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Super Antibiotics, Part II. Hyperforin, Mass Spectroscopy (MS) and Gas Chromatography-Mass Spectrometry (GC-MS), Evidence of Permeability of the Blood-Testis Barrier (BTB) and the Blood-Brain Barrier (BBB) to Hyperforin 被引量:2
1
作者 Ilia Brondz 《International Journal of Analytical Mass Spectrometry and Chromatography》 2016年第4期66-73,共8页
In the first article of this series, we presented some evidence of hyperforin as an antibiotic, antiprotozoal, antiviral, anticancer, and immunomodulatory substance. In the present article, evidence of the permeabilit... In the first article of this series, we presented some evidence of hyperforin as an antibiotic, antiprotozoal, antiviral, anticancer, and immunomodulatory substance. In the present article, evidence of the permeability of the blood-testis barrier (BTB) and blood-brain barrier (BBB) to hyperforin and its distribution in other organs of the domestic pig (Sus scrofa domesticus) are revealed. Seven-month-old male boars with a body mass of 100 kg were fed a diet containing hyperforin. Organs were surgically removed under anesthesia. Organs were suitable prepared and extracted, and then analyzed using gas chromatography-mass spectrometry with supersonic molecular beams (GC-MS with SMB). The presence of hyperforin was recorded in all organs and body fluids. Special attention was paid to the evaluation of the presence of hyperforin in the brain and testes of experimental animals. The presence of hyperforin in the brain and testes of experimental animals was established by GC-MS with SMB. The results are of interest because penicillin and numerous other antibiotics cannot pass through the BTB or BBB if healthy or non-inflamed, which limits their use in patients with meningitis and gonorrhea. The findings are also of interest in cases of penicillin- and multi-antibiotic-resistant bacterial infections. 展开更多
关键词 ANTIBIOTICS HYPERFORIN Super antibiotic Mass Spectroscopy Gas Chromatography-Mass Spectrometry blood-testis barrier blood-Brain barrier Methicillin-Resistant Staphylococcus aureus (MRSA)
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Blood-testis barrier and spermatogenesis: lessons From genetically-modified mice 被引量:9
2
作者 Xiao-Hua Jiang Ihtisham Bukhari +4 位作者 Wei Zheng Shi Yin Zheng Wang Howard J Cooke Qing-Hua Shi 《Asian Journal of Andrology》 SCIE CAS CSCD 2014年第4期572-580,共9页
The blood-testis barrier (BTB) is found between adjacent Sertoli cells in the testis where it creates a unique microenvironment for the development and maturation of meiotic and postmeiotic germ cells in seminiferou... The blood-testis barrier (BTB) is found between adjacent Sertoli cells in the testis where it creates a unique microenvironment for the development and maturation of meiotic and postmeiotic germ cells in seminiferous tubes. It is a compound proteinous structure, composed of several types of cell junctions including tight junctions (TJs), adhesion junctions and gap junctions (GJs). Some of the junctional proteins function as structural proteins of BTB and some have regulatory roles. The deletion or functional silencing of genes encoding these proteins may disrupt the BTB, which may cause immunological or other damages to meiotic and postmeiotic cells and ultimately lead to spermatogenic arrest and infertility. In this review, we will summarize the findings on the BTB structure and function from genetically-modified mouse models and discuss the future perspectives. 展开更多
关键词 blood-testis barrier genetically-modified mouse seminiferous tubule sertoli cells SPERMATOGENESIS
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Effect of Electromagnetic Pulse Exposure on Permeability of Blood-testicle Barrier in Mice 被引量:5
3
作者 XIAO-WU WANG GUI-RONG DING +4 位作者 CHANG-HONG SHI TAO ZHAO JIE ZHANG LI-HUA ZENG Guo-ZHEN GUO 《Biomedical and Environmental Sciences》 SCIE CAS CSCD 2008年第3期218-221,共4页
Objective To study the effect of electromagnetic pulse (EMP) exposure on the permeability of blood-testicle barrier (BTB) in mice. Methods Adult male BALB/c mice were exposed to EMP at 200 kV/m for 200 pulses with... Objective To study the effect of electromagnetic pulse (EMP) exposure on the permeability of blood-testicle barrier (BTB) in mice. Methods Adult male BALB/c mice were exposed to EMP at 200 kV/m for 200 pulses with 2 seconds interval. The mice were injected with 2% Evans Blue solution through caudal vein at different time points after exposure, and the permeability of BTB was monitored using a fluorescence microscope. The testis sample for the transmission electron microscopy was prepared at 2 h after EMP exposure. The permeability of BTB in mice was observed by using Evans Blue tracer and lanthanum nitrate tracer. Results After exposure, cloudy Evans Blue was found in the testicle convoluted seminiferous tubule of mice. Lanthanum nitrate was observed not only between testicle spermatogonia near seminiferous tubule wall and sertoli cells, but also between sertoli cells and primary spermatocyte or secondary spermatocyte. In contrast, lanthanum nitrate in control group was only found in the testicle sertoli cells between seminiferous tubule and near seminifdrous tubule wall. Conclusion EMP exposure could increase the permeability of BTB in the mice. 展开更多
关键词 Electromagnetic pulse (EMP) blood-testicle barrier (btb LANTHANUM Evans Blue PERMEABILITY MICE
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阴囊热应激对山羊血睾屏障结构和功能的影响
4
作者 武永杰 徐英环 +3 位作者 刘腾飞 马琳 陈鸿 徐永平 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期2973-2982,共10页
旨在探究热应激对山羊血睾屏障(BTB)结构和功能的影响,为山羊热应激防治提供理论依据。本研究选择6只1~1.5岁的健康雄性关中山羊,随机分为2组,每组3只。对照组正常饲喂,试验组采用改良后的阴囊热刺激法建立山羊睾丸热应激模型。利用CAS... 旨在探究热应激对山羊血睾屏障(BTB)结构和功能的影响,为山羊热应激防治提供理论依据。本研究选择6只1~1.5岁的健康雄性关中山羊,随机分为2组,每组3只。对照组正常饲喂,试验组采用改良后的阴囊热刺激法建立山羊睾丸热应激模型。利用CASA法检测精液质量变化,光镜与透射电镜观测睾丸结构,生物素示踪法显示BTB通透性改变,蛋白质印记法与免疫组织化学法检测BTB关键蛋白表达定位。热应激组中山羊睾丸指数、精子数量、精子活率、精子总运动性和精子前进运动率均显著降低(P<0.05)。热应激导致睾丸组织形态受损明显,生精细胞数量减少且排列紊乱;支持细胞内质网扩张,并出现大量空泡;支持细胞间紧密连接结构松散且不连续。热应激引起BTB通透性升高,关键连接蛋白表达水平显著降低(P<0.05),但分布定位未受影响。热应激损伤山羊睾丸组织形态,破坏支持细胞结构并降低BTB关键蛋白表达,从而导致BTB结构和功能完整性受损,造成精子质量下降,影响雄性山羊繁殖性能。 展开更多
关键词 山羊 热应激法 血睾屏障 超微结构
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褪黑素缓解白消安损伤小鼠睾丸的机理研究
5
作者 吴开慧 张留光 +5 位作者 汪超 许师源 刘松奇 原开敏 王栋 庞云渭 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期2486-2497,共12页
旨在揭示褪黑素(melatonin, MT)缓解白消安损伤睾丸的机理,提高白消安制备精原干细胞移植受体的效率,并探究其对白消安毒害雄性生精机能的治疗作用。本研究以6~7周ICR雄鼠为模型动物,分为对照组,白消安处理组和白消安+褪黑素处理组,每组... 旨在揭示褪黑素(melatonin, MT)缓解白消安损伤睾丸的机理,提高白消安制备精原干细胞移植受体的效率,并探究其对白消安毒害雄性生精机能的治疗作用。本研究以6~7周ICR雄鼠为模型动物,分为对照组,白消安处理组和白消安+褪黑素处理组,每组8个重复,于注射后第7天取样。通过ELISA检测睾丸组织的炎性细胞因子水平,并对睾丸和附睾进行HE染色。此外,免疫组化或免疫荧光检测血睾屏障(blood-testis barrier, BTB)相关蛋白的表达情况,以分析MT对BTB影响。结果表明,小鼠经白消安注射后,联合MT处理,观察到MT显著缓解了睾丸重和睾体率下降的趋势,并减缓了精子数量下降的速度;睾丸组织HE染色和炎性细胞因子检测发现,MT显著减缓了核转录因子κB(nuclear transportation factorκB,NF-κB)、p-NF-κB、白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、肿瘤坏死因子-ɑ(tumor necrosis factor-ɑ,TNF-α)及髓过氧化物酶(myeloperoxidase, MPO)水平的上升趋势,从而减少了组织中炎性细胞浸润;免疫组化或免疫荧光检测发现,MT缓解了白消安处理导致的BTB组成蛋白(Occludin、connexin-43、N-cadherin)和细胞骨架蛋白(F-actin和Vimentin)含量的下降。综上,MT通过下调睾丸组织中炎性细胞因子水平,缓解白消安诱发的小鼠睾丸炎症反应;并通过减缓BTB相关蛋白含量的下降,缓解白消安对BTB和支持细胞的损伤,进而缓解小鼠生精机能的损伤。 展开更多
关键词 褪黑素 白消安 睾丸炎 血睾屏障 细胞骨架
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支持细胞在精子发生中的关键功能及调控机制研究进展
6
作者 王秋月 齐晓龙 龙城 《中国畜牧杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第12期85-90,共6页
支持细胞作为睾丸曲精细管内唯一的体细胞,不仅为生殖细胞提供物理支撑和营养环境,还通过形成紧密连接构成血睾屏障,保护生殖细胞免受外界干扰。精子发生时,TGF-β/Smad、AMPK和MAPK等多种信号通路共同调控紧密连接的拆解和重建过程,确... 支持细胞作为睾丸曲精细管内唯一的体细胞,不仅为生殖细胞提供物理支撑和营养环境,还通过形成紧密连接构成血睾屏障,保护生殖细胞免受外界干扰。精子发生时,TGF-β/Smad、AMPK和MAPK等多种信号通路共同调控紧密连接的拆解和重建过程,确保生殖细胞顺利穿越生精上皮,完成精子发生。近年来,随着组学技术的发展,研究者对支持细胞的关键功能及其调控机制有了更加深入的理解。本文结合新兴技术的应用,综述了支持细胞的结构与功能、紧密连接的组成以及支持细胞调控精子发生的信号通路,以期为精子发生机制的研究提供新的视角和参考。 展开更多
关键词 睾丸 支持细胞 紧密连接 血睾屏障 精子发生 信号通路
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补肾方药治疗肾虚所致男性生殖功能衰减的药效和机制研究进展
7
作者 张露娜 陈迪新 +4 位作者 王启鹏 彭子倫 刘永俊 陈艳芬 贾丹 《广州中医药大学学报》 CAS 2024年第9期2499-2508,共10页
有关高龄育子和少子化的现状表明,男性生殖功能衰减带来不育风险的防治问题日益突出。男性生殖功能衰减与下丘脑-垂体-性腺轴、氧自由基、血睾屏障、生精细胞凋亡等因素有密切关系。中医认为,肾藏精,主生殖,生殖功能衰减与肾之阴阳失衡... 有关高龄育子和少子化的现状表明,男性生殖功能衰减带来不育风险的防治问题日益突出。男性生殖功能衰减与下丘脑-垂体-性腺轴、氧自由基、血睾屏障、生精细胞凋亡等因素有密切关系。中医认为,肾藏精,主生殖,生殖功能衰减与肾之阴阳失衡密切相关,运用补肾法可治疗肾虚导致的生殖功能衰减。补肾类方药通过系统调节下丘脑-垂体-性腺轴的功能,可显著延缓生殖功能的衰退;补肾类方药可清除体内过多的氧自由基,保护细胞免受氧化损伤;补肾类方药可通过维持血睾屏障而改善生精功能,并能调控生精细胞的凋亡。通过补肾改善肾虚所致生殖功能衰减的代表性方剂有五子衍宗丸、肾气丸、右归丸、六味地黄丸、左归丸及龟鹿二仙膏。这些方剂并非只针对单一机制产生效果,而是通过多途径、多环节、多靶点发挥治疗作用,综合调节机体内环境,以达到改善男性生殖功能的目的。中医补肾疗法在男性生殖功能衰减的治疗中发挥着不可替代的作用。深入研究其作用机制,可更好地指导临床实践,为改善男性生殖功能衰减提供理论依据。 展开更多
关键词 补肾方药 男性生殖功能衰减 下丘脑-垂体-性腺轴 氧自由基 血睾屏障 生精细胞凋亡 五子衍宗丸 肾气丸 右归丸 六味地黄丸 综述
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电磁脉冲辐射对小鼠睾丸血-睾屏障的影响 被引量:12
8
作者 侯武刚 赵洁 +2 位作者 张远强 曾丽华 郭国桢 《辐射研究与辐射工艺学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第6期366-370,共5页
采用常规苏木精-伊红染色(Hematoxylin-Eosin staining,HE staining)、硝酸镧示踪电镜和埃文思兰 (Evans Blue,EB)尾静脉注射三种方法,综合观察100kV/m和400kV/m两种不同强度电磁脉冲辐射对小 鼠睾丸血-睾屏障的影响。三种方法观察结... 采用常规苏木精-伊红染色(Hematoxylin-Eosin staining,HE staining)、硝酸镧示踪电镜和埃文思兰 (Evans Blue,EB)尾静脉注射三种方法,综合观察100kV/m和400kV/m两种不同强度电磁脉冲辐射对小 鼠睾丸血-睾屏障的影响。三种方法观察结果基本一致,两种强度的电磁脉冲辐射均可造成小鼠睾丸支持细胞和 血一睾屏障不同程度的损伤,400 kV/m辐射组损伤更甚,辐射后1 d即可见大量生精细胞的凋亡与坏死,支持细 胞亦发生形态结构的变化,血-睾屏障严重损伤,随后大量第Ⅷ期生精小管内出现基底室与近腔室的分离,大量 凋亡与坏死的生精细胞向管腔的排放,至辐射后21d仍可见到血-睾屏障损伤;100kV/m辐射组的损伤较 400 kV/m辐射组稍轻,辐射后14 d支持细胞、生精上皮以及血-睾屏障的损伤已基本恢复。结果提示一定强度 的电磁脉冲可以造成小鼠血-睾屏障的损伤,这种损伤呈辐射强度依赖性,并且与损伤后恢复时间相适应。 展开更多
关键词 电磁脉冲辐射 血-睾屏障 支持细胞 埃文思兰 硝酸镧 睾丸
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高功率微波辐射对大鼠血睾屏障的影响 被引量:12
9
作者 高晓芳 王水明 +4 位作者 彭瑞云 高亚兵 李翔 董红艳 马俊杰 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 2008年第7期579-582,共4页
目的:探讨高功率微波(HPM)辐射对血睾屏障(BTB)结构与功能的影响。方法:166只二级雄性Wistar大鼠经0、10、30、100mW/cm2HPM辐射5min,于辐射后6h,1、3、7、14d,采用镧醛(含20g/L硝酸镧,50mg/L戊二醛)心脏灌注和2%伊文思蓝(EB)尾静脉注射... 目的:探讨高功率微波(HPM)辐射对血睾屏障(BTB)结构与功能的影响。方法:166只二级雄性Wistar大鼠经0、10、30、100mW/cm2HPM辐射5min,于辐射后6h,1、3、7、14d,采用镧醛(含20g/L硝酸镧,50mg/L戊二醛)心脏灌注和2%伊文思蓝(EB)尾静脉注射,经光镜、电镜和激光共聚焦显微镜(LSCM)观察BTB结构变化及硝酸镧和EB分布。结果:10~100mW/cm2HPM辐射后大鼠睾丸间质水肿伴血管充血、出血;生精小管近腔室内血浆蛋白和红细胞积聚,病变在辐射后6h出现,1~7d明显加重,范围扩大,14d有所减轻;30、100mW/cm2辐射组明显重于10mW/cm2辐射组。电镜下见各辐射组硝酸镧颗粒于近腔室内精母细胞、精子细胞和精子之间沉淀。LSCM观察见生精小管近腔室内弥散分布的EB颗粒。结论:HPM辐射可引起BTB结构破坏,通透性增加。 展开更多
关键词 高功率微波 血睾屏障 大鼠
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温度对体外大鼠睾丸支持细胞增殖及occludin蛋白表达的影响 被引量:5
10
作者 胡建听 邵翠华 +5 位作者 王沛涛 刘勇 郝伟玉 冯友亮 刘世海 王新生 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 2012年第10期920-924,共5页
目的:通过观察不同温度对原代大鼠睾丸支持细胞增殖作用与紧密连接蛋白occludin(OCLN)表达的影响,探讨温度因素在男性生殖功能降低或男性不育中的作用机制。方法:体外分离培养雄性Wistar大鼠睾丸支持细胞(Sertoli cell,SC),油红O染色及... 目的:通过观察不同温度对原代大鼠睾丸支持细胞增殖作用与紧密连接蛋白occludin(OCLN)表达的影响,探讨温度因素在男性生殖功能降低或男性不育中的作用机制。方法:体外分离培养雄性Wistar大鼠睾丸支持细胞(Sertoli cell,SC),油红O染色及免疫组化FasL鉴定。实验分为对照组(34℃)和实验组(35℃、36℃、37℃、38℃、39℃)。在相应的温度下培养4 d后,CCK-8法检测SC增殖作用,HE染色观察细胞形态及结构,Western印迹法和免疫荧光法检测OCLN表达水平。结果:体外培养SC的纯度为(96.20±1.95)%,CCK-8结果显示,细胞增殖活性在34~36℃时逐渐增强,36~39℃时逐渐降低,并在镜下观察发现细胞核固缩、裂解明显;免疫荧光及Western印迹显示,36℃时OCLN表达量最高;高于36℃时,OCLN表达量随着温度的增加而降低(P<0.01)。结论:温度升高(>36℃)抑制SC的增殖活性,并降低SC紧密连接蛋白的表达量。因此,高温对SC活性和紧密连接完整性的影响,可能是导致男性生育能力下降或不育的机制之一。 展开更多
关键词 温度 支持细胞 紧密连接蛋白 精子发生 血-睾屏障
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微波辐射对大鼠睾丸闭锁蛋白和连接黏附分子-1表达的影响 被引量:6
11
作者 高晓芳 王水明 +5 位作者 彭瑞云 左红艳 王丽峰 高亚兵 董霁 苏镇涛 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期10-13,共4页
目的:探讨微波辐射后大鼠血睾屏障紧密连接闭锁蛋白(occludin)及连接黏附分子-1(JAM-1)表达的改变及意义。方法:80只雄性Wistar大鼠经平均功率密度为0、10、30、100mW/cm2微波辐射5min,于辐射后6h,1、3、7、14d,采用Western印迹和图像... 目的:探讨微波辐射后大鼠血睾屏障紧密连接闭锁蛋白(occludin)及连接黏附分子-1(JAM-1)表达的改变及意义。方法:80只雄性Wistar大鼠经平均功率密度为0、10、30、100mW/cm2微波辐射5min,于辐射后6h,1、3、7、14d,采用Western印迹和图像分析技术检测闭锁蛋白和JAM-1蛋白表达的动态变化。结果:10、30和100mW/cm2微波辐射后分别在3~7d、6h~7d和6h~14d闭锁蛋白表达明显下调(P<0.05),而JAM-1蛋白分别于辐射后3~7d、1~7d和1~14d表达亦明显下调(P<0.05)。结论:闭锁蛋白及JAM-1蛋白表达减少可能在微波辐射致血睾屏障损伤中发挥重要作用。 展开更多
关键词 微波辐射 血睾屏障 闭锁蛋白 连接黏附分子-1 大鼠
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血睾屏障开放调节机制研究进展 被引量:10
12
作者 袁小丽 白汝岚 +1 位作者 刘姗姗 张家骅 《动物医学进展》 CSCD 2006年第12期31-34,共4页
血睾屏障是生精上皮中以支持细胞间的紧密连接为基础形成的结构,具有形成稳定的微环境和独特的免疫屏障,有序的开放机制保证了精子发生的顺利完成等功能。血睾屏障有序的开放是精子生成的保证,Oc-cludins,Claudins和JAMs这三种膜蛋白在... 血睾屏障是生精上皮中以支持细胞间的紧密连接为基础形成的结构,具有形成稳定的微环境和独特的免疫屏障,有序的开放机制保证了精子发生的顺利完成等功能。血睾屏障有序的开放是精子生成的保证,Oc-cludins,Claudins和JAMs这三种膜蛋白在调节血睾屏障的有序开放中发挥了重要作用,体内许多细胞因子和激素,如NO,TGF-β和TNF-α就是通过调节这几种蛋白的水平来调控血睾屏障的开放。尽管对血睾屏障的开放机制有了一定的认识,但目前还缺乏合适的体外模型,建立一种合适的体外模型是目前急需解决的问题。 展开更多
关键词 紧密连接 血睾屏障 一氧化氮 转化生长因子 肿瘤坏死因子
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双酚A的毒性作用机制 被引量:8
13
作者 纪红蕊 陈家驹 +3 位作者 张茜 邹凤娟 李芬 刘波 《沈阳工业大学学报》 EI CAS 北大核心 2015年第6期710-715,共6页
针对环境污染日益严重的现状,探讨了双酚A(BPA)对小鼠的肝脏毒性和生殖毒性的作用机制.对血浆和肝脏中的关键酶与精子畸形率进行了检测,并利用紫外可见分光光度计观察了肝脏和睾丸的病理改变.结果表明,BPA可以显著升高谷丙转氨酶(GPT)... 针对环境污染日益严重的现状,探讨了双酚A(BPA)对小鼠的肝脏毒性和生殖毒性的作用机制.对血浆和肝脏中的关键酶与精子畸形率进行了检测,并利用紫外可见分光光度计观察了肝脏和睾丸的病理改变.结果表明,BPA可以显著升高谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)、碱性磷酸酶(AKP)和谷胱甘肽S转移酶(GST)的活力、丙二醛(MDA)和一氧化氮(NO)的含量以及精子畸形率.BPA可以显著降低超氧化物歧化酶(SOD)的活力,并改变了肝脏和睾丸组织的正常形态.BPA不仅可以对肝脏造成损伤,还可以透过血睾屏障损害睾丸的支持细胞和间质细胞,从而干扰精子的生长、发育和能量代谢过程,进而对生殖系统造成损伤. 展开更多
关键词 双酚A 肝脏毒性 生殖毒性 脂质过氧化损伤 血睾屏障 精子活力 精子畸形率 病理改变
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邻苯二甲酸二丁酯的毒性作用及机制 被引量:15
14
作者 纪红蕊 杜霞 +1 位作者 宋永彬 刘欣 《沈阳工业大学学报》 EI CAS 北大核心 2017年第2期230-235,共6页
针对环境污染日益严重的现状,探讨了邻苯二甲酸二丁酯(DBP)的肝脏与生殖毒性作用.检测了血浆和肝脏中的关键酶、精子活动力与畸形率,观察了肝脏和睾丸的病理改变.结果表明,DBP可以显著升高谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)、碱性磷酸酶... 针对环境污染日益严重的现状,探讨了邻苯二甲酸二丁酯(DBP)的肝脏与生殖毒性作用.检测了血浆和肝脏中的关键酶、精子活动力与畸形率,观察了肝脏和睾丸的病理改变.结果表明,DBP可以显著升高谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)、碱性磷酸酶(AKP)和丙二醛(MDA),显著降低超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT),表明DBP会诱发小鼠肝脏发生脂质过氧化过程,引起早期的肝脏损伤.DBP能够穿透血-睾屏障,干扰精子的生长和发育过程.因此,DBP是一种对雄性生殖细胞具有潜在诱变危害的遗传毒性化合物. 展开更多
关键词 邻苯二甲酸二丁酯 肝脏毒性 生殖毒性 脂质过氧化损伤 血-睾屏障 精子活力 精子畸形率 病理改变
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睾酮通过抑制Rab13表达影响支持细胞屏障通透性 被引量:2
15
作者 宿文辉 孟晓娜 贾晓宇 《生命科学研究》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期500-504,共5页
探讨Rab13 GTPase对血睾屏障(blood testis barrier,BTB)通透性的调节机制。体外分离培养20 d龄大鼠睾丸支持细胞,睾酮处理后测定跨上皮电阻(transepithelial electrical resistance,TER),FITC-鬼笔环肽染色分析F-actin分布,并采用West... 探讨Rab13 GTPase对血睾屏障(blood testis barrier,BTB)通透性的调节机制。体外分离培养20 d龄大鼠睾丸支持细胞,睾酮处理后测定跨上皮电阻(transepithelial electrical resistance,TER),FITC-鬼笔环肽染色分析F-actin分布,并采用Western印迹检测Rab13在睾酮处理前后的表达变化;si RNA干扰培养支持细胞中Rab13的表达,Western印迹检测沉默效果并检测连接蛋白表达变化;TER测定Rab13沉默前后上皮屏障功能改变,F-actin染色分析Rab13沉默对肌动蛋白丝分布的影响。结果显示,睾酮处理可使体外支持细胞屏障TER值升高,F-actin在膜下聚集增强,且Rab13在睾酮处理后表达量明显降低;Rab13 si RNA处理不影响连接蛋白质的表达,但可引起F-actin在细胞连接处的分布增强,导致体外BTB屏障功能增强。表明Rab13可通过调节F-actin的排布影响体外BTB通透性。 展开更多
关键词 血睾屏障 支持细胞 Rab13 肌动蛋白丝
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邻苯二甲酸二-(2-乙基己)酯对血睾屏障完整性的损伤及机制 被引量:4
16
作者 沈炼桔 唐向亮 +9 位作者 龙春兰 曹希宁 魏仪 王养才 孙茫 周玥 刘洋 刘博 黄方圆 魏光辉 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期1178-1182,共5页
目的探讨邻苯二甲酸二-(2-乙基己)酯(DEHP)破坏睾丸血睾屏障完整性的机制研究。方法将出生后60 d的SD雄鼠随机分为两组,即玉米油对照组和DEHP暴露组,DEHP的用药剂量为750 mg/kg,采用灌胃的方式给药,每天1次,连续处理30 d,并于最后1次处... 目的探讨邻苯二甲酸二-(2-乙基己)酯(DEHP)破坏睾丸血睾屏障完整性的机制研究。方法将出生后60 d的SD雄鼠随机分为两组,即玉米油对照组和DEHP暴露组,DEHP的用药剂量为750 mg/kg,采用灌胃的方式给药,每天1次,连续处理30 d,并于最后1次处理后麻醉处死。HE染色观察睾丸的组织病理学改变情况;Western blot检测睾丸组织中构成血睾屏障的关键连接蛋白N-cadherin、β-catenin、occludin和connexin43(Cx43)的膜蛋白表达水平;MTT检测睾丸支持细胞(Sertoli cell)的活力,活性氧检测试剂盒检测细胞中活性氧(Reactive oxygen species,ROS)生成水平;Western blot检测抗氧化应激蛋白Nrf2以及p-p38的蛋白表达水平。结果与对照组相比,DEHP暴露后的睾丸曲细精管结构紊乱,管腔中可见圆形的精子细胞,精子排列失去极性;Western blot结果表明occludin和connexin43的表达明显降低,N-cadherin和β-catenin表达明显升高(P<0.05);Sertoli细胞随着DEHP暴露浓度的增加,活力显著降低,ROS生成水平明显增加,Nrf2和p-p38的蛋白表达明显增高(P<0.05)。结论 DEHP暴露可通过氧化应激激活p38 MAPK信号通路,破坏血睾屏障完整性,并最终损伤生精功能。 展开更多
关键词 血睾屏障 氧化应激损伤 P38 邻苯二甲酸二-(2-乙基己)酯
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胶质瘤血瘤屏障体外模型的形态学观察 被引量:2
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作者 林志雄 黄强 +2 位作者 杨丽娟 陈振斌 林建华 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期257-261,共5页
目的 探讨胶质瘤血瘤屏障体外模型的形态学特征。 方法 利用电镜技术观察血管内皮细胞ECV30 4 和C6 胶质瘤细胞共培养 (混合共培养、Transwell共培养、Transwell膜两面共培养 )后的内皮细胞的孔窗、内皮细胞之间的连接及内皮细胞与... 目的 探讨胶质瘤血瘤屏障体外模型的形态学特征。 方法 利用电镜技术观察血管内皮细胞ECV30 4 和C6 胶质瘤细胞共培养 (混合共培养、Transwell共培养、Transwell膜两面共培养 )后的内皮细胞的孔窗、内皮细胞之间的连接及内皮细胞与肿瘤细胞的相互关系、瘤细胞的“血管周足”等的形态学特征 ;并与 4例人脑胶质瘤组织标本的血瘤屏障进行比较。 结果 电镜下发现ECV30 4 细胞经与C6 细胞按 3种不同方式共培养汇合后均为无孔窗型内皮细胞 ,细胞间出现紧密连接 ;Transwell共培养的膜上C6 细胞未见伸出伪足突向膜的微孔 ;经膜两面共培养的瘤细胞则可通过Transwell的微孔突向内皮细胞侧 ,但瘤细胞未伸出伪足包绕内皮细胞或突入内皮细胞间隙 ,瘤细胞的“血管周足”不完整 ,后两者与脑胶质瘤组织标本的血瘤屏障的形态特征相类似。 结论 在体外经Transwell膜两面共培养的ECV30 4 和C6 胶质瘤细胞的系统可在一定程度模拟体内的血瘤屏障的形态学特征。 展开更多
关键词 胶质瘤 血管内皮细胞 血瘤屏障 电子显微镜 人脐静脉内皮细胞 大鼠胶质瘤细胞
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小鼠睾丸中细胞连接相关蛋白质的分析 被引量:4
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作者 付俊 罗艳云 +1 位作者 缪时英 王琳芳 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期205-209,共5页
目的探讨细胞连接相关蛋白在不同发育阶段小鼠睾丸中的表达模式。方法 Western blot检测并分析1~6周龄小鼠睾丸、原代支持细胞以及小鼠精原细胞系GC1 spg、精母细胞系GC2 spg、间质细胞系TM3、支持细胞系TM4等4种生殖相关细胞系中细胞... 目的探讨细胞连接相关蛋白在不同发育阶段小鼠睾丸中的表达模式。方法 Western blot检测并分析1~6周龄小鼠睾丸、原代支持细胞以及小鼠精原细胞系GC1 spg、精母细胞系GC2 spg、间质细胞系TM3、支持细胞系TM4等4种生殖相关细胞系中细胞连接相关蛋白的表达水平。结果小鼠睾丸曲细精管中支持细胞间细胞连接相关膜蛋白连接黏附分子A、紧密连接蛋白Occludin和Claudin,以及支持细胞-生精细胞间细胞连接相关膜蛋白连接黏附分子C、连接蛋白Nectin-3和钙黏附蛋白E的表达表现出明显的阶段特异性。而参与细胞连接的调节蛋白紧密连接蛋白ZO-1、ZO-2、Afadin、β链蛋白和CD2相关蛋白在睾丸的不同发育阶段以及生殖细胞系中表达无差异。结论小鼠睾丸曲细精管中支持细胞间以及支持细胞-生精细胞间细胞连接相关的膜蛋白多表现出明显的阶段特异性。而参与细胞连接的调节蛋白在睾丸的不同发育阶段中表达无差异。 展开更多
关键词 血睾屏障 支持细胞间连接 支持细胞-生精细胞间连接 膜蛋白 调节蛋白
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电磁脉冲辐照对小鼠血-睾屏障早期影响及TGFβ3表达意义 被引量:6
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作者 彭页 程义成 +3 位作者 梅盛林 张远强 张金山 侯武刚 《中国体视学与图像分析》 2007年第1期11-15,共5页
目的探讨电磁脉冲(EMP)辐射后小鼠血-睾屏障的结构和通透性早期损伤及TGFβ3在其中的作用。方法常规HE染色和硝酸镧示踪电镜技术观察400kV/m电磁脉冲辐射后2~48h内小鼠睾丸血-睾屏障结构和通透性的动态改变;免疫组织化学染色和图... 目的探讨电磁脉冲(EMP)辐射后小鼠血-睾屏障的结构和通透性早期损伤及TGFβ3在其中的作用。方法常规HE染色和硝酸镧示踪电镜技术观察400kV/m电磁脉冲辐射后2~48h内小鼠睾丸血-睾屏障结构和通透性的动态改变;免疫组织化学染色和图像分析技术检测TGFβ3在不同时间的表达规律。结果400kV/m电磁脉冲辐射后48h内生精细胞变性、凋亡与坏死逐渐增多,支持细胞及其紧密连接发生形态变化,血-睾屏障结构损伤,各时间点TGFβ3表达强度(灰度值)持续性显著增强(均P〈0.05),提示其通透性明显升高,于辐照后2h即见发生。上述血-睾屏障的结构和通透性变化的时间和程度具有一致性。结论EMP辐射后早期小鼠血-睾屏障的结构和通透性迅速发生损伤,TGFβ3可能在其损伤中发挥重要作用。 展开更多
关键词 电磁脉冲 辐射 硝酸镧 睾丸 TGFΒ3
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4G手机射频电磁辐射阴囊暴露对成年大鼠生精能力和血-睾屏障的影响 被引量:4
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作者 程庆 禹刚 +1 位作者 王刚 白志明 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第8期680-684,共5页
目的:探讨4G手机射频电磁辐射阴囊暴露对成年大鼠睾丸的直接影响。方法:30只SD大鼠随机分为对照组及暴露组,建立阴囊局部暴露模型,暴露组接受6 h/d的辐射,共150 d。分析精液质量和生精上皮变化;检测抗氧化酶-过氧化物水平及血-睾屏障蛋... 目的:探讨4G手机射频电磁辐射阴囊暴露对成年大鼠睾丸的直接影响。方法:30只SD大鼠随机分为对照组及暴露组,建立阴囊局部暴露模型,暴露组接受6 h/d的辐射,共150 d。分析精液质量和生精上皮变化;检测抗氧化酶-过氧化物水平及血-睾屏障蛋白的表达。结果:与对照组相比,暴露组精子浓度(6.39±0.82 vs 4.74±0.87)(×10^(7)/ml)、活率(62.11±8.82 vs 41.44±7.33)(%)、总活力(55.71±7.39 vs 36.22±6.36)(%)及正常形态精子百分率(84.89±5.11 vs 70.78±8.11)(%)明显降低(P<0.05);暴露组Johnsen评分明显减低(8.38±0.98 vs 6.11±1.56,P<0.05),Coentino评分明显增高(1.36±0.21 vs 1.81±0.34,P<0.05);暴露组MDA水平明显上升(P<0.05),SOD、GSH及CAT水平明显下降(P<0.05);暴露组Occludin、ZO-1、CAR及N-Cadherin水平显著降低(P<0.05)。结论:4G手机射频电磁辐射阴囊局部暴露可直接导致成年睾丸损伤、血-睾屏障紊乱及精子质量下降,造成大鼠生育力下降。 展开更多
关键词 4G手机 射频电磁辐射 精液质量 血睾屏障
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