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Understanding the role of transmembrane 9 superfamily member 1 in bladder cancer pathogenesis
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作者 Venkata Krishna Vamsi Gade Budhi Singh Yadav 《World Journal of Clinical Oncology》 2024年第4期468-471,共4页
In this editorial we comment on the article by Wei et al,published in the recent issue of the World Journal of Clinical Oncology.The authors investigated the role of Transmembrane 9 superfamily member 1(TM9SF1)protein... In this editorial we comment on the article by Wei et al,published in the recent issue of the World Journal of Clinical Oncology.The authors investigated the role of Transmembrane 9 superfamily member 1(TM9SF1)protein in bladder cancer(BC)carcinogenesis.Lentiviral vectors were used to achieve silencing or overexpression of TM9SF1 gene in three BC cell lines.These cell lines were then subject to cell counting kit 8,wound-healing assay,transwell assay,and flow cytometry.Proliferation,migration,and invasion of BC cells were increased in cell lines subjected to TM9SF1 overexpression.TM9SF1 silencing inhibited proliferation,migration and invasion of BC cells.The authors conclude that TM9SF1 may be an oncogene in bladder cancer pathogenesis. 展开更多
关键词 Urinary bladder cancer Transmembrane 9 superfamily member 1 gene cell line Lentiviral vectors Wound healing assay ONCOGENE Proliferation Migration
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STEAP1在膀胱移形细胞癌中的表达及其潜在诊断价值
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作者 万玛草 白洁 +3 位作者 赵宪龙 常斌 王建平 杨立昌 《国际检验医学杂志》 CAS 2024年第3期272-276,共5页
目的探索前列腺六段扩膜上皮抗原1(STEAP1)在膀胱移行细胞癌中的表达及其潜在诊断价值。方法选取2021年6月至2022年12月于中国人民解放军联勤保障部队第九四O医院行外科手术治疗的52例膀胱移行细胞癌患者作为观察组,另外选取同期年龄、... 目的探索前列腺六段扩膜上皮抗原1(STEAP1)在膀胱移行细胞癌中的表达及其潜在诊断价值。方法选取2021年6月至2022年12月于中国人民解放军联勤保障部队第九四O医院行外科手术治疗的52例膀胱移行细胞癌患者作为观察组,另外选取同期年龄、性别、基础疾病患病率等基础临床资料匹配的膀胱良性肿瘤患者52例作为对照组。通过酶联免疫吸附试验法、实时荧光定量聚合酶链反应测定两组患者膀胱肿瘤组织中STEAP1及STEAP1 mRNA相对表达水平,以及对比不同病理参数患者膀胱肿瘤组织中STEAP1及STEAP1 mRNA相对表达水平。通过Spearman相关性分析、二元Logistic回归分析筛选膀胱移行细胞癌发生及临床分期的危险因素,通过受试者工作特征(ROC)曲线及曲线下面积(AUC)评价各指标对膀胱移行细胞癌的诊断及预测价值。结果观察组膀胱肿瘤组织中STEAP1及STEAP1 mRNA相对表达水平均显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。中晚期膀胱移行细胞癌患者膀胱肿瘤组织中STEAP1及STEAP1 mRNA相对表达水平均显著高于早期膀胱移行细胞癌患者,差异有统计学意义(P<0.05)。通过二元Logistic回归分析表明,患者膀胱肿瘤组织中STEAP1及STEAP1 mRNA相对表达水平增高均是膀胱移行细胞癌发生及中晚期膀胱移行细胞癌的独立危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析显示,患者膀胱肿瘤组织中STEAP1及STEAP1 mRNA独立预测膀胱移行细胞癌发生的AUC分别为0.841(95%CI:0.760~0.922,P<0.001)、0.936(95%CI:0.893~0.980,P<0.001),均具有较高的预测效能。结论膀胱移行细胞癌患者膀胱肿瘤组织中STEAP1及STEAP1 mRNA相对表达水平与膀胱移行细胞癌发生及中晚期膀胱移行细胞癌呈正相关,提示STEAP1可作为诊断、预测膀胱移行细胞癌发生、发展的潜在标志物。 展开更多
关键词 膀胱移行细胞癌 前列腺六段扩膜上皮抗原1 膀胱肿瘤组织
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LncRNA FEZF1-AS1通过调控EZH2对肺间质细胞增殖、迁移及侵袭的作用
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作者 王春燕 王萍 +2 位作者 宋龙飞 刘永全 满君 《基础医学与临床》 2024年第1期43-50,共8页
目的研究长链非编码RNA FEZ家族锌指1-反义RNA 1(lncRNA FEZF1-AS1)调控zeste同源物增强子2(EZH2)对肺间质细胞增殖、迁移、侵袭能力及上皮细胞-间质转化(EMT)的影响及其作用机制。方法将人肺腺癌细胞系A549分为对照组(control)和模型组... 目的研究长链非编码RNA FEZ家族锌指1-反义RNA 1(lncRNA FEZF1-AS1)调控zeste同源物增强子2(EZH2)对肺间质细胞增殖、迁移、侵袭能力及上皮细胞-间质转化(EMT)的影响及其作用机制。方法将人肺腺癌细胞系A549分为对照组(control)和模型组[model,用转化生长因子β1(TGF-β1)20 ng/mL作用48 h,诱导成为肺间质细胞]。用Western blot检测细胞中E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)及波形蛋白(vimentin)的蛋白表达。RT-qPCR检测细胞中lncRNA FEZF1-AS1和EZH2基因表达。转染组细胞分为转染si NC组、si lncRNA FEZF1-AS1+OE vector组和si lncRNA FEZF1-AS1+OE EZH2组。CCK-8法检测细胞增殖、细胞划痕检测细胞迁移、Transwell小室法检测细胞侵袭;用Western blot检测细胞中E-cadherin、N-cadherin、vimentin及EZH2的蛋白表达,用RNA免疫沉淀(RIP)测定FEZF1-AS1与EZH2的直接结合作用。结果与对照组比较,模型组E-cadherin的蛋白表达水平减少(P<0.05);N-cadherin及vimentin的蛋白表达水平升高(P<0.05);与对照组比较,模型组lncRNA FEZF1-AS1与EZH2基因的表达水平明显升高(P<0.05);与si NC组相比,si lncRNA FEZF1-AS1+OE vector组细胞增殖、迁移、侵袭能力降低,E-cadherin蛋白表达升高,N-cadherin、vimentin、EZH2蛋白表达降低(P<0.05);与si lncRNA FEZF1-AS1+OE vector组比较,si lncRNA FEZF1-AS1+OE EZHZ组细胞增殖、侵袭、迁移能力升高,E-cadherin蛋白表达降低,N-cadherin、vimentin、EZH2蛋白表达升高(P<0.05);RIP实验进一步证实了lncRNA FEZF1-AS1与EZH2具有结合作用。结论LncRNA FEZF1-AS1通过调控EZH2促进肺间质细胞增殖、侵袭、转移和EMT过程。 展开更多
关键词 特发性肺间质纤维化 FEZ家族锌指1-反义RNA 1(FEZF1-AS1) 上皮细胞-间充质转化(EMT) zeste基因增强子同源物2(EZH2) 人非小细胞肺癌细胞系A549
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Piezo1激活对尿路上皮细胞系Notch配体表达的影响
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作者 李志鹏 邓博浪 +4 位作者 林东旭 危鹏宇 李康 程朗晴 陈忠 《现代泌尿生殖肿瘤杂志》 2023年第6期356-359,362,共5页
目的探究膀胱出口梗阻之后,机械敏感性离子通道Piezo1激活对尿路上皮细胞系Notch配体表达的影响。方法分别使用高静水压或Piezo1通道激动剂Yoda1,对SV-HUC-1尿路上皮细胞系进行处理;使用Western blot实验检测Notch配体蛋白的表达水平。... 目的探究膀胱出口梗阻之后,机械敏感性离子通道Piezo1激活对尿路上皮细胞系Notch配体表达的影响。方法分别使用高静水压或Piezo1通道激动剂Yoda1,对SV-HUC-1尿路上皮细胞系进行处理;使用Western blot实验检测Notch配体蛋白的表达水平。结果在使用高静水压或Yoda1处理之后,SV-HUC-1细胞系Notch配体蛋白的表达水平均有不同程度的上升;Piezo1拮抗剂Dooku1能部分抑制高静水压激活Piezo1通道导致的Notch配体蛋白表达增加。结论激活Piezo1通道可导致SV-HUC-1细胞系中Notch配体蛋白表达上升,这可能参与了膀胱出口梗阻后膀胱结构重塑以及膀胱功能受损的进程。 展开更多
关键词 Piezo1 NOTCH通路 sv-huc-1细胞系 膀胱出口梗阻 高静水压
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转化生长因子-β1诱导A549细胞向间充质细胞转化的作用研究 被引量:14
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作者 郑金旭 张小燕 +2 位作者 端礼荣 陈炜 管淑红 《江苏大学学报(医学版)》 CAS 2008年第4期327-329,I0002,共4页
目的:观察重组人转化生长因子-β1(rhTGF-β1)对人肺上皮细胞株(A549)的转化作用。方法:将体外培养的A549用不同浓度的rhTGF-β1干预后,倒置显微镜观察细胞形态学的变化,用MTT法检测rhTGF-β1对A549增殖的影响。48 h收集蛋白用蛋白质印... 目的:观察重组人转化生长因子-β1(rhTGF-β1)对人肺上皮细胞株(A549)的转化作用。方法:将体外培养的A549用不同浓度的rhTGF-β1干预后,倒置显微镜观察细胞形态学的变化,用MTT法检测rhTGF-β1对A549增殖的影响。48 h收集蛋白用蛋白质印迹和间接免疫化学方法检测间充质细胞表型Fibronectin-EDA(Fn-EDA)表达变化。结果:rhTGF-β1诱导A549向间充质细胞形态转化,在体外对A549增殖无明显影响,上调间充质细胞表型Fn-EDA表达。结论:rhTGF-β1可诱导A549发生上皮细胞-间质转化(ephethlial-mesenchymal transition,EMT),支持肺上皮细胞发生EMT的观点。 展开更多
关键词 转化生长因子-Β1 人肺上皮细胞株(A549) 上皮细胞-间质转化
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氧化苦参碱干预TGF-β1诱导A549细胞上皮-间质转化作用研究 被引量:9
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作者 刘蕾 马壮 +1 位作者 谢华 孙文武 《陕西医学杂志》 CAS 2016年第11期1441-1444,共4页
目的:探讨氧化苦参碱(Oxy)对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导肺泡上皮细胞间质转化的干预作用,期望为肺纤维化治疗提供新的候选药物。方法:选用0.25、0.5、1mg/ml氧化苦参碱预处理A549细胞30min后,再给与(5ng/ml)TGF-β1共孵育培养48h,MT... 目的:探讨氧化苦参碱(Oxy)对转化生长因子β1(TGF-β1)诱导肺泡上皮细胞间质转化的干预作用,期望为肺纤维化治疗提供新的候选药物。方法:选用0.25、0.5、1mg/ml氧化苦参碱预处理A549细胞30min后,再给与(5ng/ml)TGF-β1共孵育培养48h,MTT法检测细胞增殖变化,光镜下观察细胞形态变化,Western blot检测TGF-β1下游信号分子Smad2/3磷酸化变化和EMT标志分子E-candherin、N-cadherin和Vimentin表达变化。结果:氧化苦参碱能有效干预TGF-β1诱导A549细胞细胞增殖、细胞形态变化,抑制TGF-β1介导的Smad2/3磷酸化和E-candherin表达下调、N-cadherin和Vimentin表达上升。结论:氧化苦参碱能有效抑制TGF-β1诱导A549细胞上皮-间质转化,氧化苦参碱可以作为抗肺纤维化治疗的候选药物。 展开更多
关键词 氧化苦参碱 肺纤维化/病理生理学 转化生长因子Β1 上皮细胞 细胞系 转化
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益气清热方及其拆方的兔含药血清对Ⅰ型幽门螺杆菌致GES-1细胞凋亡的影响 被引量:10
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作者 陆为民 沈洪 +4 位作者 严士海 杨学文 朱萱萱 缪界平 单兆伟 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2008年第27期3026-3030,共5页
目的:观察益气清热方及其拆方对Ⅰ型Hpylori致GES-1细胞凋亡的影响,探讨益气清热法治疗Hpylori感染的机制.方法:按生理盐水、阿莫西林、益气清热方、黄芪、黄芩分组,制备兔含药血清.建立Ⅰ型Hpylori致GES-1细胞病变的模型,分别加入100m... 目的:观察益气清热方及其拆方对Ⅰ型Hpylori致GES-1细胞凋亡的影响,探讨益气清热法治疗Hpylori感染的机制.方法:按生理盐水、阿莫西林、益气清热方、黄芪、黄芩分组,制备兔含药血清.建立Ⅰ型Hpylori致GES-1细胞病变的模型,分别加入100mL/L各组兔含药血清的完全培养液,继续培养48h,收集与固定细胞,用流式细胞仪和Hoechst33258荧光染料检测细胞凋亡情况.结果:经Ⅰ型Hpylori感染后,GES-1细胞凋亡率显著增加,阿莫西林、黄芪、黄芩及益气清热方均能降低其凋亡率(1.3633±0.4229,2.1925±0.6779,1.7967±0.6987,1.4740±0.4156vs16.6229±8.5087,P<0.01或0.05),Hoechst33258荧光染料的检测结果与流式细胞仪检测结果有较好的一致性.结论:益气清热方可能通过抑制细胞的凋亡,减轻Hpylori对胃上皮细胞的损伤,维持细胞的正常生长,达到治疗目的. 展开更多
关键词 益气清热方 Ⅰ型幽门螺杆菌 人胃上皮细胞系GES-1 中药 血清药理学 细胞培养 细胞凋亡
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蛋白酶激活受体2激动剂诱导上皮细胞分泌MCP-1 被引量:8
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作者 王海燕 何韶衡 《第四军医大学学报》 CAS 北大核心 2004年第19期1782-1784,共3页
目的 :探讨蛋白酶激活受体 (PAR) 2激动剂对人上皮细胞单核细胞趋化蛋白 1(MCP 1)分泌的影响 .方法 :人肺上皮细胞系A5 4 9细胞分别接种于 12孔培养板各孔内 ,并分别用不同浓度的PAR 2激动剂 ,反PAR 2激动剂进行刺激 .刺激时间为 2 ,8... 目的 :探讨蛋白酶激活受体 (PAR) 2激动剂对人上皮细胞单核细胞趋化蛋白 1(MCP 1)分泌的影响 .方法 :人肺上皮细胞系A5 4 9细胞分别接种于 12孔培养板各孔内 ,并分别用不同浓度的PAR 2激动剂 ,反PAR 2激动剂进行刺激 .刺激时间为 2 ,8和 16h .用ELISA方法检测上清液中的MCP 1水平 .结果 :经过 16h的培养 ,PAR 2激动剂SLIGKV和tc LIGRLO均可引起浓度相关性MCP 1释放增加 ,tc LIGRLO引起的最大MCP 1释放量达基础分泌量的 13倍 .反PAR 2激动剂对MCP 1释放的影响较小 .时间相关曲线表明 ,PAR 2激动剂的作用从 2h开始 ,16h达高峰 .结论 :PAR 2激动剂是高效的人肺上皮细胞MCP 1的促分泌剂 .其拮抗剂有可能具有抑制呼吸道炎症的作用 . 展开更多
关键词 激动剂 MCP-1 PAR 分泌量 蛋白酶激活受体2 肺上皮细胞 诱导 培养 结论 最大
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靶向抑制人SREBP-1基因对高糖刺激下人肾小管上皮细胞脂滴形成的影响 被引量:10
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作者 郝军 石宏 +2 位作者 赵松 任韫卓 段惠军 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期371-377,共7页
目的构建人SREBP-1基因的shRNA载体并转染人肾小管上皮细胞(HKC)明确是否沉默SREBP-1基因的表达可减轻高糖环境引起的细胞内脂滴形成。方法设计两对针对人SREBP-1基因的干扰靶序列及短链寡核苷酸和线性化的pGenesil-1质粒进行连接,筛选... 目的构建人SREBP-1基因的shRNA载体并转染人肾小管上皮细胞(HKC)明确是否沉默SREBP-1基因的表达可减轻高糖环境引起的细胞内脂滴形成。方法设计两对针对人SREBP-1基因的干扰靶序列及短链寡核苷酸和线性化的pGenesil-1质粒进行连接,筛选鉴定并最终命名为pGenesil-1-SREBP1-1和pGenesil-1-SREBP1-2。体外培养人肾小管上皮细胞并随机分组,采用阳离子脂质体法转染细胞后给予高糖刺激48h,在倒置荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白表达,半定量RT-PCR和Westernblot分析目标基因表达丰度的变化,并采用油红O染色检测细胞内脂滴。结果经酶切及测序鉴定证明构建的重组载体pGenesil-1-SREBP1-1、pGenesil-1-SREBP1-2序列正确;转染HKC细胞后均可表达绿色荧光;RT-PCR和Westernblot显示pGenesil-1-SREBP1-1、pGenesil-1-SREBP1-2能够有效抑制高糖环境下HKC细胞SREBP-1的表达,与阴性质粒对照组相比,差异有统计学意义。进一步研究发现在HKC细胞内,SREBP-1基因表达沉默明显抑制了脂肪酸合成酶(FAS)的转录,细胞内脂滴明显减少。结论有效沉默高糖刺激下HKC细胞SREBP-1的基因表达可通过抑制FAS转录而减少细胞内脂滴形成。 展开更多
关键词 固醇调节元件结合蛋白-1 人肾小管上皮细胞 RNA干扰 短发夹状干扰RNA 脂滴形成 脂肪酸合成酶
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TGF-β1对AGS细胞上皮-间充质转化及体外侵袭的影响 被引量:6
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作者 杨帆 姜蕊 +2 位作者 韩俊庆 王胜昔 宋伟 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2010年第2期160-164,共5页
目的观察转化生长因子-β1(TGF-β1)对人胃癌细胞株AGS发生上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)及体外侵袭的影响。方法将体外培养的AGS用TGF-β1干预后,倒置显微镜下观察细胞形态学的变化,MTT比色法检测TGF-β1对... 目的观察转化生长因子-β1(TGF-β1)对人胃癌细胞株AGS发生上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)及体外侵袭的影响。方法将体外培养的AGS用TGF-β1干预后,倒置显微镜下观察细胞形态学的变化,MTT比色法检测TGF-β1对AGS增殖的影响,细胞划痕试验和Transwell侵袭试验检测细胞运动和侵袭力的改变;免疫荧光和Western blot检测snail、E-cadherin(上皮钙粘蛋白)、和N-cadherin(神经钙粘蛋白)表达的变化。结果TGF-β1诱导AGS向间充质细胞形态转化,低浓度促进细胞增殖,而高浓度时细胞增殖率逐步降低,且snail和间充质细胞表型N-cadherin表达上调,而上皮细胞表型E-cadherin表达下调,同时细胞运动和侵袭能力大大增强。结论TGF-β1可诱导AGS发生EMT,从而增加其侵袭、转移的能力。 展开更多
关键词 TGF-Β1 人胃腺癌细胞株 上皮-间充质转化
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幽门螺杆菌上调miR-7致胃上皮细胞GES-1凋亡 被引量:2
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作者 鄢春锦 刘芬 +1 位作者 严晓丹 姜成 《山西医科大学学报》 CAS 2021年第1期56-61,共6页
目的探讨miR-7对幽门螺杆菌感染胃上皮细胞凋亡的影响。方法以Hp感染GES-1细胞,感染24 h的细胞分为1∶50(细胞∶细菌)组和1∶100组;当感染比率为1∶100(细胞∶细菌)时,按感染时间分为24 h组和48 h组,同时设未感染细胞为空白对照组,观察... 目的探讨miR-7对幽门螺杆菌感染胃上皮细胞凋亡的影响。方法以Hp感染GES-1细胞,感染24 h的细胞分为1∶50(细胞∶细菌)组和1∶100组;当感染比率为1∶100(细胞∶细菌)时,按感染时间分为24 h组和48 h组,同时设未感染细胞为空白对照组,观察不同感染菌量和感染时间对GES-1细胞miR-7和RELA表达的影响。以miR-7-5p类似物转染GES-1细胞设为miR-7 mimics组,miR-阴性序列转染GES-1为阴性对照组(NC组),未转染细胞作为空白对照组,观察各组细胞增殖凋亡及RELA蛋白表达情况。实时定量PCR法检测miR-7表达量,CCK-8法检测细胞增殖能力,流式细胞仪检测细胞凋亡率,Western blot检测RELA蛋白表达量。结果与空白对照相比较,感染24 h时1∶50组及1∶100组的miR-7表达量上调,差异有统计学意义(P<0.05)。当感染率1∶100时,与空白对照组比较,感染24 h组和48 h组miR-7表达量均显著上调(P<0.05),48 h组RELA蛋白显著下降(P<0.05),但24 h组差异无统计学意义。转染实验中发现,与空白对照组和NC组相比较,mimics组细胞增殖能力明显下降(P<0.05),细胞凋亡率明显增加(P<0.05),RELA蛋白表达显著降低(P<0.05)。结论Hp通过上调感染细胞的miR-7分子调控其靶基因RELA的表达,抑制细胞增殖,促进细胞凋亡,这可能是Hp导致胃上皮细胞损伤致病的机制之一。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 胃上皮细胞GES-1 凋亡 miR-7 RELA
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SREBP-1基因过表达促进人肾小管上皮细胞甘油三酯形成 被引量:2
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作者 郝军 郑书深 +5 位作者 赵建德 刘青娟 赵松 刘淑霞 刘巍 段惠军 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2010年第3期252-256,共5页
目的 SREBP-1重组质粒转染人肾小管上皮细胞(HKC)检测SREBP-1基因表达和细胞内脂滴的关系。方法体外培养人肾小管上皮细胞并随机分为空白对照组、pcDNA3.1空质粒对照组和pcDNA3.1-SC1重组质粒转染组,采用阳离子脂质体法将SREBP-1特异性... 目的 SREBP-1重组质粒转染人肾小管上皮细胞(HKC)检测SREBP-1基因表达和细胞内脂滴的关系。方法体外培养人肾小管上皮细胞并随机分为空白对照组、pcDNA3.1空质粒对照组和pcDNA3.1-SC1重组质粒转染组,采用阳离子脂质体法将SREBP-1特异性质粒pcDNA3.1-SC1及pcDNA3.1空质粒转染到细胞内并培养48小时,半定量RT-PCR和Westernblot分析目标基因表达丰度的变化,并采用油红O染色检测细胞内脂滴。结果 pcDNA3.1-SC1重组质粒转染的细胞内SREBP-1mRNA表达呈现明显升高,扩增条带积分光密度值分别是空白对照组和阴性对照组的6.158倍和4.194倍,SREBP-1蛋白也出现明显上调,条带积分光密度值为3.092±0.254。空白对照组和pcDNA3.1阴性对照组细胞内均未见有红染脂滴颗粒,而pcDNA3.1-SC1重组质粒转染组中出现了清晰的红染颗粒。结论 SREBP-1表达可增加人肾小管上皮细胞脂肪合成证实HKC细胞中SREBP-1表达和脂滴形成之间存在有直接关系。 展开更多
关键词 固醇调节元件结合蛋白-1 人肾小管上皮细胞 脂滴形成 质粒转染
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表皮生长因子受体单克隆抗体对辐射诱导肺腺癌细胞SPC-A-1的增敏作用 被引量:1
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作者 赵彤 王秀兰 +1 位作者 刘勇 王若雨 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期483-486,I0004,共5页
目的:探讨表皮生长因子受体单克隆抗体(C225)作为靶向治疗药物联合放射治疗对肺腺癌细胞系(SPC-A-1)的增敏作用,为临床综合治疗非小细胞肺癌提供理论依据。方法:SPC-A-1细胞体外传代培养6代以上,取对数生长期细胞进行实验。SPC-A-1细胞... 目的:探讨表皮生长因子受体单克隆抗体(C225)作为靶向治疗药物联合放射治疗对肺腺癌细胞系(SPC-A-1)的增敏作用,为临床综合治疗非小细胞肺癌提供理论依据。方法:SPC-A-1细胞体外传代培养6代以上,取对数生长期细胞进行实验。SPC-A-1细胞分为对照组(PBS)、照射组(4 Gy)、C225组(100 nmol.L-1)和照射+C225组(4Gy+100 nmol.L-1),Hoechst 33258染色后采用荧光显微镜观察细胞凋亡情况。SPC-A-1细胞分别给予0、2、4和8 Gy 6-MV X射线照射后继续培养72 h,收集细胞,分为照射组和实验组(照射+C225组),用流式细胞仪检测细胞凋亡率。SPC-A-1细胞分为对照组(PBS)、C225组(100 nmol.L-1)、照射组(8 Gy)和照射+C225组(8 Gy+100 nmol.L-1),作用48 h后,采用流式细胞仪检测细胞周期。结果:Hoechst33258染色后,照射+C225组凋亡细胞数明显高于照射组和C225组;细胞凋亡实验,实验组细胞凋亡率明显高于相应剂量照射组(P<0.05)。细胞周期检测,与对照组比较,C225组G0+G1期细胞增加(P<0.05),照射组G2+M期细胞增加(P<0.05),而照射+C225组G0+G1和G2+M期细胞均增加(P<0.05);与对照组比较,C225组、照射组及照射+C225组S期细胞均下降(P<0.05)。结论:C225对SPC-A-1细胞系有放射增敏作用,其机制可能与诱导细胞凋亡和细胞周期G0+G1期阻滞有关。 展开更多
关键词 表皮生长因子受体单克隆抗体 肺腺癌细胞株 放射治疗 放射敏感性
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蛋白酶激活受体1介导人肺上皮细胞分泌MCP-1 被引量:1
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作者 王海燕 何韶衡 郑燕珊 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第17期1752-1755,共4页
目的探讨蛋白酶激活受体1(protease-activated receptors1,PAR1)激动肽和凝血酶对人肺上皮细胞单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)分泌的影响。方法人肺上皮细胞系A549细胞分别接种于12孔培养板各孔内,并分... 目的探讨蛋白酶激活受体1(protease-activated receptors1,PAR1)激动肽和凝血酶对人肺上皮细胞单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)分泌的影响。方法人肺上皮细胞系A549细胞分别接种于12孔培养板各孔内,并分别用不同浓度的PAR1激动肽SFLLR和反PAR1激动肽RLLFS以及不同浓度的凝血酶和/或凝血酶抑制剂水蛭素进行刺激,刺激时间为2、16 h。用ELISA方法检测上清液中的MCP-1水平。结果经过16 h的培养,PAR1激动剂SFLLR可引起浓度相关性MCP-1的释放增加,增加到300μmol/L时诱导MCP-1的释放量比基础分泌量增加了近12倍,反PAR1激动剂RLLFS不能引起MCP-1的释放增加。凝血酶也可引起浓度相关性MCP-1释放,凝血酶在浓度3 000 U/L时就可引起MCP-1释放量增加,10 000 U/L时诱导MCP-1的释放量达高峰,为基础分泌量的5倍。凝血酶抑制剂水蛭素可以抑制凝血酶对MCP-1的释放作用。时间相关曲线表明,从2 h起即可引起PAR1介导的MCP-1释放增加,16 h达高峰。结论PAR1激动肽和凝血酶可促进人肺上皮细胞分泌MCP-1,PAR1拮抗剂和凝血酶抑制剂可能具有抗炎作用。 展开更多
关键词 蛋白酶激活受体 上皮细胞系 单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)
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胰岛素对人肾小管上皮细胞SREBP-1、FAS表达及脂质代谢的时效性研究 被引量:1
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作者 郝军 刘淑霞 +5 位作者 刘青娟 赵松 郑书深 姚芳 刘巍 段惠军 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期517-521,共5页
目的探讨胰岛素对人肾小管上皮细胞(human renal proximal tubularepithelial cells line,HKCcells)固醇调节元件结合蛋白-1(sterol regulatory element binding protein-1,SREBP-1)和脂肪酸合成酶(fat acid synthase,FAS)表达以及细胞... 目的探讨胰岛素对人肾小管上皮细胞(human renal proximal tubularepithelial cells line,HKCcells)固醇调节元件结合蛋白-1(sterol regulatory element binding protein-1,SREBP-1)和脂肪酸合成酶(fat acid synthase,FAS)表达以及细胞内脂滴形成的时效性影响。方法给予人肾小管上皮细胞100nmol·L-1胰岛素刺激并根据刺激时间分为0、2、4、6、12和24h组。SREBP-1和FAS mRNA采用RT-PCR检测,SREBP-1蛋白的表达用免疫细胞化学和Western blot检测,细胞内脂滴检测采用油红O染色。结果和0h组相比,2h组HKC细胞未见SREBP-1和FAS mRNA表达变化,而4、6、12h组HKC细胞SREBP-1和FAS mRNA表达均升高,其中6h组升高最明显,分别是0h对照组的3.578倍和4.272倍,差异有统计学意义。Western blot检测显示4、6和12h组HKC细胞SREBP-1蛋白的前体和成熟片段表达均较0h和2h组增强,其中也是6h组表达最强,前体和成熟片段分别是0h组的4.106倍和5.167倍。免疫细胞化学技术显示SREBP-1蛋白在人肾小管上皮细胞株中定位于细胞质,在4、6和12h组HKC内其表达明显强于0、2和24h组。油红O染色提示胰岛素刺激6h后HKC细胞内可见明显红染脂滴颗粒,而其他各组HKC细胞未见着色。结论胰岛素呈时间依赖性引起人肾小管上皮细胞SREBP-1和FAS的上调,且作用在6h达到高峰,并最终导致细胞内脂滴沉积,这可能是代谢综合征引起肾脏脂质沉积的重要机制之一。 展开更多
关键词 胰岛素 人肾小管上皮细胞 固醇调节元件结合蛋白-1 脂肪酸合成酶 脂滴形成 时效性影响
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丝裂霉素C对人膀胱癌T24细胞Mta-1 mRNA、Mta-1蛋白表达的影响及意义 被引量:1
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作者 唐正严 彭克亮 +1 位作者 齐琳 杨罗艳 《现代泌尿外科杂志》 CAS 2007年第3期146-148,共3页
目的研究人膀胱癌T24细胞株中Mta-1 mRNA和Mta-1蛋白的表达,及丝裂霉素C(MMC)对人膀胱癌T24细胞株中Mta-1 mRNA和Mat-1蛋白表达的影响。方法人膀胱癌T24细胞株培养,MMC干预,用原位杂交和免疫组化检测Mta-1 mRNA和Mta-1蛋白的表达。结果... 目的研究人膀胱癌T24细胞株中Mta-1 mRNA和Mta-1蛋白的表达,及丝裂霉素C(MMC)对人膀胱癌T24细胞株中Mta-1 mRNA和Mat-1蛋白表达的影响。方法人膀胱癌T24细胞株培养,MMC干预,用原位杂交和免疫组化检测Mta-1 mRNA和Mta-1蛋白的表达。结果人膀胱癌T24细胞株中Mta-1 mRNA阳性细胞表达率MMC组(35.1±9.0)%明显低于对照组组(61.9±12.8)%;Mta-1蛋白阳性细胞表达率MMC组(36.0±8.03)%亦明显低于对照组(57.7±10.1)%,P<0.01。结论人膀胱癌T24细胞株中存在Mta-1 mRNA和Mta-1蛋白的高表达,MMC对人膀胱癌T24细胞株中Mta-1 mRNA和Mta-1蛋白的表达具有抑制作用。 展开更多
关键词 人膀胱癌T24细胞株 MTA-1 丝裂霉素C
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过表达及沉默细胞黏附分子1基因膀胱癌细胞株的构建
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作者 刘莉 杨永姣 +4 位作者 陈业刚 王尚任 刘晓强 陈少峰 孙光 《山东医药》 CAS 北大核心 2016年第7期20-23,共4页
目的构建过表达及沉默细胞黏附分子1(CADM1)基因的膀胱癌细胞株。方法培养并收集膀胱癌细胞株T24。1过表达CADM1基因T24细胞构建:将T24细胞分为1、2、3组,real-time PCR扩增CADM1基因全长,与慢病毒载体p HBLV-IRES-Zs Green-PGK-puro进... 目的构建过表达及沉默细胞黏附分子1(CADM1)基因的膀胱癌细胞株。方法培养并收集膀胱癌细胞株T24。1过表达CADM1基因T24细胞构建:将T24细胞分为1、2、3组,real-time PCR扩增CADM1基因全长,与慢病毒载体p HBLV-IRES-Zs Green-PGK-puro进行连接(1组),并设载体对照组(2组)和空白对照(3组);经酶切及测序鉴定正确后在293T细胞中包装病毒,病毒浓缩后感染T24细胞。2沉默CADM1基因T24细胞构建:将T24细胞分为A、B、C、D、E组,设计3条针对CADM1基因的干扰序列(siRNA1/2/3)分别与载体p HBLV-U6-shRNA-ZsGreen-Puro进行连接(A、B、C组),D组与p HBLV-U6-Zs Green-Puro进行连接,E组为空白对照;经双酶切、PCR及测序鉴定连接载体,在293T细胞中包装病毒,病毒浓缩后感染T24细胞。采用real-time PCR检测T24细胞中的CADM1 mRNA,Western blotting法检测CADM1蛋白。结果过表达和沉默CADM1基因的慢病毒载体及细胞株均正确构建。1、2、3组CADM1 mRNA相对表达量分别为4.84±0.02、1.12±0.03、1.00±0.00,CADM1蛋白相对表达量分别为4.53±0.03、1.05±0.04、1.00±0.01,1组CADM1 mRNA及蛋白相对表达量高于2、3组(P均<0.05)。A、B、C、D、E组CADM1 mRNA相对表达量分别为0.28±0.05、0.98±0.02、0.74±0.01、0.99±0.01、1.00±0.00,CADM1蛋白相对表达量分别为0.33±0.04、0.86±0.12、0.67±0.07、1.00±0.04、1.00±0.03,A组CADM1 mRNA及蛋白相对表达量低于B、C、D、E组(P均<0.05)。结论成功构建了过表达及沉默CADM1基因的膀胱癌细胞株T24。 展开更多
关键词 膀胱肿瘤 膀胱癌细胞株 细胞黏附分子1 基因沉默
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KiSS-1基因对膀胱癌细胞系T24生物学行为影响的研究 被引量:1
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作者 袁子杰 杨杰 《中国实验诊断学》 北大核心 2009年第6期720-722,共3页
目的探讨肿瘤转移抑制基因KiSS-1对膀胱癌细胞T24的生物学影响。方法将构建好的含771 bp大小的基因片段的真核表达质粒pcDNA3.1(+)/KiSS-1及空载体pcDNA3.1(+)用阳离子脂质体介导采用基因转染技术转染膀胱癌细胞T24,观察KiSS-1mRNA的表... 目的探讨肿瘤转移抑制基因KiSS-1对膀胱癌细胞T24的生物学影响。方法将构建好的含771 bp大小的基因片段的真核表达质粒pcDNA3.1(+)/KiSS-1及空载体pcDNA3.1(+)用阳离子脂质体介导采用基因转染技术转染膀胱癌细胞T24,观察KiSS-1mRNA的表达、细胞生长能力、增殖情况及细胞侵袭力的变化。结果pcDNA3.1(+)/KiSS-1成功转染T24细胞,KiSS-1 mRNA表达阳性,而正常细胞和空载体组为阴性;转染目的基因后细胞生长曲线、平板克隆形成率与正常细胞及转染空质粒细胞组无显著性差异(P>0.05);转染目的基因后的细胞组穿透Millicell-PCF膜的细胞数较转染空质粒组及正常细胞组明显减少(P<0.05),细胞侵袭能力明显下降(P<0.05)。结论KiSS-1基因对膀胱癌细胞T24的生长、增殖无影响,但可抑制其侵袭力。 展开更多
关键词 KISS-1 膀胱癌细胞T24 转染 侵袭
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沉默Notch-1基因影响人膀胱癌RT4细胞生物学行为的体外实验研究
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作者 郑克文 潘悦 +7 位作者 黄航 陈洪德 卢湧湧 吴可明 邓哲宪 翁志梁 余志贤 陈伟 《中国中西医结合外科杂志》 CAS 2019年第6期868-875,共8页
目的:研究沉默Notch-1基因对人膀胱癌RT4细胞增殖、凋亡、侵袭和上皮间质转化等生物学行为的影响。方法:设计并构建Notch-1 shRNA,选取RT4细胞作为研究对象分别进行转染。实验细胞分为Notch-1阴性对照组(shRNA NC),Notch-1干扰组(Notch-... 目的:研究沉默Notch-1基因对人膀胱癌RT4细胞增殖、凋亡、侵袭和上皮间质转化等生物学行为的影响。方法:设计并构建Notch-1 shRNA,选取RT4细胞作为研究对象分别进行转染。实验细胞分为Notch-1阴性对照组(shRNA NC),Notch-1干扰组(Notch-1 shRNA)。细胞转染48 h后,MTT法检测细胞增殖水平变化;Transwell检测细胞侵袭力的改变;流式细胞术检测细胞凋亡水平情况;RT-PCR和Western blot检测凋亡相关蛋白(Bax、Bid、Bcl-2)及上皮间充质转化(EMT)因子(E-cadherin、N-cadherin、Vimentin)在mRNA和蛋白水平上的改变。结果:与shRNA NC组相比,Notch-1 shRNA组细胞增殖率明显下降(t=4.629,P=0.010),侵袭力减弱(t=8.193,P=0.001),细胞凋亡率明显升高(t=–18.441,P<0.001),Bad(t=–12.521,P<0.001;t=–6.983,P=0.002)、Bid(t=–9.231,P<0.001;t=–8.871,P=0.001)、E-cadherin(t=–13.457,P<0.001;t=–5.610,P=0.005)mRNA和蛋白表达量增多,Bcl2(t=10.651,P<0.001;t=6.973,P=0.002)、N-cadherin(t=6.505,P<0.001;t=10.132,P=0.001)、Vimentin(t=9.135,P<0.001;t=5.630,P=0.005)mRNA和蛋白表达量显著降低。结论:沉默Notch-1的表达能够抑制人膀胱癌RT4细胞的增殖和侵袭迁移,促进其细胞凋亡,其机制可能与诱导Bad、Bid、E-cadherin,抑制Bcl2、N-cadherin、Vimentin的表达有关。 展开更多
关键词 NOTCH-1 膀胱癌 凋亡 侵袭 上皮间质转化
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siRNA干扰HMGB1表达对膀胱癌T24株细胞恶性生物学行为的影响及其可能的机制 被引量:6
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作者 印胡滨 何卫阳 +2 位作者 苟欣 谷文 刘言 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期264-270,共7页
目的:探讨高迁移率族蛋白1(high-mobility group box 1,HMGB1)对膀胱癌T24株细胞的增殖、凋亡及恶性生物学行为的影响及其潜在作用机制。方法:收集2014年12月至2016年1月期间重庆医科大学附属第一医院泌尿外科病区手术切除的20例膀胱癌... 目的:探讨高迁移率族蛋白1(high-mobility group box 1,HMGB1)对膀胱癌T24株细胞的增殖、凋亡及恶性生物学行为的影响及其潜在作用机制。方法:收集2014年12月至2016年1月期间重庆医科大学附属第一医院泌尿外科病区手术切除的20例膀胱癌以及相应癌旁组织,免疫组化方法检测膀胱癌和癌旁组织HMGB1表达差异;应用RNAi处理T24细胞并分为空白对照组(Blank)、阴性对照组(NC)和干扰组(si HMGB1);CCK-8、流式细胞术、划痕实验和Transwell侵袭实验分别检测HMGB1敲低后对T24细胞增殖、凋亡、周期、迁移以及侵袭能力的影响;Western blotting检测不同膀胱癌细胞株BIU-87和T24细胞的HMGB1表达水平以及敲低HMGB1对T24细胞恶性生物学行为相关蛋白的影响。结果:与癌旁组织相比,HMGB1在膀胱癌组织处于高表达状态[(67.33±4.91)vs(12.00±3.79),P<0.05]。与NC组和Blank组相比,si HMGB1组细胞增殖受抑制(P<0.05);流式细胞术提示敲低HMGB1后细胞凋亡率增加,细胞周期阻滞在G0/G1期;划痕实验及Transwell侵袭实验显示,敲低HMGB1后细胞迁移(P<0.05)以及侵袭[穿膜细胞数:(16.33±1.45)vs(35.00±1.53)、(34.00±2.08)个,均P<0.05]能力减弱;Western blotting结果显示敲低后E-钙黏着蛋白表达上调(P<0.05),N-钙黏着蛋白、波形蛋白、基质金属蛋白酶(metrix metalloproteinase,MMP)-2、MMP-9、细胞周期蛋白D1、c-Myc、β-联蛋白表达下调(均P<0.05)。结论:HMGB1可通过促进膀胱癌细胞EMT进而增强其恶性生物学行为,其机制可能是通过β-联蛋白信号通路介导。 展开更多
关键词 高迁移率族蛋白1 膀胱癌细胞 上皮间质转化 β-联蛋白
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