Contribution of mononuclear bone marrow cells to carbon tetrachloride-induced liver fibrosis in rats

AIM： To study the inhibitory effect of mononuclear bone marrow cell （BNC） transplantation on carbon tetrachloride （CCl4） -induced liver fibrosis in rats. METHODS： Rat liver fibrosis models were induced by CCl4 and alcohol administration. After 8 wk, twenty rats were randomly allocated into treatment group （n = 10） and control group （n = 10）. BMC were infused into the rats in treatment group via the portal vein, while heparinized saline was infused in control group. CCl4 was hypodermically injected into the rats twice a week for 4 wk. At the end of wk 12, all rats were humanely sacrificed. Uver samples were taken and stained with HE or Masson trichrome. The general conditions, liver fibrosis （hydroxyproline and collagen fibre） and liver pathological grades in rats were evaluated. RESULTS： The general conditions of the rats in treatment group improved markedly, but not in control group. Hydroxyproline was 504.6± 128.8 μg/g in treatment group, and 596.0 ± 341.8 μg/g in control group. The percentage of collagen fibre was 3.75% ± 0.98% in treatment group and 5.02% ± 0.44% in control group. There was a significant difference between the two groups （P 〈 0.05）. Liver pathological grade decreased from grade N to grade 11 partially in treatment group （P 〈 0.05） with no obvious improvement in control group （P 〉 0.05）. There was a significant difference between treatment group and control group （P 〈 0.05）.CONCLUSION： Transplantation of BMC can improve liver fibrosis due to chronic liver injury in rats.

当归多糖对衰老模型大鼠骨髓造血功能的影响及其机制

目的探讨当归多糖（ASP）对衰老模型大鼠骨髓造血功能的影响及其机制。方法6～8周雄性SD大鼠40只，随机分为正常组（n=10）、ASP正常组（n=10）、衰老模型组（n=10）和ASP衰老模型组（n=10）。药物注射完成第2天，取眼球血检测外周血常规，取股骨测定每根股骨骨髓单个核细胞（BMNCs）总数；CCK8测定BMNCs增殖能力；流式细胞术检测BMNCs增殖周期与活性氧簇（ROS）含量；造血祖细胞混合集落（CFU—Mix）培养检测BMNCs形成集落能力；衰老β半乳糖苷酶（SA—B—Gal）染色观察衰老BMNCs百分率；酶学法检测细胞总抗氧化能力（T—AOC）；Western blotting检测P53和P21蛋白表达；激光扫描共焦显微镜检测P53蛋白表达及定位。结果与衰老模型组比较，ASP衰老模型组外周血红细胞、血小板和白细胞总数下降得到抑制；股骨BMNCs细胞数升高；增殖能力提高；形成CFU-Mix数增加；SA-B-Gal染色阳性BMNCs百分率显著降低；G1期细胞比例降低，S期细胞比例升高，细胞内ROS含量显著降低；T-AOC升高；P53和P21表达显著上调。结论ASP能延缓或拮抗D-半乳糖致大鼠骨髓造血细胞衰老，其机制可能与ASP抑制氧化应激，下调p53／p21通路有关。

杜仲醇提取物通过RhoA/ROCK信号通路调控大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化作用研究

目的:分析杜仲醇提取物通过RhoA/ROCK信号通路调控骨质疏松症大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨分化中的影响。方法:选取实验用纯系大鼠50只,随机数字表法分成5组:正常组(10只)、模型组(10只)、杜仲低剂量组(10只)、杜仲中剂量组(10只)与杜仲高剂量组(10只),模型组与杜仲低、中、高剂量组制备OP大鼠模型,杜仲低、中、高剂量组大鼠分别使用50、100、200 mg/kg杜仲醇提取物灌胃,正常组、模型组大鼠5 mL/kg生理盐水灌胃,末次给药后断颈处死大鼠,经过BMSCs培养并察看大鼠细胞成长及矿化状况,RT-PCR检测大鼠软骨细胞内ROCK1、RhoA表达状况及BMSCs成骨诱导后骨桥蛋白(OPN)、Runt相关转录因子2(Runx2)、骨钙素(OCN)mRNA表达。结果:模型组、杜仲低剂量组大鼠细胞矿化率较正常组显著降低,杜仲中、高剂量组大鼠细胞矿化率较模型组、杜仲低剂量组显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05);模型组、杜仲低剂量组大鼠ROCK1、RhoA mRNA表达量较正常组显著降低,杜仲中剂量组、杜仲高剂量组大鼠ROCK1、RhoA mRNA表达量较模型组显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05);模型组、杜仲低剂量组OPN、Runx2及OCN mRNA表达量较正常组显著降低,杜仲中、高剂量组OPN、Run×2及OCN mRNA表达量较模型组、杜仲低剂量组显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:杜仲醇提取物可提升BMSCs内RhoA/ROCK信号路径ROCK1、RhoA mRNA表达量,促进成骨分化和BMSCs增殖,但其具体机制仍需行更深入研究。

雌性大鼠手术去势骨质疏松症模型建立及评价

目的从动情周期、骨密度、骨组织形态结构和原代骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMMSCs)生长曲线4个层次判定雌性大鼠手术去势造模是否成功。方法30只2月龄SPF级雌性大鼠,随机平均分为空白组、假手术组和模型组3组。手术去势造模完成后次日起连续7 d对3组大鼠进行阴道脱落细胞涂片,判断动情周期。造模后第8天取左侧股骨组织做骨密度测定和HE染色,取右侧骨组织分离原代BMMSCs。结果空白组和假手术组动情周期正常,模型组大鼠动情周期紊乱;骨组织HE染色显示模型组骨小梁稀少且间距加大;与空白组比较,假手术组骨密度和BMMSCs生长速率差异无统计学意义(P>0.05),与假手术组相比,模型组骨密度显著降低,BMMSCs生长速率显著下降,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论造模成功后的雌性大鼠动情周期紊乱,骨密度降低,骨小梁疏松,BMMSCs的生长缓慢,为骨质疏松症动物模型建立判定提供较全面的依据。

卡马西平诱导大鼠骨髓抑制模型的建立

目的:建立卡马西平(CBZ)诱导的骨髓抑制大鼠模型。方法:SD大鼠72只,随机分为正常对照组和模型组。正常对照组12只,每d灌胃蒸馏水,其余不做任何处理。模型组60只,以CBZ灌胃,剂量由600mg/kg始,每5d增加200mg/kg,至1200mg/kg维持,共计灌胃120d,然后停用CBZ,继续观察30d。于给药第30d、60d、90d、120d及停药30d后各取大鼠12只处死,观察外周血象、骨髓象的变化。结果:模型组大鼠一般情况差,给药60d后大鼠即开始表现全血抑制,其中红系造血母细胞的抑制更为明显。在CBZ撤除30d内,造血系统功能未见明显恢复。结论:成功建立了CBZ诱导的骨髓抑制大鼠模型。

不同输注途径移植骨髓间充质干细胞对阿霉素肾病大鼠疗效初探

目的探索骨髓间充质干细胞(BMSCs)经不同输注方式移植入阿霉素慢性肾病大鼠体内对肾损伤的影响。方法SD大鼠左侧肾切除后以2.5 mg/kg剂量给大鼠尾静脉注射阿霉素,1次/周,连续2次,慢性肾病模型成功后,将成模大鼠36只随机均分为3组:阿霉素慢性肾病对照(ADR)组、干细胞经肾动脉移植(M-A)组、干细胞经外周静脉移植(M-V)组,另选12只正常大鼠设正常对照(N)组。BMSCs经体外培养后,以2×106个/mL经肾动脉注射到M-A组大鼠体内,2×106个/mL经尾静脉注射到M-V组大鼠体内,2周后再次同样方法注射等量BMSCs。检测移植当周、移植后1周、2周大鼠血尿素氮、血肌酐、24 h尿蛋白、24 h尿微量蛋白,末次注射干细胞后第1周于激光聚焦显微镜下观察大鼠肾脏病理和干细胞在肾脏内分布情况。结果M-A组、M-V组和ADR组在各观察时点血尿素氮、血肌酐、24 h尿蛋白总量、24 h尿微量蛋白均明显高于N组(P<0.01)。移植后1、2周M-A组的24 h尿微量蛋白低于ADR组(P<0.01),且M-A组的血肌酐较ADR组和M-V组均降低(P<0.01)。移植后1周,M-A组24 h尿蛋白、24 h尿微量蛋白明显低于M-V组(P<0.01);但2周时尿蛋白和微量蛋白与M-V组的差异无统计学意义。结论BMSCs移植可以改善阿霉素慢性肾病的肾损伤情况,在BMSCs移植后一段时间,BMSCs经肾动脉移植的效果优于经外周静脉移植。

乌贼墨多糖缓解环磷酰胺致大鼠骨髓功能抑制作用的研究

探讨乌贼墨多糖(SIPS)对环磷酰胺所致骨髓功能抑制的缓解效应。以SD大鼠为模型,灌服SIPS和腹腔注射环磷酰胺共处理,检测大鼠外周血像和骨髓DNA含量。环磷酰胺不仅显著降低了大鼠外周血红细胞、白细胞和血小板的数量以及血红蛋白的含量,骨髓细胞DNA含量也被显著下调(p<0.01orp<0.05)。SIPS十分明显的弱化了该化疗药物的骨髓抑制功能,环磷酰胺对以上指标参数所导致的负效应均被该海洋活性物质不同程度的消减(p<0.05orp<0.01)。SIPS可缓解环磷酰胺所致大鼠骨髓造血功能抑制作用。

正元胶囊防治肺腺癌A549移植瘤裸鼠化疗相关性疲劳的疗效及机制研究

【目的】探讨正元胶囊防治化疗相关疲劳的疗效及作用机制。【方法】将80只BALB/c-nu裸鼠分为正常组、模型组、顺铂组、联合治疗组,每组20只。复制肺腺癌A549移植瘤裸鼠模型。成功造模后,顺铂组给予顺铂5 mg/kg腹腔注射,每3 d1次;联合治疗组给予裸鼠顺铂5 mg/kg腹腔注射,每3 d 1次,及正元胶囊1.8 g/kg灌胃,每天1次;正常组和模型组给予相应体积的生理盐水灌胃。连续21 d。通过力竭游泳实验、悬尾实验、旷场实验评估疲劳程度。检测各组裸鼠的肝糖原含量、外周血象与外周血肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、粒细胞集落刺激因子(G-CSF)、促红细胞生成素(EPO)、白细胞介素3(IL-3)等细胞因子水平以及骨髓有核细胞计数,观察骨髓细胞涂片。【结果】顺铂组化疗后出现动物行为学的恶化。与顺铂组比较,联合治疗组裸鼠的力竭游泳时间延长,悬尾不动时间缩短,旷场实验总运动距离延长、平均运动速度提高,肝糖原含量增加,外周血白细胞(WBC)、血红蛋白(HGB)和骨髓有核细胞增加,TNF-α和IL-6水平降低,G-CSF、EPO及IL-3水平升高(P<0.05或P<0.01或P<0.001)。【结论】正元胶囊可有效改善肺腺癌A549移植瘤裸鼠化疗相关疲劳症状,其机制可能与增加肝糖原储备,减轻化疗后裸鼠的骨髓抑制,降低血清中炎症相关细胞因子TNF-α和IL-6的含量,同时提高与骨髓造血功能相关的集落刺激生长因子G-CSF、EPO及IL-3水平有关。

骨髓间充质干细胞移植促进脊髓神经功能修复机制的研究

目的:观察骨髓间充质干细胞(BMSC)移植对脊髓损伤后神经功能恢复、星形胶质细胞增生、空洞形成以及神经细胞凋亡的影响。方法:提取BMSC,制作SD大鼠脊髓损伤模型80只,随机分为对照组(A组)和细胞移植组(B组)。1周后再次手术,用微量注射器刺入B组脊髓损伤部位两端,分别缓慢推入10μLBMSC悬液,A组注入等量PBS,于移植后1、2、4、6、8周观察神经恢复情况;移植后第1、2、3、7、14天行TUNEL染色和电镜检查观察神经细胞凋亡情况。8周后行胶质纤维酸性蛋白(GFAP)及神经生长抑制因子Nogo-A免疫组化,测量各组脊髓空洞的大小。结果:8周后A组和B组神经功能评估(BBB评分)分别为(22.0±2.1)分和(28.5±2.7)分,14d时凋亡细胞数分别为14.4±2.7和9.1±3.3;白质中GFAP阳性细胞数分别为32.3±1.3和23.7±0.6,Nogo-A阳性神经元分别为(108.6±125.8)个和(78.3±12.4)个,空洞体积分别为(23.3±12.4)mm3和(14.5±10.6)mm3,2组间比较差别均有统计学意义(P<0.05)。结论:骨髓间充质干细胞可通过减少星形胶质细胞的增生,缩小空洞,抑制Nogo-A以及神经细胞凋亡等机制促进脊髓神经功能的恢复。

兔VX2肝种植瘤盐酸消融治疗后骨髓抑制及肝功能并发症相关性分析

目的:通过建立兔VX2肝种植瘤模型,了解盐酸消融治疗后的并发症,为进一步评价盐酸消融效果提供实验依据。方法:新西兰大白兔20只,采用组织块种植法制成兔肝VX2模型,随机分为治疗组和对照组,2周后治疗组接受盐酸消融治疗;于治疗术前1 d、术后第3 d、术后第14 d分别对两组兔经耳缘静脉抽血检测血常规及肝功能。结果:治疗组治疗后14 d WBC计数恢复正常,而对照组WBC数明显减低,两组差异有统计学意义(P<0.05);治疗组治疗后14 d谷丙转氨酶降低,而对照组谷丙转氨酶明显升高,两组差异有统计学意义(P<0.05)。结论:盐酸消融治疗对兔骨髓抑制不明显,对兔正常肝组织肝功损害轻并且短期内损害可以恢复,为临床开展盐酸消融治疗后评价并发症提供了科学的依据。

炙甘草汤对“再障”模型小鼠骨髓造血组织影响的实验研究

目的 :探讨炙甘草汤治疗再生障碍性贫血的作用机理。方法 :将成年健康小鼠随机分为 4组 ,除正常组外 ,其余各组一次全身进行 3.0Gy60 Co -γ射线照射 ,在照射第三天行环磷酰胺和氯霉素腹腔注射建成再障模型 ,观察该方对再障模型小鼠骨髓造血细胞 ,Caspease- 3(天冬酰酸特异性半胱胺酸蛋白酶 ) ,Ki- 6 7(人抗增殖细胞核抗原 )的影响。结果 :经炙甘草汤治疗的再障小鼠比模型组的再障小鼠在骨髓造血细胞上和Ki- 6 7表达上明显提高 ,经炙甘草汤治疗的再障小鼠比模型组的再障小鼠在Caspease - 3表达上明显减低。结论 :炙甘草汤对再障小鼠造血细胞具有明显的保护和修复作用 ,对抑制细胞凋亡和促进细胞增生也有一定的作用。

骨髓间充质干细胞NgR基因沉默静脉移植治疗大鼠脑损伤

目的:探讨沉默NgR基因的方法对骨髓间充质干细胞(BMSC)静脉移植治疗大鼠脑损伤效果的影响。方法:体外培养BMSC,经小分子干扰RNA(siRNA)转染以沉默NgR基因表达,用Westernblot法检测BMSC在转染前后NgR基因蛋白的表达。60只SD大鼠制成大鼠重型液压颅脑损伤模型,随机分为3组。A组20只给予NgR基因沉默的BMSC;B组20只给予等量的BMSC悬液;C组20只注射等量的不含干细胞的培养液。对各组静脉移植分别于处理后1d、3d、伤后1周及2周行Bederson评分并评价大鼠神经功能的损伤情况,2周后处死行NF、BrdU免疫组化和HE染色。结果:转染siRNA后,A、B组NgR基因蛋白表达量较C组明显降低,移植后1周大鼠神经学缺损评分A组<B组<C组(均P<0.05);2周后其脑组织中的NF阳性纤维数A组>B组>C组(均P<0.05),BrdU阳性细胞数A组>B组(P<0.05),C组中未检出。结论:BMSC的沉默NgR基因静脉移植治疗大鼠脑损伤可明显改善大鼠的神经学功能。

探讨BMSCs对COPD模型大鼠中炎症因子及血气的影响

目的观察骨髓间充质干细胞(BMSCs)对慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型大鼠中炎症因子及血气分析的影响。方法选取24只健康雄性大鼠,按照1:1:1比例,将其分为A组(正常组,n=8)、B组(模型组,n=8)和C组(治疗组,n=8)。其中,A组不做任何处理,B组、C组均建立COPD模型。三组大鼠均以普通饲料持续喂养76天。C组在尾静脉注射BMSCs,其他两组则注射等量的生理盐水,继续喂养2周后处死大鼠。观察三组炎症因子、血气分析。结果 B组IL-1β、TNF-α高于A组、C组,且C组高于A组(P<0.05);三组p H、Sa O2、PCO2、PO2水平两两对比,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论骨髓间充质干细胞可影响慢性阻塞性肺疾病的血气改变,且能抑制炎症反应,需引起高度关注。

低强度超声对大鼠多烯紫杉醇化疗所致骨髓抑制的影响及其机制

目的分析低强度超声治疗对大鼠多烯紫杉醇化疗所致骨髓抑制的影响及其机制。方法将40只雌性大鼠随机均分为超声组和对照组,每日腹腔注射多烯紫杉醇(25mg/kg体质量),持续4天。对超声组于第1次多烯紫杉醇注射后当天开始每天行低强度超声辐照,持续7天;对照组同期予以假辐照。分别于注射多烯紫杉醇前、超声辐照开始后第4、7及14天行血常规检查及免疫球蛋白检测。超声辐照开始后第4天,于2组中各随机选取4只大鼠处死,检测干细胞因子(SCF)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)及血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)。以组织学方法检测多烯紫杉醇注射前、超声辐照开始后第4、7及14天大鼠右侧股骨骨髓组织有核细胞计数,并观察超声辐照第7天大鼠超声辐照处皮肤和肌肉组织HE染色表现。结果与对照组相比,超声组大鼠辐照开始后第4天外周血白细胞、中性粒细胞及淋巴细胞计数,第7、14天免疫球蛋白A(IgA),第4、14天免疫球蛋白G(IgG)及免疫球蛋白M(IgM)均明显升高(P均<0.05)。超声组大鼠骨髓SCF及ICAM-1信使核糖核酸(mRNA)相对表达水平均明显高于对照组,VCAM-1mRNA相对表达水平明显低于对照组,差异均有统计学意义(P均<0.05)。超声辐照开始后第4、7天,超声组骨髓有核细胞均较对照组明显增多(P均<0.05)。2组大鼠辐照处皮肤及肌肉组织均无明显损伤。结论低强度超声可用于治疗大鼠多烯紫杉醇化疗所致骨髓抑制,其机制可能在于改善骨髓造血微环境。

骨髓间充质干细胞经肾动脉途径不同移植次数对大鼠阿霉素肾病的修复作用比较

目的比较分析骨髓间充质干细胞(BMSC)经肾动脉途径单次或多次移植于阿霉素肾病大鼠后对其肾功能的改善作用。方法以阿霉素经尾静脉输入构建大鼠慢性肾病模型32只,随机分为M0、M1、M2、M3组(4×n,n=8),另选8只为正常对照组(N组)。以2×106个/ml、单次0.5 ml分别移植BMSC细胞0次(M0组)、1次(M1组)、2次(M2组)、3次(M3组),不进行BMSC移植组别每次操作以L-DMEM培养基0.5 ml作为安慰剂对照,移植间隔为1周。移植前及末次移植后1、2周末检测大鼠血尿素氮、血肌酐、24 h尿蛋白、24 h尿微量蛋白,末次移植1周末制作病理片并于激光聚焦显微镜下观察大鼠肾脏病理和BMSC细胞在肾脏内分布情况。结果 M0、M1、M2、M3组在各观察点血尿素氮、血肌酐、24 h尿蛋白总量、24 h尿微量蛋白均明显高于N组(P<0.001),末次移植第1周末M2、M3组24 h尿蛋白总量、24 h尿微量蛋白明显低于M1组(P<0.05),M2、M3组间差异无统计学意义(P=0.063)。结论 BMSC经肾动脉途径移植2次治疗大鼠阿霉素肾病效果最宜。

骨髓造血细胞移植治疗克罗恩病的动物研究

目的:探讨骨髓造血细胞(hematopoietic cells,HCs)移植于克罗恩病(Crohn’s disease,CD)大鼠模型后其在大肠的定位情况。方法:用三硝基苯磺酸(TNBS)灌肠法制作SD大鼠CD模型。用悬浮法培养同种异体HCs,并用5-溴-2-脱氧尿嘧啶(BrdU)标记,经尾静脉注入体内,并以生理盐水为对照。于移植后第7天、第14天及第21天处死大鼠,取全段大肠组织,用免疫组化方法检测HCs的定位情况。结果:免疫组化显示移植组各时间段大肠组织均有BrdU阳性细胞定位,主要在黏膜上皮层,对照组阴性。结论:HCs可定位于大鼠CD模型的肠道中。

TNF-α-siRNA联合骨髓间充质干细胞对大鼠类风湿关节炎治疗效果的研究

抑制患者体内肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达可作为治疗类风湿关节炎(RA)的重要途径。以鸡Ⅱ型胶原法诱导的RA模型大鼠为研究对象,探讨TNF-α-siRNA联合骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植治疗RA的效果及其作用机制。RA大鼠随机分为PBS组(模型对照)、甲氨蝶呤组(阳性药物对照)、BMSCs移植组、TNF-α-siRNA注射组和TNF-α-siRNA+BMSCs移植治疗组共5个组。结果表明:与PBS组模型大鼠相比,4个治疗组大鼠的生长速度均极显著提高,而血清中TNF-α、IL-1β水平、足趾肿胀值及强迫游泳不动时间均极显著降低。进一步研究表明,与PBS组模型大鼠相比,基质金属蛋白酶抑制剂(TIMP-1)表达水平在4个治疗组均极显著提高,而基质金属蛋白酶9 (MMP-9)的表达水平均极显著降低;TNF-α-siRNA+BMSCs联合治疗效果显著优于其他治疗组。这一研究说明,TNF-α-siRNA+BMSCs联合治疗可能通过抑制RA关节处MMP-9的表达而发挥作用,从而为基因干扰联合干细胞移植治疗RA提供了重要的试验依据。

维甲酸诱导骨质疏松模型大鼠骨髓间充质干细胞的特征

背景:应用维甲酸直接体外干预骨髓间充质干细胞的研究较多,而维甲酸诱导骨质疏松模型大鼠骨髓间充质干细胞的相关研究尚未见报道。目的:建立维甲酸诱导的大鼠骨质疏松模型,观察模型大鼠骨髓间充质干细胞的体外特征。方法:将SD大鼠随机分为2组,实验组用维甲酸70mg/(kg·d)连续灌胃2周快速建立骨质疏松模型,对照组灌胃等体积生理盐水。采用全骨髓贴壁法体外培养两组大鼠骨髓间充质干细胞,观察两组细胞体外特征,包括细胞形态、生长曲线、成骨诱导后体外矿化能力和碱性磷酸酶分泌能力、成脂诱导后向脂肪细胞分化能力。结果与结论:①两组骨髓间充质干细胞各时期形态基本一致,第9天时实验组增殖能力强于对照组;②实验组碱性磷酸酶活力弱于对照组(P <0.05),茜素红染色、碱性磷酸酶染色亦支持碱性磷酸酶活力检测结果;③实验组脂滴数量和油红O吸光度值高于对照组(P <0.05);④结果表明,维甲酸灌胃法成功构建大鼠骨质疏松模型,其骨髓间充质干细胞成骨能力降低,成脂能力增强。

大鼠骨髓输注诱导小肠移植免疫耐受模型的建立

目的:建立一种输注异基因特异性供鼠骨髓细胞后再行异位小肠移植的大鼠模型。方法:选取近交系Brown-Noway(BN)大鼠30只为供鼠;Lewis(LEW)大鼠15只为受鼠,2∶1随机配对。于术前麻醉处死BN大鼠,在无菌条件下提取股骨、胫骨的骨髓细胞,经LEWIS大鼠尾静脉输入,同时于术前经尾静脉,术后2、4、6 d经受鼠腹腔注射抗CD25单克隆抗体、CTLA-4Ig及抗CD154单克隆抗体,第8天行BN→LEW大鼠异位小肠移植。小肠移植术后第7天经内眦静脉采血0.5 mL,用流式细胞仪检测淋巴细胞嵌合率,并观察大鼠超急性排斥反应(GVHD)、生存期、体质量和一般状况。结果:小肠移植后15只大鼠均未观察到GVHD。小肠移植后存活>5 d为86.7%,>7 d为80.0%,>14 d为60.0%,最长存活>50 d。结论:输注异基因特异性供鼠骨髓细胞后再行大鼠异位小肠移植模型的建立,是进一步研究小肠移植特异性免疫耐受机制的模型之一。

聚合物／液晶细胞模型的构建及其表面弹性对大鼠骨髓干细胞黏附的影响

目的:构建聚合物/液晶细胞模型,探究其表面弹性对大鼠骨髓干细胞黏附情况的影响。方法:溶剂挥发致相分离方法构建聚合物/液晶细胞模型,通过偏光显微镜、扫描式电子显微镜及X射线衍射观察细胞模型的表面特征。全骨髓细胞贴壁培养法分离大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs),通过表面因子检测和诱导其成骨成脂分化进行鉴定。培养3代后分4组:纯PU空白对照组,10%膜组,30%膜组和50%膜组。接种细胞密度为5×107/L,待细胞贴壁24h后作细胞骨架染色处理,激光共聚焦显微镜观察细胞附着在材料上的情况并拍照。结果:溶剂挥发致相分离方法成功构建3种不同硬度的聚合物/液晶细胞模型;表面因子检测显示CD29、CD44、CD90呈阳性表达,而CD34和CD45呈阴性表达;经过茜素红S染色和油红O染色,成骨成脂分化形成的钙结节和脂滴都显而易见;细胞骨架染色拍摄结果显示,纯PU对照组、10%膜组和30%膜组上的细胞铺展面积较广,肌动蛋白微丝和细胞核清晰明显;而50%膜组的细胞铺展面积较小,细胞核虽较清晰,但是肌动蛋白微丝却模糊不清。结论:合适液晶含量的聚合物/液晶生物膜能支持大鼠骨髓干细胞的贴壁生长,而液晶含量过高则抑制细胞的贴壁生长。