多功能阳离子脂质体跨血脊髓屏障的实验研究

目的探讨异硫氰酸荧光素（FITC）标记阳离子脂质体通过尾静脉注入后,跨越大鼠血脊髓屏障并在局部聚集的情况。方法 30只成年Wistar大鼠随机等分为3组,每组10只,荧光显微镜动态观察脂质体在中枢神经系统（CNS）中靶向聚集与扩散情况,通过组织学观测进一步分析其与CNS细胞的关系。结果相同浓度下（75-600μg/m L）,TAT-PEG-阳离子脂质体较未经TAT修饰者具更低细胞毒性,且更易被MCF-7细胞摄取;FITC标记TAT-PEG-阳离子脂质体可跨越BSCB并聚集,低倍镜下观察到许多荧光微粒聚集于CNS组织,高倍镜形象地显示出荧光微粒位于神经细胞内。结论经跨膜肽（TAT）、聚乙二醇（PEG）修饰的阳离子脂质体具有良好的生物相容性与靶向定位特性,可跨过BSCB,聚集于CNS细胞中,安全用作药物载体,为中枢神经系统疾病的治疗提供新的途径。

利用外源性IgG显示大鼠脊髓撞击伤后血-脊髓屏障变化

血-脑(脊髓)屏障损伤范围的观察方法多为注射外源性示踪剂,我们曾在大鼠实验中采用内源性血浆IgG作为示踪剂,取得很好的效果。本研究在大鼠脊髓撞击伤模型中以静脉注射的兔IgG为外源性示踪剂,用免疫荧光双标显示并比较了大鼠与兔两种IgG在脊髓内的分布。用图像阈值分割技术处理图像后,分析了损伤后不同时间点(0h,1d,3d,5d,7d,14d)两者的异同,发现在血-脊髓屏障已恢复的部位仍有残留的内源性IgG,而外源性IgG可精确地反映注射当时血-脊髓屏障的改变。这种方法可有效地用于诸如不同药物保护血-脑屏障的时程研究。

糖尿病介导的周细胞损伤对脊髓损伤后血脊屏障破坏的作用

糖尿病是一种常见的慢性代谢异常性疾病,可通过血糖异常诱导体内内环境紊乱,引起一系列急性或慢性并发症。慢性高血糖可引起大血管和微血管病变,该过程由错综复杂的分子机制协同调控,例如炎症反应、细胞内应激作用、细胞焦亡和细胞铁死亡等。糖尿病可抑制脊髓损伤后血脊屏障修复,加重神经功能损伤,从而不利于运动功能恢复。周细胞是神经血管单元的重要组成部分,参与调控血管再生、毛细血管血流量以及血脊屏障渗透性。脊髓损伤后,血脊屏障遭到破坏,周细胞覆盖率显著降低,血管正常功能受到巨大影响。糖尿病不仅参与调控周细胞的收缩表型和信号传导,而且改变周细胞分泌基因组谱,影响周细胞正常功能。此外,有研究证实,糖尿病促进脊髓损伤后周细胞丢失。本综述系统阐述了糖尿病对血管系统中周细胞的调控作用,及其介导的周细胞损伤对脊髓损伤后血脊屏障修复影响的研究进展。

活血通督汤对大鼠脊髓损伤后血-脊髓屏障的修复作用

目的:通过对大鼠脊髓损伤(SCI)后的行为学评分、脊髓组织病理分析以及血-脊髓屏障(BSCB)功能的评测,观察活血通督汤对大鼠SCI后BSCB的影响。方法:将24只雌性SD大鼠随机均分为假手术组、模型组及活血通督汤组,每组8只。假手术组仅咬除椎板不损伤脊髓,模型组和活血通督汤组采用改良Allen’s法建立SCI模型。分别于第1、3、5、7天行BBB评分,7 d后取材。采用HE染色观察大鼠脊髓组织受损程度,尼氏染色观察神经元形态,透射电镜观察BSCB紧密连接超微结构,EB染色检测BSCB通透性。结果:与假手术组比较,模型组和活血通督汤组相同时点BBB评分显著降低(P<0.01),在干预第7天时,活血通督汤组大鼠BBB评分显著高于模型组(P<0.05)。HE染色结果显示:与模型组比较,活血通督汤组炎症细胞浸润有所减少,神经细胞形态结构较完整且数量增多,但仍存在脊髓空洞样病变;尼氏染色结果显示:与模型组比较,活血通督汤组神经细胞形态较好且数量增多,尼氏体数量较多,空泡样改变减少,瘀血面积较小或消失;透射电镜结果显示:与模型组比较,活血通督汤组大鼠脊髓血管内皮细胞紧密连接较完整,血管管腔连续性好。激光共聚焦定性观察显示:模型组血管周围组织EB渗出明显,弥散范围较大,且固有的血管形态被弥散渗出的EB所遮盖,混为一片,较难分辨。活血通督汤组较模型组EB渗出减少,灰质区血管形态也更清晰,甚至可见少量条管状血管形态;与模型组比较,活血通督汤组脊髓组织EB含量显著降低(P<0.01),与镜下观察结果一致。结论:活血通督汤可促进血管内皮细胞间紧密连接的修复,降低BSCB的通透性,抑制血管中的炎症因子和趋化因子进入脊髓组织,为脊髓微环境的稳态提供有效保护,有利于大鼠SCI后神经细胞的再生以及运动功能的恢复。

基于督脉枢机不利探讨脊髓损伤与血脊髓屏障

长期以来,脊髓损伤(SCI)的治疗主要以受损节段的修复与功能重建为主,但疗效差强人意。文章从督脉与脊髓的关系、SCI与督脉枢机不利、血脊髓屏障(BSCB)二者间的联系入手,探讨督脉枢机不利与SCI、BSCB的相关性,以期将中医药治疗督脉枢机不利作为提升SCI疗效的突破口。笔者发现,作为SCI的治疗关键之一的BSCB,其病变的相关细胞因子与督脉枢机不利密切相关,为未来SCI的研究方向提供了理论基础。