隔药饼灸对环磷酰胺诱导免疫抑制兔共刺激分子CTLA-4、4-1BB、CD28的影响

目的探讨隔药饼灸对环磷酰胺诱导免疫抑制兔共刺激分子细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4)、4-1BB、CD28的影响。方法选择大耳白兔32只,随机分为空白组、模型组、艾条灸组和隔药饼灸组,每组8只。模型组、艾条灸组和隔药饼灸组予环磷酰胺诱导免疫抑制模型。模型制备成功次日,艾条灸组和隔药饼灸组分别予艾条灸和隔药饼灸,隔日1次,共10次。空白组和模型组不予艾灸。艾条灸组和隔药饼灸组末次干预次日,空白组和模型组同时间,采集腹腔静脉血,离心留取血清,采用ELISA法检测血清CTLA-4、4-1BB、CD28;腹腔静脉取血后,摘取脾脏和肝脏,免疫组化法检测脾脏和肝脏组织CTLA-4、4-1BB蛋白表达。结果模型组血清CTLA-4、CD28水平均高于空白组,血清4-1BB水平低于空白组(P均<0.05);与模型组比较,艾条灸组和隔药饼灸组血清CTLA-4、CD28水平均降低,血清4-1BB水平均升高(P均<0.05);与艾条灸组比较,隔药饼灸组血清CTLA-4、CD28水平均降低,血清4-1BB水平升高(P均<0.05)。模型组脾脏和肝脏组织CTLA-4阳性表达均高于空白组,4-1BB阳性表达均低于空白组(P均<0.05)。与模型组比较,艾条灸组脾脏和肝脏组织CTLA-4阳性表达均降低(P均<0.05),肝脏组织4-1BB阳性表达升高(P<0.05),而脾脏组织4-1BB阳性表达升高不明显(P>0.05);隔药饼灸组脾脏和肝脏组织CTLA-4阳性表达均降低(P均<0.05),4-1BB阳性表达均升高(P均<0.05)。艾条灸组与隔药饼灸组脾脏和肝脏组织CTLA-4、4-1BB阳性表达比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论隔药饼灸能够通过调节共刺激分子CTLA-4、4-1BB、CD28而改善环磷酰胺诱导免疫抑制兔的免疫功能,其效果优于艾条灸。

螺旋CT对日本大耳白兔气道的测量研究

目的探讨日本大耳白兔气管和主支气管各解剖径线的长度、角度及相关性,为进行气道疾病内支架介入治疗的动物实验研究奠定基础。方法用多层螺旋CT扫描30只成年健康日本大耳白兔的颈胸部,测量和测算气管各段前后径、左右径,声门水平到隆突的气管长度,左右主支气管和中间支气管内径与长度,以及左、右主支气管长轴与矢状面的夹角。结果气管各段直径、左右上肺尖叶支气管开口内径无差异,右主支气管长度、右主支气管长轴与矢状面夹角小于左侧,右主支气管内径大于左侧并有相关性。结论多层螺旋CT测定的日本大耳白兔气管、左和右主支气管径线值,获得左、右主支气管内径值、长度、嵴下角之间的回归方程,有助于为兔实验提供相关气管和支气管的解剖参数。

螺旋CT测量日本大耳白兔气道径线的窗宽窗位选择

目的探讨日本大耳白兔气管和主支气管解剖径线CT测量的窗位与窗宽选择,为气道支架动物实验奠定基础。方法多层螺旋CT扫描30只成年健康日本大耳白兔的胸部,分别常规肺窗、纵隔窗和特殊的脂肪窗测量气管胸段前后径、左右径、左右主支气管前后径。比较不同窗宽窗位下气管壁显示以及测量数据与解剖数据之间的差异。结果肺窗气管壁均清晰显示,但测量的结果偏小;纵隔窗气管壁显示模糊,测量的结果偏大;而脂肪窗气管壁显示均匀,测量的数据比较接近实际气管直径的解剖参数。结论多层螺旋CT测定日本大耳白兔气管左右径和前后径应选择脂肪窗为佳。有助于为人相关气管和支气管定制气道支架确定最佳的窗宽和窗位。

发光二极管光源照射日本大耳白兔皮肤的安全性评价

目的通过LED白色光源照射日本大耳白兔皮肤组织,对LED光源照射的安全性进行初步的评价。方法动物随机分成照射组和对照组。照射组动物剔除背部毛发,LED光源照射,强度为50 mw/cm2,对照组动物以普通日光灯光源照射,两组均每天照射5 h,连续3个月。观察动物皮肤有无红肿,测量动物进食、体重、体温等改变情况;照射完毕采集外周血测量常规、生化指标;Elisa分析免疫细胞及细胞因子改变情况;脏器组织病理检测,及分析皮肤弹力纤维变化情况;皮肤免疫组织化学分析C-myc、P53、细胞周期蛋白D1(CCND1)等癌基因及抑癌基因的表达变化。结果照射组兔皮肤未见红肿表现,体重在6周后稍高于对照组,体温3周、6周有差别,进食未见异常;血常规有白细胞增多,生化检测尿素、肌酐水平有增高,但在正常范围内;ELISA分析血免疫细胞CD3T细胞、细胞因子IL-6、TNF-α、IFN-γ水平在两组无明显差别,照射组动物CD19B细胞,IL-4水平升高;照射组动物脏器组织病理未见明显异常结构改变,皮肤弹性纤维分布无异常;皮肤组织内细胞周期蛋白(CCND1),C-Myc蛋白,P53蛋白表达与对照组相比没有差异。结论 LED光源照射日本大耳白兔3个月后,未引起体内明显的组织病理学改变,也未引起皮肤肿瘤相关因子的改变。

红景天胶囊对兔急性心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的研究红景天胶囊对兔急性心肌缺血再灌注损伤的的影响及其保护机制。方法实验选取10只健康日本大耳白兔为假手术组,另取20只随机分为模型组及红景天组,2组均采用手术结扎左侧冠状动脉前降支30 min后再灌注60 min,反复3次以造成急性心肌缺血再灌注损伤动物模型。术后3组动物均灌胃给药,测定治疗前及治疗1、2周总超氧化物歧化酶(T-SOD)、一氧化氮(NO)、血管内皮素-1(ET-1)、血清丙二醛(MDA)、血清肌酸激酶(CK)、白细胞介素-6(IL-6)水平,记算治疗2周后兔心肌缺血梗死率(%)等指标,并分析红景天胶囊对兔急性心肌缺血再灌注损伤的影响。结果红景天胶囊明显提高红景天组兔NO含量及T-SOD活性,降低ET-1及血清MDA、CK、IL-6水平,减少急性心肌缺血梗死率,与模型组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论红景天胶囊可提高兔急性心肌缺血再灌注后T-SOD及NO活性,促进氧自由基清除酶清除氧自由基、降低心肌缺血时脂质过氧化,进而改善再灌注损伤后受损血管内皮并维持其正常功能,增加心肌组织耐缺氧能力,对急性心肌缺血再灌注具有保护作用。

中药敷贴预防兔骨外固定支架针孔感染的效果

目的构建大耳白兔胫骨外固定模型,应用新型中药敷贴护理方法对兔骨外固定支架针孔进行护理,以论证新型中药敷贴的有效性及可行性,为临床护理提供理论依据。方法选用5~7个月月龄的新西兰大耳白兔作实验对象,共30只,体重2.5~3.0 kg,并适应性喂养1周。建立兔骨外固定支架模型,采用中药配方:天花粉100 g,大黄100 g,骨碎补100 g,自然铜100 g,黄柏60 g,血竭20 g,甘草20 g。按照制作创可贴的工艺和流程制作5 cm×3 cm中药敷贴。按随机排列表法将造模好的大耳白兔分为5组,每组6只。实验组为新型中药敷贴护理组,分为A1组与A2组,对照组为75%乙醇护理组(B组)、碘伏护理组(C组)、零护理组(D组),每组6只。其中A1组每3 d更换敷料1次,A2组延长更换敷料时间至每7 d 1次,B、C和D组均按每3 d更换敷料1次,有渗血渗液则及时更换敷料。通过检测血白细胞(WBC)计数及降钙素原(PCT)含量并观察针孔处局部情况进行效果评价。结果 A1组耳缘静脉血WBC计数和PCT含量在术后第7天、第14天均明显低于B、C及D组,差异有统计学意义(P<0.05);A1与A2组间比较,差异无统计学意义(P>0.05);A1组与A2组发生红肿率均为33.33%,C、D两组均为50%,B组为100%;部分存在脓液外渗等现象,穿针处皮肤周围有黄色分泌物,周围组织部分溃疡坏死,A1组分泌物发生率为16.67%,A2组为0,B组为66.67%,C、D两组均为33.33%。结论新型中药敷贴具有消肿止痛、止血生肌的功效,在预防兔骨外固定支架针孔感染中的效果显著,且优于临床上传统针孔护理方法,为进一步临床护理试验提供了动物实验依据。

玻连蛋白在肺血栓栓塞中国大耳白兔肺动脉内皮中的表达

目的:研究玻连蛋白(vitronectin,Vn)在肺血栓栓塞(pulmonary thromboembolism,PTE)中国大耳白兔肺动脉内皮中的表达变化,以及Vn在肺血栓栓塞病理过程中的作用。方法:将28只健康成年中国大耳白兔随机分为观察组和对照组,经股静脉分别注射自体血栓和生理盐水。各组于注射后1、3、5、7 d处死动物并取肺动脉及肺组织。分别进行苏木精-伊红(hematoxylin and eosin,H&E)染色、免疫组织化学染色及实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测,观察肺组织及肺血管结构、定位及定量分析Vn在肺动脉中表达情况。结果:H&E染色显示观察组动脉内血栓栓塞,而对照组肺组织及肺动脉正常。免疫组织化学染色表明Vn表达于肺动脉内皮;qRT-PCR结果表明观察组肺动脉内皮中Vn表达量均高于对照组(P<0.05),且在第3天达峰值(P<0.05)。结论:Vn在肺血栓栓塞白兔肺动脉内皮中表达水平增高,Vn可能参与了肺血栓栓塞病程中的血栓形成过程。

清热消肿止痛膏的制备及其皮肤安全性评价研究

[目的]制备清热消肿止痛膏并考察其皮肤安全性。[方法]采用正交实验,以盐酸小檗碱和盐酸黄柏碱含量之和及收膏率作为评价指标,优选清热消肿止痛膏醇提工艺;考察稠膏的密度、基质的制备、稠膏的用量,筛选制剂成型工艺参数;以大耳白兔、豚鼠为模型,对制剂进行皮肤刺激性和过敏性实验。[结果]提取工艺:分别以6、5倍量的50%乙醇提取处方量药材两次,每次提取时长为1.5 h。制剂成型工艺:稠膏相对密度为1.22~1.27(80℃);基质用压敏胶与乙酸乙酯10∶1(g/g)制备,采用稠膏与基质1∶2体积制成膏体。皮肤安全性实验:清热消肿止痛膏对皮肤无刺激性及过敏性现象发生。[结论]清热消肿止痛膏的制备工艺科学合理,稳定可行,成品制剂外用安全性良好。

癫狂梦醒汤对兔动脉粥样硬化血管基质金属蛋白酶-9表达的影响

目的观察癫狂梦醒汤对兔动脉粥样硬化(AS)血管基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响,以期为癫狂梦醒汤抗AS提供理论依据。方法将32只日本大耳白兔随机分成空白对照组、模型组、癫狂梦醒汤组。采用高脂喂饲制作AS模型。第12周末观察动脉血管内膜厚度,免疫组化法观察MMP-9蛋白表达。结果以高脂喂养成功建立AS模型,模型组血管内膜增厚,MMP-9蛋白表达明显增强;癫狂梦醒汤组血管内膜变薄,MMP-9蛋白表达明显下降(P<0.01)。结论癫狂梦醒汤可抑制MMP-9蛋白表达,明显抑制AS发生发展。

大剂量岷当归对高同型半胱氨酸血症兔TXB_2的影响

目的:观察大剂量岷当归对高同型半胱氨酸血症(HHcy)兔血清Hcy与血浆TXB_2的影响。方法:日本大耳白兔48只,随机分为正常组、模型组、岷当归低、中、高剂量组及叶酸对照组各8只。采用L-蛋氨酸皮下注射法建立HHcy家兔模型。造模8周后,岷当归低、中、高剂量组分别给予岷当归水煎液1.4g/(kg·d)、2.8g/(kg·d)、5.6g/(kg·d)灌胃,叶酸组给予叶酸1.5mg/(kg·d)、维生素B_6 20mg/(kg·d)、维生素B_(12) 0.25mg/(kg·d)灌胃。12周后检测血清同型半胱氨酸(Hcy)、血浆血栓素B2(TXB_2)指标。结果:模型组血清Hcy指标高于正常组(P<0.05),岷当归低、中、高剂量组、叶酸组较模型组血清Hcy指标低(P<0.05),岷当归中、高剂量组血清Hcy指标低于低剂量组(P<0.05)。模型组血浆TXB_2指标较正常组升高(P<0.05),岷当归各剂量组、叶酸组血浆TXB_2水平较模型组低(P<0.05),岷当归各剂量组血浆TXB_2指标较叶酸组低(P<0.05),高剂量组血浆TXB_2指标较岷当归低、中剂量组低(P<0.05)。结论:大剂量岷当归能够降低HHcy兔血清Hcy与血浆TXB_2指标,减少血管内皮损伤与抑制血小板活化。

伊维菌素微乳制剂的溶血性试验

为了观察新型兽药制剂伊维菌素微乳是否具有溶血和红细胞凝聚等反应,试验以《化学药物刺激性、过敏性和溶血性研究技术指导原则》为指导,取兔血,采用常规体外试管法,观察伊维菌素微乳制剂是否出现溶血现象。结果表明:伊维菌素微乳制剂未出现溶血和红细胞凝聚现象,可供注射使用。说明伊维菌素微乳制剂无溶血性,安全可靠。