黑豆皮提取物对果蝇结肠炎的保护作用

黑豆是东方医学中常见的药食同源材料,黑豆皮提取物(black bean seed coat extract,BBSCE)含有高浓度的酚类化合物,具有很好的抗氧化和抗炎症活性。文章采用十二烷基硫酸钠(sodium dodecyl sulfate,SDS)诱导的果蝇溃疡性结肠炎研究BBSCE对肠道损伤的防御作用。研究发现,果蝇在SDS暴露实验中,其存活率、攀爬能力以及肠道形态会受到显著影响,肠道屏障的完整性也会受到严重破坏。膳食喂养BBSCE可以有效地减轻SDS暴露对果蝇造成的损害,包括行为学损伤、肠道形态及肠道屏障的完整性。结果表明,BBSCE可以通过改善肠道萎缩和提高肠道屏障的完整性保护肠道免受化合物造成的损伤,可为功能性食品或天然药物的开发提供理论依据。

黑豆种皮多酚的超声辅助提取工艺及抑菌活性研究

试验旨在探究黑豆种皮多酚的超声辅助提取工艺及抑菌效果。以黑豆为原材料,以黑豆种皮多酚提取率为响应值,选取乙醇浓度、料液比、提取时间、超声功率为考察因素,采用响应面法对黑豆种皮多酚提取工艺进行优化,同时使用滤纸圆片法测定黑豆种皮多酚对大肠杆菌和枯草芽孢杆菌的抑制效果。结果表明:当乙醇浓度为60%、料液比为1􀏑25(g/mL)、提取时间为65 min、超声功率为400 W时,黑豆种皮多酚提取率最高,为(11.26±0.08)mg/g,与理论值接近,说明经过响应面法优化分析得出的模型是可用的。通过对抑菌圈观察发现,当多酚浓度>0.050 mg/mL时,黑豆种皮多酚对大肠杆菌和枯草芽孢杆菌有一定的抑制作用。

黑豆种皮花青素的提取工艺优化及抗氧化活性研究

黑豆种皮富含花青素,为了进一步开发黑豆中花青素资源,采用微波辅助提取法提取黑豆种皮花青素,通过单因素和正交试验优化黑豆种皮花青素提取工艺,并通过测定羟基自由基、DPPH自由基和ABTS自由基清除能力评价不同温度下所提取花青素的抗氧化活性,进一步优化黑豆种皮花青素的提取条件。结果表明,黑豆种皮花青素最佳提取工艺为:乙醇体积分数70%,料液比1∶15(g/mL),微波功率350 W,微波时间30 s,提取时间30 min,提取温度40℃,在此条件下花青素提取量为25.3 mg/g,所获得的花青素对羟基自由基和ABTS自由基具有较强的清除能力。

黑大豆种皮花色苷的提取及其抗氧化作用研究

以黑大豆皮为材料,采用二次回归正交旋转组合设计对其花色苷的提取工艺进行了优化研究。结果表明,最佳提取参数为温度60℃、时间1h、乙醇浓度60%、料液比1∶40。对黑大豆种皮花色苷含量与总抗氧化能力之间的相关性分析表明,二者之间存在极显著的线性关系(P<0.01),且黑大豆种皮花色苷提取物表现出较强的清除OH·、O-2·及有机自由基DPPH·的体外抗氧化作用,其清除能力是维生素C的1.6倍、2.2倍、1.4倍。

黑豆皮原花青素提取工艺的优化

为了优化黑豆皮中原花青素的提取工艺,以乙醇为提取剂,考察了乙醇浓度、提取时间、料液比及提取温度4个因素对黑豆皮原花青素提取率的影响,并通过正交试验对最佳提取工艺进行了筛选。结果表明:乙醇浓度60%、提取时间80min、料液比1∶25、提取温度60℃为最佳提取工艺条件,原花青素1次提取率可达85.51%,合并提取率可达95.2%。

黑豆种皮花色苷含量及抗氧化活性的测定

以不同品种黑豆种皮为材料,采用pH示差法测定武乡小黑豆发芽过程中和不同黑豆材料种皮中花色苷的含量。结果表明,武乡小黑豆在发芽过程中花色苷含量基本呈现下降趋势;不同温度下发芽的武乡小黑豆种皮中花色苷含量大小顺序为20℃>18℃>30℃>25℃;不同黑豆材料种皮中花色苷含量差异较大,其中,SNWS47种皮中花色苷含量最高,为12.31 mg/g,而平南种皮中花色苷含量较低,仅有2.70 mg/g;通过对DPPH自由基的清除能力比较不同黑豆品种中花色苷的抗氧化活性,结果表明,青黑豆种皮中花色苷抗氧化活性最高,IC_(50)为0.011 mg/L;武乡小黑豆IC_(50)最大,为4.391 mg/L,说明其抗氧化活性最低。

野生大豆黑色种皮色素提取物抗氧化活性研究

分别采用DPPH法和FRAP法测定野生大豆黑色种皮色素提取物的自由基清除能力和总抗氧化能力,并与栽培黑豆品种的黑色种皮色素提取物和VC作比较。结果表明:3个生态型的野生大豆黑色种皮色素提取物的自由基清除能力和总抗氧化能力皆明显优于栽培黑大豆品种的色素提取物,它们的自由基清除能力分别相当于VC的30.48%、40.80%和44.81%,总抗氧化能力分别相当于VC的27.65%、29.45%和30.12%。

陕北小粒黑豆皮原花青素提取工艺及抗氧化性研究

提取陕北小粒黑豆皮中原花青素,考察乙醇浓度、提取时间、提取温度和液料比对其提取得率的影响,利用Box-Behnken设计试验,建立提取过程的数学模型及二次多项式回归方程,预测出最优提取条件,并对提取的原花青素进行抗氧化性研究。结果表明,陕北小粒黑豆皮提取原花青素的优化工艺条件为提取时间4.2h、提取温度53℃、液料比22:1(mL/g)、乙醇浓度60%,在该条件下提取得率为5.380%;原花青素对DPPH自由基、羟基自由基和超氧阴离子均具有一定的清除效果,其IC50值分别为0.075,0.590,0.220mg/mL。

黑豆种皮花色苷酶法辅助提取工艺优化及其抗氧化活性分析

优化黑豆种皮花色苷复合酶法辅助提取工艺,并对其抗氧化活性进行评价。通过单因素试验和响应面法优化确定了黑豆种皮花色苷生物酶法辅助提取的最佳工艺为:复合酶(纤维素酶400 U/g,α-淀粉酶50 U/g),酶解温度50℃,液料比26∶1 mL/g,乙醇体积分数64%,酶解时间为59 min。在此条件下,提取花色苷的含量为2.019 mg/g。抗氧化试验研究表明,黑豆种皮花色苷的还原能力、对超氧阴离子自由基清除能力低于抗坏血酸,但对亚硝酸根离子和DPPH自由基、ABTS自由基的清除能力强于抗坏血酸。因此,生物酶法辅助提取是一种高效的黑豆种皮花色苷提取方法,且作为一种新型花色苷资源,黑豆种皮花色苷有着挖掘和应用价值。

黑大豆皮的抗氧化性及其活性物质的提取研究

对比了黑大豆1号种皮提取物与黄大豆皮提取物的总抗氧化能力值,发现黑大豆皮提取物的总抗氧化能力与黄大豆皮提取物的存在显著差异,前者明显比后者强。进而以总抗氧化能力为指标,采用响应面分析法对黑大豆皮中抗氧化物质的提取进行了优化,在豆皮粒度为60目,料液比为1:30,提取时间为2小时的固定条件下,得到的优化条件为:提取剂为pH 1.0的60%乙醇溶液,提取温度为80 。

黑小豆种皮中多酚的超声-微波协同萃取工艺及抗氧化活性研究

以黑小豆种皮为原料,采用超声-微波协同萃取法提取其中的多酚物质。在单因素试验基础上,利用正交试验优化黑小豆种皮中多酚的提取工艺。结果表明:黑小豆种皮多酚的最佳提取工艺条件为超声功率450 W、料液比1∶45 (g/m L)、提取温度80℃、超声-微波时间35 min。在此条件下,黑小豆种皮提取液中总酚含量为(103.55±1.05) mg/g、总抗氧化能力为(19.64±0.67) U/mg、总黄酮含量为(43.69±0.87) mg/g、总花色苷含量为(6.64±0.50) mg/g。此工艺便捷、可行、提取率高。

芸豆种皮多酚的提取工艺优化及体外抗氧化活性评价

以红芸豆为原料,优化芸豆种皮中多酚的提取工艺,并对提取物抗氧化活性进行研究。在单因素试验的基础上,采用响应面的方法确定最佳工艺,并利用分光光度法测定多酚提取物的体外抗氧化活性。结果:红芸豆种皮中多酚提取的最优工艺为乙醇体积分数42%,固液比1∶42,超声功率308W,提取时间51min,在此条件下得到的芸豆种皮多酚提取量为218.92mg/gDW。验证试验结果与预测值相对误差为0.25%,表明回归模型适用于芸豆种皮多酚的提取。多酚提取物的DPPH自由基清除能力为185.47μmol Trolox /gDW,ABTS自由基清除能力为230μmol Trolox /gDW,铁离子还原能力为204μmol Trolox /gDW。结论:优化后的超声提取工艺提高了芸豆种皮多酚的提取量,得到的多酚提取物具有较强的抗氧化能力,本研究可为芸豆多酚的进一步研究提供有利参考。

黑豆皮多酚提取物体外对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶活性的影响

目的以小麦粉、大米粉、小米粉、玉米粉4种常食用谷物和4-硝基酚-α-D-吡喃葡萄糖苷(4-Nitrophenyl-α-D-glucopyranoside,p NPG)为底物,研究在不同底物下不同浓度黑豆皮多酚提取物对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶活性的影响,同时探明其对酶的抑制动力学。方法采用大孔树脂纯化黑豆皮提取物,Folin-Ciocalteu比色法测定多酚含量,分光光度法测其抑制率,多重比较分析不同底物及不同浓度提取物的差异。结果提取物溶液浓度与抑制作用呈量效关系:当抑制剂浓度为0.25、0.5、1、2 mg/mL时谷物类底物间抑制率存在显著差异(P<0.05),4、6 mg/mL时差异不显著;经纯化后多酚含量(78.3%)较纯化之前(39.5%)显著提高,同时其对酶抑制作用较纯化之前显著增强;动力学分析结果表明黑豆皮多酚提取物对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶两种酶的抑制类型分别为竞争性抑制和非竞争性抑制类型。结论黑豆皮多酚提取物在体外对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶均具有较强的活性抑制作用。

绿豆衣提取物对大鼠肝微粒体CYP3A4活性的影响

目的:研究绿豆衣提取物(MBSC)对大鼠肝微粒体中细胞色素P450(CYP)3A4酶活性的影响。方法:采用高效液相色谱法,以咪达唑仑为CYP3A4探针药物,建立检测咪达唑仑代谢产物1-羟基咪达唑仑在大鼠肝微粒体孵育体系中浓度的方法,对体外肝微粒体孵育体系中孵育时间、肝微粒体量、孵育时间进行优化,以优化后的条件先后评价绿豆衣提取物对CYP3A4活性的影响及其潜在作用机制。结果:MBSC初提物可显著抑制CYP3A4酶活性,其活性仅为对照组的38.14%(P<0.05),且IC_(50)值为489.7μg·ml^(-1),抑制机制为竞争-非竞争性抑制。结论:绿豆衣提取物在体外对大鼠CYP3A4酶的活性具有抑制作用,尚需进一步应用体内模型评价其对CYP3A4活性的影响。

鼓粒期遮光对黑绿豆种皮花青素积累及相关基因表达特性的影响

为明确黑绿豆种皮各花青素组分积累规律和遮光对其的影响,以普通绿豆和黑绿豆为试验材料,在大田栽培条件下于花后5d开始对豆荚进行遮光处理。采用分光光度法结合液相色谱串联质谱的方法测定了2个绿豆种皮中不同时期各种花青素组分的积累,利用Real-time PCR方法分析了花青素合成结构基因的表达,并测定了3种花青素合成酶的活性。结果显示,黑绿豆种皮在花后16d(S3时期)开始大量积累花青素,近成熟期时(S4时期)能检测到的花青素组分分别为:飞燕草色素(88.67%,主调色素)、矢车菊色素(8.68%)、原花青素(1.05%)、矮牵牛花色素(0.94%)、天竺葵色素(0.34%)和芍药花色素(0.32%)。其中, 3种主要花青素的主调色素组分分别为飞燕草素-3-O-葡萄糖苷(76.61%)、矢车菊素-3-O-葡萄糖苷(89.17%)、原花青素B3 (28.64%)。Real-time PCR分析表明,黑绿豆种皮花青素合成结构基因PAL、C4H、4CL、CHS、CHI、F3’H、F3’5’H、DFR、LDOX和UFGT相对表达量显著高于普通绿豆,其中DFR (371.85倍)、LDOX (44.09倍)和F3’5’H (32.99倍)的差异表达倍数最大。黑绿豆种皮中PAL、CHI和UFGT的活性也均大于普通绿豆。9个花青素合成的结构基因表达量和2个花青素合成相关酶的活性与多数花青素组分含量和总含量都呈显著正相关关系。11个花青素合成结构基因的表达量和3个花青素合成相关酶活性在遮光条件下均显著降低,最终导致花青素各组分含量和总量显著降低。研究结果为黑绿豆种皮着色的调控机制解析奠定了基础,也有助于黑绿豆育种的辅助选择。

黔产绿豆衣水分、总灰分及浸出物测定

目的:测定绿豆衣药材中水分、总灰分及浸出物的含量,为建立绿豆衣质量标准提供实验依据。方法:按照《中国药典》2015年版四部0832(第二法)水分测定、2302灰分测定和2201浸出物测定法对绿豆衣进行水分、总灰分、浸出物测定。结果:绿豆衣水分含量在10.9%~12.0%之间;总灰分含量在2.3%~2.5%之间;浸出物含量在3.0%~3.4%之间。结论:建议绿豆衣水分限度值为15%;总灰分限度值为3.0%;浸出物标准不得少于2.5%。

黑豆种皮中原花青素的提取和纯化研究

本文主要研究黑豆(Phaseolus vulgaris)种皮中原花青素的提取和纯化方法。通过使用超声波辅助提取法粗提原花青素(Procyanidins,PC),以AB-8型大孔树脂吸附法纯化粗提物,并对纯化产物进行了红外色谱定性分析。单因素提取实验结果显示:提取条件分别在乙醇的浓度为60%,提取时间在40 min,料液比为1:20以及提取温度为50℃时提取效率相对较高。随后正交试验结果显示了最优综合提取条件为:乙醇浓度为60%、提取时间为50 min、料液比为1:20(m/V)、提取温度为60℃;确定了AB-8型大孔树脂纯化工艺的最佳动态吸附和解析条件为:以0.6 mg/m L的原花青素粗提液为上样液质量浓度,流速为1.0 m L/min,吸附平衡时间为4 h,60%的乙醇溶液作为洗脱液,洗脱流速1.5 m L/min,解析时间为3 h;且红外光谱定性分析显示以上条件纯化原花青素相对有效。