家蚕bmo-miR-217对核型多角体病毒(BmNPV)lef-1基因表达的调控作用

昆虫的单链小分子RNA(microRNAs)不仅通过与自身的靶基因互补进行转录后水平调控,从而参与重要的生命过程,并且还可以与病原体靶基因相互作用,在免疫防御方面发挥重要功能。给家蚕5龄眠起幼虫接种家蚕核型多角体病毒(Bm NPV)后72 h,收集蚕体血淋巴提取总RNA用于高通量测序,经克隆验证获得一条由Bm NPV诱导上调表达的家蚕miRNA(bmo-miR-217),用生物信息学方法预测到bmo-miR-217对应的一个病毒靶基因为lef-1。构建bmo-miR-217及Bm NPV lef-1 3'-UTR的表达载体,并共转染家蚕卵巢培养细胞Bm N,于48 h后通过检测细胞的双荧光素酶相对活性,显示出bmo-miR-217可显著下调Bm NPV lef-1基因的表达(P<0.05)。已知lef-1是Bm NPV侵染复制的必需基因之一,因此抑制其表达是家蚕先天免疫的一种有效策略。

miR-217靶向调控ERK2表达对非小细胞肺癌细胞活性和免疫逃逸的影响及机制研究

目的:研究miR-217靶向调控细胞外信号调节激酶2(ERK2)表达对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞活性和免疫逃逸的影响及作用机制。方法:qRT-PCR检测miR-217与ERK2 mRNA在NSCLC组织、癌旁组织及HLF-1、A549、HCC827细胞株中的表达量,分析不同miR-217表达量NSCLC患者的预后生存状态。使用生物信息学、双荧光素酶基因报告实验分析miR-217与ERK2的靶向关系。培养NSCLC A549细胞,分为NC组、miR-217 inhibitor组、miR-217 mimic组、miR-217 mimic+ERK2NC组、miR-217 mimic+ERK2组,除NC组不做任何处理外,其余各组均转染对应质粒,分析各组A549细胞增殖活性、免疫逃逸状况,并明确作用机制。结果:与癌旁组织比较,NSCLC组织miR-217表达量降低,ERK2 mRNA表达量升高(P<0.05)。与肺成纤维细胞HLF-1细胞株比较,NSCLC细胞A549、HCC827细胞株miR-217表达量降低,ERK2 mRNA表达量升高(P<0.05)。基于Kaplan-Meier Plotter数据库分析miR-217与NSCLC患者预后的关系,结果表明miR-217低表达与患者预后不良有关(HR=0.90,P=0.033)。双荧光素报告基因显示miR-217与ERK2之间的3'UTR区域间存在匹配序列,miR-217 mimic片段可抑制ERK2-WT信号,但对ERK2-MUT无影响。与NC组比较,miR-217 inhibitor组细胞增殖活性、PD-L1、PD-L2 mRNA表达量升高,CD8+T细胞活力降低,miR-217 mimic组细胞增殖活性、PD-L1、PD-L2 mRNA表达量降低,CD8+T细胞活力升高(P<0.05)。与miR-217 mimic组比较,miR-217 mimic+ERK2 NC组细胞增殖活性、CD8+T细胞活力、PD-L1、PD-L2 mRNA表达量无明显改变(P>0.05),miR-217 mimic+ERK2组细胞增殖活性、PD-L1、PD-L2 mRNA表达量升高,CD8+T细胞活力降低(P<0.05)。结论:miR-217过表达可降低NSCLC细胞A549活性,抑制PD-L1表达,激活肿瘤微环境中的CD8+T细胞,进而抑制免疫逃逸,其可能通过靶向调控ERK2发挥作用。

高产优质高抗玉米杂交种丹玉217的选育及栽培技术

丹玉217是丹东农业科学院以玉米自育自交系M5R3为母本,以自育自交系F902为父本杂交组配而成的玉米杂交种,该杂交种具有高产、优质、抗倒伏、抗叶斑病和适应性广等特点,适宜在东华北春播玉米区种植,适宜种植密度为4000~4500株/亩。2020年通过国家东华北春玉米区审定。本文作者简要介绍了该品种的来源及选育经过、特征特性、产量表现,并对其栽培技术和制种技术进行了阐述,以期为该品种在适宜地区的推广提供理论支持。

miR-217靶向FOXO3影响非小细胞肺癌对吉非替尼耐药性及相关机制

目的检测miR-217对非小细胞肺癌吉非替尼耐药性的影响,并探讨下游靶基因及相关通路。方法qRT-PCR检测人肺正常上皮细胞系BEAS-2B,NSCLC细胞系A549、HCC827、PC9、NCI-H1975及吉非替尼耐药株PC9/GR中miR-217表达量。选取PC9/GR细胞,利用转染技术构建control组、NC-mimic组、miR-217 mimic组、miR-217 mimic+si-NC组、miR-217 mimic+si-FOXO3组细胞,CCK8及克隆形成实验检测细胞增殖能力、流式细胞仪检测细胞凋亡能力,Western blot检测PI3K/AKT信号通路蛋白表达。Targetscan生物信息学网站预测miR-217下游靶基因,双荧光素酶实验检测miR-217与靶基因FOXO3相关性。结果与BEAS-2B相比,miR-217表达量在A549、HCC827、PC9、NCI-H1975细胞中显著降低(P<0.05),随着吉非替尼培养浓度增加,PC9细胞中miR-217基因表达量逐渐降低(P<0.05),并且miR-217在PC9/GR细胞中的表达低于PC9(P<0.05)。相较于control及NC-mimic组,miR-217 mimic组细胞增殖能力明显降低(P<0.05),细胞凋亡数量增多(P<0.05),p-PI3K和p-AKT蛋白表达量降低(P<0.05)。双荧光素酶报告表明FOXO3是miR-217的靶标。回复实验测得,与miR-217 mimic组及miR-217 mimic+si-NC组相比,miR-217 mimic+si-FOXO3组细胞耐药能力升高(P<0.05),增殖能力显著提升(P<0.05),细胞凋亡数量减少(P<0.05),p-PI3K和p-AKT蛋白表达量增高(P<0.05)。结论miR-217过表达逆转NSCLC细胞PC9/GR对吉非替尼的耐药性并抑制PC9/GR细胞增殖加速凋亡,这种机制可能与靶向FOXO3调控PI3K/AKT信号通路相关。

miR-10a-5p、miR-217-5p、miR-370-3p水平联合检测对急性髓系白血病患者复发的预测价值

目的探讨微小RNA-10a-5p(miR-10a-5p)、微小RNA-217-5p(miR-217-5p)、微小RNA-370-3p(miR-370-3p)水平联合检测对急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)患者复发的预测价值。方法 回顾性选取2021年6月至2022年12月西安国际医学中心医院收治的AML患者78例,纳入观察组,根据1∶1选例原则,另选取同期单纯贫血患者78例,纳入对照组。比较两组、不同疗效及不同复发情况患者骨髓细胞miR-10a-5p、miR-217-5p、miR-370-3p水平,分析各指标水平与疗效及复发的关系。结果 观察组miR-10a-5p水平高于对照组,miR-217-5p、miR-370-3p水平低于对照组(P<0.05);不同疗效患者miR-10a-5p水平比较:未缓解>部分缓解>完全缓解,miR-217-5p、miR-370-3p水平比较:未缓解<部分缓解<完全缓解(P<0.05);复发患者miR-10a-5p水平高于未复发患者,miR-217-5p、miR-370-3p水平低于未复发患者(P<0.05);AML患者miR-10a-5p水平与疗效及复发情况均呈正相关,miR-217-5p、miR-370-3p水平与疗效及复发情况均呈负相关,且联合预测AML患者复发AUC为0.913,约登指数为12.32,最佳诊断敏感度为84.21%,特异度为88.14%。结论 miR-10a-5p、miR-217-5p、miR-370-3p水平与AML患者疗效及复发均具有一定相关性,联合检测对复发具有一定预测价值,可作为临床评估疗效及复发情况的辅助指标。

miR-217靶向PI3K/Akt通路增强阿霉素对急性髓系白血病的敏感性

目的:探讨miR-217对急性髓系白血病细胞增殖及阿霉素敏感性的影响。方法:构建mimic NC和mi R-217 mimic载体转染至HL-60细胞中,q PCR检测转染效率。不同浓度的阿霉素处理细胞24和48 h,CCK-8法检测阿霉素化学敏感性并筛选阿霉素的最佳处理浓度和时间。将细胞分为对照、mimic NC、mi R-217 mimic、阿霉素和mi R-217 mimic+阿霉素共5组,流式细胞术检测细胞凋亡,qPCR检测miR-217、PI3K和Akt3的表达,Western blot检测PI3K/Akt通路蛋白PI3K、Akt3和凋亡蛋白Bcl-2、Bax的表达,双荧光素酶验证mi R-217和Akt3的关系。结果:mi R-217 mimic能够增强HL-60细胞对阿霉素的敏感性,阿霉素的最佳处理浓度和时间为160 ng/ml、48 h。与对照组相比,mi R-217 mimic组和阿霉素组细胞凋亡率、mi R-217和Bax蛋白水平显著升高(P<0.01),而Bcl-2蛋白和PI3K、Akt3 m RNA和蛋白水平显著降低(P<0.01);与阿霉素组相比,mi R-217 mimic+阿霉素组细胞凋亡率、mi R-217和Bax蛋白水平显著升高(P<0.01),Bcl-2蛋白和PI3K、Akt3 m RNA和蛋白水平显著降低(P<0.01)。双荧光素酶实验表明mi R-217与Akt3之间存在靶向调控关系。结论:mi R-217靶向Akt3调控PI3K/Akt通路,抑制细胞增殖,促进细胞凋亡并增强阿霉素对急性髓系白血病细胞的敏感性。

血清降钙素原联合miR-217对急性胰腺炎病情严重程度及预后的评估价值

目的探究血清降钙素原(PCT)和miR-217与急性胰腺炎(AP)病情严重程度的关系,并分析两者联合检测对AP预后的预测价值。方法选择2020年1月至2021年6月无锡市第五人民医院收治的147例AP患者作为研究对象,设为AP组。根据AP病情严重程度将患者分为轻度组(33例)、中度组(71例)和重度组(43例),另根据患者预后情况将其分为预后良好组(85例)和预后不良组(62例)。另选择同期于该院进行健康体检的147名志愿者设为健康组。采用ELISA法检测各组血清PCT表达水平。采用实时荧光定量PCR法检测各组血清miR-217表达水平。采用多因素logistic回归模型分析影响AP预后不良的危险因素。采用ROC曲线分析血清PCT和miR-217表达水平对AP预后不良的预测价值。结果与健康组相比,AP组的血清PCT、miR-217表达水平均显著升高,差异均有统计学意义(P均<0.05)。与轻度组相比,中度组、重度组的血清PCT、miR-217表达水平均显著升高(P均<0.05);与中度组相比,重度组的血清PCT、miR-217表达水平均显著升高(P均<0.05)。与预后良好组相比,预后不良组的血清PCT、miR-217表达水平均显著升高(P均<0.05)。多因素logistic回归模型分析结果显示,高脂血症、急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ(APACHEⅡ)评分、胰腺坏死范围、血尿素氮(BUN)、PCT和miR-217均是AP预后不良的独立危险因素(P均<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清PCT和miR-217联合检测预测AP患者发生预后不良的曲线下面积(AUC)为0.854,分别大于单项检测,且联合检测的敏感度最高。结论血清PCT和miR-217表达水平均与AP病情严重程度密切相关,两者联合检测对于AP预后不良具有较高的预测价值。

妊娠期糖尿病患者血清miR-217、DKK1水平对妊娠结局的预测价值探讨

目的探讨妊娠期糖尿病(GDM)患者血清微小RNA-217(miR-217)和分泌型蛋白Dickkopf-l(DKK1)水平与妊娠结局的关系及对妊娠结局的预测价值。方法选取2021年4月至2023年4月在大连市妇女儿童医疗中心进行定期产检并分娩的97例GDM患者作为GDM组,选取同期同院91例体检健康孕妇作为对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测miR-217表达水平,酶联免疫吸附试验(ELISA)法对DKK1水平进行检测。采用Logistic回归对影响GDM患者发生不良妊娠结局的独立危险因素进行分析,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析miR-217、DKK1水平对GDM患者发生不良妊娠结局的诊断价值。结果GDM组血清miR-217、DKK1水平均高于对照组(P<0.001)。GDM组发生妊娠不良结局的比例显著高于对照组(P<0.05)。与妊娠结局良好组相比,妊娠结局不良组miR-217、DKK1、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、空腹血糖、空腹胰岛素及糖化血红蛋白(HbAlc)水平均升高(P<0.05)。血清miR-217、DKK1是影响GDM患者发生不良妊娠结局的独立危险因素(P<0.05)。血清miR-217、DKK1及联合诊断GDM不良妊娠结局的ROC曲线下面积(AUC)分别为0.841、0.849、0.943,miR-217、DKK1联合诊断效能高于单独检测效能(P=0.027)。结论血清miR-217、DKK1水平的升高与GDM不良妊娠结局有关,且miR-217、DKK1及二者联合对GDM患者发生不良妊娠结局均具有预测价值。

circ_HIPK3靶向miR-381-3p/ZNF217轴调控Aβ诱导的海马神经元功能和形态

目的分析环状RNA同源结构域相互作用蛋白激酶3(circ_HIPK3)靶向miR-381-3p/锌指蛋白217 ZNF217)轴对β淀粉样蛋白(Aβ)诱导的海马神经元功能和形态的影响。方法制备新生大鼠海马神经元,分为对照组、Aβ组、si NC1组、si HIPK3组、si HIPK3+inhibitor NC组、si HIPK3+miR-381-3p inhibitor组、si HIPK3+miR-381-3p inhibitor+si NC2组、si HIPK3+miR-381-3p inhibitor+si ZNF217组,除对照组外其余组均通过40μmol/L Aβ1~42诱导。qRT-PCR法测定海马神经元circ_HIPK3、miR-381-3p、ZNF217 mRNA表达,透射电镜观察细胞形态,CCK-8法测定海马神经元存活率,Hochesst 33342法测定海马神经元凋亡,流式细胞仪检测海马神经元内Ca^(2+)荧光强度,Western blot法测定海马神经元磷酸化Tau蛋白(P-Tau)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、胱天蛋白酶-3(Caspase-3)、ZNF217蛋白表达,双萤光素酶报告基因分析miR-381-3p与circ_HIPK3、ZNF217靶向关系。结果对照组海马神经元结构正常,胞核形态正常,线粒体、内质网无病理改变;Aβ组海马神经元呈退行性改变,核形态异常,膜内陷,可见大量线粒体肿胀,胞浆内含大量脂滴空泡;与Aβ组相比,si HIPK3组海马神经元结构部分恢复;与si HIPK3组相比,si HIPK3+miR-381-3p inhibitor组海马神经元结构损伤严重;与si HIPK3+miR-381-3p inhibitor组相比,si HIPK3+miR-381-3p inhibitor+si ZNF217组海马神经元结构损伤减轻。与对照组相比,Aβ组海马神经元circ_HIPK3、ZNF217 mRNA和蛋白表达、凋亡率、Ca^(2+)荧光强度、P-Tau、Bax、Caspase-3蛋白表达升高,miR-381-3p表达、存活率、Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05);与Aβ组相比,si HIPK3组海马神经元circ_HIPK3、ZNF217 mRNA和蛋白表达、凋亡率、Ca^(2+)荧光强度、P-Tau、Bax、Caspase-3蛋白表达降低,miR-381-3p表达、存活率、Bcl-2蛋白表达升高(P<0.05);与si HIPK3组相比,si HIPK3+miR-381-3p inhibitor组海马神经元circ_HIPK3、ZNF217 mRNA和蛋白表达、凋亡率、Ca^(2+)荧光强度、P-Tau、Bax、Caspase-3蛋白表达升高,miR-381-3p水平、存活率、Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05);与si HIPK3+miR-381-3p inhibitor组相比,si HIPK3+miR-381-3p inhibitor+si ZNF217组海马神经元ZNF217 mRNA和蛋白表达水平、凋亡率、Ca^(2+)荧光强度、P-Tau、Bax、Caspase-3蛋白表达降低,存活率、Bcl-2蛋白表达升高(P<0.05);miR-381-3p与circ_HIPK3、ZNF217均靶向结合。结论circ_HIPK3沉默可能通过调控miR-381-3p/ZNF217轴改善Aβ诱导的海马神经元结构功能损伤。

miR-217靶向调控HMGA 2基因对内质网应激介导的口腔癌细胞自噬与凋亡的影响

目的探究微小RNA 217(miRNA-217)对口腔癌细胞中内质网应激介导的自噬与凋亡的影响及其分子机制。方法培养人口腔癌细胞和人正常口腔角质形成细胞,实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测细胞中miR-217与高迁移率族蛋白A2(HMGA2)表达水平;将人口腔癌细胞系SAS分为对照组、miR-NC组、miR-217 mimic组和miR-217 mimic+4-PBA组4组,脂质体法进行转染和内质网应激抑制剂4-苯丁酸处理后,流式细胞术检测细胞凋亡率,Hoechst33342染色观察细胞凋亡情况,细胞免疫荧光染色检测细胞中微管相关蛋白1轻链3(LC3)表达,蛋白质免疫印迹(Western Blot)测定细胞中自噬相关蛋白LC3I、LC3II及Beclin-1的表达水平,RT-qPCR和Western Blot测定细胞内质网应激相关分子CCAAT/增强予结合蛋白同源蛋白(CHOP)、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)及天冬氨酸蛋白水解酶-12(Caspase-12)的表达水平;双荧光素酶报告基因检测实验和Western Blot验证miR-217对HGMA2的靶向作用。结果与人正常口腔角质形成细胞HNOK比较,人口腔癌细胞HSC3、SAS、SCC15、FaDu中miR-217相对表达量下调而HMGA2相对表达量上调(P<0.05);与对照组比较,miR-217 mimic组SAS细胞凋亡率升高,有大量呈亮蓝色高荧光的凋亡细胞,LC3荧光强度升高,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值与Beclin-1蛋白相对表达量均上调,GRP78、CHOP、Caspase-12 mRNA相对表达量与蛋白相对表达量均上调(P<0.05);而与miR-217 mimic组比较,miR-217 mimic+4-PBA组SAS细胞凋亡率下降,呈亮蓝色高荧光的凋亡细胞明显减少,LC3荧光强度降低,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值与Beclin-1蛋白相对表达量均下调,GRP78、CHOP、Caspase-12 mRNA相对表达量与蛋白相对表达量也均下调(P<0.05);HMGA2与miR-217在特定区域存在碱基互补现象,且miR-217靶向负调控HGMA2表达。结论miR-217可能通过促进内质网应激途径诱导口腔癌细胞发生自噬与死亡,其机制可能与靶向负调控HMGA2表达相关。

circPLOD2调节miR-217/ANLN轴对结肠癌细胞增殖、凋亡和免疫逃逸的影响

目的:探讨circPLOD2对结肠癌细胞增殖、凋亡和免疫逃逸的影响以及对miR-217/ANLN轴的调节机制。方法:将HT-29细胞分为NC组、si-NC组、si-circPLOD2组、si-circPLOD2+anti-miR-NC组、si-circPLOD2+anti-miR-217组。qRT-PCR检测细胞中circPLOD2、miR-217、ANLN mRNA的表达;CCK-8法检测细胞增殖活性;流式细胞仪检测细胞凋亡;Western blot检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax及PD-L1的表达;ELISA检测免疫逃逸相关因子TNF-α、IL-2、IFN-γ的水平;双荧光素酶报告基因实验验证circPLOD2、miR-217、ANLN三者的靶向关系。结果:与si-NC组相比,si-circPLOD2组HT-29细胞中circPLOD2、ANLN水平、细胞增殖活性、Bcl-2、PD-L1表达降低(P<0.05),miR-217水平、细胞凋亡率、Bax表达以及TNF-α、IL-2、IFN-γ水平升高(P<0.05),且双荧光素酶基因报告实验验证了circPLOD2、ANLN与miR-217之间均存在靶向关系。结论:敲低circPLOD2能够上调miR-217表达,下调ANLN的表达,抑制CC细胞的增殖和免疫逃逸,促进细胞凋亡。

hsacircRNA0002141靶向miR-217影响口腔癌进展的分子机制研究

目的探讨人环状RNA(hsa_circRNA)0002141在口腔癌细胞生物学进展中的作用及其机制。方法应用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测人口腔鳞状细胞癌HSC3、SAS、SCC15、FaDu细胞与人正常口腔角质形成HNOK细胞中hsa_circ_0002141、miR-217的表达差异,生物信息学软件预测hsa_circ_0002141与miR-217的靶向结合位点,双荧光素酶报告基因检测细胞荧光素酶活性;将si_NC组、si_circ_0002141组、pc_NC组、pc_circ_0002141组、pc_circ_0002141+miR-NC组、pc_circ_0002141+miR-217 mimic组均根据脂质体法转染口腔癌细胞SAS,以正常培养的SAS细胞作为对照组,CCK-8法检测各组细胞增殖活性,EdU染色检测各组细胞增殖水平,Transwell实验测定各组细胞迁移与侵袭情况。结果与人正常口腔角质形成HNOK细胞比较,在人口腔鳞状细胞癌HSC3、SAS、SCC15、FaDu细胞中,hsa_circ_0002141表达显著上调,而miR-217表达显著下调(P<0.05)。hsa_circ_0002141与miR-217之间存在互补靶向结合位点,miR-217靶向负调控hsa_circ_0002141表达(P<0.05)。与对照组比较,si_circ_0002141组SAS细胞增殖活性下降,EdU阳性率降低,细胞迁移与细胞侵袭数目均减少(P<0.05);而pc_circ_0002141组细胞增殖活性上升,EdU阳性率升高,细胞迁移与细胞侵袭数目均增加(P<0.05)。与pc_circ_0002141组比较,pc_circ_0002141+miR-217 mimic组细胞增殖活性下降,EdU阳性率降低,细胞迁移与细胞侵袭数目均减少(P<0.05)。结论hsa_circ_0002141可调控SAS细胞的增殖、迁移及侵袭的生物学行为,该机制可能与其靶向miR-217有关。

锌指蛋白217在恶性肿瘤中的研究进展

近年来恶性肿瘤的发病率和死亡率逐渐增加,深入研究恶性肿瘤的发病机制对于早期诊断、治疗以及改善患者预后至关重要。锌指蛋白217是Kruppel样转录因子家族的成员,其在乳腺癌、卵巢癌、宫颈癌等多种恶性肿瘤中高表达,并被证实与肿瘤恶性增殖、侵袭迁移和化疗耐药密切相关。这些特性表明,锌指蛋白217有望成为恶性肿瘤早期诊断和评估预后的生物标志物和抗肿瘤治疗的分子靶点。本文就锌指蛋白217在恶性肿瘤中作用的相关研究进展进行综述。

LncRNA NORAD通过miR-199a-3p调控ZNF217对非小细胞肺癌细胞增殖、凋亡及化疗敏感性的影响

背景与目的针对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)的治疗和诊断仍然是医学界的难题,而探究NSCLC发生发展的分子机制是当前研究的热点。长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)NORAD在多种癌细胞中高表达,可能是促进NSCLC发生的分子靶点。探讨LncRNA NORAD通过miR-199a-3p调控锌指蛋白217(zinc finger protein 217,ZNF217)对NSCLC细胞增殖、凋亡及化疗敏感性的影响。方法实时定量聚合酶链式反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,qRT-PCR)法检测正常肺上皮细胞BEAS-2B、肺癌H460细胞和顺铂(Cisplatin,DDP)耐药细胞株H460/DDP细胞中NORAD、miR-199a-3p、ZNF217基因表达;将H460/DDP细胞分为control组、si-NC组、si-NORAD组、miR-NC组、miR-199a-3p mimic组、si-NORAD+inhibitor NC组、si-NORAD+miR-199a-3p inhibitor组。检测细胞增殖、细胞凋亡情况,各组细胞NORAD、miR-199a-3p、ZNF217基因表达,Ki-67、caspase-9、ZNF217蛋白表达量;验证miR-199a-3p与NORAD和ZNF217的关系。结果与BEAS-2B细胞相比,H460和H460/DDP细胞中NORAD、ZNF217 mRNA表达显著升高(P<0.05),miR-199a-3p表达显著降低(P<0.05)。与H460细胞相比,H460/DDP细胞中NORAD、ZNF217 mRNA表达显著升高(P<0.05),miR-199a-3p表达显著降低(P<0.05)。与control组和si-NC组相比,si-NORAD组H460/DDP细胞增殖率、NORAD、ZNF217 mRNA表达、Ki-67、ZNF217蛋白表达显著降低(P<0.05),凋亡率、miR-199a-3p表达、caspase-9表达显著升高(P<0.05)。与miR-NC组相比,miR-199a-3p mimic组H460/DDP细胞增殖率、NORAD、ZNF217 mRNA表达、Ki-67、ZNF217蛋白表达显著降低(P<0.05),凋亡率、miR-199a-3p、caspase-9表达显著升高(P<0.05)。与si-NORAD+inhibitor NC组相比,si-NORAD+miR-199a-3p inhibitor组H460/DDP细胞增殖率、ZNF217 mRNA表达、Ki-67、ZNF217蛋白表达显著升高,凋亡率、miR-199a-3p表达、caspase-9表达显著降低(P<0.05)。结论下调NORAD表达可增强miR-199a-3p表达并抑制ZNF217表达,进而抑制H460/DDP细胞增殖,促进其凋亡,增强其DDP化疗敏感性。

出血性脑卒中患者血清miR-217-5p表达及临床意义

目的探讨血清miR-217-5p在出血性脑卒中患者中的表达水平及其临床意义。方法选取2019年5月至2021年5月邯郸市第一医院收治的出血性脑卒中患者135例作为观察组,另选取同时期健康体检者127例为对照组。采用实时荧光定量聚合酶链式反应法检测所有受试者血清miR-217-5p表达水平并对比;根据美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分将观察组患者分为轻度、中度和重度,比较不同病情程度患者血清miR-217-5p表达水平;根据治疗后随访3个月的预后情况将观察组分为预后良好组和预后不良组,比较预后良好组和预后不良组血清miR-217-5p表达水平及一般资料;采用多因素Logistic回归分析法分析出血性脑卒中患者预后不良的影响因素,并绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-217-5p表达水平对出血性脑卒中患者预后情况的预测价值。结果观察组血清miR-217-5p表达水平低于对照组(t=37.182,P<0.05);观察组中度、重度患者血清miR-217-5p表达水平低于轻度者(P<0.05),重度者血清miR-217-5p表达水平低于中度者(P<0.05)。随访3个月,135例患者发生预后不良的有51例,发生率为37.78%;预后不良组血清miR-217-5p表达水平低于预后良好组(t=13.525,P<0.05);预后不良组年龄大于预后良好组(t=2.900,P<0.05),合并脑疝占比、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、C反应蛋白(CRP)、白细胞介素-6(IL-6)、NIHSS评分高于预后良好组(t=4.676、6.949、6.332、5.712、3.062、12.066,P<0.05),格拉斯哥昏迷指数(GCS)评分低于预后良好组(t=10.457,P<0.05)。经Logistic回归分析显示,年龄、合并脑疝、IL-1β、TNF-α、CRP、IL-6、NIHSS评分、GCS评分、miR-217-5p表达水平均是出血性脑卒中预后不良的影响因素(OR=5.073、3.009、5.801、5.392、5.223、5.109、7.294、7.621、0.685,P<0.05);ROC曲线结果显示,血清miR-217-5p表达水平预测出血性脑卒中患者预后不良的曲线下面积(AUC)、敏感度、特异度、阳性预测价值、阴性预测价值分别为0.832、86.27%、79.76%、72.13%、90.54%。结论出血性脑卒中患者血清miR-217-5p呈低表达,且该指标与预后密切相关,可作为预测出血性脑卒中患者预后的重要生化指标。

miR-217调节Runx2/OPN在钛颗粒诱导小鼠胫骨骨溶解中的作用

目的 探讨微RNA-217(miR-217)调节矮小相关转录因子2(Runx2)和骨桥蛋白(OPN)分子在小鼠胫骨假体周围骨溶解(PPOL)中的作用机制。方法 建立钛颗粒诱导的小鼠胫骨PPOL模型,外源性miR-217 mimics作用PPOL小鼠1~2周。采用micro-CT检测PPOL小鼠胫骨微结构(骨密度、骨矿物质含量及骨体积比)。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blotting检测小鼠胫骨PPOL骨组织内Runx2和OPN mRNA和蛋白表达情况。结果 去内毒素的钛颗粒成功诱导小鼠胫骨骨髓腔PPOL效应,外源性miR-217 mimics参与PPOL作用,在第1周和第2周时,PPOL小鼠胫骨的骨密度、骨矿物质含量及骨骼体积比均显著升高(P <0.05);miR-217 mimics可呈时间依赖性促进小鼠胫骨PPOL骨组织内Runx2和OPN mRNA和蛋白的表达(P <0.05)。结论 miR-217可促进PPOL小鼠胫骨骨组织内Runx2和OPN mRNA和蛋白表达,增加PPOL小鼠胫骨的骨密度及骨矿物质含量,改善PPOL小鼠的骨溶解病理效应。

SMI技术联合血清miR-217-5p诊断进展性缺血性脑卒中的研究

本研究考察超微血流成像(SMI)技术联合血清miR-217-5p诊断进展性缺血性脑卒中的价值。选择121例急性缺血性脑卒中患者作为研究对象,参照欧洲进展性卒中研究组相关诊断标准将患者分为非进展组(73例)和进展组(48例)。所有患者均进行SMI检查。另外,选择20例男性和10例女性健康体检者作为对照组。通过RT-qPCR检测受试者血清miR-217-5p水平。结果显示,进展组(50.00%)患者颈动脉重度狭窄率高于非进展组(20.55%),P<0.001。进展组患者的SMI分值高于非进展组(P<0.001)。与对照组相比,非进展组和进展组的血清miR-217-5p相对表达量均降低,且进展组低于非进展组(P<0.001)。血清miR-217-5p水平与狭窄程度负相关(r=-0.247,P=0.006),SMI分值与狭窄程度正相关(r=0.427,P<0.001)。血清miR-217-5p水平和SMI分值联合诊断进展性缺血性脑卒中的ROC曲线下面积(AUC)和特异性高于单独诊断。血清miR-217-5p联合SMI分值诊断进展性缺血性脑卒中的准确性高于两项指标的单独诊断。

幽门螺杆菌感染对老年胃癌病理组织miR-217表达水平的影响

目的探究幽门螺杆菌感染对老年胃癌病理组织miR-217表达水平的影响及预后情况。方法选取武警安徽省总队医院2019年2月~2020年2月收治的108例老年胃癌患者进行回顾性分析,据术后病理组织幽门螺杆菌检测结果分为阳性组(74例)及阴性组(34例)。采用qRT-PCR法检测miR-217表达水平,比较不同临床病理特征幽门螺杆菌阳性胃癌患者癌组织miR-217的表达水平,ROC曲线评估癌组织miR-217对幽门螺杆菌阳性胃癌患者预后的影响,比较miR-217不同表达水平与幽门螺杆菌阳性胃癌患者生存预后的关系。结果阳性组癌组织miR-217的表达水平高于阴性组,差异有统计学意义(P<0.05);肿瘤直径≥5 cm、分化程度为低中分化、TNM分期为Ⅲ~Ⅳ期、存在淋巴结转移的幽门螺杆菌阳性胃癌患者癌组织miR-217的表达水平较高(P<0.05)。癌组织miR-217预测预后的曲线下面积为0.712(95%CI:0.590~0.834,P=0.003),截断值为4.667,灵敏度为70.80%,特异度为62.00%。癌组织miR-217高表达者(miR-217>4.667)的死亡率高于miR-217低表达者(P<0.05)。结论幽门螺杆菌感染阳性胃癌患者癌组织的miR-217表达水平较高,与幽门螺杆菌感染阳性胃癌病理特征有关,同时癌组织miR-217对患者的预后具有预测价值。

基于生物信息学分析ZNF217在低级别胶质瘤中表达的临床意义

目的利用生物信息学分析ZNF217在低级别胶质瘤(LGG)中表达的临床意义。方法通过GEPIA、HPA、UALCAN、CGGA、TIMER2.0、cBioPortal和LinkedOmics等数据库对低级别胶质瘤患者ZNF217的差异表达、临床病理特征、预后价值、免疫细胞浸润、基因突变和启动子甲基化水平进行分析。结果LGG组织中ZNF217 mRNA和蛋白表达水平较正常组织上调(P<0.05),ZNF217 mRNA表达水平与患者的肿瘤分级、免疫细胞浸润及相关标志物呈正相关(P<0.05),与患者总生存期和无病生存期呈负相关(P<0.05)。ZNF217发生基因突变和启动子低甲基化(P<0.05),进而导致LGG患者预后不良(P<0.05)。结论ZNF217在LGG中表达上调,其高表达与LGG患者预后不良有关,ZNF217可能成为LGG预后生物标志物和潜在的治疗靶点。

沉默circRNA hsa_circ_0061137通过miR-217/ARL6IP1轴抑制宫颈癌细胞生长和转移

目的:探讨环状RNA(circular RNA,circRNA)hsa_circ_0061137对宫颈癌(cervical cancer,CC)生长转移的影响及其相关作用机制。方法:取CC组织样本(93例)及癌旁组织样本(93例),正常宫颈上皮细胞系(End1/E6E7)和CC细胞系(HeLa、SiHa、C-33A、CaSki),用qRT-PCR法检测组织和细胞中hsa_circ_0061137、miR-217、ARL6IP1的表达;双荧光素酶报告实验验证hsa_circ_0061137、ARL6IP1与miR-217的靶向调控作用。敲低CC细胞系(HeLa、SiHa)中hsa_circ_0061137及HeLa细胞共转染si-hsa_circ_0061137和miR-217抑制物(miR-217 inhibitor)后,用CCK8法检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;Transwell检测细胞迁移和侵袭;Western blot检测上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关蛋白(E-cadherin、Vimentin)的表达;qRT-PCR法检测各组细胞中hsa_circ_0061137、miR-217、ARL6IP1的表达。裸鼠荷瘤实验检测敲低hsa_circ_0061137后对肿瘤生长的影响。结果:hsa_circ_0061137、ARL6IP1在CC组织及细胞系中表达水平显著高于正常宫颈组织及正常宫颈上皮细胞(P<0.05);miR-217在CC组织及细胞系中表达水平显著低于正常宫颈组织及正常宫颈上皮细胞(P<0.05)。hsa_circ_0061137、ARL6IP1分别与miR-217之间存在靶向负调控关系。敲低hsa_circ_0061137,可抑制CC细胞增殖、迁移、侵袭及EMT特性,并促进CC细胞凋亡(P<0.05);miR-217 inhibitor可部分逆转hsa_circ_0061137敲低发挥的抗CC生长及转移作用(P<0.05)。裸鼠荷瘤实验证实hsa_circ_0061137敲低可显著减弱瘤体生长增殖,并抑制ARL6IP1表达(P<0.05)。结论:沉默hsa_circ_0061137可发挥抗CC增殖及转移作用,其作用可能与靶向miR-217/ARL6IP1轴有关。