利用HPLC法检测葡萄酒中的生物胺

建立了葡萄酒中生物胺的一种柱前衍生反相高效液相色谱-紫外检测方法,以高氯酸提取葡萄酒中生物胺,丹磺酰氯为衍生剂,1,7-二氨基庚烷为定量内标,采用C18色谱柱分离,流动相为乙腈和水,梯度洗脱,流速为1mL/min,紫外检测波长254 nm。结果表明,色胺、腐胺、尸胺、组胺、酪胺、精胺和亚精胺在18 min内得到良好分离。在0.1～20 mg/L浓度范围内,各组分生物胺呈现良好线性相关(r>0.9)。在葡萄酒中添加生物胺混合标准溶液,平均回收率为95.63%～104.79%,相对标准偏差RSD小于10%。4种酒样的检测结果令人满意。采用柱前衍生高效液相色谱-紫外检测,满足了葡萄酒中生物胺检测的需要。

高效液相色谱法测定生物胺衍生条件的优化研究

利用荧光检测器(FLD),采用柱前衍生高效液相色谱法(HPLC)对组胺(HIS)、色胺(TRP)、2-苯乙胺(2-PHE)、腐胺(PUT)、尸胺(CAD)、酪胺(TYR)、亚精胺(SPD)和精胺(SPM)8种生物胺(BA)进行测定分析。通过探究丹酰氯(Dns-Cl)质量浓度、反应体系的pH、衍生时间及衍生温度对生物胺衍生反应的影响,确定最优的衍生条件。结果显示,当Dns-Cl的质量浓度为BA质量浓度的10倍、pH 11.0、40℃下避光反应45 min,所有BA均能有效分离。BA的相对标准偏差(RSD)在3%以内,能够满足分析要求。

对甲氧基苯磺酰氯柱前衍生生物胺的高效液相色谱分离

采用对甲氧基苯磺酰氯作为柱前衍生试剂,RP-HPLC为分析模式,建立了一种新的生物胺衍生化方法,并对葡萄酒中生物胺含量进行检测。通过液质联用对产物进行定性,研究并确定了最适衍生化条件:衍生温度50℃,缓冲液pH 9.0,衍生时间15 min。实验建立了7种生物胺的HPLC分离方法:Beckman ODS柱;流动相A为10 mmol/L的NH4Ac溶液(pH 6.37),B相为乙腈;采用梯度洗脱;流速1 mL/min;检测波长240 nm,室温。

柱前DCI衍生-固相萃取-高效液相色谱法快速测定干酪中的6种生物胺

研究了利用RP—HPLC对干酪中6种生物胺进行测定，分别采用三氯醋酸、高氯酸、盐酸、无水乙醇、无水甲醇作为提取溶剂对干酪样品中的生物胺进行提取，经丹磺酰氯（DCI）柱前衍生后，利用固相萃取装置萃取生物胺衍生产物，然后上机检测．采用乙腈一超纯水为流动相，梯度洗脱，流速1mL／min，利用荧光检测器进行检测。结果表明，采用浓度为0．1m01／L的盐酸作为干酪中生物胺的提取试剂比其他4种溶剂更为适宜；固相萃取步骤的引入对进一步富集，纯化衍生产物起到了重要作用；干酪中的6种生物胺在25min内被快速检出，6种生物胺的整体回收率较高，相对标准偏差（RSD）为1．7-~6．7％，最低检出限0．0037-0．0182mg／L。该方法是一种针对干酪中6种常见生物胺的快速高效的检测方法。

响应面法优化丹磺酰氯衍生生物胺的衍生条件

通过采用响应面法优化丹磺酰氯同8种生物胺反应的衍生温度、衍生时间和衍生剂用量,研究不同衍生因素之间的交互作用,以期为生物胺衍生条件的优化提供更为科学、直观的理论依据。研究结果表明:用10mg/mL的丹磺酰氯衍生20μg/mL的8种生物胺混标(工作)溶液,在衍生温度40.06℃,衍生时间34.70min,衍生剂添加量3mL时,生物胺的衍生产率最高,由模型得到生物胺总面积的预测值与验证试验的吻合率达到100.05%,说明该模型能较好地预测丹磺酰氯衍生生物胺的衍生效果,具有较高参考价值。同时,通过响应面交互作用分析表明,在以8种生物胺总面积为研究对象时,衍生温度与衍生时间、衍生剂用量并没有显著的交互作用(P>0.05),衍生时间与衍生剂用量之间存在显著(P<0.05)的交互作用。

高效液相色谱法检测食品中生物胺的不同离线衍生策略的比较分析

目的比较和分析高效液相色谱法检测食品生物胺过程中最常用的4种离线衍生策略。方法分别采用丹磺酰氯、9-芴甲基氯甲酸酯、苯甲酰氯、4-二甲胺基苯基偶氮苯磺酰氯对混合酱油样品和混合葡萄酒样品中的生物胺进行衍生,分别于衍生后的0、24和48 h用紫外检测器-反相高效液相色谱法定量分析生物胺衍生物的水平。结果4种衍生剂均能与腐胺、尸胺、精胺、亚精胺、酪胺、β-苯乙胺、组胺、色胺的胺基反应,但衍生产物的稳定性不同,采用丹磺酰氯制备的生物胺衍生物最稳定,在室温下放置48h未发现显著降解,而采用其他衍生剂制备的某些特定生物胺衍生物则发生了显著降解。此外,采用不同衍生策略制备的8种生物胺衍生物在C_(18)色谱柱上的洗脱顺序也存在差异。结论采用丹磺酰氯制备的生物胺衍生物具有高稳定性,适合在高效液相色谱仪上采用批处理程序进行定量分析,而采用其他3种衍生剂制备的某些特定生物胺的衍生物稳定性不佳,不适合在高效液相色谱仪上采用批处理程序进行定量分析。

黄酒中生物胺的分析研究

采用丹磺酰氯为衍生试剂，建立了反相高效液相色谱法同时测定腐胺、尸胺、酪胺和组胺4种生物胺的方法，色谱条件为：C18色谱柱分离，甲醇和0．1％乙酸溶液为流动相梯度洗脱，流速0．8mL／min，二极管阵列检测器，检测波长为254nm。以1，7-二氨基庚烷为内标。给定条件下4种生物胺得到了较好的分离，线性相关性良好（r〉0．998）。腐胺、尸胺和酪胺的检测限为0．8蚓InL，组胺为4μg/mL。检测方法具有良好的重现性和回收率。在对几种黄酒中生物胺的分析发现4种含有腐胺，3种含有酪胺，各有一种含有组胺和尸胺，最高生物胺含量为435．5μg／g。

HPLC-FLD法检测黄酒中9种生物胺

目的建立高效液相色谱-荧光检测法(HPLC-FLD)检测黄酒中色胺、苯乙胺、腐胺、尸胺、酪胺、章鱼胺、组胺、亚精胺及精胺。方法生物胺与内标1,7-二氨基庚烷与衍生试剂丹磺酰氯在特定条件下进行衍生,衍生物用乙醚萃取、N2吹干,再用乙腈定容、混匀,过膜后进HPLC分析。以C18色谱柱为分离柱,FLD检测器检测,流动相为乙腈和水,梯度洗脱,流速为1 ml/min,柱温30℃,以保留时间定性,内标法定量。结果 9种生物胺在1.0 mg/L^75.0 mg/L范围内呈良好的线性关系,加标回收率在80%~121%,该法各组分检测限为0.06 mg/kg^0.71 mg/kg,回收率RSD值在0.69%~2.36%之间。结论本法操作简便、准确可靠,能够同时测定黄酒中9种生物胺的含量。

柱前衍生化RP-HPLC法同时测定多肽类药物中7个生物胺的含量

目的:建立柱前衍生化RP-HPLC法测定注射用胸腺肽、骨肽注射液、鲑降钙素注射液、注射用谷胱甘肽、转移因子口服液和转移因子胶囊中色胺、2-苯乙胺、腐胺、尸胺、组胺、酪胺、亚精胺7个生物胺含量。方法:样品经0.1mol·L^(-1)盐酸溶液溶解,以丹磺酰氯为衍生化试剂,用反相高效液相色谱法测定。采用C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以含0.1%醋酸的0.01 mol·L^(-1)醋酸铵溶液(A)-乙腈(B)为流动相,梯度洗脱(0~21 min,70%A→50%A;21~25 min,50%A→30%A;25~60 min,30%A;60~70 min,30%A→70%A),流速1.0 mL·min^(-1),检测波长254 nm,柱温35℃。结果:色胺、2-苯乙胺、尸胺、酪胺和亚精胺的线性范围均为0.1~50 mg·L^(-1)(r>0.999),腐胺的线性范围为0.06~31.91 mg·L^(-1)(r>0.999),组胺的线性范围为0.10~26.12 mg·L^(-1)(r>0.999);平均回收率在73.6%~104.0%。注射用胸腺肽检出的生物胺种类和含量最高,转移因子制剂其次,骨肽注射液中只检出组胺,鲑降钙素注射液和注射用谷胱甘肽均未检出生物胺。注射用胸腺肽检出腐胺、尸胺、组胺、酪胺和亚精胺。其中,注射用胸腺肽A企业样品中组胺和腐胺含量较高,分别约为0.113%、0.159%;B企业样品中尸胺、酪胺和亚精胺含量较高,分别约为0.373%、0.363%和0.090%;转移因子口服液和转移因子胶囊检出有腐胺、尸胺、酪胺和亚精胺。结论:该方法准确可靠,灵敏度高,重复性好,易于操作,可用于多肽类药物中生物胺的检测。

柱前衍生法测定烟叶中的7种生物胺

建立了丹磺酰氯柱前衍生高效液相色谱法(HPLC)测定烟草基因编辑素材中的7种生物胺的方法。采用0.4 mol/L HClO4进行样品超声提取,提取液经过pH调整后,利用丹磺酰氯(4 mg/mL)进行柱前衍生;衍生后的样品溶液利用优化的HPLC-DAD色谱方法进行检测;方法在1.0~50μg/mL范围内具有较好的线性(R^2>0.98),检出限在0.01~0.15μg/mL之间,定量限在0.05~0.25μg/mL之间,日间和日内精密度均小于5%,不同加标水平下,平均回收率在86.7%~124.0%之间。