青霉素敏感携带blaZ基因金黄色葡萄球菌几种表型检测方法比较

目的评估"四叶草"试验、K-B纸片法、头孢硝噻吩显色法、青霉素抑菌圈边缘试验4种方法检测青霉素敏感金黄色葡萄球菌bla Zβ-内酰胺酶基因的能力。方法以PCR法扩增bla Zβ-内酰胺酶基因为标准,评估"四叶草"试验、K-B纸片法、头孢硝噻吩显色法、青霉素抑菌圈边缘试验4种方法检测28株青霉素最低抑菌浓度(MIC)≤0.12μg/m L的金黄色葡萄球菌中产酶株的能力。结果 28株菌株经PCR法扩增出7株bla Z阳性株,经"四叶草"试验、头孢硝噻吩显色法和青霉素抑菌圈边缘试验分别检出5株、2株和3株,检出率分别为17.86%、7.14%和10.71%;21株bla Z阴性菌株经上述试验检测均为阴性。K-B纸片法抑菌圈直径均≥29 mm,bla Z阳性株平均直径32.43 mm(范围29~35 mm),bla Z阴性株平均直径38.81 mm(范围32~45 mm),两者差异有统计学意义(t=4.58,P<0.05)。结论检测金黄色葡萄球菌是否对青霉素敏感的常规表型测试法结果不完全可靠。

液相色谱-质谱联用技术分析秦巴硒菇提取物活性成分及其治疗慢性粒细胞白血病的网络药理学研究

目的 利用液相色谱质谱联用和网络药理学、分子对接技术探讨秦巴硒菇提取物治疗慢性粒细胞白血病(chronic myeloid leukemia, CML)的潜在活性靶点及相关信号通路,并通过体外实验进一步验证。方法 应用液相色谱质谱分析秦巴硒菇提取物的活性成分,通过Swiss Target Prediction数据库预测药物靶点;从GeneCards、DisGeNET数据库获取CML的疾病靶点。筛选出药物和CML的共同靶点,通过STRING数据库进行蛋白质互作分析,利用Cytoscape软件构建蛋白互作网络图,并通过DAVID数据库进行GO和KEGG通路富集分析。分别应用DockThor和Pymol进行分子对接及可视化处理。利用CCK-8法测定秦巴硒菇提取物对K562细胞的增殖抑制作用,Western blot验证其对相关蛋白及磷酸化水平的影响。结果 秦巴硒菇提取物活性成分共126种,药物和疾病共同靶点172个;KEGG通路分析结果显示PI3K/Akt/mTOR信号通路可能在治疗CML疾病中起到关键作用。秦巴硒菇提取物在K562细胞中24、48 h的IC50分别为1.86、1.48 g·L^(-1),秦巴硒菇提取物可抑制PI3K、Akt、mTOR蛋白磷酸化水平。结论 秦巴硒菇提取物可通过多成分、多通路、多靶点、多种方式协同作用治疗CML,其作用机制可能与调控PI3K/Akt/mTOR信号通路有关。

金黄色葡萄球菌β-内酰胺酶表型检测方法比较

目的评价几种金黄色葡萄球菌β-内酰胺酶表型检测方法的差异。方法收集自动化仪器检测青霉素最小抑菌浓度(MIC)≤0.12和≥0.25μg/mL的金黄色葡萄球菌38株和15株。分别采用青霉素抑菌圈边缘试验(P1、P10)、头孢硝噻吩显色试验和"四叶草"试验检测β-内酰胺酶。采用聚合酶链反应(PCR)扩增blaZ基因,并以基因检测方法为标准,评价几种检测方法的差异。结果 38株MIC≤0.12μg/mL的菌株中有2株抑菌圈直径(P10)为27 mm。检出blaZ基因阳性菌株15株,分别为2株青霉素MIC=0.12μg/mL和13株青霉素MIC≥0.25μg/mL的菌株。15株blaZ基因检测阳性菌株青霉素抑菌圈边缘试验均为阳性,敏感性为100%;头孢硝噻吩显色试验和"四叶草"试验阳性各14株,敏感性为93.3%。38株blaZ基因检测阴性的菌株中,"四叶草"试验阳性3株,特异性为92.1%;头孢硝噻吩显色试验和青霉素抑菌圈边缘试验阳性各为2株,特异性为94.7%。结论几种常见β-内酰胺酶表型检测方法均具有较高的敏感性和特异性,临床可根据实际需求进行选择。

The inhibition effect of Chlorpromazine against the β-lactam resistance of MRSA

Objective:To investigate the gene related to β-lactam resistance and to confirm the mechanism about a synergy effect between CPZ and β-lactam antibiotics.Methods:To measure antibacterial activity,we performed a minimum inhibitory concentration(MIC) and synergy test.Transmission electron microscopy(TEM) was used in morphological analysis.To analyze gene expression,we conducted reverse transcriptase polymerase chain reaction(PCR).Results:We confirmed a synergy effect between CPZ and β-lactam antibiotics.Furthermore,we observed that CPZ affect the cell envelope of MRS A by using TEM.At the gene level,CPZ reduced the expression of resistance genes.Conclusions:Through this result,we hypothesize that a decrease of resistance factor expressions was caused by CPZ because it disrupts the activity of a sensor protein located in the cell membrane.

5-氯-3-氟-2-甲氧基苯甲酸的合成

5-氯-3-氟-2-甲氧基苯甲酸是一种抗癌药物中间体取代苯化合物,具有较好的化学和生物活性,未来有望作为医药、农药和染料等精细化学品的重要中间体,目前未见相关研究报道。本文选择以5-氯-2-甲氧基苯甲酸甲酯为起始原料,经过硝化、还原、重氮化、希曼法热解以及水解成酸得到目标化合物,五步总收率达48.39%,相关中间体和目标化合物用HNMR及MS方法进行结构鉴定及确认。