Blockage of IGF-1R signaling sensitizes urinary bladder cancer cells to mitomycin-mediated cytotoxicity

A major problem which is poorly understood in the management of bladder cancer is low sensitivity to chemotherapy and high recurrence after transurethral resection. Insulin-like growth factor 1 receptor (IGF-1R) signaling plays a very important role in progression, invasion and metastasis of bladder cancer cells. In this study, we investigated whether IGF-1R was involved in the growth stimulating activity and drug resistance of bladder cancer cells. The results showed: The mRNAs of IGF-1, IGF-2 and IGF-1R were strongly expressed in serum-free cultured T24 cell line, whereas normal urothelial cells did not express these factors/receptors or only in trace levels; T24 cell responded far better to growth stimulation by IGF-1 than did normal urothelial cells; blockage of IGF1R by antisense oligodeoxynucleotide (ODN) significantly inhibited the growth of T24 cell and enhanced sensitivity and apoptosis of T24 cells to mitomycin (MMC). These results suggested that blockage of IGF-IR signaling might potentially contribute to the treatment of bladder cancer cells which are insensitive to chemotherapy.

原发性膀胱移行细胞癌Pgp与突变p53蛋白、EGFR的相互关系

目的 :探讨mdr1基因表达产物Pgp与突变 p5 3蛋白、EGFR是否存在相关性及其临床意义。方法 :采用免疫组化SP法 ,检测 10 7例原发性膀胱移行细胞癌中Pgp、突变 p5 3蛋白、EGFR表达情况。结果 :Pgp、突变p5 3蛋白、EGFR的阳性表达率分别为 6 3 .6 % ,72 .9%和 6 6 .4% ,三者的过表达均与膀胱癌的病理分级、分期和术后的复发有关 ;相关性研究显示Pgp表达与突变 p5 3蛋白和EGFR的表达密切相关 (P <0 .0 1)。结论 :Pgp、突变 p5 3蛋白和EGFR过表达不仅是判定原发性膀胱移行细胞癌恶性程度和预后的重要指标 ,而且提示原发性膀胱移行细胞癌中Pgp的表达可能与其他肿瘤一样 ,受到 p5 3和EGFR等的调控。

膀胱移行细胞癌中促红细胞生成素及其受体的表达

目的探讨促红细胞生成素(EPO)及其受体(EPOR)在膀胱移行细胞癌(TCC)组织中的表达,并探讨其临床意义。方法应用免疫组织化学方法、RT-PCR方法检测70例膀胱TCC组织、15例癌旁组织、10例正常膀胱组织中EPO和EPOR的蛋白和 mRNA的表达。结果70例膀胱TCC组织有44例(62.9%)EPO蛋白阳性表达,有29例(41.4%)EPOR蛋白阳性表达;15例膀胱TCC癌旁组织及10例正常膀胱组织均未见EPO、EPOR蛋白的表达。EPO蛋白表达强度与膀胱TCC的组织学分级相关(rs=0.329,P<0.05),而与临床分期则无明显的相关性。膀胱癌组织中EPO与EPOR表达具有相关性(rs=0.346,P<0.01)。RT-PCR检测发现膀胱移行细胞癌组织中EPO及其受体 mRNA的表达明显高于正常膀胱组织、癌旁组织中EPO及其受体 mRNA的表达(P<0.01)。结论EPO、EPOR在膀胱TCC组织中过表达,提示EPO、EPOR在膀胱TCC的发生、发展过程中可能起重要作用;EPO蛋白表达强度与膀胱TCC的组织学分级有明显相关性,可能成为膀胱TCC不良预后的指标之一。

趋化因子受体CXCR4在膀胱移行细胞癌中的表达

目的:研究趋化因子受体CXCR4在膀胱移行细胞癌(BTCC)组织中的表达及其临床意义。方法:运用免疫组化技术,检测42例膀胱移行细胞癌组织、5例腺性膀胱炎组织、5例移行细胞乳头状瘤及10例正常膀胱黏膜上皮中CXCR4的表达,染色结果采用免疫反应积分(IRS)和积分光密度值(IOD)分别进行评分。结果:42例BTCC组织中,40例CXCR4表达阳性(95.2%)。随着肿瘤细胞病理分级、临床分期的增加,CXCR4的表达强度升高(P<0.05)。正常膀胱组织和各阳性对照组中CXCR4的表达呈阴性。结论:CXCR4的表达与BTCC的分级分期有相关性;CXCR4的异常表达与BTCC的复发、转移有关,并有可能成为一种新的预后判断指标。

HER-2和MMP-2在膀胱移行上皮癌组织中的表达及意义

目的:探讨膀胱移行细胞癌(bladder transitional cell carcinoma,BTCC)组织中HER-2和MMP-2蛋白的表达、相关性及意义。方法:应用免疫组织化学链酶卵白素-过氧化物酶复合物(SP)方法,检测82例BTCC组织标本中HER-2和MMP-2蛋白的表达,并与10例正常膀胱组织进行对照研究。结果:82例BTCC组织中,HER-2蛋白的阳性表达率为51.2%,MMP-2阳性率70.7%;正常膀胱组织中未见HER-2和MMP-2蛋白阳性表达。HER-2和MMP-2蛋白的阳性表达随着BTCC的病理分级和临床分期的增高而增加(P<0.05);HER-2和MMP-2两者在BTCC组织的表达存在正相关(P<0.05)。结论:HER-2与MMP-2在膀胱移行上皮癌组织中高表达,两者的表达密切相关,与促进癌浸润和转移有关,可能提示预后较差。

RXRγ、RARβ在9-cis-RA抑制人胃癌SGC7901细胞生长中的作用

目的:探讨维甲类X受体(RXR)γ、RARβ在RXR激动剂9-顺维甲酸(9-cis-RA)抑制人胃癌SGC7901细胞生长中的作用。方法:体外培养SGC7901细胞给予9-cis-RA干预,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、流式细胞术、HE染色、免疫组化染色、Western-blot检测9-cis-RA作用后SGC7901细胞生长情况、凋亡率、细胞周期的改变、RXRγ及RARβ表达情况。结果:SGC7901细胞与9-cis-RA共同培养48h后,肿瘤细胞生长受到抑制,其作用具有浓度及时间依赖性。流式细胞仪检测显示处于G0/G1期的细胞增多,凋亡率增高,免疫组化及Western-blot检测显示20μmol/L的9-cis-RA作用72h后,RXRγ、RARβ蛋白表达增加。结论:9-cis-RA可通过上调RXRγ、RARβ蛋白表达诱导细胞凋亡从而抑制人胃癌SGC7901细胞生长。

膀胱移行细胞癌Pgp、突变p53蛋白、EGFR表达的预后判定价值

目的 探讨 Pgp、突变 p53蛋白、EGFR表达在膀胱移行细胞癌预后方面的判定价值。方法 应用免疫组化 SP法 ,检测 83例随 3年以上、术前未经化疗的原发性膀胱移行细胞癌中Pgp、突变 p53蛋白和 EGFR表达情况。结果 Pgp、突变 p53蛋白、EGFR的阳性表达率分别为63.9%、74.7%、67.5% ,三者的过表达均与膀胱癌的病理分级、临床分期和复发有关 ;生存分析显示 Pgp、突变 p53蛋白、EGFR表达与患者术后存活率密切相关。结论 Pgp、突变 p53蛋白、EGFR过表达是判定膀胱移行细胞癌恶性程度和预后的重要指标。

EphA 2在膀胱移行细胞癌中的表达及其意义

[目的]探讨上皮细胞激酶2（EphA2）在膀胱移行细胞癌（Bladder transitional cell carcinoma BTCC ）中的表达及意义。[方法]采用Western blotting 和 RT-PCR技术测定20例BTCC组织和10例正常膀胱黏膜EphA2蛋白和 EphA2 mRNA的表达。[结果]EphA2蛋白在BTCC中的表达明显高于正常膀胱黏膜（ P ＜0．01），在BTCC低分化组表达强于高分化组；EphA2 mRNA在BTCC中的表达高于正常膀胱黏膜（ P＜0．01），与BTCC的分化程度无关（ P＝0．295）。[结论]EphA2将成为判定膀胱癌恶性程度的指标，EphA2 mRNA表达强度与EphA2蛋白表达强度不完全一致。提示转录后的调控机制干预了 BTCC中EphA2的表达。

PSMA和AR在膀胱移行细胞癌中的表达及其相关性研究

目的:研究前列腺特异性膜抗原(PSMA)、雄激素受体(AR)在膀胱移行细胞癌中的表达及其诊治中的临床意义。方法:应用免疫组织化学SP法分别检测75例膀胱移行细胞癌组织及15例正常膀胱黏膜组织中PSMA、AR的表达情况。结果:15例正常膀胱黏膜组织中均未见PSMA和AR的表达,而在75例膀胱移行细胞癌组织的阳性表达率分别为28.0%和21.3%,与正常膀胱黏膜组织相比差异均具有统计学意义(均P<0.05);不同临床分期和病理分级患者PSMA阳性表达差异无统计学意义,而其在复发性膀胱癌患者的表达高于初发性膀胱癌患者,差异具有统计学意义(P<0.01);不同临床分期患者AR的阳性表达差异具有统计学意义(P<0.05)。在膀胱移行细胞癌中,PSMA与AR的表达相关联(r=0.328,P<0.01)。结论:PSMA和AR能客观反映膀胱移行细胞癌的生物学行为,分别对判断恶性程度、预后具有指导意义,且两者可能在膀胱移行细胞癌的发生、发展过程中具有协同作用。

维甲酸受体β在膀胱移行细胞癌中的表达及意义

目的探讨维甲酸受体β(retinoic acid receptor-beta,RAR-β)在膀胱移行细胞癌中表达的意义。方法应用免疫组织化学方法检测80例膀胱移行细胞癌组织标本中RAR-β的表达。病理分级:Ⅰ级26例,Ⅱ级22例,Ⅲ级32例;临床分期:T120例,T220例,T322例,T418例;其中复发性膀胱癌46例。以10例正常膀胱组织作为对照。结果10例正常膀胱粘膜组织中RAR-β均为强阳性表达。80例膀胱移行细胞癌中RAR-β阳性表达28例(35.0%)。RAR-β表达在病理分级Ⅰ级以及临床分期T1、T2期膀胱癌中表达较高;在复发性与非复发性膀胱移行细胞中的表达分别为17.4%和58.9%,差异显著(P<0.05)。结论RAR-β在膀胱移行细胞癌组织中存在表达缺失,其表达缺失程度与肿瘤病理分级、临床分期及复发相关,有作为膀胱移行细胞癌预后指标的可能。

子宫颈脱落细胞中DAPK1、RAR—β和MGMT基因启动子的甲基化水平及其临床意义

目的检测宫颈脱落细胞中DAPK1、RAR-β、MGMT基因启动子的甲基化水平，探讨其筛查高级别宫颈病变[包括宫颈上皮内瘤变（CIN）Ⅱ、Ⅲ]及宫颈鳞癌的价值。方法采用简单随机法选取2010年3-10月间北京协和医院临床使用后剩余的宫颈脱落细胞标本共103份，其中，细胞学诊断包括正常宫颈细胞12份、不典型鳞状上皮细胞（ASC）17份、低度鳞状上皮内病变（LSIL）30份、高度鳞状上皮内病变（HSIL）30份、宫颈鳞癌14份；组织学诊断包括正常宫颈组织27份、CINI19份、CINⅡ17份、CINⅢ25份、宫颈鳞癌15份。采用甲基化特异性高分辨率熔解曲线分析（MS—HRM）法检测宫颈脱落细胞中DAPKl、RAR—B、MGMT基因启动子的甲基化率，并评价MS．HRM法检测的敏感性；采用第二代杂交捕获技术（HCⅡ）检测宫颈脱落细胞中高危型HPV载量（以HPV-HCⅡ值表示）；评价DAPK1、RAR—β、MGMT基因启动子的甲基化和HCⅡ单独或联合检测筛查高级别宫颈病变及宫颈鳞癌的价值。结果MS—HRM法可以检测出标准样本中的1％DNA甲基化率。在不同细胞学病变中，DAPK1、RAR—β、MGMT基因启动子的甲基化率分别比较，差异均有统计学意义（P值分别为0．000、0．011、0．002）；在不同组织学病变中，DAPK1和RAR-β基因启动子的甲基化率分别比较，差异均有统计学意义（P值分别为0．000、0．021）。高级别宫颈病变＋宫颈鳞癌与正常宫颈＋CINI组织中DAPK1基因启动子的甲基化率分别为1．47％和20．98％，两者比较，差异有统计学意义（P=0．000）。DAPK1基因启动子的甲基化检测筛查高级别宫颈病变及宫颈鳞癌的灵敏度为0．571、特异度为0．791，曲线下面积（AUC）为0．709；DAPK1基因启动子的甲基化联合HCⅡ检测的灵敏度为0．825、特异度为0．565，AUC为0．695。结论MS—HRM法检测宫颈脱落细胞的甲基化水平是可行的。DAPK1、RAR—β基因启动子甲基化可以作为筛查宫颈病变的分子标记。DAPK1基因启动子的甲基化联合HCⅡ检测有助于筛查高级别宫颈病变及宫颈鳞癌。

卡介菌多糖核酸膀胱灌注对膀胱癌细胞端粒酶活性及细胞凋亡的影响

目的:探讨卡介菌多糖核酸(BCG-PSN)膀胱灌注对膀胱癌细胞端粒酶活性及细胞凋亡的影响。方法:32例膀胱移行细胞癌患者术前膀胱灌注BCG-PSN 20 mg,隔天1次,共3次。对术前术后的标本采用端粒重复序列扩增法(TRAP-PCR ELISA)和末端脱氧核苷酸转移酶介导缺口末端标记法(TUNEL)分别检测肿瘤细胞端粒酶活性及细胞凋亡的情况。结果:膀胱灌注前后肿瘤细胞端粒酶活性分别为(12.78±3.67)和(3.89±1.12),差异有统计学意义(P<0.05)。灌注前后肿瘤细胞凋亡指数分别为(31.6±11.3)%和(69.1±12.4)%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:BCG-PSN膀胱灌注能抑制膀胱癌细胞端粒酶活性,并诱导肿瘤细胞凋亡,具有明显的抗肿瘤作用。

子宫颈鳞状细胞癌中过氧化物酶体增殖物激活受体γ、维甲酸类X受体α及环氧合酶2的表达及其意义

目的 探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）、维甲酸类X受体α（RXRα）和环氧合酶2（COX-2）在子宫颈鳞状细胞癌（SCC）发生、发展中的可能作用.方法 用免疫组织化学EliVision plus两步法检测17例正常子宫颈鳞状上皮（NCE）、72例子宫颈鳞状上皮内病变（SIL）及42例子宫颈浸润性SCC组织中PPARγ、RXRα和COX-2蛋白的表达情况.结果 PPARγ蛋白在NCE、SIL和SCC组的阳性表达率分别为23.5%（4/17）、58.3%（42/72）和83.3%（35/42）,RXRα蛋白的阳性表达率分别为29.4%（5/17）、54.2%（39/72）和90.5%（38/42）,COX-2在NCE中无明显表达,而在SIL和SCC中的阳性表达率分别36.1%（26/72）和57.1%（24/42）.在SIL中,高级别SIL组PPARγ、RXRα和COX-2的阳性表达率均高于低级别SIL组（均P〈0.05）.在SCC中,有淋巴结转移组COX-2阳性表达率高于无淋巴结转移组（χ2=3.98,P=0.04）.结论 PPARγ、RXRα和COX-2可能均参与了SCC的癌变过程.