冻融囊胚移植中囊胚形态学评分对妊娠结局和新生儿出生结局的影响

目的探讨囊胚形态学评分在冻融囊胚移植(frozen-thawed embryo,FET)周期中对妊娠结局及新生儿出生结局产生的影响,为评估囊胚移植手术临床安全性和有效性提供参考依据。方法2017年5月至2021年12月于我院行FET的患者共计2576个周期进行回顾性分析。以囊胚内细胞团(ICM)及滋养细胞层(TE)评分为标准进行分组:A组(移植≥4AA级别囊胚)108周期,B组(移植4-6AB,4-6BA级别囊胚)370个周期,C组(移植4-6BB,4-6CA级别囊胚)1170个周期,D组(4-6BC,4-6CB,4-6CC级别囊胚)共928个周期,对不同组别患者的妊娠结局和新生儿出生结局进行分析比较。结果四组患者的女方年龄、BMI、不孕年限、卵巢基础储备功能、子宫内膜容受性、超促排周期促性腺激素总量及天数差异无统计学意义(P>0.05)。四组冻融囊胚移植手术后妊娠结局比较:A组冻融囊胚移植后的临床妊娠率高于B、C、D组,B组高于C组和D组(P<0.05),A组和B组间临床妊娠率比较差异无统计学意义(P>0.05);四组着床率比较差异有统计学意义(P<0.05),且随着ICM和TE评分的下降,着床率也下降(P<0.05);四组异位妊娠率、早孕流产率和中孕流产率、多胎妊娠率比较差异无统计学意义(P>0.05);A组与B组、A组与C组、C组与D组间双胎妊娠率比较差异无统计学意义(P>0.5)。四组新生儿出生性别、出生体重比较差异无统计学意义(P>0.05),但A组男婴出生率高于D组,出生体重低于D组(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,ICM和TE评分是临床妊娠率和活产率的独立影响因素(P<0.05)。结论ICM及TE评分可作为FET周期中预测移植后妊娠结局和新生儿出生结局的一个重要参数。

精子DNA完整性对囊胚形成时间及形态的影响

目的探讨精子染色质结构分析(SCSA)检测的精子DNA碎片指数(DFI)和DNA高染色性(HDS)对囊胚形成时间及形态分级的影响。方法回顾性分析2016年5月至2022年9月因单基因疾病来北京大学第三医院生殖医学中心接受辅助生殖技术治疗的242例患者临床资料,共有1167枚囊胚。根据囊胚形成时间分为D5囊胚和D6囊胚,再根据囊胚的内细胞团和滋养外胚层细胞形态学,各分为A、B、C三个等级,分别对各组囊胚的临床资料进行比较,分析不同形成时间及形态分级囊胚间的精子DNA完整性的差异;利用Logistic回归分析精子DNA完整性对囊胚形成时间和质量的影响。结果与D5囊胚组相比,D6囊胚组的男方年龄和精子DFI水平显著升高(P<0.05),抗苗勒管激素(AMH)水平、窦卵泡数(AFC)、精子浓度显著降低(P<0.05)。与内细胞团B级囊胚相比,内细胞团C级囊胚组的AMH水平和AFC显著降低(P<0.05),内细胞团A级囊胚组的精子正常形态率显著升高(P<0.05);与滋养外胚层细胞C级囊胚相比,滋养外胚层细胞A级和B级囊胚组的精子DFI显著降低(P<0.05),滋养外胚层细胞A级囊胚组的精子浓度和正常形态率显著升高(P<0.05)。Logistic回归分析结果显示,精子DFI影响囊胚形成时间,显著增加D6囊胚的概率[OR=1.017,95%CI(1.001,1.033),P=0.047];AFC[OR=0.973,95%CI(0.949,0.998),P=0.036]和精子浓度[OR=0.996,95%CI(0.992,1.000),P=0.048]也是囊胚形成时间的独立影响因素;精子DFI影响囊胚质量,增加非优质囊胚的发生[OR=1.017,95%CI(1.004,1.029),P=0.010];精子HDS对囊胚形成时间和囊胚质量均无显著影响(P>0.05)。结论精子DNA碎片升高可能会延迟胚胎发育,影响囊胚质量,而精子HDS对囊胚的发育和形态分级未见显著影响。

卵裂期优质胚胎与非优质胚胎来源的囊胚冻融移植后着床率比较

目的比较卵裂期优质胚胎与非优质胚胎来源的囊胚进行冻融囊胚移植(FET)的囊胚着床率,探讨卵裂期非优质胚胎来源的囊胚移植价值。方法选择2018年1月至2022年1月于山东中医药大学第一附属医院生殖与遗传中心行FET的613枚受精后5 d(D_(5))囊胚为研究对象,根据其在受精后3 d(D_(3))是否为优质胚胎将其分为优质组(n=158)和非优质组(n=455)。分别比较2组不同内膜准备方案、囊胚腔不同扩张程度、不同级别内细胞团(ICM)、不同级别滋养外胚层(TE)的囊胚着床率以及不同等级囊胚的着床率。结果优质组囊胚着床率为37.97%(60/158);其中自然周期方案、替代周期方案、降调节+替代周期方案、促排卵周期方案的囊胚着床率分别为38.30%(18/47)、41.82%(23/55)、36.67%(11/30)、30.77%(8/26);优质组4种内膜准备方案的囊胚着床率比较差异无统计学意义(χ^(2)=0.942,P>0.05)。非优质组囊胚着床率为33.41%(152/455);其中自然周期方案、替代周期方案、降调节+替代周期方案、促排卵周期方案的囊胚着床率分别为31.01%(40/129)、32.43%(36/111)、23.30%(7/30)、37.30%(69/185);非优质组4种内膜准备方案的囊胚着床率比较差异无统计学意义(χ^(2)=3.008,P>0.05)。优质组与非优质组的囊胚着床率以及自然周期方案、替代周期方案、降调节+替代周期方案、促排卵周期方案的囊胚着床率比较差异均无统计学意义(χ^(2)=1.082、0.829、1.414、1.270、0.419,P>0.05)。优质组中囊胚腔扩张程度2级、3级、4级、5级的囊胚着床率分别为6.25%(1/16)、35.40%(25/71)、46.38%(32/69)、0.00%(0/2);囊胚腔扩张程度3、4级的囊胚着床率高于2级(χ^(2)=5.227、8.805,P<0.05);囊胚腔扩张程度3级与4级囊胚着床率比较差异无统计学意义(χ^(2)=1.807,P>0.05)。非优质组中囊胚腔扩张程度2级、3级、4级、5级的囊胚着床率分别为40.43%(19/47)、31.07%(64/206)、34.03%(65/191)、36.36%(4/11);非优质组中不同囊胚腔扩张程度的胚囊着床率比较差异无统计学意义(χ^(2)=1.624,P>0.05)。非优质组中囊胚腔扩张2级的囊胚着床率显著高于优质组(χ^(2)=6.434,P<0.05);优质组与非优质组中囊胚腔扩张3、4、5级的囊胚着床率比较差异均无统计学意义(χ^(2)=0.416、3.303、1.051,P>0.05)。优质组中ICM A级、B级、C级的囊胚着床率分别为16.67%(1/6)、40.58%(56/138)、21.43%(3/14);优质组中不同ICM等级的囊胚着床率比较差异无统计学意义(χ^(2)=3.181,P>0.05)。非优质组中ICM A级、B级、C级的囊胚着床率分别为28.57%(2/7)、34.07%(138/405)、27.90%(12/43);非优质组中不同ICM等级的囊胚着床率比较差异无统计学意义(χ^(2)=0.739,P>0.05)。优质组与非优质组中ICM A、B、C级的囊胚着床率比较差异均无统计学意义(χ^(2)=0.258、1.897、0.229,P>0.05)。优质组中TE A级、B级、C级的囊胚着床率分别为37.50%(6/16)、36.28%(41/113)、44.83%(13/29);优质组中不同TE等级的囊胚着床率比较差异无统计学意义(χ^(2)=0.713,P>0.05)。非优质组中TE A级、B级、C级的囊胚着床率分别为73.33%(11/15)、36.16%(111/307)、22.56%(30/133);非优质组中TE A级的囊胚着床率显著高于B级和C级(χ^(2)=8.399、17.353,P<0.05),TE B级的囊胚着床率显著高于C级(χ^(2)=7.882,P<0.05)。非优质组中TE A级的囊胚着床率显著高于优质组(χ^(2)=4.014,P<0.05),非优质组中TE C级的囊胚着床率显著低于优质组(χ^(2)=6.057,P<0.05),2组间TE B级的囊胚着床率比较差异无统计学意义(χ^(2)=0.001,P>0.05)。优质组中囊胚等级≤3BB、3BB~4BB、≥4BB的囊胚着床率分别为18.42%(14/76)、48.28%(14/29)、60.38%(32/53),优质组中囊胚等级3BB~4BB、≥4BB的囊胚着床率高于囊胚等级≤3BB(χ^(2)=9.567、23.957,P<0.05),≥4BB与3BB~4BB的囊胚着床率比较差异无统计学意义(χ^(2)=1.115,P>0.05)。非优质组中囊胚等级≤3BB、3BB~4BB、≥4BB的囊胚着床率分别为23.04%(53/230)、29.90%(29/97)、54.69%(70/128);非优质组中囊胚等级≥4BB的囊胚着床率显著高于囊胚等级3BB~4BB、≤3BB(χ^(2)=13.764、33.149,P<0.05),囊胚等级3BB~4BB与≤3BB的囊胚着床率比较差异无统计学意义(χ^(2)=1.706,P>0.05)。优质组与非优质组中囊胚等级≤3BB、3BB~4BB、≥4BB的囊胚着床率比较差异均无统计学意义(χ^(2)=0.714、3.355、0.493,P>0.05)。结论卵裂期非优质胚胎若形成囊胚,应优先选择≥4BB等级的囊胚行FET,以提高囊胚着床率。

人类发育欠佳胚胎在卵裂期及囊胚期移植后的临床结局比较

目的比较分析人类体外受精后的发育欠佳胚胎,行卵裂期移植或囊胚培养后,哪一种策略更有利于改善患者的临床结局。方法患者入选标准:体外受精第3天(d3)所有胚胎均为发育欠佳胚胎(胚胎卵裂球数<6-细胞,或胚胎碎片为10%～20%)。将患者随机分为两组:卵裂期移植组(n=114)及囊胚培养组(n=106)。比较两组间的临床妊娠率、继续妊娠率及植入率。结果卵裂期移植组与囊胚培养组的移植周期临床妊娠率(38.6%vs 24.5%)、继续妊娠率(35.1%vs 24.5%)及植入率(24.5%vs 17.9%)差异均无统计学意义。由于囊胚培养组具有较高的周期取消率(53.8%),卵裂期移植组的取卵周期临床妊娠率显著高于囊胚培养组(38.6%vs 11.3%)。结论人类发育欠佳胚胎在卵裂期进行移植更加适合。

低评分胚胎在卵裂期及囊胚期移植的结局分析

目的分析低胚胎评分患者行卵裂期(D_3)或囊胚期(D_5)移植的结局。方法选取接受IVF-ET治疗的低评分胚胎患者222例,根据患者意向分为卵裂期移植组(A组)和囊胚培养组(B组)。比较2组临床妊娠率、继续妊娠率及种植率。结果 2组的取卵周期临床妊娠率无显著差异(P>0.05),2组移植周期临床妊娠率、继续妊娠率及种植率有显著差异(P<0.05)。结论继续囊胚培养能有效筛选出低评分胚胎中具有发育潜能的胚胎,降低无效移植。

低评分胚胎的囊胚培养和移植结局

目的探讨IVF/ICSI-ET中第三天(D3)低评分胚胎的囊胚培养和移植结局。方法将受精后第3天的低评分胚胎培养至囊胚期。比较不同卵裂球数的D3低评分胚胎囊胚形成情况;分析所获得的可移植囊胚进行玻璃化冷冻-解冻-移植后的临床结局。结果 1.低评分胚胎可移植囊胚形成率30.85%;2.其中6-9细胞的胚胎囊胚形成率及可移植囊胚形成率均较高,差异有统计学意义(P<0.05);3.2012年2月至2014年4月共解冻所形成的可移植囊胚362枚,存活314枚,囊胚复苏率86.74%;共解冻225个周期,移植206个周期,囊胚移植后胚胎着床率为27.07%,生化妊娠率41.26%,临床妊娠率36.41%,流产率为24.0%,活产率26.70%。低评分胚胎组的胚胎着床率(27.07%vs.44.44%)、生化妊娠率(41.26%vs.66.67%)、临床妊娠率(36.41%vs.61.90%)、活产率(26.70vs.47.62%)均低于优质胚胎组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论卵裂期低评分胚胎仍有可能获得妊娠及活产儿。将卵裂期低评分胚胎用于囊胚培养,可提高胚胎利用率。对于无优胚移植或者移植优胚仍未受孕的患者,可选择移植来源于低评分胚胎的囊胚。

胚龄对于CC级别单囊胚冻融移植周期妊娠结局的影响

目的·探讨单囊胚冻融移植周期中胚龄对CC级别囊胚妊娠结局的影响。方法·纳入2017年4月—2019年12月于上海永远幸妇科医院进行单个冻融囊胚移植的565例患者,分为高质量囊胚组(AA、AB、BA级,n=189)、中质量囊胚组(BB、AC、CA级,n=114)、低质量囊胚组(CB、BC级,n=140)和CC级别囊胚组(n=122)。其中,CC级别囊胚组按照胚龄进一步分为D5亚组(n=26)、D6亚组(n=81)和D7亚组(n=15)。对4个不同级别囊胚组及3个CC级别囊胚胚龄亚组的周期特征及妊娠结局进行比较。结果·高质量囊胚组、中质量囊胚组、低质量囊胚组、CC级别囊胚组的临床妊娠率(58.7%vs 54.4%vs 47.1%vs 25.4%,P=0.000)和活产率(46.2%vs 43.2%vs 36.2%vs 17.6%,P=0.000)依次降低。多元回归分析显示,胚胎质量与临床妊娠率显著相关。与高质量囊胚相比,CC胚胎的临床妊娠率较低(a OR=0.81,95%CI 0.71~0.93,P=0.003)。CC级别囊胚胚龄亚组分析显示,D5、D6和D7亚组的临床妊娠率(42.3%vs 23.5%vs 6.7%,P=0.040)和活产率(31.6%vs 15.6%vs 0,P=0.133)依次降低。多元回归分析显示,胚龄对CC级别囊胚移植临床妊娠率有显著影响。相较于D5的CC级别胚胎,D7的CC级别胚胎的临床妊娠率更低(a OR=0.69,95%CI 0.49~0.96,P=0.032)。结论·D5的CC级别囊胚具有很好的妊娠结局,临床价值高。D6的CC级别囊胚虽然妊娠率较低,但仍具有一定的临床价值,而D7的CC级别囊胚临床价值较小。

非高龄患者囊胚整倍体率的形态学影响因素分析

目的:探讨非高龄患者囊胚整倍体率的形态学影响因素。方法:收集2018年1月—2019年7月在本院行胚胎植入前遗传学检测患者,超促排卵后胚胎培养至囊胚阶段,激光法活检4~8个囊胚滋养外胚层细胞,全基因组扩增后进行高通量测序和生物信息学数据分析。囊胚形态学评价参数包括囊胚分期、内细胞团和外滋养层评级等,分析胚胎的形态参数与整倍体发生率的关联。结果:活检402枚囊胚,成功获得396枚(98.5%)囊胚最终测序结果,其中整倍体囊胚190枚(47.9%),多因素分析结果表明相比于4期/5期囊胚和A/B级内细胞团,3期囊胚(OR=0.64,95%CI 0.44~0.92)和C级内细胞团(OR=0.34,95%CI 0.25~0.77)分别所对应囊胚整倍体率较低。结论:4期和5期囊胚的整倍体率较高;C级内细胞团的囊胚整倍体率较低(22.7%),需进行染色体检测后方可移植。

胚胎植入前非整倍体检测:囊胚形态学评分有指导作用吗?

目的评价囊胚形态学评分在PGT-A周期中的指导作用。方法回顾性分析2019年1~12月在本中心行PGT-A检查的474枚囊胚的形态学评分及相关临床资料,按照活检时间不同分为D5组(204枚)和D6组(270枚),比较不同囊胚评级与整倍体率及活产率的关系;又将244枚BB级囊胚按照不同囊胚扩张程度分为<4期、4期和>4期3组,比较D5或D6活检时不同囊胚扩张程度对整倍体率和活产率的影响。结果474枚囊胚中,D5活检囊胚中,一般囊胚的整倍体率显著高于较差囊胚(56.59%vs.37.50%,P=0.025);D6活检囊胚中,一般囊胚的整倍体率亦显著高于较差囊胚(58.26%vs.37.24%,P=0.005)。通过PGT-A获得233枚整倍体胚胎,移植126枚,移植D5、D6各不同评级囊胚的活产率均无显著性差异(P>0.05)。244枚BB级囊胚中,D5活检的各扩张程度囊胚整倍体率无显著性差异(P>0.05);D6活检的扩张程度<4期囊胚整倍体率显著低于4期囊胚(25.00%vs.62.20%,P=0.026)。移植的72枚BB级整倍体囊胚中,移植D5、D6不同扩张程度囊胚亚组间活产率均无显著性差异(P>0.05)。结论对发育速度较慢(D6囊胚)、扩张程度<4期的较差囊胚[内细胞团(ICM)和滋养外胚层细胞(TE)评级低于BB级]进行PGT-A检测更具意义。经PGT-A筛查获得的整倍体胚胎,建议优先选择发育速度较快(D5囊胚)的整倍体胚胎进行移植。

冻融单囊胚移植周期中囊胚形成时间对临床结局的影响

目的探讨冻融胚胎移植(FET)周期中囊胚形成时间对临床结局的影响。方法回顾性分析2017年1月至2020年7月在本院生殖中心行单囊胚FET的815个周期的临床资料,根据囊胚形成时间分为五组:≤118 h组(D5上午,n=306),(119~129)h组(D5下午,n=160),(130~142)h组(D6上午,n=264),(143~153)h组(D6下午,n=55),>153 h组(D7,n=30);根据Gardner囊胚评分标准,再细分为高质量囊胚组(G1)、普通囊胚组(G2)和低质量囊胚组(G3),分析囊胚形成时间和囊胚级别对FET妊娠结局的影响。结果(1)共纳入815个FET周期,临床妊娠率47.48%(387/815),活产率36.93%(301/815)。≤118 h组的临床妊娠率(60.78%)和活产率(48.04%)均显著高于其他四组(P<0.05);(119~129)h组与(130~142)h组的临床妊娠率(分别为43.75%、41.67%)和活产率(分别为33.75%、32.20%)均无显著性差异(P>0.05),但均显著高于(143~153)h组和>153 h组的临床妊娠率(分别为25.45%、23.33%)和活产率(分别为18.18%、16.67%)(P<0.05);(143~153)h组和>153 h组的临床妊娠率和活产率均无显著差异(P>0.05)。(2)高质量囊胚组中,≤118 h组的临床妊娠率(63.27%)显著高于(119~129)h组(45.35%)和(130~142)h组(49.43%)(P<0.05),除≤118 h组以外其他4组间临床妊娠率均无显著性差异(P>0.05);5组间活产率均无统计学差异(P>0.05)。(3)普通囊胚组中,5组间临床妊娠率和活产率均无显著差异(P>0.05)。(4)低质量囊胚组中,随着囊胚形成时间的延长,临床妊娠率和活产率均呈现逐渐下降的趋势,≤118 h组的临床妊娠率(61.11%)显著高于(130~142)h组(26.67%)、(143~153)h组(8.33%)和>153 h组(5.88%)(P<0.05),与(119~129)h组无显著性差异(P>0.05),后3个发育时段组间均无显著性差异(P>0.05);≤118 h组的活产率(38.89%)显著高于(143~153)h组(8.33%)和>153 h组(5.88%)(P<0.05),其他4组间的活产率均无显著差异(P>0.05)。结论D5上午形成的囊胚发育潜力最好,可优先移植;对于高质量囊胚和普通囊胚,囊胚形成时间对活产率影响不大;对于低质量囊胚,随着囊胚形成时间的延长,其临床妊娠率和活产率逐渐降低。

低等级胚胎继续培养的价值与其临床结局

目的观察体外受精-胚胎移植治疗周期中形态学低等级胚胎培养形成囊胚情况及其临床结局。方法采用序贯培养法培养D3移植和冷冻后废弃的形态学低等级胚胎,观察不同年龄组(年龄≤30岁组、>30且≤35岁组和>35岁组)囊胚形成情况,并利用低等级胚胎囊胚形成情况对体外受精妊娠结局进行预测;将形成的囊胚利用玻璃化法冷冻保存,观察囊胚解冻后的临床结局,并与直接冷冻低等级胚胎的解冻效果比较。结果共收集745例治疗周期的3249个低等级胚胎继续培养,有312例(41.88%)周期形成444个(13.67%)囊胚,其中>35岁组的周期培养成功率和囊胚形成率最低(P<0.05);低等级胚胎中有囊胚形成者的临床妊娠率高于无囊胚形成者(P<0.05);有130例囊胚解冻周期,共解冻196个囊胚,有184个(93.90%)囊胚复苏存活,共进行了120例移植周期,有43例(35.83%)临床妊娠;比较胚胎复苏存活率、移植周期取消率以及临床妊娠率,继续培养形成囊胚解冻组均明显优于低等级胚胎直接冷冻组(P<0.05)。结论 D3低等级胚胎具有不同程度的发育潜能,通过继续培养冷冻囊胚可以提高患者的累积妊娠率。

CC级单囊胚冻融移植周期临床结局分析

目的探讨冻融胚胎移植(FET)周期中CC级单囊胚移植的应用价值。方法回顾性分析2017年1月至2019年12月在本院生殖中心行单囊胚FET的645个周期,对CC级(CC组,142周期)和非CC级(非CC组,503周期)单囊胚FET结局进行比较,同时分析不同年龄段(≤35岁、36~40岁、>40岁)CC级和非CC级囊胚的妊娠结局,并比较分析了CC级囊胚形成时间(D5、D6、D7)以及患者年龄(≤35岁、36~40岁、>40岁)对于FET结局的影响。结果(1)共纳入645个单囊胚FET周期,临床妊娠率为46.20%,活产率为35.81%。其中142个CC级单囊胚FET周期临床妊娠率26.76%、活产率18.31%,均显著低于非CC级单囊胚FET周期(分别为52.69%、40.76%)(P<0.05),但两组间的早期流产率、早产率和新生儿出生体重均无统计学差异(P>0.05)。(2)患者年龄≤35岁和36~40岁时,CC组的临床妊娠率(分别为36.36%、25.58%)和活产率(分别为25.76%、18.60%)均显著低于非CC组的临床妊娠率(分别为59.75%、44.78%)和活产率(分别为47.48%、35.07%)(P<0.05);患者年龄>40岁时,CC组与非CC组的临床妊娠率(9.09%vs.19.61%)和活产率(3.03%vs.11.76%)无统计学差异(P>0.05)。(3)CC级单囊胚FET周期D5、D6、D7亚组临床妊娠率(分别为41.94%、25.27%、10.00%)及活产率(分别为29.03%、17.58%、5.00%)比较,D5亚组临床妊娠率显著高于D7亚组(P<0.05)。(4)CC级单囊胚FET周期在≤35岁、36~40岁、>40岁年龄亚组的临床妊娠率(分别为36.36%、25.58%、9.09%)及活产率(分别为25.76%、18.60%、3.03%)比较,≤35岁亚组临床妊娠率显著高于>40岁亚组,≤35岁、36~40岁亚组活产率显著高于>40岁亚组(P<0.05)。结论CC级单囊胚FET周期临床妊娠率和活产率虽低于非CC级囊胚,但依然有一定的活产率;CC级单囊胚FET临床妊娠率及活产率与囊胚形成时间、患者年龄有关;对于反复胚胎质量差没有优质囊胚的患者,可根据患者年龄、囊胚形成时间考虑CC级囊胚移植。

PGT-SR后囊胚形态学评分与冻融单囊胚移植活产的相关性分析

目的探讨胚胎植入前染色体结构重排检测(preimplantation genetic testing for chromosome structural rearrangements,PGT-SR)后囊胚形态学评分对冻融单囊胚移植活产的影响。方法回顾性病例对照研究分析2015年3月至2021年1月期间于郑州大学第一附属医院生殖医学中心行PGT-SR助孕后冻融单囊胚移植患者的临床资料,共1412个移植周期。依据是否获得活产分为活产组(n=634)和未活产组(n=778),根据囊胚扩张度、内细胞团和滋养层细胞形态对囊胚进行评分,比较各形态学参数的活产率差异。通过二元logistic回归评估每个形态学参数对单囊胚移植活产的预测价值。再依据囊胚发育天数分为第5天囊胚(n=977)和第6天囊胚(n=435),进一步探究第5天和第6天囊胚的不同扩张度分期的活产。结果活产组的不孕年限[(2.88±2.41)年]比未活产组[(3.18±2.67)年,P=0.028]短。活产组的移植日内膜厚度[(10.12±2.03)mm]和第5天囊胚移植周期比例[75.6%(479/634)]比未活产组[(9.78±1.76)mm,P=0.003;64.0%(498/778),P<0.001]高;两组间内膜准备方案、囊胚扩张度和滋养层细胞等级构成比比较差异均有统计学意义(P=0.008、P=0.002、P=0.015)。两组间内细胞团等级构成比差异无统计学意义(P=0.236)。调整相关混杂因素后,二元logistic回归分析结果显示,与1~2期相比,3期、4期的活产率显著升高(aOR=1.894,95%CI:1.056~3.394,P=0.032;aOR=1.970,95%CI:1.046~3.709,P=0.036),内细胞团和滋养层细胞等级并不是活产的独立影响因素(aOR=1.480,95%CI:0.790~2.772,P=0.221;aOR=1.242,95%CI:0.952~1.621,P=0.111)。内膜准备方案、囊胚发育天数和内膜厚度同样是活产的独立影响因素,与激素替代方案相比,自然周期方案的活产率显著升高(aOR=1.425,95%CI:1.028~1.975,P=0.033);与第6天囊胚相比,第5天囊胚的活产率显著升高(aOR=1.448,95%CI:1.068~1.963,P=0.017)。进一步分析相同囊胚发育天数的不同扩张度分期的活产,结果显示,第5天囊胚的不同扩张度分期间的活产率差异有统计学意义(P=0.002),3期、4期和6期的活产率[51.1%(360/704)、50.3%(87/173)、58.3%(7/12)]均高于1~2期[28.1%(16/57),均P<0.0125]。结论行PGT-SR助孕后冻融周期单囊胚移植时,建议优先选择扩张度为3~4期的第5天囊胚移植,选择自然周期内膜准备方案可获得更高的活产率。

低级别囊胚冻融移植结局影响因素的相关性分析

目的分析影响低级别囊胚冻融移植临床结局的相关因素。方法回顾性分析2014年3月至2018年3月期间在安徽医科大学第一附属医院生殖医学中心行低级别囊胚冻融移植的358个周期,根据移植后14 d血人绒毛膜促性腺激素(hCG)值及移植后35 d阴道超声结果,分为妊娠组和非妊娠组,妊娠组28个周期,非妊娠组330个周期,探究影响妊娠结局的原因。结果①低级别囊胚冻融移植的妊娠率为12.01%(43/358),临床妊娠率为7.82%(28/358),生化妊娠率为4.19%(15/358),流产率为21.43%(6/28),活产率为6.15%(22/358);②年龄、女方体质量指数(BMI)、不孕类型、不孕年限、移植日子宫内膜厚度、移植胚胎数等不影响低级别囊胚移植的临床结局;③囊胚发育天数影响低级别囊胚的冻融移植结局,第5日(D5)囊胚种植率(26.51%)、临床妊娠率(26.83%)、活产率(19.51%)显著高于第6日(D6)囊胚(6.20%、5.36%、4.42%)(P均<0.0001)。结论低级别囊胚冻融移植成功率较低,D5囊胚比D6囊胚具有更高的移植成功率。

PGT-A后不同发育时间和评级囊胚的移植临床结局及转录组特征分析

目的探讨行胚胎植入前遗传学非整倍体检测(preimplantation genetic testing for aneuploidies,PGT-A)后不同发育时间和评级囊胚移植的临床结局,并对其转录组特征进行比较分析。方法回顾性队列研究分析2017年1月至2021年12月期间在山西省妇幼保健院生殖医学中心行PGT-A后选择整倍体囊胚移植的患者临床资料,共295个移植周期,分别按照囊胚发育时间[第5日(day 5,D5)组和第6日(day 6,D6)组]及囊胚评级(高质量组和一般质量组)进行分组,比较各组囊胚移植临床结局。通过比较来自GEO和ENA数据平台不同发育时间和评级的囊胚单细胞转录组数据(scRNA-seq),分析不同组间的转录组水平差异。结果①D5组和D6组男女方年龄、不孕类型、不孕年限、体质量指数(body mass index,BMI)、卵泡刺激素(follicle-stimulating hormone,FSH)、黄体生成素(luteinizing hormone,LH)、雌二醇和获卵数差异均无统计学意义(均P>0.05),两组间MⅡ卵率[86.35%(2051/2375)比82.71%(1770/2140),P=0.001]、囊胚形成率[68.08%(725/1065)比62.14%(540/869),P=0.006]、着床率[72.78%(115/158)比52.55%(72/137),P<0.001]、临床妊娠率[56.33%(89/158)比43.80%(60/137),P=0.032]和活产率[53.80%(85/158)比40.87%(56/137),P=0.027]相比较,D5组都显著高于D6组,两组间流产率、早产率、男性比例和出生体质量差异均没有统计学意义(均P>0.05);②高质量组和一般质量组男女方年龄、不孕类型、不孕年限、BMI、FSH、LH、雌二醇和获卵数差异均没有统计学意义(均P>0.05),两组间MⅡ卵率[87.06%(1251/1437)比83.50%(2570/3078),P=0.002]、囊胚形成率[73.38%(499/680)比61.08%(766/1254),P<0.001]、着床率[77.90%(74/95)比56.50%(113/200),P<0.001]、临床妊娠率[61.05%(58/95)比45.50%(91/200),P=0.013]和活产率[56.84%(54/95)比43.50%(87/200),P=0.032]相比较,高质量组都显著高于一般质量组,两组间流产率、早产率、新生儿男性比例和出生体质量差异均没有统计学意义(均P>0.05);③基于GEO和ENA数据平台的scRNA-seq数据,挖掘D5和D6囊胚以及高质量和一般质量囊胚内细胞团(inner cell mass,ICM)和外滋养层(trophectoderm,TE)的差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs)。经过KEGG富集分析,显示D5组较D6组ICM/TE上调的DEGs显著富集在285/288个信号通路;高质量组较一般质量组ICM/TE上调的DEGs显著富集在207/3个信号通路。结论发育D5囊胚比发育D6囊胚,高质量囊胚比一般质量囊胚都具有较好的着床和继续临床妊娠能力。对不同发育时间和评级的囊胚进行转录组水平分析比较,显示转录组特征具有显著差异。囊胚转录组水平的分析,对囊胚着床及继续临床妊娠能力具有预测价值。