姜黄素引入酯键增韧基团对膀胱癌T24细胞靶向作用的体外研究

目的:探讨姜黄素引入酯键增韧基团成为姜黄素前体化合物后靶向诱导膀胱癌T24细胞凋亡,为膀胱癌靶向治疗提供依据。方法:取不同浓度姜黄素前体化合物:叔丁氧羰基-苯丙氨酸酯姜黄素单脂(boc-phenylalanine-curcumin,BPC)及相同浓度的姜黄素对膀胱癌T24细胞及人主动脉平滑肌细胞(people aortic smooth muscle cells,HASMC)作用后,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡率,透视电镜观察BPC 20、40μmol/L处理T24细胞后细胞超微结构的改变。结果:5～40μmol/L BPC及姜黄素母体作用于膀胱癌T24细胞6～24 h后均明显抑制其增殖,呈时间剂量依赖,抑制率BPC:5.31%～59.34%(P<0.05);姜黄素:7.33%～63.59%(P<0.05);对正常二聚体细胞HASMC的抑制作用BPC较姜黄素组明显降低(1.41%～12.34%vs 5.34%～36.59%),差异有统计学意义(P<0.05);流式细胞仪分析5～40μmol/L BPC及姜黄素作用于膀胱癌T24细胞24 h后,BPC诱导凋亡率:16.97%～47.12%(P<0.05),姜黄素:19.21%～48.92%(P<0.05);而对HASMC作用则较姜黄素明显减弱,BPC诱导凋亡率为:0.94%～3.27%,姜黄素组为:4.69%～11.35%,差异有统计学意义(P<0.05)。透视电镜显示:经BPC作用后,T24细胞出现典型细胞凋亡的形态学特征。结论:姜黄素酯前体化合物BPC明显抑制膀胱癌T24细胞增殖、诱导其凋亡,而对正常二倍体细胞HASMC抑制作用降低,为姜黄素酯对肿瘤的靶向治疗研究提供新的依据。

LY294002联合姜黄素对人膀胱癌EJ细胞的体外抑制作用

目的研究磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)特异性抑制剂LY294002与姜黄素联合对体外培养的人膀胱癌EJ细胞的抑制作用。方法用MTT法,检测姜黄素单独或联合PI3K/Akt特异性抑制剂LY294002对人膀胱癌EJ细胞的抑制率;用流式细胞技术及Western blotting法,检测药物单独或联合作用对EJ细胞凋亡的影响。结果联合LY294002能够显著提高姜黄素对EJ细胞的抑制率;联合LY294002能够增加EJ细胞的凋亡水平。结论 LY294002通过促进细胞凋亡有效提高姜黄素对EJ细胞抑制作用的敏感性,通过抑制PI3K/Akt信号转导通路的激活,可明显提高姜黄素对膀胱癌的治疗效果。

姜黄素对人膀胱癌T24细胞增殖和凋亡的影响

目的:旨在探讨姜黄素对人膀胱癌T24细胞增殖和凋亡的影响。方法:细胞传代培养:培养人膀胱癌T24细胞,施加不同浓度姜黄素,观察对细胞的增殖、凋亡作用;应用四唑盐比色法(MTT法)检测细胞增殖抑制率;流式细胞仪检测细胞凋亡率(碘化丙啶染色)。结果:姜黄素各组较对照组增殖降低,存在剂量-效应关系。姜黄素各组较对照组凋亡升高,存在剂量-效应关系。结论:姜黄素抑制人膀胱癌T24细胞增殖,姜黄素促进人膀胱癌T24细胞凋亡。

姜黄素激活人膀胱癌T24细胞自噬诱导细胞凋亡

目的探讨姜黄素(Cur)对人膀胱癌T24细胞株的抗肿瘤作用及其对细胞自噬的影响。方法采用CCK-8法检测Cur对T24细胞增殖的抑制作用;Annexin V/PI法检测细胞凋亡情况;采用Western blot对细胞LC3B及P62蛋白表达量进行检测;吖啶橙染色观察细胞内自噬囊泡的改变。结果 Cur可以显著抑制T24细胞增殖,诱导细胞凋亡(P<0.01)。Cur诱导T24细胞发生自噬,显著上调LC3蛋白表达,下调P62蛋白表达,增加细胞内自噬囊泡的数量(P<0.01)。Cur增强顺铂(cis-Dichlorodiamineplatinum,CDDP)的促凋亡作用(P<0.01)。结论 Cur可显著抑制膀胱癌T24细胞的增殖并通过激活细胞自噬促进肿瘤细胞凋亡,Cur可增强CDDP的抗肿瘤效果。

姜黄素对人膀胱癌T24细胞凋亡的影响

目的探讨姜黄素对人膀胱癌T24细胞凋亡的影响。方法培养人膀胱癌T24细胞,施加不同浓度姜黄素,观察对细胞凋亡的影响;应用流式细胞仪检测细胞凋亡率(碘化丙啶染色)。结果姜黄素各组较对照组凋亡率升高,存在剂量-效应关系。结论姜黄素促进人膀胱癌T24细胞凋亡。

姜黄素联合阿霉素对膀胱癌T24生长抑制的协同作用

目的探讨姜黄素联合阿霉素对人膀胱癌T24细胞的生长抑制及其诱导肿瘤凋亡的协同作用.方法用不同浓度的姜黄素和阿霉素分别及联合作用T24细胞,用MTT法检测细胞增殖抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期分布.结果阿霉素和姜黄素联用时,能较大幅度增强姜黄素的抑制效果(P<0.05);流式细胞仪检测结果显示:姜黄素与阿霉素联合将细胞周期阻滞于S期.结论姜黄素联合阿霉素对膀胱癌细胞T24的生长有协同抑制效应,能提高阿霉素对人膀胱癌T24细胞的敏感性.

脉冲强磁场联合姜黄素对诱导膀胱肿瘤细胞BIU-87凋亡的影响

目的：观察脉冲强磁场联合姜黄素引起膀胱肿瘤细胞BIU-87凋亡的作用。方法：将体外培养的膀胱肿瘤细胞癌株BIU-87随机分为A、B和C 3组。A组为空白对照组,B、C组均经姜黄素处理,C组处理后置于脉冲强磁场中干预（8T,15HZ）,每天2 h。分别于干预后的第1、2、3天时采用显微镜观察肿瘤细胞形态、MTT法检测肿瘤细胞生长抑制率。结果：与A组比较,肿瘤细胞显微镜下处理后的B、C组,均出现典型的凋亡细胞形态,以C组表现更加明显;MTT检测,B、C组肿瘤细胞生长抑制率明显上升（均P〈0.01）,且呈时间依赖关系,第1-3天肿瘤细胞增殖抑制率B组明显低于C组（18.6%、40.6%、51.4%与26.9%、50%、61.4%,P〈0.01）;结论：脉冲强磁场联合姜黄素可促进膀胱肿瘤细胞的凋亡和抑制其生长。

姜黄素对膀胱癌T24细胞生物学行为的影响及其机制

目的观察姜黄素对人膀胱癌T24细胞增殖、凋亡及细胞内核因子κB(NF-κB)蛋白表达的影响。方法将对数生长期T24细胞分为两组,实验组加入10、20、50、100μmol/L姜黄素,对照组加入完全培养液。培养24、48、72 h时采用MTT比色法检测两组细胞增殖抑制率;培养24 h采用流式细胞术检测细胞凋亡率、Western blot法检测细胞内NF-κB蛋白表达情况。结果实验组细胞增殖抑制率明显高于对照组,且呈时间—剂量依赖性,P均<0.05;实验组24 h细胞凋亡率明显高于、NF-κB蛋白表达水平明显低于对照组,且呈剂量依赖性,P均<0.05。结论姜黄素能有效抑制人膀胱癌T24细胞增殖,诱导细胞凋亡,其机制可能与下调NF-κB表达有关。

莲黄子复方对裸鼠膀胱癌T24细胞移植瘤的抑制作用

目的:研究莲黄子(半边莲、大黄、五加皮、决明子)复方对膀胱癌T24细胞裸鼠移植瘤的抑瘤作用。方法:Nu/Nu裸鼠接种T24细胞构建膀胱癌T24细胞移植瘤模型,15只模型裸鼠随机分为莲黄子复方低剂量治疗组、高剂量治疗组和对照组,每组5只;治疗组裸鼠分别予2.5 m L/kg或5 m L/kg莲黄子复方药液灌胃治疗,对照组予5 m L/kg生理盐水灌胃,治疗当天定义为0天;其后,隔日灌胃,总计7次;治疗后1天开始隔日测量裸鼠移植瘤的体积,末次治疗后第2天处死裸鼠,称量瘤体重量;采用ELISA法检测裸鼠血清肿瘤坏死因子(TNF)-α、粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、γ-干扰素(IFN-γ)含量;免疫组织化学法检测裸鼠移植瘤组织凋亡相关蛋白Bcl2和Ba X及抑癌基因PTEN的表达。结果:治疗前各组模型裸鼠移植瘤体积比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗结束时,两种剂量治疗组裸鼠的肿瘤体积和重量均明显小于对照组(P<0.05);同时,相比对照组,两种剂量治疗组裸鼠血清TNF-α含量均明显升高,而GM-CSF、IFN-γ含量则明显降低(P<0.05);移植瘤组织中Bcl2表达在高剂量治疗组、低剂量治疗组及对照组间呈现递增的趋势,而Bax和PTEN表达则呈递减趋势,且组间差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:莲黄子配方对膀胱癌T24细胞裸鼠移植瘤有明显的抑制作用,其机制可能与其诱导PTEN和Bax的表达及抑制Bcl2的表达有关。

姜黄素诱导人膀胱癌UMUC2细胞株凋亡的作用

目的为寻找有效无毒的膀胱灌注药物用于膀胱肿瘤术后预防肿瘤种植与复发,我们观察了姜黄素对人膀胱癌细胞UMUC2的细胞毒效应及诱导凋亡的体外作用。方法以0～160μmol/L姜黄素作用于UMUC2细胞1～48 h,应用MTT法、平板克隆实验观察姜黄素的细胞毒效应,荧光染色观察凋亡形态学改变,流式细胞仪进行细胞周期分析及凋亡定量测定,免疫细胞化学染色观察凋亡相关蛋白p53和Survivin的表达。结果所有浓度组姜黄素均对膀胱癌UMUC2细胞有明显的生长抑制作用,160μmol/L姜黄素作用1 h对全部癌细胞是致命的。荧光染色观察到典型的核凝集、碎裂凋亡形态学改变。流式细胞术定量分析了亚G1峰,后者同时表明姜黄素导致的细胞周期阻滞以G2/M期为主,使S期细胞比例显著减少。免疫细胞化学染色显示姜黄素下调p53、Survivin蛋白的表达。结论姜黄素明显抑制膀胱癌细胞系UMUC2的生长并诱导凋亡,导致细胞G2/M期阻滞,其作用机制与其下调p53、Survivin的表达相关,克隆形成实验证实大剂量姜黄素、短期作用对膀胱癌细胞系UMUC2有致命的细胞毒效应,显示了姜黄素用于膀胱癌患者的化学治疗,尤其是腔内灌注化疗的可能性。

姜黄素作用PTEN/PI3K/AKT通路诱导膀胱癌EJ细胞凋亡

目的:研究姜黄素抗癌作用的分子机制。方法:以人膀胱癌细胞株EJ为模型,采用MTT法、流式细胞术,检测姜黄素对EJ细胞生长和凋亡的影响,并通过Western Blotting法检测姜黄素对EJ细胞PTEN/PI3K/AKT通路凋亡相关蛋白表达的影响。结果:姜黄素以浓度及时间依赖的方式抑制EJ细胞的增殖;流式细胞仪检测发现姜黄素作用于EJ细胞24 h后凋亡率呈剂量依赖性增加。Western Blotting显示50μM姜黄素作用EJ细胞后,PTEN、GSK-3β、C-raf、Bad、caspase-9、caspase-3的活性增强,PARP的裂解增加和Akt、PDK1的表达水平降低。结论:姜黄素能增加EJ细胞PTEN的表达,进而抑制PI3K/Akt信号通路的激活,继之激活下游GSK-3β,caspase-9和Bad等多种促凋亡分子的表达,诱导EJ细胞发生凋亡。该研究表明PTEN/PI3K/Akt信号通路在姜黄素诱导的EJ膀胱癌细胞凋亡中起了重要作用。

复方苦参注射液诱导自噬促进膀胱癌细胞凋亡机制的研究

目的探究复方苦参注射液对膀胱癌T24细胞增殖、凋亡及自噬的影响,并探究其可能的分子机制,为复方苦参注射液在临床上治疗膀胱癌提供理论依据。方法CCK-8法检测复方苦参注射液对T24细胞增殖的影响。流式细胞术检测复方苦参注射液对T24细胞凋亡的影响。MDC染色法检测复方苦参注射液对T24细胞自噬的影响。蛋白免疫印迹和免疫荧光实验检测复方苦参注射液对T24细胞凋亡关键蛋白和自噬关键蛋白的影响。结果复方苦参注射液能有效抑制T24细胞增殖。复方苦参注射液能诱导T24细胞发生凋亡和自噬。蛋白免疫印迹和免疫荧光实验结果表明,随着复方苦参注射液剂量的升高,T24细胞中B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、自噬选择性底物(P62)的表达逐渐下降,B细胞淋巴瘤2相关X蛋白(Bax)、活化的天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(cleaved-Caspase 3)、自噬关键分子酵母Atg6同系物(Beclin1)、微管相关蛋白B轻链3-Ⅱ(LC3Ⅱ)的表达逐渐升高(P<0.05),Bcl-2/Bax比值逐渐减小(P<0.05)。结论复方苦参注射液能抑制T24细胞的增殖、调节T24细胞自噬,诱导T24细胞凋亡。

复方苦参注射液联合表柔比星对膀胱癌细胞凋亡的影响

目的:探究复方苦参注射液、表柔比星及两药联合应用对人膀胱癌T24细胞增殖、凋亡的影响及其机制。方法:将膀胱癌T24细胞分为空白对照组、复方苦参注射液60μl/ml组、表柔比星4.6μmol/L组及联合给药(复方苦参注射液60μl/ml+表柔比星4.6μmol/L)组。CCK-8法观察膀胱癌T24细胞增殖,流式细胞术检测膀胱癌T24细胞凋亡,蛋白免疫印迹实验检测膀胱癌T24细胞凋亡关键蛋白的表达情况。结果:与空白对照组相比,复方苦参注射液60μl/ml和表柔比星4.6μmol/L能显著抑制膀胱癌T24细胞增殖(P<0.01),且联合用药能起到协同增效作用(P<0.01)。复方苦参注射液60μl/ml和表柔比星4.6μmol/L能显著诱导膀胱癌细胞凋亡(P<0.01),两药联合使用促进凋亡作用更加明显(P<0.01)。复方苦参注射液60μl/ml和表柔比星4.6μmol/L能下调膀胱癌细胞凋亡相关蛋白pro-Caspase 3和Bcl-2的表达(P<0.05),上调Cleaved PARP、Bax和Cleaved-Caspase 3蛋白的表达(P<0.05),降低Bcl-2/Bax比值(P<0.05),联合用药作用更加明显(P<0.05)。结论:复方苦参注射液与表柔比星能够抑制膀胱癌细胞增殖,促进膀胱癌细胞凋亡,两药联合应用起到协同增效作用。