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三七总皂甙对大鼠骨髓基质细胞骨形成蛋白-2表达及碱性磷酸酶活性的影响 被引量:9
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作者 刘东宁 王云国 +5 位作者 刘志礼 王敏 王尔天 黄曹 杨大志 易伟宏 《南昌大学学报(医学版)》 CAS 2012年第9期9-13,共5页
目的研究三七总皂甙(PNS)对大鼠骨髓基质细胞骨形成蛋白-2(BMP-2)表达及碱性磷酸酶活性的影响,探讨其在骨髓基质细胞向成骨细胞增殖、分化中的作用机制。方法分离、纯化大鼠骨髓基质细胞(BMSCs),实验按不同质量浓度PNS分组(0、50、100、... 目的研究三七总皂甙(PNS)对大鼠骨髓基质细胞骨形成蛋白-2(BMP-2)表达及碱性磷酸酶活性的影响,探讨其在骨髓基质细胞向成骨细胞增殖、分化中的作用机制。方法分离、纯化大鼠骨髓基质细胞(BMSCs),实验按不同质量浓度PNS分组(0、50、100、150、200mg.L-1),以0mg.L-1为对照组。均采用成骨诱导液培养,MTT法观察细胞增殖,ALP活性测定,Western Blotting检测细胞BMP-2表达。结果在第3、5天各组细胞增殖差异无统计学意义(P>0.05),在第7、9天,50、100、150mg.L-1组高于对照组(P<0.05);BMP-2表达水平及ALP活性在50、100及150mg.L-1组高于对照组(P<0.05),对照组少量表达BMP-2;200mg.L-1组细胞增殖、BMP-2表达水平及ALP活性与对照组差异均无统计学意义(P>0.05)。结论三七总皂甙可通过上调BMP-2的表达水平,增强碱性磷酸酶活性,促进骨髓基质细胞向成骨细胞增殖、分化。 展开更多
关键词 三七总皂甙 骨髓基质细胞 骨形成蛋白-2 碱性磷酸酶活性 动物 实验 大鼠
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Time-sequential changes of differentially expressed miRNAs during the process of anterior lumbar interbody fusion using equine bone protein extract, rhBMP-2 and autograft 被引量:1
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作者 Da-Fu CHEN Zhi-Yu ZHOU +9 位作者 Xue-Jun DAI Man-Man GAO Bao-Ding HUANG Tang-Zhao LIANG Rui SHI Li-Jin ZOU Hai-Sheng LI Cody BUNGER Wei TIAN Xue-Nong ZOU 《Frontiers of Materials Science》 SCIE CSCD 2014年第1期72-86,共15页
The precise mechanism of bone regeneration in different bone graft substitutes has been well studied in recent researches. However, miRNAs regulation of the bone formation has been always mysterious. We developed the ... The precise mechanism of bone regeneration in different bone graft substitutes has been well studied in recent researches. However, miRNAs regulation of the bone formation has been always mysterious. We developed the anterior lumbar interbody fusion (ALIF) model in pigs using equine bone protein extract (BPE), recombinant human bone morphogenetic protein-2 (rhBMP-2) on an absorbable collagen sponge (ACS), and autograft as bone graft substitute, respectively. The miRNA and gene expression profiles of different bone graft materials were examined using microarray technology and data analysis, including self-organizing maps, KEGG pathway and Biological process GO analyses. We then jointly analyzed miRNA and mRNA profiles of the bone fusion tissue at different time points respectively. Results showed that miRNAs, including let-7, miR-129, m iR-21, miR-133, miR-140, miR-146, miR-184, and miR-224, were involved in the regulation of the immune and inflammation response, which provided suitable inflammatory microenvironment for bone formation. At late stage, several miRNAs directly regulate SMAD4, Estrogen receptor 1 and 5-hydroxytryptamine (serotonin) receptor 2C for bone formation. It can be concluded that miRNAs play important roles in balancing the inflammation and bone formation. 展开更多
关键词 miRNA bone protein extract (BPE) recombinant human bone morphoge-netic protein-2 (rhBMP-2 AUTOGRAFT
原文传递
CCDC134调控人牙髓干细胞成骨分化
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作者 徐万田 董文睿 朱文胤 《口腔疾病防治》 2022年第3期169-177,共9页
目的探讨CCDC134(coiled⁃coil domain containing 134)对人牙髓干细胞(human dental pulp stem cells,hDPSCs)成骨分化功能的调控作用。方法从牙髓组织中,分离培养hDPSCs,并分别以NC⁃CCDC134、shCCDC134、CCDC134慢病毒转染hDPSCs,分为... 目的探讨CCDC134(coiled⁃coil domain containing 134)对人牙髓干细胞(human dental pulp stem cells,hDPSCs)成骨分化功能的调控作用。方法从牙髓组织中,分离培养hDPSCs,并分别以NC⁃CCDC134、shCCDC134、CCDC134慢病毒转染hDPSCs,分为空白对照组、阴性对照组、CCDC134下调组(shCCDC134)、CCDC134过表达组(CCDC134)。流式细胞术检测hDPSCs表面标志物Stro⁃1、CD105、CD34、CD45;甲苯胺蓝染色检测克隆形成;碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色检测ALP表达;茜素红染色检测矿化结节形成;油红染色检测成脂能力;qPCR检测CCDC134、Runt相关转录因子2(Runt⁃related transcription factor 2,RUNX2)、骨钙素(osteocalcin,OCN)、骨形态发生蛋白⁃2(bone morphogenetic protein⁃2,BMP⁃2)、Smad家族成员1(mothers against decapentaplegic homolog 1,SMAD1)的mRNA水平表达;蛋白印迹法检测CCDC134、RUNX2、OCN、BMP⁃2、SMAD1蛋白表达水平。进一步以BMP⁃2信号激活剂(BMP⁃2)和抑制剂(Dorsomorphin)分别干预CCDC134下调及上调的hDPSCs(分组为:shCCDC134、shCCDC134+BMP⁃2、CCDC134、CCDC134+Dorsomorphin),细胞聚合体移植于裸鼠皮下2个月,HE染色法检测新骨形成。结果hDPSCs高表达间充质干细胞表面标志物,低表达造血干细胞表面标志物。与空白对照组相比,成骨诱导的hDPSCs中CCDC134的表达升高;与阴性对照组相比,shCCDC134组CCDC134的表达降低,CCDC134组的表达升高(P<0.05);shCCDC134组的矿化结节减少、成骨相关基因和蛋白表达降低(P<0.05),CCDC134组的指标升高(P<0.05);shCCDC134组的BMP⁃2/SMAD1信号通路的相关表达降低,CCDC134组表达升高(P<0.05)。与shCCDC134组相比,shCCDC134+BMP⁃2组成骨相关基因和蛋白表达升高、裸鼠皮下新骨形成增加(P<0.05),与CCDC134组相比,CCDC134+Dorsomorphin组以上指标降低(P<0.05)。结论CCDC134通过调控BMP⁃2/SMAD1信号通路促进hDPSCs成骨分化。 展开更多
关键词 牙髓干细胞 CCDC134 成骨分化 组织工程 骨形成蛋白⁃2 重组人Smad家族成员1 Runt相关转录因子2 骨钙素
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