黑升麻的雌激素活性及其对人类乳腺癌MCF-7细胞雌激素受体水平的影响

为了检测黑升麻 (CR)的雌激素活性及其对人类乳腺癌 MCF- 7细胞雌激素受体 (ERs)水平的影响 ,未成年雌性小鼠按体重以 75、15 0和 30 0 m g/ kg的 CR灌胃 14d,观察处于动情期的时间 ,第 15天处死后取子宫和卵巢称重。以 MTT实验筛选 CR的最佳细胞作用剂量 ,观察对照组、CR组 (4.75μg/ L )和 17β-雌二醇组 (0 .3nmol/ L)的细胞生长曲线 ,并在流式细胞仪上用间接免疫荧光法测定各组 ERs水平。结果发现子宫重量随 CR剂量增加而增加 ,30 0 mg/ kg的 CR可显著增加动情天数 (P<0 .0 5 )。 4.75 μg/ L CR对 MCF- 7细胞的促增殖作用最强 ,达 6 4.7% ;CR组和 17β-雌二醇组的细胞群体倍增时间 (TD)分别为 32 .1h和31.7h,明显低于对照组 (TD=35 .3h) ;4.75 μg/ L 的 CR可显著增加细胞的 ERs水平 (P<0 .0 1)。结果表明CR具有雌激素活性 ,其升高 ERs水平的作用可能是该物质可治疗更年期综合征的机制之一。

基于大麻素2型受体和雌激素受体α研究升麻和黑升麻含药血清对成骨细胞功能的影响

目的研究升麻Cimicifuga foetida和黑升麻含药血清基于大麻素2型受体(cannabinoid receptor type 2,CB2R)与雌激素受体α(estrogen receptorα,ERα)对成骨细胞骨形成的调控作用。方法采用高分辨质谱法鉴定升麻和黑升麻中的化学成分;升麻与黑升麻含药血清或与CB2R反向激动剂AM630或ERα抑制剂ICI联合处理MC3T3-E1成骨细胞,CCK-8法测定细胞增殖活性;试剂盒测定碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性;茜素红染色观察成骨细胞骨矿化结节的形成;Western blotting检测骨形成相关蛋白及CB2R与ERα的表达。结果升麻和黑升麻中分别鉴定了12、14个化学成分,其中有3个共有成分。升麻和黑升麻含药血清可显著增加成骨细胞的增殖、ALP活性和骨矿化结节形成,增加CB2R和ERα及骨形成相关蛋白的表达。15%升麻含药血清对MC3T3-E1成骨细胞增殖、ALP活性、骨矿化结节形成及骨形成相关蛋白表达的促进作用可被AM630和ICI所逆转,15%黑升麻含药血清对MC3T3-E1细胞骨形成的促进作用仅可被ICI所逆转。结论升麻含药血清可通过CB2R与ERα双靶点促进成骨细胞的骨形成,黑升麻含药血清仅通过激活ERα增加成骨细胞的骨形成。