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5株携带blaNDM-5基因大肠埃希菌临床株的分子流行特征分析 被引量:3
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作者 满思金 陈爱文 +4 位作者 李笃军 李日雷 赵辉 贾楠 朱元祺 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第22期5041-5044,共4页
目的探讨耐碳青霉烯类抗菌药物大肠埃希菌的耐药机制并对分离株的分子流行特征进行分析,为医院感染的防控提供依据。方法选取2015年5月-2016年10月住院患者标本分离的5株耐碳青霉烯类抗菌药物的大肠埃希菌,产金属碳青霉烯酶的筛选采用... 目的探讨耐碳青霉烯类抗菌药物大肠埃希菌的耐药机制并对分离株的分子流行特征进行分析,为医院感染的防控提供依据。方法选取2015年5月-2016年10月住院患者标本分离的5株耐碳青霉烯类抗菌药物的大肠埃希菌,产金属碳青霉烯酶的筛选采用亚胺培南/EDTA复合E-test条,采用PCR方法检测菌株携带的碳青霉烯酶、超广谱β-内酰胺酶、ampC酶和喹诺酮类耐药相关基因,并测序确认类型及其亚型,脉冲场凝胶电泳技术检测分离株间的同源性,液相质粒接合试验分析质粒的转移特性。结果除了阿米卡星和氨曲南外,5株大肠埃希菌对目前测试的头孢菌素、碳青霉烯类和喹诺酮类抗菌药物都耐药,且金属酶表型实验结果都呈现阳性;5株大肠埃希菌携带不同的耐药基因,但都携带blaNDM-5和blaTEM-1基因;脉冲场凝胶电泳显示5株大肠埃希菌的脉冲带型不一致,没有呈现克隆聚集性;质粒接合试验没有显示5株大肠埃希菌临床株(供体菌)将携带blaNDM-5的质粒转移到大肠埃希菌J53AziR(受体菌)。结论研究结果表明本地区存在携带blaNDM-5基因的大肠埃希菌的流行,但没有呈现克隆聚集暴发性,为预防和控制医院感染的暴发,必须重视和加强对耐碳青霉烯类抗菌药物肠杆菌的监测。 展开更多
关键词 大肠埃希菌 blandm-5 脉冲场凝胶电泳 碳青霉烯酶 耐药性
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两株blaNDM-5基因介导的碳青霉烯耐药禽源大肠杆菌ST10和ST354耐药性 被引量:6
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作者 卢亚兰 代正云 +4 位作者 陈凌云 陈怡飞 孙东昌 杨华 唐标 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期1837-1846,共10页
【背景】近年来,对碳青霉烯类抗生素耐药的肠杆科细菌的出现对公众的健康构成了严重的威胁。【目的】为了解家禽养殖中肠道菌对碳青霉烯类抗生素耐药情况,对陕西西安和浙江海宁两地的鸡和鸭养殖场粪便进行耐药菌筛选并分析。【方法】在... 【背景】近年来,对碳青霉烯类抗生素耐药的肠杆科细菌的出现对公众的健康构成了严重的威胁。【目的】为了解家禽养殖中肠道菌对碳青霉烯类抗生素耐药情况,对陕西西安和浙江海宁两地的鸡和鸭养殖场粪便进行耐药菌筛选并分析。【方法】在含美罗培南的LB琼脂平板上筛选可疑菌落并利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)鉴定。通过微量肉汤稀释法进行最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)测定。通过Illumina HiSeq平台进行全基因组测序。使用Res Finder数据库预测获得性耐药基因。利用S1酶切后脉冲场电泳(pulsed-field gel electrophoresis,PFGE)和Southern blot杂交进行质粒和碳青霉烯类耐药基因的确认。【结果】分离出两株碳青霉烯类耐药的大肠杆菌HN1-26和XN3-1,均对头孢他啶、头孢噻呋、氨苄西林、奥格门丁、复方新诺明、磺胺异恶唑、恩诺沙星、氧氟沙星、美罗培南、四环素耐药。此外,XN3-1对氟苯尼考和大观霉素耐药。菌株HN1-26和XN3-1的多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)分别为ST354和ST10。两株菌对美罗培南的MIC值均为64μg/m L,但是在含美罗培南的LB平板上,菌株HN1-26比菌株XN3-1生长得更快。两株菌都存在携带blaNDM-5基因的Inc X3型质粒。两个质粒的序列完全一致,大小为46161 bp,包含接合转移元件,能够以大肠杆菌作为受体细胞进行转移。【结论】Inc X3型质粒是转移blaNDM-5基因的重要载体,在我国畜禽养殖中具有扩散风险。 展开更多
关键词 blandm-5 大肠杆菌 质粒 家禽养殖场
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尿液标本中大肠埃希菌耐药基因BlaKPC-2及BlaNDM-5检测及耐药性分析 被引量:1
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作者 罗瑜 姚建平 赵东霞 《中国医院药学杂志》 CAS 北大核心 2019年第15期1543-1546,共4页
目的:分析尿液标本中大肠埃希菌耐药基因BlaKPC-2及BlaNDM-5表达情况并分析其耐药性。方法:所有菌株均参照2011年美国临床实验室标准化研究所纸片扩散法对21种抗菌药物耐药性结果进行检测判读;采用PCR法检测BlaKPC-2及BlaNDM-5基因表达... 目的:分析尿液标本中大肠埃希菌耐药基因BlaKPC-2及BlaNDM-5表达情况并分析其耐药性。方法:所有菌株均参照2011年美国临床实验室标准化研究所纸片扩散法对21种抗菌药物耐药性结果进行检测判读;采用PCR法检测BlaKPC-2及BlaNDM-5基因表达情况;分析耐药基因BlaKPC-2及BlaNDM-5与耐药性的关系。结果:在全部送检的样本中普外科、肾脏病科及呼吸科送检的大肠埃希菌占比较高,大肠埃希菌耐药株共336例,占96.00%;自2015-2017年某院大肠埃希菌检出构成比呈逐年降低趋势;BlaKPC-2阳性大肠埃希菌百分比15.43%,BlaNDM-5阳性大肠埃希菌百分比8.86%;BlaKPC-2阳性及BlaNDM-5阳性大肠埃希菌百分比均逐年降低;BlaKPC-2阳性大肠埃希菌对哌拉西林、头孢吡肟、头孢噻肟、头孢他啶、头孢呋辛钠、头孢克洛、头孢唑啉、舒巴坦、他唑巴坦、阿米卡星、环丙沙星、诺氟沙星、萘啶酸及左旋氧氟沙星的耐药率明显高于BlaKPC-2阴性大肠埃希菌,且差异有显著性(P<0.05);BlaNDM-5大肠埃希菌对头孢吡肟、头孢噻肟、头孢他啶、头孢呋辛钠、头孢克洛、头孢唑啉、他唑巴坦及阿米卡星的耐药率均显著高于阴性大肠埃希菌,且差异有显著性(P<0.05)。结论:治疗后BlaKPC-2及BlaNDM-5阳性表达与其耐药密切相关,且表达阳性菌耐药率多高于阴性菌。 展开更多
关键词 尿液标本 大肠埃希菌 BlaKPC-2 blandm-5 耐药性
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海南地区1株携带bla_(NDM-5)大肠埃希菌的分离及耐药基因分析 被引量:1
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作者 麦文慧 陈东科 +5 位作者 李娟 陈海 朱雄 王日 陈柳虹 吴清艳 《临床检验杂志》 CAS CSCD 2016年第5期354-357,共4页
目的分析2014年海南地区临床分离的1株携带bla_(NDM-5)大肠埃希菌的耐药表型及耐药基因。方法收集临床分离耐碳青霉烯类药物大肠埃希菌1株,经Vitek 2 Compact和E-test条进行菌株鉴定及药敏复核试验;改良Hodge试验和EDTA协同试验筛选碳... 目的分析2014年海南地区临床分离的1株携带bla_(NDM-5)大肠埃希菌的耐药表型及耐药基因。方法收集临床分离耐碳青霉烯类药物大肠埃希菌1株,经Vitek 2 Compact和E-test条进行菌株鉴定及药敏复核试验;改良Hodge试验和EDTA协同试验筛选碳青霉烯酶表型;PCR扩增并测序筛查碳青霉烯酶基因(bla_(NDM)、bla_(KPC)、bla_(GES)、bla_(IMP)、bla_(VIM)、bla_(OXA-48)和其他β-内酰胺酶基因(bla_(TEM)、bla_(SHV)、bla_(CTX);多位点序列分型(MLST)进行序列分型;接合转移试验、S1酶切脉冲场凝胶电泳(S1-PFGE)、Southern印迹杂交方法分析其携带质粒的特征。结果该菌株对所检测的包括碳青霉烯类的β-内酰胺类药物全部耐药,对阿米卡星、庆大霉素、环丙沙星、左氧氟沙星、利福平、替加环素和多粘菌素B敏感;改良Hodge试验和EDTA协同增效试验阳性;基因扩增及序列比对显示与已报道的bla_(NDM-5)同源性100%,同时检出bla_(TEM-1)和bla_(CTX-M-55)基因;MLST测序分型为ST5131;S1-PFGE、Southern印迹杂交显示bla_(NDM-5)位于大小约50 000 bp的质粒上,并且为接合性质粒。结论海南地区发现携带bla_(NDM-5)的大肠埃希菌,该基因存在于可经接合传递的质粒上;该菌株同时携带bla_(TEM-1)、bla_(CTX-M-55)β-内酰胺酶基因。 展开更多
关键词 大肠埃希菌 耐药性 blandm-5 水平转移
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产NDM-5大肠埃希菌的鉴定及特征分析 被引量:3
5
作者 付魏萍 袁翊 张禄滑 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2020年第3期68-73,共6页
对分离自血液标本的1株碳青霉烯类耐药大肠埃希菌(Escherichia coli)SCNJ06进行特征分析,以期为临床耐药菌株感染的防治提供理论参考。采用全基因组测序以及生物信息学分析,该菌株属于序列型167(ST167),含有11种耐药基因,分别是rmtB、ap... 对分离自血液标本的1株碳青霉烯类耐药大肠埃希菌(Escherichia coli)SCNJ06进行特征分析,以期为临床耐药菌株感染的防治提供理论参考。采用全基因组测序以及生物信息学分析,该菌株属于序列型167(ST167),含有11种耐药基因,分别是rmtB、aph(3″)-Ib、aph(6)-Id、blaNDM-5、blaTEM-1B、blaCTX-M-55、fosA3、floR、sul2、tet(A)和mdf(A)。其中,blaNDM-5位于IncX3型质粒pNDM5SCNJ06上,mdf(A)位于染色体上,其余耐药基因位于IncFII型质粒prmtBSCNJ06上。接合试验显示,pNDM5SCNJ06和prmtBSCNJ06均能够发生接合转移。应加强抗菌药物临床应用管理和医院感染防控措施,重视细菌耐药监测工作。 展开更多
关键词 碳青霉烯耐药 多重耐药 接合转移 blandm-5 rmtB
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北京市2016—2017年耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌分子流行病学和遗传特征调查 被引量:12
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作者 张凡 李耘 +1 位作者 甘露 闫梦瑶 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 2020年第6期610-620,共11页
目的调查北京市2016—2017年耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌中碳青霉烯酶基因流行现状和遗传背景。方法挑选2016—2017年北京市细菌耐药监测项目收集的厄他培南耐药肺炎克雷伯菌为碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌(carbapenem-resistant Klebsiell... 目的调查北京市2016—2017年耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌中碳青霉烯酶基因流行现状和遗传背景。方法挑选2016—2017年北京市细菌耐药监测项目收集的厄他培南耐药肺炎克雷伯菌为碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌(carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae,CRKP)。PCR扩增检测CRKP中碳青霉烯酶基因(blaKPC、blaSME、blaIMI、blaGES、blaIMP、blaVIM、blaSPM、blaSIM、blaGIM、blaNDM和blaOXA-48);m CIM和e CIM法检测碳青霉烯酶。脉冲场凝胶电泳和多位点序列分析检测不同菌株的同源性。采用美国临床实验室标准协会(CLSI)推荐的琼脂二倍稀释法检测常见抗菌药物对其最低抑菌浓度(MIC)。采用S1-PFGE和Southern Blotting技术进行blaKPC-2和blaNDM-5基因定位。采用接合实验检测blaKPC-2和blaNDM-5基因的水平传递性。三代测序技术分析blaNDM-5基因遗传背景。结果2016—2017年北京14家二级和三级医院收集的肺炎克雷伯菌中共筛选出78株CRKP,其中64株检出blaKPC-2基因,1株检出blaNDM-1基因,1株检出blaNDM-5基因,检出率分别为82.1%、1.3%和1.3%。m CIM和e CIM检测的敏感度和特异度均为100%。MLST将66株碳青霉烯酶基因阳性菌分为12个不同的ST型,其中以ST11为主,共46株(69.7%)。PFGE结果显示共有52个PFGE型别。所有碳青霉烯酶基因阳性菌均对碳青霉烯类抗生素耐药,对其他常见抗菌药物如β-内酰胺类合剂、第三/四代头孢菌素、单环β-内酰胺类、喹诺酮类抗菌药物的耐药率大于87%。对携带blaKPC-2和blaNDM-5基因的CRKP进行基因定位分析发现,仅一株菌所携带blaKPC-2基因定位在染色体上,其他均定位在质粒上,有4株细菌接合成功,其中携带blaNDM-5基因的是一个大小约为46kb的质粒,质粒类型为Inc X3型。遗传背景分析blaNDM-5基因上游为Tn3、IS3000、ISAba125和IS5,下游为bleMBL、trp F、dsb C和IS26。结论北京地区耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌分子型别多态性大,同时又存在优势序列型,为ST11型。携带blaKPC-2基因的质粒大小不一,提示其遗传背景可能比较复杂。与blaKPC-2基因不同,对比国内外其他研究发现blaNDM-5基因的遗传背景比较稳定,Inc X3型质粒在介导blaNDM-5基因的传播上发挥着重要作用。 展开更多
关键词 碳青霉烯类抗生素 blaKPC-2和blandm-5基因 耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌 细菌耐药
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Transmission of Carbapenem Resistance Between Human and Animal NDM-Positive Escherichia coli Strains
7
作者 Yingbo Shen Fupin Hu +21 位作者 Yongqiang Wang Dandan Yin Lu Yang Yiqiang Chen Chunyan Xu Jiyun Li Junyao Jiang Xueyang Wang Yulin Fu Dongyan Shao Dejun Liu Tengfei Ma Chang Cai Zhangqi Shen Shaolin Wang Juan Li Rong Zhang Yuebin Ke Congming Wu Jianzhong Shen Timothy R.Walsh Yang Wang 《Engineering》 SCIE EI CAS 2022年第8期24-33,共10页
Although carbapenem use is prohibited in animals in China,carbapenem-resistant Escherichia coli(CREC),especially New Delhi metallo-β-lactamase(NDM)-producing strains,are widely prevalent in foodproducing animals.At p... Although carbapenem use is prohibited in animals in China,carbapenem-resistant Escherichia coli(CREC),especially New Delhi metallo-β-lactamase(NDM)-producing strains,are widely prevalent in foodproducing animals.At present,the impact of livestock-associated CREC strains on human populations at the national level is unknown.Here,we conduct a retrospective cross-sectional study to investigate the prevalence of CREC from clinical settings across 22 Chinese provinces or municipalities and analyze anthropogenic factors associated with their presence.We also ascertain the blaNDMand blaKPCabundance among pig and chicken farms and present a detailed genomic framework for CREC of animal and human origin.Overall,631/29799(2.1%)clinical Escherichia coli(E.coli)isolates were identified as CREC.Multivariable analysis revealed that being male,an age below 1,an age between 13 and 18,provinces with greater chicken production,and provinces with higher pig production were associated with higher odds of CREC infection.In general,73.8%(n=45/61)of pig farms and 62.2%(n=28/45)of chicken farms had a blaNDMabundance of 1×10^(-5)to 1×10^(-3)and 1×10^(-3)to 1×10^(-2),respectively.Among all the Chinese NDM-positive E.coli(n=463)available at the National Center for Biotechnology Information(NCBI),the genomic analysis revealed that blaNDM-5and Inc X3 were the predominant carbapenemase gene-plasmid combination,while a highly homogeneous relationship between NDM-positive isolates from humans and animals was demonstrated at the plasmid and core genome levels.All the findings suggest frequent CREC transmission between humans and animals,indicating that further discussions on the use of antibiotics in animals and humans are needed,both in China and across the globe. 展开更多
关键词 Carbapenem resistance Escherichia coli blandm-5 One Health Antimicrobial resistance transmission
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耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌新生儿株的分子机制
8
作者 徐慧 贾楠 +2 位作者 李笃军 朱鹏飞 朱元祺 《中国卫生检验杂志》 CAS 2021年第15期1835-1839,共5页
目的探讨分离自新生儿的耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的分子机制和菌株之间的同源性。方法10株肺炎克雷伯菌(NX01~NX10)于2018年12月—2019年5月分离自新生儿患者;菌株鉴定和药敏使用梅里埃VITEK 2 Compact系统;β-内酰胺酶耐药基因的检测... 目的探讨分离自新生儿的耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌的分子机制和菌株之间的同源性。方法10株肺炎克雷伯菌(NX01~NX10)于2018年12月—2019年5月分离自新生儿患者;菌株鉴定和药敏使用梅里埃VITEK 2 Compact系统;β-内酰胺酶耐药基因的检测和确认采用聚合酶链反应扩增和测序方法;脉冲场凝胶电泳(PFGE)、S1酶切脉冲场凝胶电泳(S1-PAGE)和多位点序列分型(MLST)分析菌株携带的质粒和菌株的同源性。结果除了NX03株携带blaIMP-1、blaSHV-62和blaDHA-1基因外,其余9株都携带blaNDM-5、blaCTX-M-14、blaCTX-M-15、blaTEM-1B和blaSHV-172基因,并呈现多耐药;在10株肺炎克雷伯菌中,9株菌(NX01~NX02、NX04~NX10)的PFGE带型完全相同,属于ST17,而NX03株为另外克隆,为ST502;S1-PAGE显示10菌株都携带3个质粒。结论携带blaNDM-5、blaCTX-M-14、blaCTX-M-15、blaTEM-1B和blaSHV-172基因的ST17型肺炎克雷伯菌的克隆聚集是引起新生儿医院感染暴发的原因。 展开更多
关键词 新生儿 肺炎克雷伯菌 blandm-5 Β-内酰胺酶 基因
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