运动对废用性骨质疏松大鼠骨代谢和破骨细胞分化OPG-RANKL-RANK系统的影响

目的:研究跑台运动对废用性骨质疏松的作用以及破骨细胞分化OPG-RANKL-RANK系统在其中的介导作用。方法:6周龄雄性Sprague-Dawley大鼠40只,分为正常对照组、废用模型组、正常恢复组和运动恢复组,每组10只。正常对照组不做任何特殊处理,安静饲养4周后处死;废用模型组尾部悬吊4周后处死;正常恢复组尾部悬吊4周后,安静饲养4周处死;运动恢复组尾部悬吊4周后,跑台训练4周处死。各组大鼠处死后立即进行骨密度(BMD)、骨组织形态计量学、骨组织抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP-5b)染色计量、骨代谢以及破骨细胞分化OPG-RANKL-RANK系统相关细胞因子等指标的测试。结果:废用模型组大鼠BMD、骨小梁体积百分比(TBV)、骨小梁宽度(Tb.Wi)、血清碱性磷酸酶(ALP)浓度、骨髓细胞因子OPG基因表达量均显著小于正常对照组(P<0.01),而骨小梁间距(Tb.Sp)、胫骨干骺端TRACP-5b平均阳性染色面积百分比(APSAP)、血清Ca2+和TRACP-5b浓度、骨髓细胞因子RANKL、M-CSF、RANK、IL-6和TNF-α基因表达量则显著大于正常对照组(P<0.01)。运动恢复组大鼠BMD、TBV、Tb.Wi、血清ALP浓度、骨髓细胞因子OPG基因表达量均显著大于正常恢复组(P<0.05或P<0.01),而Tb.Sp、血清Ca2+和TRACP-5b浓度、胫骨干骺端APSAP、骨髓细胞因子RANKL、M-CSF、RANK、IL-6和TNF-α基因表达量均显著小于正常恢复组(P<0.05,P<0.01)。结论:4周的尾部悬吊可导致大鼠废用性骨质疏松症的发生,跑台运动可以促进废用性骨质疏松症的恢复,这均与骨髓微环境破骨细胞分化OPG-RANKL-RANK系统相关细胞因子的表达有关。

通过RAW264.7细胞系初步研究破骨细胞中Notch1对RANKL-RANK系统的影响

目的·探索细胞核因子κB受体激活蛋白配体(receptor activator of nuclear factor-κB ligand,RANKL)/核因子κB受体激活蛋白(receptor activator of nuclear factor-κB,RANK)系统及Notch通路间的交互调控机制。方法·通过RANKL (35 ng/L)刺激RAW264.7小鼠破骨细胞前体细胞系,用real-time PCR、Western blotting检测Notch通路关键分子的表达水平。小干扰RNA(small interfering RNA,si RNA)技术抑制Notch通路中Notch1、Dll1和Dll3分子的表达,检测上述分子抑制后Rank mRNA和蛋白表达的变化。结果·RANKL刺激引起Notch1、Jagged1、Jagged2的表达降低,Dll4的表达升高。RANKL抑制Notch通路下游分子Hes1、Hey1的表达。通过si RNA技术,Notch1、Dll1和Dll3 mRNA的表达分别下调71%(P=0.000)、53%(P=0.015)和70%(P=0.000)。Notch1表达抑制后,Rank m RNA和蛋白的表达均增加(P=0.003,P=0.000)。结论·Notch1对RANKL-RANK系统的潜在调节机制,可能在破骨细胞相关的溶骨活动中发挥重要作用。

RANKL-RANK信号传导与类风湿关节炎骨破坏相关性研究

目的：探讨RANKL-RANK信号传导系统与类风湿关节炎（RA）患者炎性关节骨破坏的相关性。方法：应用ELISA方法检测OPG、RANKL、抗CCP抗体、RF-IgA、RF-IgG、RF-IgM在RA患者外周血的表达；应用单克隆抗体，通过免疫组织化学方法检测RA活动期、缓解期及健康对照关节滑膜组织中RANKL, OPG的表达及分布状况。结果：显示OPG、RANKL、抗CCP、RF-IgA、RF-IgG、RF-IgM抗体在RA患者外周血的表达：早期RA组和非早期RA组指标均显著高于正常对照组（P〈0.01），OPG、RANKL的表达在早期RA组高于非早期RA组（P〈0.05）；各组滑膜组织中OPG、RANKL的表达，骨侵蚀组与非骨侵蚀组检测数值均显著高于正常对照组（P〈0.01）；且骨侵蚀组与非骨侵蚀组检测数值比较，OPG、RANKL均具有显著性差别（P〈0.05）。结论： RANKL-RANK/OPG系统在RA关节骨侵蚀发病早期既已表达，且随着病情的活动变化而变化。

OPG/RANKL/RANK:联系骨骼系统与免疫系统的纽带

机体的骨组织细胞和免疫细胞相互影响,使骨骼系统与免疫系统间建立起诸多联系。NF-k B受体活化因子配体不仅调控骨骼和免疫器官的发育,而且在骨骼的自身免疫性疾病中起重要作用。文章简要介绍骨骼系统和免疫系统的结构和生物学功能,阐述骨代谢与免疫系统之间的相互调控作用,重点论述骨保护素/核因子k B受体活化因子配体/核因子k B受体活化因子(OPG/RANKL/RANK)系统作为纽带联系骨骼系统与免疫系统的功能。

调控骨性关节炎软骨下骨骨重建中OPG/RANKL/RANK系统的效果评价

目的:评价OPG(骨保护素)/RANKL(核因子受体活化因子配体)/RANK(核因子受体活化因子)系统在调控骨性关节炎软骨下骨骨重建中的作用。方法:采用免疫组化法检测骨性关节炎大鼠(观察组)、健康大鼠(对照组)以及骨性关节炎大鼠治疗后的膝关节软骨下骨中OPG、RANKL、RANK的表达。结果:观察组大鼠膝关节软骨下骨中OPG、RANKL、RANK的阳性表达率均较对照组大鼠高(P<0.05),A组大鼠膝关节软骨下骨中OPG、RANKL、RANK的阳性表达率均较B组大鼠低(P <0. 05)。结论:OPG/RANKL/RANK系统中各指标阳性表达可能在骨性关节炎软骨下骨骨重建中发挥阻碍作用。

姜黄素联合甲氨蝶呤治疗类风湿关节炎骨破坏的疗效观察

[目的]探讨姜黄素联合甲氨蝶呤对寒湿痹阻型类风湿关节炎(RA)骨破坏的干预作用。[方法]将符合标准的128例RA患者随机分为对照组和治疗组,每组64例,对照组口服甲氨蝶呤,治疗组在服甲氨蝶呤基础上加用姜黄素口服治疗,疗程12周,观察改良疾病活动性评分体系(DAS)28评分、炎性指标及对成骨细胞骨代谢相关因子骨保护素(OPG)、核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)的影响。[结果]治疗组与对照组比较,治疗后DAS28评分、血小板计数(PLT)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、RANKL、RANKL/OPG比值均较治疗前显著下降(P<0.05),且治疗组比对照组下降更明显,血红蛋白(HGB)、OPG较治疗前明显升高(P<0.05),以治疗组升高水平较好。[结论]姜黄素联合甲氨蝶呤可有效改善RA寒湿痹阻患者的关节及全身症状,且能改善骨破坏,对RANK/RANKL/OPG系统有明显干预作用。

骨关节炎软骨下骨的变化及其分子机制的研究进展

骨关节炎(osteoarthritis,OA)是一种最常见的慢性骨关节疾病,可累及整个关节。软骨下骨作为关节的重要组成部分,与OA的发生发展密切相关。OA中软骨下骨变化的机制复杂,目前尚未完全阐明。本文通过文献回顾对OA中软骨下骨的病理变化,OPG/RANKL/RANK系统、转化生长因子β(transforming growth factorβ,TGFβ)、雌激素-雌激素受体信号通路和脂代谢等因素对软骨下骨的影响进行综述,探讨OA中软骨下骨变化的作用及其分子机制。

新罗上代王位继承原理与王室近亲婚的关系小议

在朴、昔、金三姓集团联盟治理体制下,各集团间的亲疏关系和利害关系决定着每个阶段中居主导地位的姓氏集团,婚姻关系又是影响或者决定各集团间的亲属关系和利害关系的最大因素。在新罗上代,无论是朴、昔、金三姓之间的近亲婚,还是金氏王族的近亲婚,王室婚姻普遍实行近亲婚,而这种婚姻关系就是各集团之间亲疏关系和利害关系的产物,也是结果,其目的都是为了保证王室的安定、永续,保全王室权威和纯正血统。新罗上代普遍实行的王室近亲婚与其王位继承原理有着密不可分的关系。

附子白术汤通过调节OPG/RANKL保护乳腺癌骨转移裸鼠骨损伤的研究

目的:从调节护骨素(OPG)/细胞核因子κB受体活化因子配体(RANKL)系统探讨附子白术汤抑制乳腺癌骨转移骨损伤的机制。方法:采用左心室注射人乳腺癌骨转移细胞株(MDA-MB-231BO)细胞法建立乳腺癌骨转移裸鼠模型;随机分为模型组、唑来膦酸组、附子白术汤组、附子-白术药对组,另备正常裸鼠正常组(n=6)。造模后第4天开始药物干预:唑来膦酸组sc唑来膦酸0.2 mg.kg-1;模型组、附子白术汤组、附子-白术药对组、正常组,分别ig给予生理盐水20 mL.kg-1、附子白术汤5.6 g.kg-1、附子-白术药对煎液2.4 g.kg-1、生理盐水20 mL.kg-1;每周3次,持续6周。观察各组裸鼠体重、骨转移灶病理和OPG,RANKLmRNA表达变化。结果:①与模型组比较,附子-白术药对组与附子白术汤组骨转移个数、骨转移率及体重下降率均明显下降(P<0.05),骨转移灶中TRAP(+)细胞数量均减少(P<0.01),OPG mRNA表达含量上调(P<0.01),RANKLmRNA表达含量及二者比值降低(P<0.01);②与附子白术汤组比较,附子-白术药对组骨转移个数、骨转移率、体重下降率、骨转移灶中TRAP细胞数量,OPG mRNA,RANKL mRNA表达含量及其比值均无统计学差异。结论:附子白术汤和附子-白术药对均可通过调节OPG/RANKL系统,减少破骨细胞的数量并抑制其活性,从而减轻乳腺癌骨转移裸鼠溶骨性损伤;附子-白术药对与附子白术汤功效相近,可能是附子白术汤的核心药物。

强直性脊柱炎患者骨代谢生化指标和RANKL-RANK-OPG系统表达之间的相关性

目的:考察强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)患者骨代谢生化指标变化,并分析其与RNAKL-RANK-OPG系统表达之间的相关性。方法:研究对象为40名强直性脊柱炎男性患者,40名健康男性为对照组,记录强直性脊柱炎AS患者的病程,体重指数(body mass index,BMI),甲状旁腺素(parathyroid hormone,PTH),血钙,血磷,碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)等临床指标,采用双能X线吸收法测定AS患者的骨密度(bone mineral density,BMD),利用免疫分析法检测血清中骨吸收指标骨钙素(bone glutamyl protein,BGP),I型强胶原羧基肽(carboxyterminal propeptide of type I procollagen,PICP),骨碱性磷酸酶(bone alkaline phosphatase,BALP),骨吸收指标抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP)及sRANKL,OPG的表达。分析骨代谢指标,RANKL-RANK-OPG与各项临床指标的相关性。结果:AS患者PICP,BALP,TRAP及sRANKL、OPG的表达较正常对照组存在明显的差异,具有统计学意义。不同部位的骨密度发生不同程度的骨量减少和骨质疏松,股骨颈、大转子、转子间和股骨颈分别为28%、45%、40%和50%,与骨代谢指标存在一定的相关性,TRAP与大转子的骨密度成负相关(r=-0.369,P=0.019),PICP与大转子的骨密度成正相关(r=0.391,P=0.013),BGP与转子间的骨密度成负相关(r=-0.419,P=0.009),sRANKL/OPG与腰椎密度均呈现负相关(r=-0.134,P=0.011)。骨代谢指标之间以及与临床指标也存在不同程度的相关性,sRANKL与OPG存在正相关(r=0.369,P=0.019)sRANKL/OPG与sRANKL、OPG存在负相关(r=-0.334,P=0.035;r=-0.983,P=0.000)。结论:AS患者骨代谢发生异常,骨吸收增强。RANKL-RANK-OPG系统失衡可能是AS骨量减少和伴随发生骨质疏松的机制之一。

中医药通过OPG/RANKL/RANK系统干预类风湿关节炎骨破坏的研究进展

骨保护素/核因子-κB受体活化因子配体/核因子-κB受体活化因子(osteoprotegerin/receptoractivatorof NF-κB ligand/receptor activator of nuclear factor-κB,OPG/RANKL/RANK)系统与类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)骨破坏关系密切,调控OPG/RANKL/RANK系统已经成为治疗RA骨破坏新的靶点和思路。中医药治疗RA历史悠久,大量实验研究证明了中医药联合西药能够发挥增效减毒的作用,但现有研究仍存在不足之处,如缺乏拔罐、穴位埋线、刺络放血等中医特色疗法干预骨破坏的研究;部分动物实验方案设计有待完善;临床试验研究缺乏放射学变化相关指标的应用;临床研究样本量较小,治疗周期较短,结果准确性不足,缺乏远期随访。今后需进一步挖掘中医特色疗法,进行试验方案设计时充分考虑到剂量与研究结果的可能相关性,加强大样本、多中心的临床研究,延长研究周期,设计合理的跟踪随访机制,在疗效评价中引入骨侵蚀的超声评分、改良Sharp评分等指标,以提高研究结果的可信度,为中医药干预RA骨破坏提供更为有利的证据。

OPG-RANKL-RANK信号系统与骨质疏松治疗的研究进展

OPG-RANKL-RANK信号系统是介导骨吸收和骨形成之间平衡的重要信号通路。骨质疏松是由于各种原因导致的骨吸收和骨形成紊乱,出现骨量减少、骨密度降低且易发生脆性骨折为基础的一种全身性慢性疾病。在骨质疏松的分子研究中,以OPG-RANKL-RANK为靶标来分析其具体机制,通过大量分子细胞生物学实验和临床试验进行药物研究,此领域得到了越来越多的关注。现总结近年来OPG-RANKLRANK信号系统作为骨质疏松潜在药物靶点的研究结论,探讨该信号系统在骨质疏松治疗中的潜能,为靶向药物的开发及骨质疏松的治疗奠定基础。

淫羊藿苷对骨质疏松症模型大鼠OPG/RANKL/RANK轴系统影响的实验研究

目的通过观察不同剂量淫羊藿苷对去势骨质疏松症模型大鼠骨保护素(OPG)、核因子κB受体活化因子(RANK)和核因子κB受体活化因子配体(RANKL)表达的影响,探讨其对骨改建影响的可能机制。方法将健康雌性SD大鼠切除双侧卵巢,造成骨质疏松症大鼠模型,以低、中、高剂量(200,400,800 mg/kg)淫羊藿苷灌胃3月后,取大鼠右后肢胫骨近端干骺端,利用荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测OPG mRNA、RANK mRNA和RANKL mRNA的表达。结果淫羊藿苷上调OPG mRNA的同时下调RANKL mRNA和RANKL mRNA,这种调节作用在高剂量时最为显著。结论淫羊藿苷可影响大鼠OPG mRNA,RANKL mRNA,RANKL mRNA的表达,此作用与骨改建密切相关。

药对“蛇床子-补骨脂”与乳腺癌骨转移裸鼠体重变化与骨代谢的量效关系研究

目的从调节破骨细胞分化的主要途径护骨素(OPG)/细胞核因子κB受体活化因子配体(RANKL)/细胞核因子κB受体活化因子(RANK)系统研究蛇床子-补骨脂温肾药对抑制乳腺癌骨转移的作用机制。方法将42只乳腺癌骨转移裸鼠随机分为模型组、唑来磷酸组、蛇床子组、补骨脂组、2:2配比组、1:3配比组、3:1配比组,每组6只;另备正常裸鼠6只作为正常组。分别给予相应的药液灌胃,唑来磷酸组皮下注射,正常组给予生理盐水灌胃,持续6周。观察裸鼠的体重、骨转移灶病理和OPG、RANKL mRNA表达水平变化。结果 3:1配比组和2:2配比组体重下降率明显低于其他配比组,而2:2配比组低于3:1配比组;不同比例配伍组的骨抗酒石酸酸性磷酶(TRAP)(+)细胞数差异均有统计学意义,2:2配比组优于1:3配比组(P<0.05);不同配比的蛇床子-补骨脂可不同程度地上调OPG基因表达,下调RANKL基因表达,从基因方面调节OPG/RANKL的分泌比例,其中2:2配比组的疗效优于其他配比组。结论不同配比的蛇床子-补骨脂均具有一定的抑制乳腺癌骨转移作用,其中2:2配比组疗效最突出,其作用机制可能是调节了OPG/RANKL基因分泌比例。