自噬相关蛋白Atg5在BPA所致肝脏脂质沉积中的作用研究

目的:观察自噬相关蛋白Atg5是否介导双酚A(bisphenol A,BPA)所致的肝脏脂质沉积。方法:将Hep G2肝细胞分为对照组、BPA不同浓度(1、10μmol/L)干预组、阳性对照组即200μmol/L油酸(oleic acid,OA)联合400μmol/L软脂酸(Palmitic acid,PA),分别给予上述不同干预24 h。采用化学酶促-比色法定量检测细胞内甘油三酯(triglyceride,TG)含量,油红O染色观察细胞内脂滴沉积情况。Real-time PCR及Western blot、免疫荧光方法检测在不同干预情况下Hep G2细胞内Atg5的表达水平。结果:1不同浓度BPA干预后,Hep G2细胞内TG含量均有不同程度的升高,其中10μmol/L BPA组升高具有统计学意义(0.197±0.033;0.094±0.014,P=0.031);2油红O染色结果与TG定量一致。3Real-time PCR结果表明,与对照组相比10μmol/L BPA组Atg5 m RNA表达并无明显变化(0.93±0.088;1.017 5±0.062 4,t=0.811,P=0.428);Western blot结果显示与对照组相比10μmol/L BPA组其蛋白表达明显减少(0.519±0.059;1,t=0.8101,P=0.000);免疫荧光进一步检测发现,与对照组相比10μmol/L BPA组Atg5荧光小点数量明显减少。结论:自噬相关蛋白Atg5可能介导BPA所致的肝脏脂质沉积的发生。