基于CREB3L1探讨矾冰纳米乳对兔耳增生性瘢痕模型相关蛋白及炎症因子的影响

目的观察矾冰纳米乳对兔耳增生性瘢痕组织环腺苷酸应答元件结合蛋白3样1(CREB3L1)及炎症损伤的影响,探讨其预防增生性瘢痕的作用机制。方法将30只新西兰大耳白兔随机分为空白组、模型组、积雪草苷组及矾冰纳米乳低、中、高剂量组(8.15、16.3、32.6 mg·mL^(-1))。采用热力烫伤法进行造模,深Ⅱ度烧伤造模成功后第14天给予相应药物外用,空白组、模型组外用等量生理盐水,每日2次,连续给药至第35天。苏木素-伊红(HE)染色观察兔耳瘢痕组织病理学改变;马松(Masson)染色观察瘢痕组织胶原沉积情况;免疫荧光双标法检测兔耳瘢痕组织CREB3L1/α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)共表达情况;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测瘢痕组织白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素10(IL-10)等炎性因子表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测CREB3L1、Ⅰ型胶原蛋白(COL-Ⅰ)、Ⅲ型胶原蛋白(COL-Ⅲ)、α-SMA mRNA表达;蛋白免疫印迹法(Western Bolt)检测CREB3L1、COL-Ⅰ、COL-Ⅲ、α-SMA的蛋白表达情况。结果与空白组比较,模型组瘢痕增生指数明显升高(P<0.01);病理学改变包括真皮层增厚,形成致密的网状纤维,伴见炎症细胞浸润;Masson染色可见真皮层增厚,蓝染的胶原纤维大量沉积排列紊乱;免疫荧光双标结果显示,瘢痕组织中CREB3L1阳性表达增加,α-SMA阳性表达增加,IL-6含量明显升高(P<0.01),IL-10含量明显降低(P<0.01),兔耳瘢痕组织中的CREB3L1、COL-Ⅰ、COL-Ⅲ、α-SMA mRNA相对表达量明显增加(P<0.01),CREB3L1、COL-Ⅰ、COL-Ⅲ、α-SMA蛋白的表达明显增加(P<0.01)。与模型组比较,矾冰纳米乳中、高剂量组及积雪草苷组治疗后瘢痕增生指数均明显下降(P<0.05,P<0.01),病理改变可见真皮层变薄,炎性细胞均有不同程度减少,蓝染的胶原纤维减少,免疫荧光双染可见瘢痕组织中CREB3L1阳性表达降低,α-SMA阳性表达降低,IL-6含量明显降低(P<0.01),IL-10含量明显升高(P<0.01),矾冰纳米乳中、高剂量组和积雪草苷组均能够明显下调CREB3L1、COL-Ⅰ、COL-Ⅲ、α-SMA mRNA的表达(均P<0.01),降低CREB3L1、COL-Ⅰ、COL-Ⅲ、α-SMA蛋白的表达(P<0.05,P<0.01)。结论矾冰纳米乳能够通过调节CREB3L1及相关纤维化蛋白的表达,降低炎症水平,从而预防增生性瘢痕形成,丰富了中医“既病防变”“治未病”思想的科学内涵。

红外热成像技术在兔静脉血栓栓塞诊断中的应用价值

目的探讨红外热成像技术在兔静脉血栓栓塞诊断中的应用价值。方法选择雄性新西兰大白兔60只,随机分为T0组、T1组、T2组、T3组,每组15只。T1组、T2组、T3组制备血瘀证动物模型,T1组于实验第1天造模1次,T2组于实验第1、2天各造模1次,T3组于实验第1、2、3天各造模1次。T0组仅双后肢备皮,不制备血瘀证动物模型。T0组备皮后6 h,T1组、T2组、T3组末次造模后6 h,采用红外热成像技术检测双后肢温差;采用彩色多普勒超声诊断仪测量右后肢股静脉内径和血流量;腹主动脉取血,离心留取血清,采用ELISA法检测凝血功能[纤维蛋白原(FIB)、抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)、D-二聚体(D-Dimer)]、炎症因子[IL-1β、IL-6、超氧化物歧化酶(SOD)、TNF-α],采用一氧化氮(NO)测试盒(一步法)检测血清NO;空气栓塞法处死实验动物,解剖右后肢深静脉和肺动脉,观察右后肢深静脉和肺动脉血栓形成情况并测量其长度。结果双后肢温差分布:T0组<T1组<T2组、T3组(P均<0.05),而T2组与T3组比较差异无统计学意义(P>0.05)。右后肢股静脉内径和血流量:T0组>T1组>T2组>T3组(P均<0.05)。FIB:T0组<T1组<T2组<T3组(P均<0.05);AT-Ⅲ:T0组、T1组>T3组,T1组>T2组(P均<0.05);D-Dimer:T0组、T1组<T2组<T3组(P均<0.05)。各组血清IL-1β、IL-6、SOD、TNF-α水平比较差异均无统计学意义(P均>0.05);NO:T0组、T1组<T2组、T3组(P均<0.05)。右后肢深静脉血栓长度:T0组<T1组<T2组、T3组(P均<0.05),而T2组与T3组比较差异无统计学意义(P>0.05);肺动脉血栓长度:T0组、T1组<T2组、T3组(P均<0.05),T0组与T1组、T2组与T3组比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论红外热成像技术对兔静脉血栓栓塞具有一定诊断价值,可作为一种辅助诊断手段。

隔药饼灸对环磷酰胺诱导免疫抑制兔共刺激分子CTLA-4、4-1BB、CD28的影响

目的探讨隔药饼灸对环磷酰胺诱导免疫抑制兔共刺激分子细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4)、4-1BB、CD28的影响。方法选择大耳白兔32只,随机分为空白组、模型组、艾条灸组和隔药饼灸组,每组8只。模型组、艾条灸组和隔药饼灸组予环磷酰胺诱导免疫抑制模型。模型制备成功次日,艾条灸组和隔药饼灸组分别予艾条灸和隔药饼灸,隔日1次,共10次。空白组和模型组不予艾灸。艾条灸组和隔药饼灸组末次干预次日,空白组和模型组同时间,采集腹腔静脉血,离心留取血清,采用ELISA法检测血清CTLA-4、4-1BB、CD28;腹腔静脉取血后,摘取脾脏和肝脏,免疫组化法检测脾脏和肝脏组织CTLA-4、4-1BB蛋白表达。结果模型组血清CTLA-4、CD28水平均高于空白组,血清4-1BB水平低于空白组(P均<0.05);与模型组比较,艾条灸组和隔药饼灸组血清CTLA-4、CD28水平均降低,血清4-1BB水平均升高(P均<0.05);与艾条灸组比较,隔药饼灸组血清CTLA-4、CD28水平均降低,血清4-1BB水平升高(P均<0.05)。模型组脾脏和肝脏组织CTLA-4阳性表达均高于空白组,4-1BB阳性表达均低于空白组(P均<0.05)。与模型组比较,艾条灸组脾脏和肝脏组织CTLA-4阳性表达均降低(P均<0.05),肝脏组织4-1BB阳性表达升高(P<0.05),而脾脏组织4-1BB阳性表达升高不明显(P>0.05);隔药饼灸组脾脏和肝脏组织CTLA-4阳性表达均降低(P均<0.05),4-1BB阳性表达均升高(P均<0.05)。艾条灸组与隔药饼灸组脾脏和肝脏组织CTLA-4、4-1BB阳性表达比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论隔药饼灸能够通过调节共刺激分子CTLA-4、4-1BB、CD28而改善环磷酰胺诱导免疫抑制兔的免疫功能,其效果优于艾条灸。

康柏西普结膜下注射对兔小梁切除术后滤过通道内瘢痕形成的影响

目的探讨康柏西普结膜下注射对兔小梁切除术后滤过通道内瘢痕形成的影响。方法选择健康新西兰大白兔40只,按随机数字表法随机分成4组:小梁切除术中联合应用丝裂霉素组(A组)、小梁切除术毕注射康柏西普组(B组)、小梁切除术中联合应用丝裂霉素并术毕注射康柏西普组(C组)、小梁切除术毕注射生理盐水组(D组),每组10只。于兔右眼行标准小梁切除术,手术前后测量眼压,用裂隙灯显微镜观察术眼滤过泡形态和并发症情况;术后第28天,摘取术眼,剪取滤过泡区域组织,HE染色观察滤过通道组织病理变化,Masson染色观察滤过通道组织胶原蛋白沉积和纤维化程度,免疫组织化学染色观察滤过通道组织CD31表达。结果各组眼压于术后第3天降至最低,术后第7天逐渐回升,术后第28天几乎完全恢复至术前水平。术后第7天,A、B、C组术区均形成功能性滤过泡,D组滤泡表面结膜血管密集,血管化明显,滤过泡区域扁平。其中,A组滤泡高度升高,表面血管稀疏;B组滤泡弥漫性升高,滤泡表面未见明显充血;C组滤泡弥漫性升高,滤泡表面及结膜表面未见明显充血。随着时间延长,至术后28天,各组术区结膜均逐渐充血减轻消退,滤过泡局限、扁平。术后第28天,A、B组术眼组织病理学特征相似,均可见疏松的胶原纤维排列及局部增厚的上皮组织,伴有淋巴细胞点状浸润;A、C组均可见到虹膜中较多上皮细胞变性,细胞肿胀,胞质空泡化,而B组未见到此类病理改变。术后第28天,A、B、C组滤过通道胶原纤维占比均低于D组(P均<0.05),并且B组滤过通道胶原纤维占比低于A、C组(P均<0.05);B组滤过通道组织中微血管数目明显低于A、C、D组(P均<0.05)。结论康柏西普能够抑制兔小梁切除术后滤过通道新生血管形成和瘢痕化,辅助维持滤过泡形态,从而有效提高青光眼小梁切除术成功率。

二甲双胍基于Nrf2/HO-1/NF-κB信号通路对腰椎间盘退变的影响

目的探讨二甲双胍基于核转录因子红系2相关因子2(Nrf2)/血红素氧合酶1(HO-1)/核转录因子κB(NF-κB)信号通路对腰椎间盘退变的影响。方法选取120只雄性新西兰大白兔,选取其中100只大白兔建立腰椎间盘退变模型,并随机分为模型组(灌胃生理盐水10 mL/kg)、二甲双胍低剂量组(灌胃二甲双胍40 mg/kg)、二甲双胍高剂量组(灌胃二甲双胍160 mg/kg)、Nrf2抑制剂组(腹腔注射全反式维甲酸7 mg/kg)、二甲双胍+Nrf2抑制剂组(灌胃二甲双胍160 mg/kg+腹腔注射全反式维甲酸7 mg/kg),每组20只。将其余20只大白兔作为假手术组(灌胃生理盐水10 mL/kg)。各组大白兔给予相应干预4周后,进行X线及MRI检查,以观察腰椎骨质改变情况及退变程度;采用HE染色法观察各组大白兔椎间盘组织形态变化;采用免疫组化染色法检测各组大白兔椎间盘组织Ⅱ型胶原蛋白、Nrf2阳性表达水平;采用ELISA检测各组大白兔椎间盘组织白细胞介素(IL)-6、IL-1β、活性氧簇、丙二醛水平;采用Western blot检测各组大白兔椎间盘组织Nrf2/HO-1/NF-κB信号通路相关蛋白、超氧化物歧化酶2(SOD2)蛋白、过氧化氢酶(CAT)蛋白、Caspase-3蛋白、Ⅰ型胶原蛋白表达量。结果(1)与假手术组相比,模型组大白兔的椎间盘纤维环及髓核细胞坏死严重,L 4~5椎间盘相对高度降低,椎间盘Prirrmann分级评分升高,椎间盘组织中的Ⅱ型胶原蛋白及Nrf2平均光密度值均降低,IL-6、IL-1β、活性氧簇、丙二醛水平均升高,Nrf2蛋白、HO-1蛋白、SOD2蛋白、CAT蛋白、Ⅰ型胶原蛋白表达量均降低,磷酸化NF-κB(p-NF-κB)/NF-κB值、Caspase-3蛋白表达量均升高(均P<0.05)。(2)与模型组相比,二甲双胍低剂量组、二甲双胍高剂量组大白兔的椎间盘纤维环及髓核细胞坏死情况有所改善,L 4~5椎间盘相对高度均升高,椎间盘Prirrmann分级评分均降低,椎间盘组织中的Ⅱ型胶原蛋白及Nrf2平均光密度值均升高,IL-6、IL-1β、活性氧簇、丙二醛水平均降低,Nrf2蛋白、HO-1蛋白、SOD2蛋白、CAT蛋白、Ⅰ型胶原蛋白表达量均升高,p-NF-κB/NF-κB值、Caspase-3蛋白表达量均降低(均P<0.05),且二甲双胍高剂量组上述指标优于二甲双胍低剂量组。(3)与模型组相比,Nrf2抑制剂组上述观察指标的变化均与二甲双胍各剂量组相反。(4)相比于二甲双胍低剂量组、二甲双胍高剂量组,二甲双胍+Nrf2抑制剂组大白兔的椎间盘纤维环及髓核细胞坏死更严重,椎间盘Prirrmann分级评分升高,椎间盘组织中的Ⅱ型胶原蛋白及Nrf2平均光密度值均降低,IL-6、IL-1β、活性氧簇、丙二醛水平均升高,Nrf2蛋白、HO-1蛋白、SOD2蛋白、CAT蛋白、Ⅰ型胶原蛋白表达量均降低,p-NF-κB/NF-κB值、Caspase-3蛋白表达量均升高(均P<0.05)。结论二甲双胍可能通过激活Nrf2/HO-1信号通路,抑制NF-κB活化,来发挥抗炎、抗氧化应激及抗凋亡作用,从而延缓椎间盘退变,且高剂量(160 mg/kg)二甲双胍的干预效果更好。

螺旋CT对日本大耳白兔气道的测量研究

目的探讨日本大耳白兔气管和主支气管各解剖径线的长度、角度及相关性,为进行气道疾病内支架介入治疗的动物实验研究奠定基础。方法用多层螺旋CT扫描30只成年健康日本大耳白兔的颈胸部,测量和测算气管各段前后径、左右径,声门水平到隆突的气管长度,左右主支气管和中间支气管内径与长度,以及左、右主支气管长轴与矢状面的夹角。结果气管各段直径、左右上肺尖叶支气管开口内径无差异,右主支气管长度、右主支气管长轴与矢状面夹角小于左侧,右主支气管内径大于左侧并有相关性。结论多层螺旋CT测定的日本大耳白兔气管、左和右主支气管径线值,获得左、右主支气管内径值、长度、嵴下角之间的回归方程,有助于为兔实验提供相关气管和支气管的解剖参数。

螺旋CT测量日本大耳白兔气道径线的窗宽窗位选择

目的探讨日本大耳白兔气管和主支气管解剖径线CT测量的窗位与窗宽选择,为气道支架动物实验奠定基础。方法多层螺旋CT扫描30只成年健康日本大耳白兔的胸部,分别常规肺窗、纵隔窗和特殊的脂肪窗测量气管胸段前后径、左右径、左右主支气管前后径。比较不同窗宽窗位下气管壁显示以及测量数据与解剖数据之间的差异。结果肺窗气管壁均清晰显示,但测量的结果偏小;纵隔窗气管壁显示模糊,测量的结果偏大;而脂肪窗气管壁显示均匀,测量的数据比较接近实际气管直径的解剖参数。结论多层螺旋CT测定日本大耳白兔气管左右径和前后径应选择脂肪窗为佳。有助于为人相关气管和支气管定制气道支架确定最佳的窗宽和窗位。

超高效液相色谱-串联质谱法测定兔血浆中的丝裂霉素C

建立了采用超高效液相色谱-串联质谱测定兔血浆中丝裂霉素C的方法。以兔空白血浆为基质,通过添加标准溶液的方法配制含丝裂霉素C和内标物曲安奈德的样品,选用乙酸乙酯为提取溶剂,液-液萃取法处理血浆样品。采用Hypersil Gold C18分析柱(50 mm×2.1 mm,1.9μm),流动相为甲醇-0.1%甲酸水溶液(90∶10,v/v),等度洗脱,流速0.2 mL/min,柱温35℃,在3 min内实现了快速分离。采用电喷雾正离子(ESI+)模式电离,选择反应监测(SRM)模式检测,以曲安奈德作为内标物进行定量。用于监测的定量离子对分别为丝裂霉素C m/z 335.2→242.2和曲安奈德m/z 435.2→397.3/415.2,用基质匹配标准溶液法进行定量。结果表明:兔血浆中丝裂霉素C的质量浓度在1～1 000μg/L范围内线性关系良好(r=0.997 8,权重系数(weighting):1/x2);血浆中丝裂霉素C的检出限(信噪比为3)为0.2μg/L;其平均回收率为85%～115%;日内及日间的相对标准偏差(RSDs)均小于15%,满足生物样品检测的要求。该方法可用于兔气管外壁给药后的血浆样品中丝裂霉素C的检测。本方法选择性强、灵敏度高、操作简便快速、重现性好,适用于丝裂霉素C药代动力学等方面的研究。

玻连蛋白在肺血栓栓塞中国大耳白兔肺动脉内皮中的表达

目的:研究玻连蛋白(vitronectin,Vn)在肺血栓栓塞(pulmonary thromboembolism,PTE)中国大耳白兔肺动脉内皮中的表达变化,以及Vn在肺血栓栓塞病理过程中的作用。方法:将28只健康成年中国大耳白兔随机分为观察组和对照组,经股静脉分别注射自体血栓和生理盐水。各组于注射后1、3、5、7 d处死动物并取肺动脉及肺组织。分别进行苏木精-伊红(hematoxylin and eosin,H&E)染色、免疫组织化学染色及实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测,观察肺组织及肺血管结构、定位及定量分析Vn在肺动脉中表达情况。结果:H&E染色显示观察组动脉内血栓栓塞,而对照组肺组织及肺动脉正常。免疫组织化学染色表明Vn表达于肺动脉内皮;qRT-PCR结果表明观察组肺动脉内皮中Vn表达量均高于对照组(P<0.05),且在第3天达峰值(P<0.05)。结论:Vn在肺血栓栓塞白兔肺动脉内皮中表达水平增高,Vn可能参与了肺血栓栓塞病程中的血栓形成过程。

基于“隐喻”的风险事件分类模型及其转化关系

为了加强对风险的管控,探究风险事件的分类标准以及不同类型风险事件之间的转化关系,基于“隐喻”理论以及风险矩阵模型,确定风险事件分类的依据和标准,在此基础上确定风险事件分类模型。以风险事件发生的可能性和后果严重性相对大小作为分类依据,将风险事件划分为黑天鹅事件、灰犀牛事件、金丝猴事件和大白兔事件4类,并分别从风险量化视角、评估者知识量视角和时间视角对典型风险事件之间的转化关系进行了讨论。研究发现,风险量化主要从风险事件发生的可能性和后果2个方面进行,评估者知识量大小对风险事件类型判断有重要影响,风险事件发展的历程中事件的所属类型也随之不断变化。

丝裂霉素C-聚乳酸凝胶兔气管外壁给药后体内释放量的测定

目的将丝裂霉素C(MMC)与聚乳酸(PLA)制成凝胶制剂固定在兔气管外壁给药,并建立超高效液相色谱-串联质谱法(UHPLC-MS/MS)测定兔体内释放丝裂霉素C的含量。方法新西兰大白兔30只,气管处外科手术形成瘢痕组织,将0.2 ml载有不同剂量(0.05、0.1、0.2、0.4和0.6mg)的聚乳酸凝胶与明胶海绵的混匀后置于损伤后的气管外壁,固定后缝合手术切口。兔血浆经乙酸乙酯提取后,采用UHPLC-MS/MS法测定MMC血浆药物浓度。结果兔血浆中丝裂霉素C的质量浓度在1～1 000μg·L-1范围内线性良好(r=0.9977,权重W:1/x2);血浆中丝裂霉素C的检出限(信噪比为3)为0.2μg·L-1;其平均回收率在85%～115%之间;日内及日间的相对标准偏差(RSDs)均小于15%,满足生物样品分析要求。兔气管外壁给药后,血浆中MMC释放量少,血药浓度极低,此为选择UHPLC-MS/MS的主要依据。结论该方法简便快捷、灵敏度高、重现性好,适用于丝裂霉素C的体内大批量样品定量分析及药代动力学等方面的研究。MMC-PLA凝胶局部用药后吸收量极少,说明此凝胶剂对全身影响不大。

神经干注射安定病理生理改变的实验研究

目的 观察兔坐骨神经干注射安定前后的病理、生理改变。方法 用 9只实验用大白兔电针探测坐骨神经，试验侧注射安定 5 mg，对照侧注射生理盐水 1 ml,观察注药前后各时段坐骨神经阈电位改变及坐骨神经病理改变。结果 试验侧注药后神经阈电位显著大于注药前及对照侧 (P0.05)。电镜观察病理过程符合 Sunderland轴突损伤定义。结论 安定直接神经注射能迅速抑制神经的兴奋性传导。

发光二极管光源照射日本大耳白兔皮肤的安全性评价

目的通过LED白色光源照射日本大耳白兔皮肤组织,对LED光源照射的安全性进行初步的评价。方法动物随机分成照射组和对照组。照射组动物剔除背部毛发,LED光源照射,强度为50 mw/cm2,对照组动物以普通日光灯光源照射,两组均每天照射5 h,连续3个月。观察动物皮肤有无红肿,测量动物进食、体重、体温等改变情况;照射完毕采集外周血测量常规、生化指标;Elisa分析免疫细胞及细胞因子改变情况;脏器组织病理检测,及分析皮肤弹力纤维变化情况;皮肤免疫组织化学分析C-myc、P53、细胞周期蛋白D1(CCND1)等癌基因及抑癌基因的表达变化。结果照射组兔皮肤未见红肿表现,体重在6周后稍高于对照组,体温3周、6周有差别,进食未见异常;血常规有白细胞增多,生化检测尿素、肌酐水平有增高,但在正常范围内;ELISA分析血免疫细胞CD3T细胞、细胞因子IL-6、TNF-α、IFN-γ水平在两组无明显差别,照射组动物CD19B细胞,IL-4水平升高;照射组动物脏器组织病理未见明显异常结构改变,皮肤弹性纤维分布无异常;皮肤组织内细胞周期蛋白(CCND1),C-Myc蛋白,P53蛋白表达与对照组相比没有差异。结论 LED光源照射日本大耳白兔3个月后,未引起体内明显的组织病理学改变,也未引起皮肤肿瘤相关因子的改变。

红景天胶囊对兔急性心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的研究红景天胶囊对兔急性心肌缺血再灌注损伤的的影响及其保护机制。方法实验选取10只健康日本大耳白兔为假手术组,另取20只随机分为模型组及红景天组,2组均采用手术结扎左侧冠状动脉前降支30 min后再灌注60 min,反复3次以造成急性心肌缺血再灌注损伤动物模型。术后3组动物均灌胃给药,测定治疗前及治疗1、2周总超氧化物歧化酶(T-SOD)、一氧化氮(NO)、血管内皮素-1(ET-1)、血清丙二醛(MDA)、血清肌酸激酶(CK)、白细胞介素-6(IL-6)水平,记算治疗2周后兔心肌缺血梗死率(%)等指标,并分析红景天胶囊对兔急性心肌缺血再灌注损伤的影响。结果红景天胶囊明显提高红景天组兔NO含量及T-SOD活性,降低ET-1及血清MDA、CK、IL-6水平,减少急性心肌缺血梗死率,与模型组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论红景天胶囊可提高兔急性心肌缺血再灌注后T-SOD及NO活性,促进氧自由基清除酶清除氧自由基、降低心肌缺血时脂质过氧化,进而改善再灌注损伤后受损血管内皮并维持其正常功能,增加心肌组织耐缺氧能力,对急性心肌缺血再灌注具有保护作用。

中药敷贴预防兔骨外固定支架针孔感染的效果

目的构建大耳白兔胫骨外固定模型,应用新型中药敷贴护理方法对兔骨外固定支架针孔进行护理,以论证新型中药敷贴的有效性及可行性,为临床护理提供理论依据。方法选用5~7个月月龄的新西兰大耳白兔作实验对象,共30只,体重2.5~3.0 kg,并适应性喂养1周。建立兔骨外固定支架模型,采用中药配方:天花粉100 g,大黄100 g,骨碎补100 g,自然铜100 g,黄柏60 g,血竭20 g,甘草20 g。按照制作创可贴的工艺和流程制作5 cm×3 cm中药敷贴。按随机排列表法将造模好的大耳白兔分为5组,每组6只。实验组为新型中药敷贴护理组,分为A1组与A2组,对照组为75%乙醇护理组(B组)、碘伏护理组(C组)、零护理组(D组),每组6只。其中A1组每3 d更换敷料1次,A2组延长更换敷料时间至每7 d 1次,B、C和D组均按每3 d更换敷料1次,有渗血渗液则及时更换敷料。通过检测血白细胞(WBC)计数及降钙素原(PCT)含量并观察针孔处局部情况进行效果评价。结果 A1组耳缘静脉血WBC计数和PCT含量在术后第7天、第14天均明显低于B、C及D组,差异有统计学意义(P<0.05);A1与A2组间比较,差异无统计学意义(P>0.05);A1组与A2组发生红肿率均为33.33%,C、D两组均为50%,B组为100%;部分存在脓液外渗等现象,穿针处皮肤周围有黄色分泌物,周围组织部分溃疡坏死,A1组分泌物发生率为16.67%,A2组为0,B组为66.67%,C、D两组均为33.33%。结论新型中药敷贴具有消肿止痛、止血生肌的功效,在预防兔骨外固定支架针孔感染中的效果显著,且优于临床上传统针孔护理方法,为进一步临床护理试验提供了动物实验依据。

清热消肿止痛膏的制备及其皮肤安全性评价研究

[目的]制备清热消肿止痛膏并考察其皮肤安全性。[方法]采用正交实验,以盐酸小檗碱和盐酸黄柏碱含量之和及收膏率作为评价指标,优选清热消肿止痛膏醇提工艺;考察稠膏的密度、基质的制备、稠膏的用量,筛选制剂成型工艺参数;以大耳白兔、豚鼠为模型,对制剂进行皮肤刺激性和过敏性实验。[结果]提取工艺:分别以6、5倍量的50%乙醇提取处方量药材两次,每次提取时长为1.5 h。制剂成型工艺:稠膏相对密度为1.22~1.27(80℃);基质用压敏胶与乙酸乙酯10∶1(g/g)制备,采用稠膏与基质1∶2体积制成膏体。皮肤安全性实验:清热消肿止痛膏对皮肤无刺激性及过敏性现象发生。[结论]清热消肿止痛膏的制备工艺科学合理,稳定可行,成品制剂外用安全性良好。

日本大耳白兔和新西兰兔体温周期变动规律的研究

目的 探讨生理状况下普通级日本大耳白兔和新西兰兔的体温变化规律.方法 在23.5 ～28℃、相对湿度54％ ～ 65％的环境下,利用稻盛弘TM无线自动测温平台对处于自由状态下的家兔进行自动连续测温.对31.2万次形成12480个家兔时点体温数据分析.结果 早晚定时定量饲喂条件下,参试动物昼夜体温呈W型规律性波动,1：00 ～6：00、15：00～ 18：00为体温上升期,7：00～ 11：00、20：00 ～0：00为体温下降期,5：00 ～8：00、1 8：00 ～ 20：00为体温波峰期,23：00 ～2：00、11：00～ 15：00为体温波谷期.体温波动较大的区间集中在采食后5h以内,4：00～7：00、8：00～ 11：00、16：00 ～ 24：00的14h内每4h体温变化较大.0：00 ～4：00、7：00 ～ 8：00、11：00 ～ 16：00的10h内体温变化较小,适合进行热原实验.结论 家兔体温在采食后2～5h呈体温下降趋势,23：00 ～2：00、11：00 ～ 15：00为体温波谷期.热原检查试验适合在0：00 ～3：00和12：00 ～ 15：00进行.目前生物制品所涉及动物实验中被广泛采用的按24 h平均时间间隔测温的方法或有商榷余地.

癫狂梦醒汤对兔动脉粥样硬化血管基质金属蛋白酶-9表达的影响

目的观察癫狂梦醒汤对兔动脉粥样硬化(AS)血管基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响,以期为癫狂梦醒汤抗AS提供理论依据。方法将32只日本大耳白兔随机分成空白对照组、模型组、癫狂梦醒汤组。采用高脂喂饲制作AS模型。第12周末观察动脉血管内膜厚度,免疫组化法观察MMP-9蛋白表达。结果以高脂喂养成功建立AS模型,模型组血管内膜增厚,MMP-9蛋白表达明显增强;癫狂梦醒汤组血管内膜变薄,MMP-9蛋白表达明显下降(P<0.01)。结论癫狂梦醒汤可抑制MMP-9蛋白表达,明显抑制AS发生发展。

三黄片抗动脉粥样硬化的实验研究

目的:探讨三黄片抗动脉粥样硬化的效果。方法:选取40只大白兔,随机分为对照组、模型组、三黄片高剂量组、三黄片低剂量组,每组各10只。对照组给予普通饲料及纯化水,其余3组喂养高脂饲料,三黄片高剂量组、低剂量组分别给予0.24 g·m L-1及0.12 g·m L-1的溶液,于给药结束后耳缘静脉取血,检测丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)、低密度脂蛋白(LDL-C)、甘油三酯(TG)总胆固醇(TC)等指标,同时测定血压,比较各组指标变化。结果:给药10周后,模型组较对照组血清中SOD及NO含量明显升高,MDA含量显著降低,收缩压及舒张压明显升高,TG、LDL-C及TCHO含量明显升高(P<0.05);与模型组比较,三黄片高剂量组、低剂量组血清中SOD及NO含量明显升高,MDA含量明显降低,收缩压及舒张压明显降低,TG、LDL-C及TCHO含量明显降低,有显著性差异(P<0.05)。结论:三黄片具有调节大白兔的血压、清除氧自由基、防止脂质过氧化等作用,对动脉粥样硬化模型具有较好的防治作用。

大剂量岷当归对高同型半胱氨酸血症兔TXB_2的影响

目的:观察大剂量岷当归对高同型半胱氨酸血症(HHcy)兔血清Hcy与血浆TXB_2的影响。方法:日本大耳白兔48只,随机分为正常组、模型组、岷当归低、中、高剂量组及叶酸对照组各8只。采用L-蛋氨酸皮下注射法建立HHcy家兔模型。造模8周后,岷当归低、中、高剂量组分别给予岷当归水煎液1.4g/(kg·d)、2.8g/(kg·d)、5.6g/(kg·d)灌胃,叶酸组给予叶酸1.5mg/(kg·d)、维生素B_6 20mg/(kg·d)、维生素B_(12) 0.25mg/(kg·d)灌胃。12周后检测血清同型半胱氨酸(Hcy)、血浆血栓素B2(TXB_2)指标。结果:模型组血清Hcy指标高于正常组(P<0.05),岷当归低、中、高剂量组、叶酸组较模型组血清Hcy指标低(P<0.05),岷当归中、高剂量组血清Hcy指标低于低剂量组(P<0.05)。模型组血浆TXB_2指标较正常组升高(P<0.05),岷当归各剂量组、叶酸组血浆TXB_2水平较模型组低(P<0.05),岷当归各剂量组血浆TXB_2指标较叶酸组低(P<0.05),高剂量组血浆TXB_2指标较岷当归低、中剂量组低(P<0.05)。结论:大剂量岷当归能够降低HHcy兔血清Hcy与血浆TXB_2指标,减少血管内皮损伤与抑制血小板活化。