,BSP法检测小鼠肝脏PPARγ启动子甲基化程度。结果:与空白组比较,模型组小鼠肝脏中胶原和Col-Ⅰ明显沉积(P<0.05),α-SMA表达明显升高(P<0.05),而PPARγ蛋白含量明显降低(P<0.05)。与模型组比较,鳖甲煎丸低、中、高剂量组小鼠肝脏中胶原和Col-I沉积明显减少(P<0.05),α-SMA表达明显降低(P<0.05),而PPARγ蛋白含量明显升高(P<0.05),且呈剂量依赖性(P<0.05)。BSP分析发现,模型组小鼠肝脏中PPARγ启动子甲基化位点明显多于空白组(P<0.05),鳖甲煎丸低、中、高剂量组小鼠PPARγ启动子甲基化位点明显少于模型组(P<0.05)。结论:鳖甲煎丸可通过去甲基化PPARγ启动子促进PPARγ表达,从而缓解肝纤维化。

鳖甲煎丸经AT1R/VEGF信号通路对肝癌血管生成的影响

目的 探讨鳖甲煎丸通过AT1R/VEGF信号通路影响肝癌血管生成的相关机制。方法 将40只BALB/c小鼠分为正常组、模型组、阿霉素干预组(DOX组)及鳖甲煎丸干预组(BJJW组),每组各10只。除正常组外,余下3组小鼠均立肝癌HepG2移植瘤模型,造模期间各组给予生理盐水和相应的药物治疗(腹腔注射给药),连续治疗10 d。测量各组小鼠的瘤体体积和瘤体肿瘤,并计算抑瘤率;采用免疫组织化学法检测CD34的表达情况来反映肿瘤组织的微血管密度,并采用Wstern blot法检测各组小鼠肿瘤组织中血管生成相关蛋白——缺氧诱导因子(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)、金属基质蛋白酶-2(MMP-2)和MMP-9水平的表达情况,及血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1R)通路相关蛋白含量。结果 与正常对照组相比,模型组与各治疗组小鼠均形成瘤体组织,表示造模成功。其中模型组小鼠肿瘤体积、瘤体肿瘤[分别为(245.32±122.51)cm^(3)、(1.08±0.78)g]均明显大于治疗组[DOX组体积分别为(83.41±12.04)cm^(3)、(110.04±48.07)g;BJJW组分别为(110.04±48.07)cm^(3)、(0.63±0.34)g](P<0.05),肿瘤细胞凋亡率较DOX组和BJJW组明显偏低(P<0.05)。模型组MVD、CD34阳性表达率、VEGF、HIF-1α、MMP-2、MPP-9蛋白含量及AT1R通路相关蛋白含量均较正常对照组明显升高(P<0.05);而DOX组及BJJW组的MVD、CD34阳性表达率、VEGF、HIF-1α、MMP-2、MPP-9蛋白及AT1R通路相关蛋白含量均明显低于模型组(均P<0.05)。结论 鳖甲煎丸可通过抑制肝癌血管的生成来起到抑癌效果,这可能与AT1R/VEGF信号通路被抑制有关。

程序性死亡配体1在肝癌小鼠的表达及鳖甲煎丸的抑制作用

目的:研究程序性死亡配体1(PD-L1)在肝癌小鼠的表达,探讨鳖甲煎丸抑制肝癌发生的作用机制。方法:健康雄性SPF级C57BL/6小鼠24只,随机分为对照组、模型组和鳖甲煎丸组,每组8只。采用高脂高糖饮食联合腹腔注射四氯化碳(CCl4)制备小鼠肝癌模型;自第6周开始,鳖甲煎丸组给予鳖甲煎丸(1.365 g/kg)灌胃,1次/d;至第24周处死小鼠,计算各组小鼠肝脏的相对质量,记录肝脏表面结节数,测定最大结节直径,取肝组织行HE染色,并分别用荧光定量PCR和Western blot检测PD-L1 mRNA和蛋白表达。结果:模型组小鼠肝脏的相对质量、表面结节数量和结节最大直径较对照组比较均增加(P<0.05);与模型组比较,鳖甲煎丸组小鼠肝脏的相对质量、表面结节数量和结节最大直径均减少(P<0.05);模型组小鼠肝组织镜下可见肝小叶结构紊乱,有增生性结节及癌结节,肝细胞脂肪变性明显,可见核深染及核分裂,伴炎症细胞浸润及点、片状坏死灶,鳖甲煎丸组的组织病理学改变较模型组减轻;模型组小鼠肝组织PD-L1 mRNA和蛋白表达较对照组升高(P<0.05),与模型组比较,鳖甲煎丸组PD-L1 mRNA和蛋白表达均降低(P<0.05)。结论:PD-L1在肝癌小鼠的肝组织中高表达,鳖甲煎丸抑制肝癌发生的作用机制包括抑制PD-L1表达、降低肝癌细胞免疫逃逸,并改善肿瘤免疫微环境。

基于网络药理学和分子对接探讨鳖甲煎丸抗肝癌的作用机制

目的基于网络药理学、芯片分析和分子对接方法探究鳖甲煎丸抗肝癌的作用机制。方法通过中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)、中药高通量实验和参考指南数据库(HERB)和中国知识资源总库(CNKI)收集鳖甲煎丸活性成分及作用靶点,在GeneCards、OMIM和DrugBank数据库收集肝癌疾病靶点,取二者交集靶点作为潜在靶点并进行GO功能和KEGG通路富集分析。利用Cytoscape3.7.2软件构建鳖甲煎丸-活性成分-潜在靶点-肝癌网络和蛋白相互作用(PPI)网络并筛选核心成分和核心靶点,结合GEO芯片筛选核心作用靶点,与核心成分进行分子对接验证。结果筛选得到鳖甲煎丸活性成分152个,治疗肝癌潜在靶点221个,GO功能富集分析主要涉及细胞凋亡等生物过程,细胞核、细胞质等细胞组分,蛋白结合、酶结合、蛋白丝氨酸/苏氨酸/酪氨酸激酶活性等分子功能,KEGG富集分析涉及PI3K-Akt、MAPK等信号通路。核心成分槲皮素、β-谷甾醇、山柰酚、木犀草素与核心作用靶点MAPK1、MYC、EGFR、FOS对接结合稳定。结论鳖甲煎丸可能通过PI3K-Akt、MAPK等信号通路,作用于MAPK1、MYC、FOS、EGFR等靶点发挥抗肝癌作用。

鳖甲煎丸治疗代偿期慢性乙型肝炎肝硬化的疗效观察

目的 探讨鳖甲煎丸治疗代偿期慢性乙型肝炎(CHB)肝硬化患者的疗效。方法 以2018年1月—2020年1月该院收治的代偿期CHB肝硬化患者130例为研究对象,采用随机数字表法分为对照组(65例)和观察组(65例)。对照组进行常规治疗联合恩替卡韦片治疗,观察组在对照组的基础上采用鳖甲煎丸进行治疗,两组均治疗24周。比较两组治疗12、24周后肝功能、病毒学指标及治疗前、治疗24周后肝硬度值及超声影像学检查指标、肝纤维化指标、血清炎性因子水平。结果 治疗24周后,观察组总胆红素(TBIL)、谷丙转氨酶(ALT)/谷草转氨酶(AST)复常率及乙型肝炎病毒-脱氧核糖核酸(HBV-DNA)转阴率高于对照组(P<0.05)。治疗24周后,两组脾脏长度、门静脉内径短于治疗前,观察组短于对照组,脾脏厚度、肝硬度值及血清Ⅲ型前胶原(PC-原)、Ⅳ型胶原(IV-C)、层黏连蛋白(LN)、透明质酸(HA)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)低于治疗前,观察组低于对照组(P<0.05)。结论 鳖甲煎丸治疗代偿期CHB肝硬化患者可有效改善患者肝功能,缓解肝纤维化进程,降低机体炎症反应,改善肝脏和脾脏情况,促进病毒转阴,具有较好的治疗效果。

鳖甲煎丸联合炔雌醇环丙孕酮片治疗痰瘀互结型多囊卵巢综合征临床观察

目的分析鳖甲煎丸联合炔雌醇环丙孕酮片治疗痰瘀互结型多囊卵巢综合征(PCOS)的效果。方法选取就诊于湖北省中西医结合医院妇产科门诊符合PCOS诊断标准且中医辨证为痰瘀互结型的患者共60例,随机将其分为对照组和治疗组:对照组患者在自然月经或黄体酮撤退性出血第5天开始定时服用炔雌醇环丙孕酮片,治疗组在对照组用药基础上服用鳖甲煎丸,经期停服,治疗3个月经周期,随访3个月经周期,比较2组的疗效。结果治疗组在实验室检查指标、彩超检查、中医证候评分、综合疗效等方面均优于对照组。结论鳖甲煎丸联合炔雌醇环丙孕酮片治疗痰瘀互结型PCOS,能通过减少PCOS患者的卵巢包膜厚度、改善胰岛素抵抗及脂代谢异常、降低炎性因子、抑制卵巢组织中的血管内皮生长因子等途径达到临床治疗效果。

鳖甲煎丸联合中药洗剂治疗寻常型银屑病的临床疗效

目的观察鳖甲煎丸联合中药洗剂治疗寻常型银屑病的临床疗效。方法选取2020年2月-2021年2月湖南中医药大学第二附属医院收治的寻常型银屑病患者100例,按照入院先后顺序分为对照组(n=50)和观察组(n=50)。对照组患者采用中药洗剂治疗,观察组患者在对照组基础上联合鳖甲煎丸治疗,2组患者均持续治疗3个月。比较2组临床疗效,治疗前及治疗1、2、3个月后皮损面积和严重程度指数(PASI)积分,治疗前及治疗3个月后血清白介素-17(IL-17)、白介素-31(IL-31)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及一氧化氮合酶(NOS)、一氧化氮(NO)水平,不良反应。结果观察组治疗总有效率高于对照组(96.00%vs.84.00%,χ^(2)=4.000,P=0.046)。治疗1、2、3个月后,2组PASI积分均较治疗前降低,且观察组均低于对照组(P<0.01)。与治疗前比较,治疗3个月后2组血清IL-17、IL-31、TNF-α、NOS、NO水平均降低,且观察组低于对照组(P<0.01)。观察组不良反应总发生率低于对照组(6.00%vs.20.00%,χ^(2)=4.332,P=0.037)。结论采用鳖甲煎丸联合中药洗剂治疗寻常型银屑病的疗效确切,可有效改善患者皮损症状,减轻炎性反应,改善病情,且安全性较高。

鳖甲煎丸联合常规西药治疗老年肝硬化患者的效果

目的:观察鳖甲煎丸联合常规西药治疗老年肝硬化患者的效果。方法:选取2020年5月至2022年5月该院收治的80例老年肝硬化患者进行前瞻性研究,按随机数字表法将其分为对照组(n=40)和观察组(n=40)。对照组给予常规西药治疗,观察组在对照组基础上联合鳖甲煎丸治疗,比较两组临床疗效、治疗前后肝功能指标[天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)及总胆红素(TBIL)]水平、肝纤维化指标[透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)及层粘连蛋白(LN)]水平、肝脏硬度和慢性乙型肝炎脱氧核糖核酸(HBV DNA)水平。结果:观察组治疗总有效率为90.00%(36/40),高于对照组的72.50%(29/40),差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,两组AST、ALT、TBIL、HA、PCⅢ和LN水平均低于治疗前,且观察组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,两组肝脏硬度、HBV DNA水平均低于治疗前,且观察组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:鳖甲煎丸联合常规西药治疗老年肝硬化患者可提高治疗总有效率,降低肝功能指标水平、肝纤维化指标水平、肝脏硬度和HBV DNA水平,效果优于单纯常规西药治疗。

恩替卡韦联合鳖甲煎丸治疗慢性乙型肝炎的效果观察

目的:观察恩替卡韦联合鳖甲煎丸治疗慢性乙型肝炎的效果。方法:选取2018年1月—2021年11月山东第一医科大学第二附属医院收治的116例慢性乙肝患者,采用随机数表法将患者分为对照组和研究组各58例,对照组口服恩替卡韦分散片治疗,研究组在对照组治疗基础上联合鳖甲煎丸口服治疗,治疗时间96周。观察两组的临床疗效以及治疗前后谷丙转氨酶(BPT)、谷草转氨酶(AST)、谷草转氨酶与血小板比率指数(APRI)、肝脏硬度值(LSM)及肝纤维化指标透明质酸酶(HA)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、层粘连蛋白(LN)的水平变化;观察两组患者治疗24、48、72、96周后的乙肝病毒的脱氧核糖核酸(HBV-DNA)水平变化情况。结果:治疗96周后,研究组总有效率(89.66%)高于对照组(74.13%),差异有统计学意义(P<0.05);治疗96周后,两组患者ALT、AST水平及APRI、LSM均显著下降,且研究组ALT、AST水平及APRI、LSM显著低于对照组(P<0.05)。治疗24、48、72、96周后,两组患者HBV-DNA水平均逐步下降,且研究组HBV-DNA水平均显著低于对照组(P<0.05)。治疗后,研究组患者HA、Ⅳ-C、PCⅢ、LN水平均显著低于对照组(P<0.05)。结论:恩替卡韦联合鳖甲煎丸长期治疗乙肝肝硬化代偿期患者疗效显著,可以减轻患者肝纤维化程度,改善患者肝脏相关指标,逆转肝硬化。

鳖甲煎丸抑制肝癌细胞增殖、黏附及侵袭作用的实验研究

目的研究鳖甲煎丸对肝癌细胞生长增殖、黏附及侵袭能力的影响,初步探讨鳖甲煎丸抗肝癌细胞的转移、侵袭作用机制。方法运用血清药理学方法,以高、中剂量的鳖甲煎丸含药血清和空白血清分别培养肝癌细胞HepG2,采用MTT比色法、细胞黏附实验和transwell侵袭实验检测药物对细胞生长、黏附和侵袭作用的影响,以进一步阐明鳖甲煎丸抗肝癌细胞的转移、侵袭作用机制。结果高剂量和中剂量含药血清可显著抑制肝癌细胞生长增殖,对基底膜的黏附及侵袭穿越迁移亦有抑制作用,且该作用与药物浓度有关。结论鳖甲煎丸能显著抑制肝癌细胞的生长增殖、黏附及转移侵袭。

鳖甲煎丸对肝细胞癌中Wnt/β-catenin信号通路及抑制基因DKK-1、FrpHe表达的影响

目的通过研究鳖甲煎丸对肝细胞癌中Wnt信号通路及抑制基因DKK-1、FrpHe表达的影响,探讨其抗肝细胞癌转移侵袭的作用机制与Wnt/β-catenin信号通路的关系。方法 24只Wistar大鼠随机分为3组(8只/组),分别以临床剂量的20倍、10倍的鳖甲煎丸和生理盐水灌胃3 d,3 d后采血,离心,获取血清。分别将3组血清加入DMEM培养液中培养肝癌细胞HepG2,48 h后采用流式细胞术检测细胞中的β-catenin蛋白含量,qRT-PCR法检测DKK-1、FrpHe基因的表达情况,以进一步阐明药物的作用机制与Wnt/β-catenin信号通路的关系。结果流式细胞术结果:高剂量组和中剂量组含药血清均可显著降低细胞中β-catenin蛋白表达,且该作用与药物浓度有关。RT-PCR结果:高剂量组和中剂量组含药血清均可显著下调DKK-1基因的表达,且该作用与药物浓度有关。而高剂量组和中剂量组含药血清对FrpHe基因的表达影响不明显。结论鳖甲煎丸能显著抑制肝细胞癌的生长、粘附和转移,且这种抑制作用与显著降低肝癌细胞中β-catenin蛋白表达、显著下调DKK-1基因的表达,从而阻断Wnt/β-catenin信号通路有关。