RalB在多种肿瘤细胞中的表达及意义

目的探讨RalB(v-ral simian leukemia viral oncogene homolog B,ras related;GTP binding protein)蛋白在多种肿瘤细胞中的表达及意义。方法以人胚肾293T细胞为正常细胞对照,选用8种不同组织的肿瘤细胞,采用抗RalB的单克隆抗体通过Western blot方法检测其RalB蛋白的表达。结果RalB在293T细胞中表达明显降低,在乳腺癌细胞株MCF-7、卵巢癌细胞株HO8910、宫颈癌细胞株Hela、肺癌细胞株、结肠癌细胞株LOVO、SW480中均有表达,其中RalB蛋白在结肠癌细胞株SW480中表达明显增高。结论RalB可能以组织特异性的方式在不同肿瘤细胞中表达。

醒脑开窍液对大鼠脑缺血再灌注损伤脑组织VEGF、HIF-1α表达影响随机平行对照研究

[目的]观察醒脑开窍液对大鼠脑缺血再灌注损伤脑组织VEGF、HIF-1α表达影响。[方法]使用随机平行对照方法,将45只健康清洁级SD大鼠（体重210-230g,平均体重210±20g,鼠龄4-5周）,采用Zea longa大脑中动脉内栓线阻断方法复制脑缺血再灌注损伤模型。造模成功45只大鼠按随机数字表分为三组,15只/组,模型组、尼莫地平组、醒脑开窍液组,分别灌胃干预（剂量1m L/100g体重,模型组等量生理盐水）。连续干预7天。采用改良Bederson’s评分法,观察大鼠神经行为学改变。实时定量PCR方法检测VEGF与HIF-1αm RNA表达,Western blot方法检测蛋白表达。[结果]VEGF m RNA尼莫地平组、醒脑开窍液组3d高于模型组（P〈0.05）,不同时间（1d、3d、7d）醒脑开窍液组均与尼莫地平组无显著性差异（P〉0.05）;HIF-1αm RNA表达醒脑开窍液组7d高于模型组（P〈0.05）,不同时间（1d、3d、7d）醒脑开窍液组均与尼莫地平组无显著性差异（P〉0.05）。[结论]醒脑开窍液、尼莫地平均可提升大鼠脑缺血再灌注损伤脑组织VEGF、HIF-1α表达,干预时间越长,提升幅度越大,具有时效关系。

经HIF-1α与EGFP双基因重组腺病毒转染大鼠心肌干细胞后HIF-1α基因的表达

常规经基因修饰腺病毒转染细胞后,即进行细胞的移植,并不对病毒转染效果进行检验。本研究采用HIF-1α与EGFP双基因重组腺病毒转染大鼠心肌干细胞,察看基因重组腺病毒是否能够转染心肌干细胞内;研究经HIF-1α与EGFP(enhanced green fluorescence protein,EGFP)双基因重组腺病毒转染心肌干细胞后HIF-1α基因的表达情况。在荧光显微镜下,去察看病毒转染细胞的情况,确定病毒最适MOI值;采用实时定量PCR(real-time quantitative PCR,RT-qPCR)评价HIF-1α基因表达变化;应用Western blotting方法检测HIF-1α蛋白表达变化,进而获得良好的实验结果。