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应用MALDI-TOF MS快速鉴定bla_(KPC-2)基因型肺炎克雷伯菌 被引量:2
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作者 汪华学 张杰 +3 位作者 曹云松 徐阳 应冲涛 郭普 《中国感染控制杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期217-223,共7页
目的探讨基质辅助激光解析/电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)对携带bla_(KPC-2)基因型肺炎克雷伯菌的快速鉴定能力。方法收集2018年9月—2020年11月蚌埠医学院第一附属医院临床住院患者分离的肺炎克雷伯菌,采用纸片扩散法进行药敏试验。... 目的探讨基质辅助激光解析/电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)对携带bla_(KPC-2)基因型肺炎克雷伯菌的快速鉴定能力。方法收集2018年9月—2020年11月蚌埠医学院第一附属医院临床住院患者分离的肺炎克雷伯菌,采用纸片扩散法进行药敏试验。应用聚合酶链反应(PCR)方法筛选携带bla_(KPC-2)基因型肺炎克雷伯菌。MALDI-TOF MS鉴定菌株并收集携带bla_(KPC-2)基因型和碳青霉烯类敏感肺炎克雷伯菌(CSKP)的质谱图,各自选取其中70株菌株图谱,建立携带bla_(KPC-2)基因型和CSKP的超级图库(Super-Spectra)。采用超级图库鉴定除建库以外的肺炎克雷伯菌,根据耐药表型和PCR结果,判断鉴定结果是否准确。结果共收集295株肺炎克雷伯菌,经耐药表型筛选耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)143株和CSKP 152株。CRKP中鉴定出140株携带碳青霉烯酶基因(134株检出bla_(KPC-2)基因,3株检出blaKPC-18基因,2株检出blaNDM-1基因,1株检出blaIMP基因),3株不携带碳青霉烯酶基因;其中2株同时检出bla_(KPC-2)基因和blaNDM-1基因。根据建库要求,建立携带bla_(KPC-2)基因型和CSKP的超级图库(Super-Spectra);设置error值<0.5,二者重合率达80%;对比图发现,4154.4、8310.7、10880.8、3579、10079.3 m/z五个峰可作为区分携带bla_(KPC-2)基因肺炎克雷伯菌和CSKP的特征峰。选取除建库以外的155株肺炎克雷伯菌进行验证,准确率为92.90%(144/155);其中携带bla_(KPC-2)基因肺炎克雷伯菌准确率为94.52%(69/73),CSKP准确率为91.46%(75/82)。结论通过MALDI-TOF MS建立Super-Spectra,可快速预测bla_(KPC-2)基因型肺炎克雷伯菌,为临床CRKP感染的诊疗及医院感染防控提供可靠的实验室依据。 展开更多
关键词 基质辅助激光解析/电离飞行时间质谱 肺炎克雷伯菌 bla_(kpc-2) 超级图库
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Newly Detected Transmission of bla_(KPC-2) by Outer Membrane Vesicles in Klebsiella Pneumoniae 被引量:1
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作者 Liu-jun CHEN Xiao-peng JING +6 位作者 Dong-li MENG Ting-ting WU Huan ZHOU Rui-ling SUN Xiao-chun MIN Rong LIU Ji ZENG 《Current Medical Science》 SCIE CAS 2023年第1期80-85,共6页
Objective The prevalence of carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae(CR-KP)is a global public health problem.It is mainly caused by the plasmid-carried carbapenemase gene.Outer membrane vesicles(OMVs)contain toxins ... Objective The prevalence of carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae(CR-KP)is a global public health problem.It is mainly caused by the plasmid-carried carbapenemase gene.Outer membrane vesicles(OMVs)contain toxins and other factors involved in various biological processes,includingβ-lactamase and antibiotic-resistance genes.This study aimed to reveal the transmission mechanism of OMV-mediated drug resistance of Klebsiella(K.)pneumoniae.Methods We selected CR-KP producing K.pneumoniae carbapenemase-2(KPC-2)to study whether they can transfer resistance genes through OMVs.The OMVs of CR-KP were obtained by ultracentrifugation,and incubated with carbapenem-sensitive K.pneumoniae for 4 h.Finally,the carbapenem-sensitive K.pneumoniae was tested for the presence of bla_(KPC-2)resistance gene and its sensitivity to carbapenem antibiotics.Results The existence of OMVs was observed by the electron microscopy.The extracted OMVs had bla_(KPC-2)resistance gene.After incubation with OMVs,bla_(KPC-2)resistance gene was detected in sensitive K.pneumoniae,and it became resistant to imipenem and meropenem.Conclusion This study demonstrated that OMVs isolated from KPC-2-producing CR-KP could deliver bla_(KPC-2)to sensitive K.pneumoniae,allowing the bacteria to produce carbapenemase,which may provide a novel target for innovative therapies in combination with conventional antibiotics for treating carbapenem-resistant Enterobacteriaceae. 展开更多
关键词 bla_(kpc-2) carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae CARBAPENEMASE outer membrane vesicles simplified carbapenem inactivation method
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Characterization of a bla_(CTX-M-3),bla_(KPC-2)and bla_(TEM-1B)co-producing IncN plasmid in Escherichia coli of chicken origin
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作者 WANG Wen-jing WANG Yi-fu +7 位作者 JIN Ya-jie SONG Wu-qiang LIN Jia-meng ZHANG Yan TONG Xin-ru TU Jian LI Rui-chao LI Tao 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2023年第1期320-324,共5页
An extensively drug-resistant(XDR)Escherichia coli strain 258E was isolated from an anal swab sample of a chicken farm of Anhui province in China.Genomic analyses indicated that the strain 258E harbors an incompatibil... An extensively drug-resistant(XDR)Escherichia coli strain 258E was isolated from an anal swab sample of a chicken farm of Anhui province in China.Genomic analyses indicated that the strain 258E harbors an incompatibility group N(IncN)plasmid pEC258-3,which co-produces bla_(CTX-M-3),bla_(KPC-2),bla_(TEM-1B),qnrS1,aac(6')-Ib-cr,dfrA14,arr-3,and aac(6')-Ib3.Multiple genome arrangement analyses indicated that pEC258-3 is highly homologous with pCRKP-1-KPC discovered in Klebsiella pneumoniae from a patient.Furthermore,conjugation experiments proved that plasmid pEC258-3 can be transferred horizontally and may pose a significant potential threat in animals,community and hospital settings. 展开更多
关键词 bla_(CTX-M-3) bla_(kpc-2) bla_(TEM-1B) IncN PLASMID Escherichia coli
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2016-2018年东莞地区耐碳青霉烯类肠杆菌目细菌的耐药表型、耐药机制和分子流行病学分析 被引量:5
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作者 郭主声 吕飞 +7 位作者 谢树金 黄亚 林偲思 徐宝华 冯剑波 冯森 何芬 周谋清 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期798-805,共8页
目的通过研究东莞地区的耐碳青霉烯类肠杆菌目细菌(carbapenem-resistant Enterobacteriaceae,CRE)的耐药情况和基因分型,研究耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae,CRKP)的亲缘性、耐药机制和bla_(KPC... 目的通过研究东莞地区的耐碳青霉烯类肠杆菌目细菌(carbapenem-resistant Enterobacteriaceae,CRE)的耐药情况和基因分型,研究耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae,CRKP)的亲缘性、耐药机制和bla_(KPC-2)基因环境,为临床寻找控制和治疗该致病菌的更优方案提供参考。方法回顾性收集2016年1月—2018年12月东莞市人民医院、东莞东华医院、康华医院、东莞市中医院和东莞市妇幼保健院等十三所医院的住院患者的CRE菌株进行常规微生物培养、鉴定和药敏试验。以美罗培南或亚胺培南纸片法(K-B法)或最小抑菌浓度(MIC)测定法对肠杆菌目细菌进行初筛;采用改良Hodge试验、亚胺培南-EDTA双纸片协同试验和CIM试验检测CRE产酶情况;聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测并鉴定CRE的碳青霉烯类耐药基因(bla_(KPC)、bla_(NDM)、bla_(IMP)、bla_(DHA)、bla_(CTX-M)和bla_(CMY)),以及CRKP的多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)和孔蛋白(OmpK35、OmpK36和OmpK37);通过Junction PCR、Mapping PCR和Crossing PCR检测bla_(KPC-2)基因环境;使用WHONET 5.6软件统计分析CRE临床分离株在标本和科室中的分布与耐药情况,以及碳青霉烯酶基因在科室中的分布情况。结果从37217株肠杆菌目细菌中共检出131株CRE(占0.35%),其中肺炎克雷伯菌79株(占60.31%)、大肠埃希菌21株(占16.03%)和阴沟肠杆菌12株(占9.16%);检出CRE的临床科室主要为ICU(66株,占50.38%);在检出CRE的标本中,位于前3位分别是痰液标本(56株,占42.75%)、尿液标本(21株,占16.03%)、伤口分泌物标本(12株,占9.16%);CRE对目前临床中常使用的抗菌药物表现出高耐药性,仅对阿米卡星耐药率较低,为21.38%。检测104株CRE(包括肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌和阴沟肠杆菌)发现的碳青霉烯酶有KPC-2型(57,54.81%)、NDM-1型(7株,6.73%)和NDM-5型(2株,1.92%);其中,CRKP主要为ST11型(49株,占62.03%),其次为ST1型(25株,占31.65%);ompK35(75株,占94.94%)、ompK36(77株,占97.47%)和ompK37(79株,占100%)发生突变的占比高;bla_(KPC-2)的基因环境主要为B1型突变型(38株,占48.10%),其次为A型突变型(14株,占17.72%)。结论2016—2018年东莞地区临床CRE检出率为0.35%,耐药性强,其中,CRKP主要为ST11型,主要流行的是KPC-2型,其基因环境为B1型突变型,而且孔蛋白突变占比极高,这提示东莞地区bla_(KPC-2)基因主要通过质粒进行传播,并且孔蛋白突变在CRE中发挥重要作用,院内感染医务工作者应根据该菌科室分布、耐药情况和耐药机制等特点,采取合理有效的预防和治疗方法。 展开更多
关键词 耐碳青霉烯类肠杆菌目细菌 耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌 多位点序列分型 孔蛋白 bla_(kpc-2) 基因环境
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bla_(KPC-2)在耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌中的传播机制 被引量:3
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作者 李姝婧 蒋晓飞 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期253-257,共5页
耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)在临床高度流行, 由于缺乏有效治疗药物而带来了显著挑战。bla_(KPC-2)编码的肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶-2(KPC-2)是CRKP产生碳青霉烯抗性的主要原因之一。在中国和其他亚洲地区, Tn1721和IncFⅡ质粒是bla_(... 耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)在临床高度流行, 由于缺乏有效治疗药物而带来了显著挑战。bla_(KPC-2)编码的肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶-2(KPC-2)是CRKP产生碳青霉烯抗性的主要原因之一。在中国和其他亚洲地区, Tn1721和IncFⅡ质粒是bla_(KPC-2)在缺乏规律间隔成簇短回文重复序列(CRISPR)和限制-修饰(R-M)系统的Kpn ST11之间转移的主要载体。转座子的结构对耐药基因的转座频率有明显影响, 这可能和不同转座子的转座模式有关系。bla_(KPC-2)在ST11中有流行优势与ST11免疫缺陷有重要联系, 用重新设计的CRISPR/Cas3系统通过接合实验传递入ST11型肺炎克雷伯菌, 高危IncFⅡ质粒可以被成功剪切, 从而使ST11型CRKP恢复对抗生素的敏感性, 这为CRKP的临床治疗和预防提供了新思路。 展开更多
关键词 bla_(kpc-2) 耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌 传播机制
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大环内酯类抗菌药物联合解热止嗽汤治疗携带bla_(KPC-2)基因病原菌感染肺炎的疗效 被引量:1
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作者 尹伟栋 钱根才 +2 位作者 童江民 沈月英 高春新 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第10期1456-1459,共4页
目的探究使用大环内酯类抗菌药物联合解热止嗽汤治疗携带bla_(KPC-2)基因病原菌感染肺炎患儿的临床疗效.方法选择2018年5月-2019年5月浙江大学附属儿童医院长兴院区儿内科接受治疗的54例携带bla_(KPC-2)基因耐药菌感染肺炎患儿作为研究... 目的探究使用大环内酯类抗菌药物联合解热止嗽汤治疗携带bla_(KPC-2)基因病原菌感染肺炎患儿的临床疗效.方法选择2018年5月-2019年5月浙江大学附属儿童医院长兴院区儿内科接受治疗的54例携带bla_(KPC-2)基因耐药菌感染肺炎患儿作为研究对象,按照治疗方式不同分为研究组和对照组,每组各27例.对照组患儿仅接受大环内酯类抗菌药物治疗,研究组患儿在此基础上加用解热止嗽汤进行治疗,对两组患儿的临床疗效和血清因子水平进行比较.结果54例肺炎患儿痰液标本共分离病原菌73株,其中肺炎克雷伯菌携带bla_(KPC-2)基因阳性率最高为86.21%;治疗后研究组患儿退热、肺部啰音消失、咳嗽消失及肺部阴影消失的时间均短于对照组;研究组患儿治疗疗效高于对照组患儿(Z=2.338,P=0.019);研究组患儿血清降钙素原(PCT)、C-反应蛋白(CRP)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)以及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平均低于对照组(P<0.05);研究组患儿不良反应总发生率低于对照组患儿(P<0.05).结论大环内酯类抗菌药物联合解热止嗽汤治疗携带bla_(KPC-2)基因病原菌感染肺炎患儿能够有效改善临床症状,降低炎症因子水平,产生不良反应的概率较小,安全性较高. 展开更多
关键词 bla_(kpc-2)基因 病原菌 大环内酯类抗菌药物 解热止嗽汤
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亚胺培南联合常用抗菌药物对bla_(KPC-2)型CRKP体外抗菌作用分析
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作者 邵传锋 陈佩雷 陈朴 《中国基层医药》 CAS 2021年第8期1192-1196,共5页
目的:探讨亚胺培南联合常用抗菌药物对bla_(KPC-2)型碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌(CRKP)的体外抗菌作用。 方法:选取乐清市人民医院2018年1月至2019年1月分离的6株非重复的经聚合酶链反应和DNA序列确认的bla_(KPC-2)型CRKP菌株,测量其对... 目的:探讨亚胺培南联合常用抗菌药物对bla_(KPC-2)型碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌(CRKP)的体外抗菌作用。 方法:选取乐清市人民医院2018年1月至2019年1月分离的6株非重复的经聚合酶链反应和DNA序列确认的bla_(KPC-2)型CRKP菌株,测量其对常用9种抗菌药物的敏感率,采取棋盘稀释法进行亚胺培南联合8种抗菌药物的药物敏感性试验,计算部分抑菌浓度指数(FIC)并评价联合应用效果;通过绘制体外时间-杀菌曲线评估联合用药的杀菌作用。 结果:6株bla_(KPC-2)型CRKP菌株对亚胺培南、美罗培南、头孢他啶、环丙沙星、利福平、头孢噻肟等抗菌药物耐药率为100.00%(6/6),对米诺环素、克拉维酸耐药率为66.67%(4/6),对替加环素耐药率为33.33%(2/6);亚胺培南联合替加环素抗菌作用较好,对4株起协同作用、2株起相加作用;以菌株KPN2进行亚胺培南联合替加环素治疗的时间-杀菌曲线显示:菌株KPN2在亚胺培南1/2最低抑菌浓度(MIC)与替加环素1/4 MIC在(t+2)时杀菌率>95%,此作用可维持(t+10)h至(t+12)h,亚胺培南联合替加环素对002杀菌率逐步降低,002生长曲线逐渐上升。 结论:体外药物敏感性试验显示,亚胺培南联合替加环素对bla_(KPC-2)型CRKP具有较好协同杀菌作用,可供临床治疗bla_(KPC-2)型CRKP感染患者时参考。 展开更多
关键词 克雷伯菌 肺炎 碳青霉烯类 亚胺培南 抗生素 bla_(kpc-2)型耐药 体外抗菌 替加环素 药敏试验 杀菌曲线
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产KPC铜绿假单胞菌的耐药分子机制及其临床分布 被引量:6
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作者 陈勇 史利宁 +7 位作者 胡毓安 曹进 孙宁 姚新月 张静 王颖 范明 王卫萍 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2021年第6期575-579,共5页
目的产KPC铜绿假单胞菌(PA)常为泛耐药菌,增加了临床治疗的难度。探讨产KPC的PA的分子耐药传播机制及其临床分布,为预防和控制耐药菌株的传播以及临床治疗提供理论依据。方法收集东部战区总医院2018年7月至2018年12月临床分离的泛耐药PA... 目的产KPC铜绿假单胞菌(PA)常为泛耐药菌,增加了临床治疗的难度。探讨产KPC的PA的分子耐药传播机制及其临床分布,为预防和控制耐药菌株的传播以及临床治疗提供理论依据。方法收集东部战区总医院2018年7月至2018年12月临床分离的泛耐药PA,16S rRNA测序法进行菌种鉴定;改良CarpaNP法检测碳青霉烯酶的类型;PCR法进行碳青霉烯酶基因检测和质粒同源性分析;高通量全基因组测序技术对其质粒进行测序。结果112株泛耐药PA中有20株菌检出A类碳青霉烯酶,占17.9%,经PCR验证均携带bla KPC基因。其中16株来自ICU病房,占80.0%。质粒全序测定结果显示,质粒全长51.6 kb,有69个开放阅读框(ORFs),平均GC含量59.2%,是一个全新的带bla KPC质粒,它有全新的骨架区和1个新的Tn 1403-based bla KPC-2单元转座子。结论产KPC酶是PA对碳青霉烯类药物耐药的重要原因,PA中出现携带bla KPC-2的耐药质粒,提示这种耐药特性将如同其在肠杆菌科一样在PA中播散。 展开更多
关键词 铜绿假单胞菌 bla_(kpc-2) 碳青霉烯酶
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耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌感染患者临床分布特点、耐药基因及相关危险因素分析
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作者 范向平 谢琪 +2 位作者 刘志云 车玉传 邓莉 《临床误诊误治》 CAS 2024年第21期39-47,共9页
目的探析耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)感染患者分布特点、耐药基因以及相关危险因素,以避免抗菌药物的不合理使用。方法回顾性分析2017年1月至2021年9月确诊的619例肺炎克雷伯菌(KPN)感染患者的临床资料,对CRKP感染分布特点及耐药基... 目的探析耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)感染患者分布特点、耐药基因以及相关危险因素,以避免抗菌药物的不合理使用。方法回顾性分析2017年1月至2021年9月确诊的619例肺炎克雷伯菌(KPN)感染患者的临床资料,对CRKP感染分布特点及耐药基因进行统计分析,采用单因素、多因素logistic回归分析CRKP感染发生的危险因素。结果619例中,51例(8.24%)为CRKP,568例(91.76%)为碳青霉烯类敏感肺炎克雷伯菌(CSKP)。与CSKP组相比,CRKP组医院获得性感染、科室分布为神经内科以及1个月内使用过碳青霉烯类药物的占比更高,科室分布为呼吸科的占比更低,且CRKP组对多磷酸类、中效磺胺类、氨基苷类、碳青霉烯类、头孢菌素类、青霉素类、喹诺酮类抗菌药物的耐药率更高(P<0.05,P<0.01)。PCR扩增耐药基因显示,51株CRKP菌种中30株(58.9%)携带bla_(KPC-2)基因,18株(35.3%)携带bla_(NDM)基因,2株(3.9%)携带bla_(IMP)基因,1株(1.9%)携带bla_(OXA-48)基因,2株(3.9%)同时携带bla_(KPC-2)和bla_(NDM)基因。多因素logistic回归分析显示,血清白蛋白<35 g/L、急性生理功能和慢性健康状况评分系统Ⅱ评分≥20分、有留置管、机械通气≥7 d、1个月内使用过碳青霉烯类药物、使用≥3种抗菌药物、住院时间≥20 d、携带多种耐药菌是CRKP感染的独立危险因素(P<0.05,P<0.01)。结论CRKP在医院获得性感染中占比较高,检测CRKP耐药情况及耐药基因可指导临床合理选择抗菌药物,从而减少耐药的发生,防控CRKP感染。 展开更多
关键词 肺炎克雷伯菌 耐碳青霉烯类 多磷酸盐类:氨基苷类 bla_(kpc-2) 危险因素 血清白蛋白 急性生理功能和慢性健康状况评分系统Ⅱ
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