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平胃胶囊对恶变后GES-1细胞氧化应激的抑制作用及机制研究
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作者 王丽娟 汪龙德 +4 位作者 牛小英 汪霞 张瑞婷 吴毓谦 樊泽坤 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期58-67,共10页
目的:观察平胃胶囊对亚硝酸胺类化合物N-甲基-N’-硝基-N-亚硝基胍(N-methyl-N’-nitro-N-nitrosoguanidine,MNNG)诱导的胃癌前病变(precancerous lesions of gastric cancer,PLGC)细胞模型的影响,并初步探讨其作用机制。方法:制备空白... 目的:观察平胃胶囊对亚硝酸胺类化合物N-甲基-N’-硝基-N-亚硝基胍(N-methyl-N’-nitro-N-nitrosoguanidine,MNNG)诱导的胃癌前病变(precancerous lesions of gastric cancer,PLGC)细胞模型的影响,并初步探讨其作用机制。方法:制备空白血清和平胃胶囊含药血清备用;MNNG诱导人胃黏膜上皮细胞系GES-1制备PLGC细胞模型,采用倒置显微镜观察细胞形态,免疫荧光法检测增殖细胞相关抗原Ki67的表达水平,进行模型评价。CCK-8法筛选含药血清最佳干预浓度及时间;采用荧光探针DCFH-DA检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量;ELISA检测丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量;采用相关试剂盒检测超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)活性;采用新型荧光探针JC-10检测细胞线粒体膜电位的变化;采用实时荧光定量PCR检测Ki67和黑色素瘤分化相关基因7(melanoma differentiation-associated gene-7,MDA-7)的mRNA表达水平;采用Western blot法测定Ki67、白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)和MDA-7的蛋白表达水平。结果:与正常组相比,模型组和空白血清组ROS和MDA含量显著升高(P<0.01),SOD和GSH-Px的活性显著降低(P<0.01),线粒体膜电位显著下降(P<0.01),Ki67和IL-6蛋白表达显著升高(P<0.01),MDA-7蛋白表达显著下降(P<0.01);与空白血清组相比,模型组ROS和MDA含量,SOD和GSH-Px活性,Ki67和MDA-7 mRNA表达水平,Ki67、IL-6和MDA-7蛋白表达水平,以及线粒体膜电位均无显著差异(P>0.05);与空白血清组相比,平胃胶囊含药血清组中ROS和MDA含量显著降低(P<0.01),SOD和GSH-Px活性显著上升(P<0.05),线粒体膜电位显著升高(P<0.01),Ki67和IL-6蛋白表达水平显著下降(P<0.01),MDA-7的mRNA及蛋白表达水平显著升高(P<0.01)。结论:平胃胶囊可显著减轻MNNG诱导的胃黏膜上皮细胞氧化应激损伤和炎症反应,调控促癌基因和抑癌基因的表达,从而发挥防治PLGC的作用。 展开更多
关键词 平胃胶囊 胃癌前病变 ges-1细胞 氧化应激
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山橿中生物碱类成分Laetanine、Launobine对乙酸致GES-1细胞损伤的保护作用及机制
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作者 李文博 任伟宏 孙孝亚 《中国现代医药杂志》 2024年第5期1-8,共8页
目的利用乙酸建立胃黏膜上皮细胞(GES-1细胞)损伤模型,研究山橿中生物碱类成分Laetanine、Launobine对GES-1细胞损伤的保护作用及机制。方法通过MTT细胞增殖/毒性实验确定Laetanine、Launobine的最佳给药浓度。分别以浓度为0.01%~0.2%... 目的利用乙酸建立胃黏膜上皮细胞(GES-1细胞)损伤模型,研究山橿中生物碱类成分Laetanine、Launobine对GES-1细胞损伤的保护作用及机制。方法通过MTT细胞增殖/毒性实验确定Laetanine、Launobine的最佳给药浓度。分别以浓度为0.01%~0.2%的乙酸培养液作用于GES-1细胞,作用时间分别为3、4、5h,筛选最佳造模条件。利用乙酸建立GES-1细胞损伤模型,测定Laetanine、Launobine含药培养基处理后的细胞存活率;Griess法测定细胞上清液中NO的浓度;ELISA法测定各组细胞上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和前列腺素E2(PGE2)水平;WST-1法检测各实验组超氧化物歧化酶(SOD)抑制率,计算SOD活力值。结果0.1%乙酸溶液处理3h为GES-1细胞损伤的最佳造模条件;与模型组比较,Laetanine、Launobine给药组均能显著升高GES-1细胞存活率(P<0.01);经Laetanine、Launobine处理后,细胞上清液中的NO、TNF-α、IL-6和PGE2水平显著降低,SOD活力显著升高(P<0.01或P<0.05)。结论山橿中生物碱类成分Laetanine和Launobine均能保护乙酸损伤的GES-1细胞,减轻GES-1细胞的受损程度,其作用机制可能与其降低NO、TNF-α、IL-6和PGE2水平,升高SOD水平有关,表明Laetanine和Launobine可能为山橿发挥抗胃溃疡作用的有效成分。 展开更多
关键词 山橿 生物碱 Laetanine Launobine 胃溃疡 ges-1细胞 保护 机制
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砂仁挥发性成分及其对GES-1细胞保护作用的比较分析
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作者 周小妹 张迎 +5 位作者 罗明权 练勇 程倩颖 靳德军 孔奕丹 魏娜 《海南医学院学报》 CAS 北大核心 2024年第10期721-730,共10页
目的:分析阳春砂、绿壳砂、海南砂及其伪品海南假砂的挥发性成分,比较四种砂仁挥发油对胃黏膜保护的活性。方法:采用顶空固相微萃取技术与气相色谱-质谱联用技术(HS-SPME-GC-MS),结合NIST08和NIST08s谱库对比定性色谱结果,分析4种砂仁... 目的:分析阳春砂、绿壳砂、海南砂及其伪品海南假砂的挥发性成分,比较四种砂仁挥发油对胃黏膜保护的活性。方法:采用顶空固相微萃取技术与气相色谱-质谱联用技术(HS-SPME-GC-MS),结合NIST08和NIST08s谱库对比定性色谱结果,分析4种砂仁的挥发性成分;采用面积归一化法,计算各挥发性成分的相对百分比含量,并进行主成分及热图分析;建立人胃黏膜上皮细胞(GES-1细胞)损伤模型,采用CCK-8法,对4种砂仁挥发油进行胃黏膜保护活性评价。结果:从阳春砂、绿壳砂、海南砂及其海南假砂中共检出114种化学成分,分别鉴定出57、58、58、58种成分,各占总挥发性成分相对百分比含量的93.23%、88.79%、90.87%、91.40%,其中总单萜烃类化合物各占总挥发性成分相对百分比含量的40.48%、37.77%、37.09%、33.39%,总倍半萜烃类化合物各占总挥发性成分相对百分比含量的52.53%、49.88%、31.22%、35.45%;阳春砂、绿壳砂、海南砂挥发油对乙醇致GES-1细胞损伤具有保护作用(P<0.05),海南假砂无明显活性。结论:阳春砂与绿壳砂的挥发性成分及含量差异较小,而海南砂、海南假砂与阳春砂、绿壳砂的挥发性成分及含量差异较大;阳春砂、绿壳砂、海南砂挥发油具有一定的胃黏膜保护活性。 展开更多
关键词 砂仁 挥发性成分 顶空固相微萃取气质联用 ges-1细胞
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金合欢素对幽门螺杆菌感染的胃上皮GES-1细胞凋亡的抑制作用
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作者 姚奇汐 李自宇 +2 位作者 康厚乐 贺欣 康敏 《现代消化及介入诊疗》 2024年第3期307-311,共5页
目的研究金合欢素对幽门螺旋杆菌(Hp)感染GES-1细胞凋亡的保护作用及潜在的作用机制。材料和方法体外用Hp和金合欢素处理GES-1细胞,CCK-8法检测细胞活力,创面愈合法评估细胞迁移及修复能力的变化,流式细胞术分析细胞凋亡率,western blot... 目的研究金合欢素对幽门螺旋杆菌(Hp)感染GES-1细胞凋亡的保护作用及潜在的作用机制。材料和方法体外用Hp和金合欢素处理GES-1细胞,CCK-8法检测细胞活力,创面愈合法评估细胞迁移及修复能力的变化,流式细胞术分析细胞凋亡率,western blots法检测凋亡相关蛋白的表达水平。结果Hp可诱导GES-1细胞活力下降,抑制细胞迁移,使细胞凋亡比率增加,同时增加Bax、cle-caspase3的表达水平。而金合欢素处理可增强细胞活力,抑制Hp感染所致的细胞凋亡水平,并下调Bax、cle-caspase3的表达。讨论与结论金合欢素能增强GES-1细胞活性,通过抑制Hp感染的GES-1细胞凋亡,从而对胃黏膜上皮细胞具有保护作用。 展开更多
关键词 胃上皮ges-1细胞株 幽门螺旋杆菌 感染 金合欢素 细胞凋亡
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1株携带bla_(NDM-1)的临床多重耐药豚鼠气单胞菌的基因组及表型鉴定
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作者 李玲 周宏伟 张嵘 《临床检验杂志》 CAS 2023年第2期123-127,共5页
目的分析从粪便筛查分离出的产NDM-1型碳青霉烯酶的豚鼠气单胞菌(XX182)的抗菌药物耐药表型和基因组特征,阐明该菌株的抗菌药物耐药机制及其耐药性转移的能力。方法肉汤微量稀释法检测该菌株的抗菌药物敏感性,PCR检测碳青霉烯酶耐药基... 目的分析从粪便筛查分离出的产NDM-1型碳青霉烯酶的豚鼠气单胞菌(XX182)的抗菌药物耐药表型和基因组特征,阐明该菌株的抗菌药物耐药机制及其耐药性转移的能力。方法肉汤微量稀释法检测该菌株的抗菌药物敏感性,PCR检测碳青霉烯酶耐药基因亚型(bla_(NDM)、bla_(VIM)、bla_(IMP)、bla_(KPC)),接合试验检测耐药基因的可转移性,通过全基因组测序(WGS)和生物信息学分析明确该菌株的基因组特征。结果该菌株对头孢菌素、碳青霉烯类、环丙沙星和多黏菌素耐药,对替加环素、阿米卡星和氨曲南敏感。该菌株携带多种抗菌药物耐药基因,主要包括bla_(NDM-1)、bla_(MOX-6)、bla_(RSA-1)、bla_(TEM-1)、aac(3)-Ⅱd、cmlA5、arr-2等。毒力因子分析发现其携带有极鞭毛、侧鞭毛、Ⅵ型分泌系统(T6SS)和溶血素A等毒力因子。结论该豚鼠气单胞菌对碳青霉烯类抗菌药物耐药主要由产NDM-1型碳青霉烯酶导致,且bla_(NDM-1)耐药基因位于不可接合质粒上。尽管目前气单胞菌属对碳青霉烯类耐药率较低,但仍应加强对该克隆菌株的监测。 展开更多
关键词 豚鼠气单胞菌 多重耐药 全基因组测序 bla_(NDM-1)
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黄芪甲苷调控JAK2/STAT3/CXCL12信号通路抑制炎症细胞浸润改善小鼠胃炎的机制研究
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作者 江晓涛 杨泽虹 +5 位作者 王姝烨 安金琪 黄远程 邹雨杉 文艺 李培武 《广州中医药大学学报》 CAS 2024年第2期447-456,共10页
【目的】探讨黄芪甲苷对胃炎的抑炎作用及机制。【方法】(1)体外实验:应用1、2.5、5、10、20μg·mL-1脂多糖(LPS)诱导GES-1细胞24 h,确定LPS诱导GES-1细胞炎症模型的最佳浓度。在GES-1细胞炎症模型的基础上,使用0.1、1、10μg·... 【目的】探讨黄芪甲苷对胃炎的抑炎作用及机制。【方法】(1)体外实验:应用1、2.5、5、10、20μg·mL-1脂多糖(LPS)诱导GES-1细胞24 h,确定LPS诱导GES-1细胞炎症模型的最佳浓度。在GES-1细胞炎症模型的基础上,使用0.1、1、10μg·mL-1浓度的黄芪甲苷分别干预24 h,明确黄芪甲苷最佳的干预浓度。采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)方法测定黄芪甲苷对细胞活性的影响;采用AutoDock软件对黄芪甲苷和信号传导和转录激活因子3(STAT3)进行分子对接,验证两者的相互作用;采用Western Blot法检测磷酸化STAT3(p-STAT3)和CXCL12蛋白表达水平。(2)体内实验:采用LPS法诱导胃炎小鼠模型,应用黄芪甲苷和p-STAT3抑制剂干预1周后,免疫组织化学法和Western Blot法检测胃黏膜p-STAT3、CXCL12蛋白表达水平,酶联免疫吸附分析(ELISA)检测血浆中CXCL12的含量。【结果】(1)体外实验结果显示:10μg·mL-1是LPS诱导GES-1细胞炎症模型的最佳浓度,选用黄芪甲苷10μg·mL-1开展后续实验。分子对接结果显示,黄芪甲苷与STAT3具有较高的亲和力。与空白对照组比较,LPS诱导组GES-1细胞p-STAT3、CXCL12蛋白表达水平显著升高(P<0.001);黄芪甲苷组和p-STAT3抑制剂组p-STAT3、CXCL12蛋白表达水平较LPS诱导组显著降低(P<0.01)。(2)体内实验结果显示:与空白对照组比较,模型组小鼠胃黏膜p-STAT3、CXCL12蛋白水平和血浆中CXCL12含量显著上调(P<0.01或P<0.001);黄芪甲苷和p-STAT3抑制剂组胃炎小鼠胃黏膜p-STAT3、CXCL12蛋白表达水平和血浆中CXCL12含量显著下调(P<0.05或P<0.01或P<0.001)。【结论】黄芪甲苷通过抑制JAK2/STAT3信号通路降低CXCL12的表达,抑制炎症细胞浸润,达到改善胃炎小鼠胃黏膜炎症的作用。 展开更多
关键词 黄芪甲苷 胃炎 抑炎作用 STAT3信号通路 CXCL12 ges-1细胞 小鼠
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ST11肺炎克雷伯菌QL5株携带的质粒pQL5-NDM-KPC的研究
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作者 马超越 王笑 +2 位作者 刘真真 贾楠 朱元祺 《中国实验诊断学》 2024年第4期401-404,共4页
目的探讨肺炎克雷伯菌QL5株携带编码碳青霉烯酶基因的质粒及其特性。方法基于二代Illumina和三代Nanopore测序技术平台获得菌株的基因组和质粒序列,然后用一系列软件分析菌株的生物学信息。S1核酸酶切脉冲场凝胶电泳、质粒液相接合试验... 目的探讨肺炎克雷伯菌QL5株携带编码碳青霉烯酶基因的质粒及其特性。方法基于二代Illumina和三代Nanopore测序技术平台获得菌株的基因组和质粒序列,然后用一系列软件分析菌株的生物学信息。S1核酸酶切脉冲场凝胶电泳、质粒液相接合试验和稳定性试验检测菌株携带的质粒特性。结果生信分析显示:肺炎克雷伯菌QL5株携带的bla_(NDM-1)和bla_(KPC-2)基因位于同一个IncC/IncFII(PHN7A8)/IncR杂合质粒上(命名为pQL5-NDM-KPC);QL5株携带的pQL5-NDM-KPC可发生bla_(NDM-1)基因所在区域的片段丢失。结论经检索,携带bla_(NDM-1)和bla_(KPC-2)基因位于同一个IncC/IncFII(PHN7A8)/IncR杂合质粒pQL5-NDM-KPC(GenBank序列号:OR253888)上,为国内外首次报道。 展开更多
关键词 肺炎克雷伯菌 blaKPC-2 blaNDM-1 质粒
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Characterization of a bla_(CTX-M-3),bla_(KPC-2)and bla_(TEM-1B)co-producing IncN plasmid in Escherichia coli of chicken origin
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作者 WANG Wen-jing WANG Yi-fu +7 位作者 JIN Ya-jie SONG Wu-qiang LIN Jia-meng ZHANG Yan TONG Xin-ru TU Jian LI Rui-chao LI Tao 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2023年第1期320-324,共5页
An extensively drug-resistant(XDR)Escherichia coli strain 258E was isolated from an anal swab sample of a chicken farm of Anhui province in China.Genomic analyses indicated that the strain 258E harbors an incompatibil... An extensively drug-resistant(XDR)Escherichia coli strain 258E was isolated from an anal swab sample of a chicken farm of Anhui province in China.Genomic analyses indicated that the strain 258E harbors an incompatibility group N(IncN)plasmid pEC258-3,which co-produces bla_(CTX-M-3),bla_(KPC-2),bla_(TEM-1B),qnrS1,aac(6')-Ib-cr,dfrA14,arr-3,and aac(6')-Ib3.Multiple genome arrangement analyses indicated that pEC258-3 is highly homologous with pCRKP-1-KPC discovered in Klebsiella pneumoniae from a patient.Furthermore,conjugation experiments proved that plasmid pEC258-3 can be transferred horizontally and may pose a significant potential threat in animals,community and hospital settings. 展开更多
关键词 bla_(CTX-M-3) bla_(KPC-2) bla_(TEM-1B) IncN PLASMID Escherichia coli
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Effect of ultrasonic modification on the protective activity of Flammulina velutipes polysaccharide to prevent ethanol-induced injury on GES-1 cells
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作者 Jinrong Xiao Xin Chen +5 位作者 Jingsi Zhang Yifan Wang Lei Zhong Qiping Zhan Qiuhui Hu Liyan Zhao 《Food Science and Human Wellness》 SCIE CSCD 2023年第6期2451-2459,共9页
Flammulina velutipes(F.velutipes)polysaccharides were modified by ultrasound at the rated power of 150 W and 900 W.The monosaccharide composition,ultraviolet-visible,and Fourier transform infrared spectral characteris... Flammulina velutipes(F.velutipes)polysaccharides were modified by ultrasound at the rated power of 150 W and 900 W.The monosaccharide composition,ultraviolet-visible,and Fourier transform infrared spectral characteristics of F.velutipes polysaccharides(FVP)and their ultrasonic modification products(U-FVPs)were determined.The protective effects of FVP and U-FVPs on human gastric mucosal cells GES-1 were confi rmed for the first time.The mole ratios of glucose and galactose were decreased and the mole ratio of mannose was increased after ultrasonic modification.Compared with the original FVP and the FVP modifi ed by ultrasound of 150 W(U-FVP1),the FVP modifi ed by ultrasound of 900 W(U-FVP2)could better prevent ethanol-induced damage to GES-1 cells.With increasing ultrasound intensity,the protective effect of FVPs on GES-1 cells was significantly enhanced by more effective prevention of intracellular reactive oxygen species(ROS)production and more promotion of expression of triglyceride factor 2(TFF2),prostaglandin E2(PGE2),epidermal growth factor(EGF),and transforming growth factorβ1(TGF-β1)mRNA.The ultrasonic modifi cation might be an effective way to develop novel F.velutipes polysaccharides that could effectively resist the gastric injury caused by excessive alcohol consumption. 展开更多
关键词 Flammulina velutipes polysaccharide Ultrasonic modification ges-1 cell Gastric ulcer Ethanol-induced injury
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二肽AQ、SQ和IQ增强GES-1细胞对酒精损伤的抵抗能力
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作者 李明亮 许锦珍 +7 位作者 冯志远 李诒光 张卓然 刘丹 方磊 廖群 刘文颖 刘文君 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期143-148,共6页
部分食源性二肽具有良好的吸收特性以及生理活性,在功能食品的开发上具有强大的应用前景。该研究旨在阐明二肽AQ、SQ和IQ具有增强GES-1细胞对酒精损伤抵抗能力的作用。首先,该研究对GES-1细胞进行二肽预处理,之后,利用酒精建立细胞损伤... 部分食源性二肽具有良好的吸收特性以及生理活性,在功能食品的开发上具有强大的应用前景。该研究旨在阐明二肽AQ、SQ和IQ具有增强GES-1细胞对酒精损伤抵抗能力的作用。首先,该研究对GES-1细胞进行二肽预处理,之后,利用酒精建立细胞损伤模型;通过检测细胞存活率和细胞的乳酸脱氢酶释放量判断模型是否成立,通过检测细胞内ROS含量、抗氧化酶活力和氧化损伤标志物含量,评价二肽对细胞氧化应激的改善作用;通过检测细胞内紧密连接蛋白以及相关损伤标志物的蛋白表达水平,评价二肽对细胞屏障功能的增强作用。结果表明,上述3种二肽可以减轻细胞氧化应激,减少损伤标志物的表达水平并增加紧密连接蛋白的表达水平。该研究证明了上述3种二肽可以增强GES-1细胞抵抗酒精损伤的能力,在修复酒精性胃黏膜损伤,保护胃黏膜屏障功能方面具有一定的应用价值和潜力。 展开更多
关键词 二肽 ges-1细胞 酒精损伤 紧密连接蛋白 胃黏膜屏障
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三七提取物对GES-1细胞及MNNG转化后GES-1细胞增殖的抑制作用 被引量:7
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作者 王志斌 李军祥 +2 位作者 朱陵群 牛福玲 崔巍 《中西医结合学报》 CAS 2004年第6期445-449,共5页
目的 :通过细胞培养方法 ,由研究灌服三七提取物后的犬血清对胃癌前细胞的抑制作用入手 ,以期找出三七入血后的最佳作用时间点 (段 )。方法 :采用永生化的人胃黏膜上皮细胞系GES 1细胞以及N 甲基 N 硝基 N 亚硝基胍 (N methyl N’ nit... 目的 :通过细胞培养方法 ,由研究灌服三七提取物后的犬血清对胃癌前细胞的抑制作用入手 ,以期找出三七入血后的最佳作用时间点 (段 )。方法 :采用永生化的人胃黏膜上皮细胞系GES 1细胞以及N 甲基 N 硝基 N 亚硝基胍 (N methyl N’ nitro N nitroso guanidine ,MNNG)进一步转化GES 1细胞后获得的细胞 (以下简称MC细胞 )作为胃癌前病变细胞的体外研究模型 ;以三七水提物给彼格犬一次性灌胃 ,取给药前的血清、给药后不同时点的血清作为实验药物血清。以四甲基固氮唑盐 [3 (4,5 dimethylthiazol 2 yl) 2 ,5 diphenyltetrazoliumbromide ,MTT]法分别检测每个采血时间点上不同浓度 (8%、4 %、2 % )含药血清对GES 1及MC细胞作用 72h后的抑制情况 ,并根据结果找出抑制作用最佳的药物血清时间点。结果 :2h和6h含药血清刺激下的抑制率最高 ,两个时间点含 8%药物血清的培养基对两种细胞的抑制作用均十分显著 ,其中 2h 8%GES 1组抑制率为 70 .8% (P <0 .0 1) ,2h 8%MC组抑制率为 4 5 .3% (P <0 .0 1) ;6h 8%GES 1组抑制率为 88.5 % (P <0 .0 1) ,6h 8%MC组抑制率为 4 2 .4 % (P <0 .0 1)。结论 :灌服三七提取物后 2h、6h取的药物犬血清对GES 1及MC细胞的增殖抑制作用最强。 展开更多
关键词 三七提取物 ges-1细胞 MNNG转化 ges-1细胞 抑制作用 细胞增殖 胃癌
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幽门螺杆菌VacA N端片段通过线粒体途径诱导GES-1细胞凋亡 被引量:10
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作者 杨卓 张艳 +3 位作者 黎村艳 于文 曹斌 余敏君 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期251-255,260,共6页
目的:本研究初步探讨幽门螺杆菌(H.pylori)空泡毒素单一毒力决定簇对GES-1胃黏膜上皮细胞凋亡的影响,为进一步研究H.pylori的致病机制奠定基础。方法:将本课题组已构建的pDsRed-Monomer-C1/VacA N端真核表达载体转染至GES-1细胞中,Weste... 目的:本研究初步探讨幽门螺杆菌(H.pylori)空泡毒素单一毒力决定簇对GES-1胃黏膜上皮细胞凋亡的影响,为进一步研究H.pylori的致病机制奠定基础。方法:将本课题组已构建的pDsRed-Monomer-C1/VacA N端真核表达载体转染至GES-1细胞中,Western blot鉴定VacA蛋白在细胞中的表达;电子显微镜和中性红摄取试验检测GES-1细胞的空泡样变;Hoechst33342染色、Annexin V-FITC凋亡检测试剂盒以及电镜观察细胞凋亡情况,同时采用分光光度法检测细胞Caspase-9、Caspase-3的活化程度,Rho123检测细胞跨膜电位的变化,ELISA法检测细胞色素C的释放。结果:重组质粒pDsRed-Monomer-C1/VacA转染GES-1细胞24小时后,电镜下可明显观察到空泡样变及核固缩、染色质边聚等凋亡特征,重组质粒组部分细胞发生空泡样变;Hoechst 33342染色后镜下可见明显的核染色质浓缩,Annexin V-FITC凋亡检测试剂盒检测发现重组质粒组细胞凋亡率明显高于对照组(P<0.05);Caspase-9和Caspase-3活化程度呈时间依赖性增加,分别在12小时和24小时达到峰值;Rho123染色发现线粒体跨膜电位明显降低;重组质粒转染组释放细胞色素C的浓度呈时间依赖性正相关,与空质粒组及对照组相比差异显著(P<0.05)。结论:VacA N端片段可诱导GES-1细胞凋亡及空泡样变,VacA蛋白可激活Caspase-9和Caspase-3,且可能主要通过线粒体途径诱导GES-1细胞凋亡。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 VACA ges-1细胞 线粒体途径 细胞凋亡
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温郁金二萜类化合物C对幽门螺杆菌诱导人胃GES-1上皮细胞炎症的抑制作用及其对NF-κB信号通道的影响 被引量:23
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作者 黄宣 吕宾 +2 位作者 赵敏 陈冰冰 孟立娜 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期562-567,共6页
目的通过体外实验研究温郁金二萜类化合物C对幽门螺杆菌(helicobacter pylori,Hp)诱导炎症的抑制作用及对NF-κB信号通路的影响。方法选用Hp I型菌株感染人胃上皮细胞株GES-1,建立体外Hp感染细胞模型,并予不同浓度温郁金二萜类化合物C... 目的通过体外实验研究温郁金二萜类化合物C对幽门螺杆菌(helicobacter pylori,Hp)诱导炎症的抑制作用及对NF-κB信号通路的影响。方法选用Hp I型菌株感染人胃上皮细胞株GES-1,建立体外Hp感染细胞模型,并予不同浓度温郁金二萜类化合物C、阿莫西林等进行干预,ELISA法检测上清液中IL-8、IL-4,并应用Wester blot方法检测NF-κB中p65、IKKα、IKKβ蛋白表达。结果 MTT法显示温郁金二萜类化合物C对胃GES-1细胞的IC5为5 mg.L-1,阿莫西林为5 mg.L-1,Hp作用于人胃GES-1上皮细胞后,上清液中IL-8明显升高,其中以12 h浓度最高,而予不同浓度温郁金二萜类化合物C、阿莫西林组干预后,IL-8水平在各个时间段均低于模型组,其中以高浓度温郁金二萜类化合物C组下降最为明显(P<0.05)。而IL-4水平在Hp作用于人胃GES-1细胞后下降,予中浓度温郁金二萜类化合物C组、高浓度二萜类化合物C组干预后IL-4水平明显升高(P<0.05)。温郁金二萜类化合物C具有抑制Hp促p65进入胞核,抑制Hp所刺激的IkBα的降解,抑制p65、IkBα磷酸化,抑制蛋白IKKα、IKKβ的表达等作用。结论 NF-κB信号通路在Hp引起慢性胃炎的发病机制中起到核心作用,采用温郁金二萜类化合物C可阻断NF-κB信号通路,可以有效减少Hp诱导的促炎性因子的分泌与增加抑炎因子的分泌。 展开更多
关键词 温郁金二萜类化合物C 幽门螺杆菌 核因子-κB 炎症介质 ges-1细胞 信号通道
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半夏泻心汤对幽门螺杆菌感染人胃上皮细胞GES-1生长的影响 被引量:12
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作者 姜成 刘芬 +1 位作者 鄢春锦 严晓丹 《辽宁中医杂志》 CAS 2013年第2期351-352,共2页
目的:观察半夏泻心汤对幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染的胃上皮细胞GES-1增殖的影响。方法:采用MTT法检测细胞的增殖。以细胞细菌不同比例体外共培养48 h,以确定两者的合适比例。用不同浓度的含药血清培养感染细胞。结果:细胞... 目的:观察半夏泻心汤对幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染的胃上皮细胞GES-1增殖的影响。方法:采用MTT法检测细胞的增殖。以细胞细菌不同比例体外共培养48 h,以确定两者的合适比例。用不同浓度的含药血清培养感染细胞。结果:细胞:细菌比例在1∶10以上时,Hp显著抑制细胞的增殖(P<0.05),而且呈量效关系;与模型组相比,半夏泻心汤能降低细菌对细胞增殖的抑制作用(P<0.05)。结论:Hp抑制细胞增殖,半夏泻心汤能扭转细菌的抑制作用。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 胃上皮细胞ges-1 半夏泻心汤 增殖
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从形态及功能研究MNNG诱导GES-1永生化细胞的恶性转化 被引量:9
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作者 孙振卿 闫慧明 +3 位作者 贾彬 张平 孟鹏鹏 冯广跃 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第22期14-18,共5页
目的探讨甲基硝基亚硝基胍(methyl nitro nitrosoguanidine,MNNG)作用于GES-1永生化细胞所发生的恶性转化。方法 MNNG作用于GES-1永生化细胞24 h后,通过显微镜和软琼脂集落形成实验观察细胞形态学、染色体变化和集落形成情况。统计采用... 目的探讨甲基硝基亚硝基胍(methyl nitro nitrosoguanidine,MNNG)作用于GES-1永生化细胞所发生的恶性转化。方法 MNNG作用于GES-1永生化细胞24 h后,通过显微镜和软琼脂集落形成实验观察细胞形态学、染色体变化和集落形成情况。统计采用t检验。结果经MNNG处理的GES-1细胞(命名为MC)核增大,畸形,核染色质变粗,核仁肥大,核分裂。染色体可见双倍及多倍体,染色体断裂。克隆形成实验可见细胞接触抑制消失克隆形成,t=5.139,P<0.05。结论经MNNG诱导的GES-1细胞的生长特性改变,呈现肿瘤细胞的形态学及生长特征。 展开更多
关键词 ges-1 恶性转化 甲基硝基亚硝基胍 染色体 软琼脂集落
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阿司匹林、氯吡格雷联用对人胃黏膜上皮细胞株GES-1增殖的影响 被引量:9
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作者 孙沂 樊宏伟 +1 位作者 王书奎 张振玉 《胃肠病学和肝病学杂志》 CAS 2010年第6期520-523,共4页
目的探讨阿司匹林、氯吡格雷及二者联用对人胃黏膜上皮细胞株GES-1增殖的影响。方法体外培养人胃黏膜上皮细胞株GES-1,分别将不同浓度阿司匹林(2.5、5、10和20mmol/L)及氯吡格雷(0.01、0.1、0.5和1mmol/L)与GES-1细胞共同培养24、48、7... 目的探讨阿司匹林、氯吡格雷及二者联用对人胃黏膜上皮细胞株GES-1增殖的影响。方法体外培养人胃黏膜上皮细胞株GES-1,分别将不同浓度阿司匹林(2.5、5、10和20mmol/L)及氯吡格雷(0.01、0.1、0.5和1mmol/L)与GES-1细胞共同培养24、48、72h,采用MTT比色法计算细胞生长抑制率。分别以药物的不同浓度对GES-1细胞生长抑制率作图,得到剂量反应曲线。根据Bliss法,分别求出阿司匹林和氯吡格雷的半数抑制浓度(IC50),倒置相差显微镜下观察IC50剂量阿司匹林和IC50剂量氯吡格雷单独和联合与GES-1细胞共同培养24h后,细胞形态学变化。MTT比色法检测药物联合作用对GES-1细胞增殖率的影响。结果阿司匹林对GES-1细胞的损害呈剂量和时间依赖性。阿司匹林作用24h的IC50为18.32mmol/L(95%CI=2.66~26.98)。氯吡格雷对GES-1细胞的损害呈剂量依赖性,但无时间依赖性。氯吡格雷作用24h的IC50为0.36mmol/L(95%CI=0.26~0.46)。光镜下可见药物作用后贴壁细胞数量减少,细胞变圆,悬浮,部分细胞核浓缩;药物联合作用组悬浮细胞数明显增多,细胞损害明显增大。氯吡格雷和阿司匹林联合使用对GES-1细胞的生长抑制率明显高于单独使用阿司匹林或氯吡格雷(P<0.01)。结论阿司匹林和氯吡格雷均可抑制人胃黏膜上皮细胞的增殖,二者联合使用对细胞的损害具有协同作用。 展开更多
关键词 阿司匹林 氯吡格雷 ges-1细胞 MTT法 半数抑制浓度
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EB病毒转化人胃上皮细胞GES-1中bcl-2基因的表达 被引量:2
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作者 朱丽华 周天戟 +2 位作者 史国友 章广玲 李淑英 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期195-197,共3页
目的研究EBV感染人胃上皮细胞系GES-1后bcl-2基因的表达状况,探讨bcl-2基因在EBV相关胃癌发生中所起的作用。方法采用携带新霉素抗性(NEOr)基因的重组EBV产生细胞系Akata1061以密切接触法感染人胃上皮细胞系GES-1,经有限稀释法克隆和G41... 目的研究EBV感染人胃上皮细胞系GES-1后bcl-2基因的表达状况,探讨bcl-2基因在EBV相关胃癌发生中所起的作用。方法采用携带新霉素抗性(NEOr)基因的重组EBV产生细胞系Akata1061以密切接触法感染人胃上皮细胞系GES-1,经有限稀释法克隆和G418筛选获得感染和转染细胞克隆,用pcDNA3空载体质粒转染的人胃上皮细胞系GES-1细胞作对照;采用免疫细胞化学染色(ICC)法测定EBNA1基因的表达以鉴定EBV感染细胞克隆及测定EBV感染细胞中Bcl-2蛋白的表达。结果与对照相比较,感染细胞中Bcl-2蛋白的表达阳性。结论EBV感染可使人胃上皮细胞Bcl-2蛋白表达增高,EBV对人胃上皮细胞的转化作用可能与bcl-2基因的过度表达有关。 展开更多
关键词 EB病毒 胃上皮细胞 ges-1 BCL-2基因
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益气清热方及其拆方的兔含药血清对Ⅰ型幽门螺杆菌致GES-1细胞凋亡的影响 被引量:10
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作者 陆为民 沈洪 +4 位作者 严士海 杨学文 朱萱萱 缪界平 单兆伟 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2008年第27期3026-3030,共5页
目的:观察益气清热方及其拆方对Ⅰ型Hpylori致GES-1细胞凋亡的影响,探讨益气清热法治疗Hpylori感染的机制.方法:按生理盐水、阿莫西林、益气清热方、黄芪、黄芩分组,制备兔含药血清.建立Ⅰ型Hpylori致GES-1细胞病变的模型,分别加入100m... 目的:观察益气清热方及其拆方对Ⅰ型Hpylori致GES-1细胞凋亡的影响,探讨益气清热法治疗Hpylori感染的机制.方法:按生理盐水、阿莫西林、益气清热方、黄芪、黄芩分组,制备兔含药血清.建立Ⅰ型Hpylori致GES-1细胞病变的模型,分别加入100mL/L各组兔含药血清的完全培养液,继续培养48h,收集与固定细胞,用流式细胞仪和Hoechst33258荧光染料检测细胞凋亡情况.结果:经Ⅰ型Hpylori感染后,GES-1细胞凋亡率显著增加,阿莫西林、黄芪、黄芩及益气清热方均能降低其凋亡率(1.3633±0.4229,2.1925±0.6779,1.7967±0.6987,1.4740±0.4156vs16.6229±8.5087,P<0.01或0.05),Hoechst33258荧光染料的检测结果与流式细胞仪检测结果有较好的一致性.结论:益气清热方可能通过抑制细胞的凋亡,减轻Hpylori对胃上皮细胞的损伤,维持细胞的正常生长,达到治疗目的. 展开更多
关键词 益气清热方 Ⅰ型幽门螺杆菌 人胃上皮细胞系ges-1 中药 血清药理学 细胞培养 细胞凋亡
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姜黄素对幽门螺杆菌及其诱导人胃GES-1细胞损伤的影响 被引量:9
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作者 任娇艳 苟娜 +3 位作者 高立 杨宜婷 李良 袁尔东 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第23期151-156,共6页
对姜黄素抑制幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)及其诱导人胃GES-1细胞损伤的影响进行研究。抑菌实验结果显示,姜黄素可明显抑制Hp生长,其最低抑制浓度为200μmol/L。采用Berthelot显色法检测Hp脲酶活力的变化情况,发现姜黄素对其也... 对姜黄素抑制幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)及其诱导人胃GES-1细胞损伤的影响进行研究。抑菌实验结果显示,姜黄素可明显抑制Hp生长,其最低抑制浓度为200μmol/L。采用Berthelot显色法检测Hp脲酶活力的变化情况,发现姜黄素对其也有明显的抑制作用,半数抑制浓度为1.735 mmol/L。通过噻唑蓝实验分析姜黄素对人胃GES-1细胞和Hp感染人胃GES-1细胞的影响。结果显示,短时间内(12 h)较低浓度(68μmol/L)姜黄素对人胃GES-1细胞增殖无明显影响,但姜黄素浓度的增加和作用时间的延长可使细胞存活率明显下降。经68μmol/L姜黄素作用12 h后,损伤模型组细胞形态有一定程度的复原,细胞存活率略有升高,但不显著(P>0.05);高浓度(136、680μmol/L)姜黄素会导致细胞存活率明显下降。因此,姜黄素对Hp生长和脲酶活力有明显的抑制作用,但不足以缓解Hp对人胃GES-1细胞的损伤作用。 展开更多
关键词 姜黄素 幽门螺杆菌 脲酶 人胃ges-1细胞
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三七提取物对经MNNG转化后的GES-1细胞增殖抑制及促凋亡作用 被引量:8
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作者 李军祥 王志斌 +2 位作者 朱陵群 朱福玲 崔巍 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期719-722,共4页
目的通过细胞培养方法,研究灌服三七提取物后犬血清对胃癌前病变细胞增殖抑制及促凋亡作用。方法采用永生化的人胃黏膜上皮细胞系GES-1细胞被N-甲基-N-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)进一步转化后的细胞(简称MC细胞)作为胃癌前病变细胞的体外研... 目的通过细胞培养方法,研究灌服三七提取物后犬血清对胃癌前病变细胞增殖抑制及促凋亡作用。方法采用永生化的人胃黏膜上皮细胞系GES-1细胞被N-甲基-N-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)进一步转化后的细胞(简称MC细胞)作为胃癌前病变细胞的体外研究模型;以三七提取物给彼格犬一次性灌胃,取给药前的血清及给药后不同时点的血清作为实验药物血清。以四甲基固氮唑盐(MTT)法分别检测每个采血时间点上含药血清对MC细胞作用72h后的抑制情况,找出最佳含药血清时点(2h、6h);根据以上结果,以流式细胞仪(flowcytometry)分别检测2h和6h药物血清对MC细胞作用72h后的促凋亡作用。结果2h和6h时点的药物血清对MC细胞的抑制率最高,分别达到45.3%和42.4%,与空白血清组比较差异有显著性(P<0.01);其能明显促进MC细胞的凋亡,与空白血清组比较其凋亡比例增加(P<0.05)。在2h和6h药物血清的作用下MC细胞在G0/G1期细胞比例明显下降(P<0.05);而G2/M期细胞显著增加(P<0.05);但S期并没有一致性的变化。结论灌服三七提取物后2h、6h药物血清对MC细胞的增殖抑制作用最强;均对MC细胞有显著的促凋亡作用,且能降低MC细胞在G0/G1期的比例及增加G2/M期的比例,这可能是其抑制MC细胞增殖及促凋亡的原因之一。 展开更多
关键词 三七 胃癌 细胞培养 凋亡 细胞增殖抑制 ges-1细胞 促凋亡作用 三七提取物 N-甲基-N-硝基-N-亚硝基胍 MNNG
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