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Are bone marrow regenerative cells ideal seed cells for the treatment of cerebral ischemia? 被引量:5
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作者 Yi Li Xuming Hua +3 位作者 Fang Hua Wenwei Mao Liang Wan Shiting Li 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2013年第13期1201-1209,共9页
Bone marrow cells for the treatment of ischemic brain injury may depend on the secretion of a large number of neurotrophic factors. Bone marrow regenerative cells are capable of increasing the secretion of neurotrophi... Bone marrow cells for the treatment of ischemic brain injury may depend on the secretion of a large number of neurotrophic factors. Bone marrow regenerative cells are capable of increasing the secretion of neurotrophic factors. In this study, after tail vein injection of 5-fluorouracil for 7 days, bone marrow cells and bone marrow regenerative cells were isolated from the tibias and femurs of rats, and then administered intravenously via the tail vein after focal cerebral ischemia. Immunohistological staining and reverse transcription-PCR detection showed that transplanted bone marrow cells and bone marrow regenerative cells could migrate and survive in the ischemic regions, such as the cortical and striatal infarction zone. These cells promote vascular endothelial cell growth factor mRNA expression in the ischemic marginal zone surrounding the ischemic penumbra of the cortical and striatal infarction zone, and have great advantages in promoting the recovery of neurological function, reducing infarct size and promoting angiogenesis. Bone marrow regenerative cells exhibited stronger neuroprotective effects than bone marrow cells. Our experimental findings indicate that bone marrow regenerative cells are preferable over bone marrow cells for cell therapy for neural regeneration after cerebral ischemia. Their neuroprotective effect is largely due to their ability to induce the secretion of factors that promote vascular regeneration, such as vascular endothelial growth factor. 展开更多
关键词 neural regeneration brain injury cerebral ischemia seed cells bone marrow transplantation bonemarrow cells bone marrow regenerative cells vascular regeneration factor brain NEUROREGENERATION
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Biodegradable chitin conduit tubulation combined with bone marrow mesenchymal stem cell transplantation for treatment of spinal cord injury by reducing glial scar and cavity formation 被引量:7
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作者 Feng Xue Er-jun Wu +4 位作者 Pei-xun Zhang Li-ya A Yu-hui Kou Xiao-feng Yin Na Han 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2015年第1期104-111,共8页
We examined the restorative effect of modified biodegradable chitin conduits in combination with bone marrow mesenchymal stem cell transplantation after right spinal cord hemisection injury. Immunohistochemical staini... We examined the restorative effect of modified biodegradable chitin conduits in combination with bone marrow mesenchymal stem cell transplantation after right spinal cord hemisection injury. Immunohistochemical staining revealed that biological conduit sleeve bridging reduced glial scar formation and spinal muscular atrophy after spinal cord hemisection. Bone marrow mesenchymal stem cells survived and proliferated after transplantation in vivo, and differentiated into cells double-positive for S100 (Schwann cell marker) and glial fibrillary acidic protein (glial cell marker) at 8 weeks. Retrograde tracing showed that more nerve fibers had grown through the injured spinal cord at 14 weeks after combination therapy than either treatment alone. Our findings indicate that a biological conduit combined with bone marrow mesenchymal stem cell transplantation effectively prevented scar formation and provided a favorable local microenvi- ronment for the proliferation, migration and differentiation of bone marrow mesenchymal stem cells in the spinal cord, thus promoting restoration following spinal cord hemisection injury. 展开更多
关键词 nerve regeneration spinal cord injury spinal cord hemisection biological conduit bonemarrow mesenchymal stem cells stem cells transmission electron microscope cell transplantation neurons nerve fibers NSFC grants neural regeneration
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An Effective Method for Depleting MatureT Lymphocytes from Bone Marrow Cells──Two-step Percoll Centrifugation
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作者 唐继森 王辨明 《Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences)》 SCIE CAS 1994年第2期128-128,共1页
In the present paper we have observed the effect of discontinuous gradient two-step Percoll centrifugation on depleting mature T lymphocytes from normal bone marrow. The pre-/post-Percoll percentage of CD34+, and Leu4... In the present paper we have observed the effect of discontinuous gradient two-step Percoll centrifugation on depleting mature T lymphocytes from normal bone marrow. The pre-/post-Percoll percentage of CD34+, and Leu4+ cells in MNC was counted by using APAAP technique. As the two-step Percoll centrifugation is simple,and time saving, and decreases the incidence of contamination of cultured cells as well,This technique may be of value in serum-free culture of hematopoietic cells and immunological studies. 展开更多
关键词 Percoll centrifugation mature T lymphocyte in bonemarrow CD34+ cells Leu4+ T lymphocytes
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骨髓动员外周血干细胞移植治疗严重肢体缺血的临床应用 被引量:4
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作者 张鸿坤 李鸣 +4 位作者 封华 金炜 赵海格 陈旭东 田路 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 2007年第4期360-363,共4页
目的:探讨外周血干细胞移植改善严重缺血肢体的作用。方法:15例下肢严重缺血的患者,经骨髓动员后,CS-3000Plus机器采集外周血干细胞,直接移植入缺血肢体中,共移植17人次。结果:采用骨髓动员外周血干细胞分离并移植治疗临床上严重肢体缺... 目的:探讨外周血干细胞移植改善严重缺血肢体的作用。方法:15例下肢严重缺血的患者,经骨髓动员后,CS-3000Plus机器采集外周血干细胞,直接移植入缺血肢体中,共移植17人次。结果:采用骨髓动员外周血干细胞分离并移植治疗临床上严重肢体缺血的患者,术后一年,疼痛指数由术前5.0降到术后0,踝肱指数(ABI)由术前0.30提高到术后0.46;6例溃疡5例愈合;无痛行走距离由术前0.15 km提高到术后0.72 km;最大行走距离由术前0.96 km提高到术后2.13 km。结论:骨髓动员外周血干细胞移植能促进缺血肢体新生血管形成,有效改善缺血肢体的疼痛和步行距离,并促进溃疡愈合。 展开更多
关键词 干细胞 缺血 四肢/血液供给 干细胞移植 骨髓细胞
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人骨髓间质干细胞体外扩增、冻存及初步鉴定 被引量:4
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作者 余良宏 康德智 +3 位作者 林建华 张志坚 吴朝阳 傅冷西 《福建医科大学学报》 2007年第2期176-178,共3页
目的探索人骨髓间质干细胞(hMSC)的体外分离、扩增、冻存、复苏的方法。方法无菌条件下抽取骨外伤髓内钉固定手术髓腔内容物,应用Ficoll-Paque分离液分离hMSC,通过传代扩增细胞,“慢冻速融”进行细胞冻存、复苏;流式细胞仪检测hMSC的表... 目的探索人骨髓间质干细胞(hMSC)的体外分离、扩增、冻存、复苏的方法。方法无菌条件下抽取骨外伤髓内钉固定手术髓腔内容物,应用Ficoll-Paque分离液分离hMSC,通过传代扩增细胞,“慢冻速融”进行细胞冻存、复苏;流式细胞仪检测hMSC的表面标志。结果hMSC容易分离获取、体外扩增迅速、冻存复苏简便,复苏后细胞形态保持不变。流式细胞仪检测结果显示,CD34、CD45阴性,CD29及CD71、CD90阳性表达率分别为96.9%,99.1%及4.1%。结论hMSC库有望建立,为组织工程、细胞移植的研究提供种子细胞。 展开更多
关键词 骨髓细胞 质干细胞 低温保存 组织工程 细胞 培养的
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血必净注射液对2Gy照射小鼠造血系统的保护作用 被引量:2
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作者 李德冠 王营营 +5 位作者 王月英 吴红英 王小春 路璐 樊飞跃 孟爱民 《陕西医学杂志》 CAS 2013年第9期1107-1108,1203,共3页
目的:探讨血必净注射液对辐射诱导小鼠造血系统损伤的影响。方法:将ICR小鼠分为对照组、照射组、血必净组。对照组接受假照射,对其余两组进行2Gy全身照射。血必净组小鼠0.4ml/kg腹腔注射,照射前3d开始给药,持续给药8d。血必净末次给药24... 目的:探讨血必净注射液对辐射诱导小鼠造血系统损伤的影响。方法:将ICR小鼠分为对照组、照射组、血必净组。对照组接受假照射,对其余两组进行2Gy全身照射。血必净组小鼠0.4ml/kg腹腔注射,照射前3d开始给药,持续给药8d。血必净末次给药24h后处死小鼠,取外周血和单侧股骨细胞进行计数,取胸腺和脾脏计算脏器指数,检测骨髓细胞CFU-GM。结果:与对照组比较,照射组小鼠外周血白细胞和骨髓有核细胞计数、胸腺和脾脏指数、CFU-GM均明显下降(P<0.05),而血必净组小鼠除胸腺指数外也均显著下降(P<0.05)。与照射组相比,血必净组小鼠外周血白细胞、胸腺指数及CFU-GM有显著提高(P<0.05)。结论:血必净注射液对辐射引起的造血系统损伤有一定的保护作用。 展开更多
关键词 造血系统 辐射效应 造血系统 药物作用 骨髓细胞 细胞计数 动物 实验 小鼠
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静态心肌灌注-代谢显像评价心肌梗死后经冠状动脉介入骨髓干细胞移植治疗的价值 被引量:3
7
作者 川玲 赵文锐 +5 位作者 方庭正 王升 王新强 梁英魁 高连如 朱智明 《心肺血管病杂志》 CAS 2009年第1期1-3,共3页
目的:应用心肌灌注-代谢显像评价心肌梗死(AMI)后经冠状动脉介入移植治疗的疗效。方法:应用单光子发射型断层扫描(SPECT)静态心肌灌注代谢显像对比观察经冠状动脉成形术(PCI)+支架(stent)+心肌骨髓干细胞移植(MBMC)前后的心肌梗死区心... 目的:应用心肌灌注-代谢显像评价心肌梗死(AMI)后经冠状动脉介入移植治疗的疗效。方法:应用单光子发射型断层扫描(SPECT)静态心肌灌注代谢显像对比观察经冠状动脉成形术(PCI)+支架(stent)+心肌骨髓干细胞移植(MBMC)前后的心肌梗死区心肌血流灌注和代谢变化。结果:介入移植治疗前灌注缺损106节段,代谢缺损80节段;介入治疗后灌注缺损84节段,代谢缺损66节段,治疗前后灌注代谢差异无统计学意义(χ2=0.033,P>0.05);介入移植治疗前后人均灌注缺损分别是(3.13±1.14)节段和(2.54±1.30)节段,2组差异有统计学意义(P=0.0005);介入移植治疗前后人均代谢缺损分别是(2.42±1.28)节段和(2±1.28)节段,2组差异有统计学意义(P=0.004)。介入移植治疗后定量分析靶心图灌注显像的总记分(SPS)、代谢显像的总记分(SMS)以及严重度记分(SSS)较治疗前均有下降,但无统计学意义(P=0.184,P=0.608,P=0.166)。结论:静态心肌灌注-代谢显像是观察经冠状动脉介入移植治疗AMI疗效的一种方法。 展开更多
关键词 静态心肌灌注-代谢显像 心肌梗死 干细胞移植
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人参总皂甙对小鼠骨髓基质细胞RNA表达及其细胞因子诱生的影响 被引量:2
8
作者 杨世成 王树和 +1 位作者 张东吉 杨贵贞 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 1994年第1期40-43,共4页
采用胶片法(细胞贴壁胶片生长法)及放射自显影等技术,较系统地观察了人参总甙(TGS)对小鼠骨髓基质细胞RNA表达的时相特点及对细胞因子IL-3、11-6诱生的影响。结果表明.TGS在体外对小鼠骨髓基质细胞RNA的代谢... 采用胶片法(细胞贴壁胶片生长法)及放射自显影等技术,较系统地观察了人参总甙(TGS)对小鼠骨髓基质细胞RNA表达的时相特点及对细胞因子IL-3、11-6诱生的影响。结果表明.TGS在体外对小鼠骨髓基质细胞RNA的代谢有明显的促进效应.并且发现骨髓基质细胞实验上清中IL-3、IL-6因子的活性显著高于正常对照组。在此基础上。又利用放射自显影技术做为胶片法可行性的佐证.取得满意结果。 展开更多
关键词 人参 皂甙 骨髓 基质细胞 小鼠
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新型多孔磷酸钙支架对骨髓间充质干细胞生物学行为的影响 被引量:4
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作者 王淑红 张雄 +1 位作者 张劲娥 黄远亮 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期544-548,共5页
目的评价新型多孔磷酸钙(CPC)作为骨组织工程支架对Beagle犬骨髓间充质干细胞(BMSCs)黏附、增殖及成骨分化等生物学行为的影响。方法将Beagle犬BMSCs接种于新型多孔CPC三维支架表面,以磷酸三钙(TCP)和聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物(PLGA)为... 目的评价新型多孔磷酸钙(CPC)作为骨组织工程支架对Beagle犬骨髓间充质干细胞(BMSCs)黏附、增殖及成骨分化等生物学行为的影响。方法将Beagle犬BMSCs接种于新型多孔CPC三维支架表面,以磷酸三钙(TCP)和聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物(PLGA)为对照组,通过观察细胞形态、绘制细胞生长曲线、测定碱性磷酸酶(ALP)活性、进行茜素红染色并半定量测定骨钙素等方法,检测BMSCs在支架材料上的黏附、增殖及成骨分化情况。结果细胞形态和生长曲线结果显示BMSCs在新型多孔CPC三维支架材料表面分布均匀,生长及增殖活跃。ALP活性半定量结果表明,CPC、TCP组ALP表达强度明显高于PLGA组(P<0.05),CPC组与TCP组间的差异无统计学意义(P>0.05)。骨钙素染色与半定量检测结果均显示:各观察点PLGA组钙盐沉积量明显少于CPC和TCP组(P<0.05),而TCP和CPC组间的差异无统计学意义(P>0.05)。结论本实验所用多孔CPC材料具有与TCP类似但优于PLGA的良好生物相容性,利于BMSCs的黏附、增殖及成骨分化,可作为支架材料与BMSCs共同培养,构建具有成骨能力的组织工程化骨。 展开更多
关键词 多孔磷酸钙 骨髓间充质干细胞 黏附 增殖 分化
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不同培养基培养人脐血间充质干细胞的差异 被引量:8
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作者 赵霞 路希敬 +4 位作者 刘国强 徐敏 邢健 王椋 丁慧芳 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2013年第19期3449-3454,共6页
背景:脐血间充质干细胞为干细胞领域的研究热点,但目前传代及扩增此类细胞尚无简单、有效、完美培养方法。目的:采用不同的培养基分离培养融合状态的间充质干细胞,以筛选一种较好的体外培养人脐血间充质干细胞的方法。方法:无菌条件下... 背景:脐血间充质干细胞为干细胞领域的研究热点,但目前传代及扩增此类细胞尚无简单、有效、完美培养方法。目的:采用不同的培养基分离培养融合状态的间充质干细胞,以筛选一种较好的体外培养人脐血间充质干细胞的方法。方法:无菌条件下取正常足月剖宫产新生儿的脐血,随机分为5组:低糖DMEM(Dulbecco改良的Eagle培养基)组、高糖DMEM组、α-DMEM组、低糖DMEM+干细胞因子组、低糖DMEM+骨髓间充质干细胞培养上清组。用淋巴细胞分离液分离脐血的单个核细胞。将脐血单个核细胞接种于含体积分数为10%胎牛血清的上述培养基中,放置于37℃、体积分数为5%的CO2培养箱内培养,倒置显微镜观察细胞数量和形态的变化并用流式细胞技术分析细胞的表面抗原。结果与结论:①各组间充质干细胞培养48h后贴壁细胞数和细胞存活率的比较:低糖DMEM+干细胞因子组、低糖DMEM+骨髓间充质干细胞培养上清组的贴壁细胞数明显多于低糖DMEM组、高糖DMEM组、α-DMEM组(P<0.05),细胞存活率亦明显高于低糖DMEM组、高糖DMEM组、α-DMEM组(P<0.05)。②各组间充质干细胞在不同培养时间下生长状态的比较:培养第3,6,9,12,15,18,21天低糖DMEM+干细胞因子组、低糖DMEM+骨髓间充质干细胞培养上清组细胞增殖的速度均快于低糖DMEM组、高糖DMEM组、α-DMEM组(P<0.05)。低糖DMEM+干细胞因子组与低糖DMEM+骨髓间充质干细胞培养上清组比较差异无显著性意义。结果可见人脐血间充质干细胞与骨髓间充质干细胞培养上清或干细胞因子共孵育,对脐血间充质干细胞体外分离培养及扩增有支持作用。 展开更多
关键词 干细胞 脐带脐血干细胞 脐血间充质干细胞 低糖DMEM 体外培养 干细胞因子 骨髓间充质干细胞 培养上清 分离培养 扩增 干细胞图片文章
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稳定表达GDNF基因的骨髓基质干细胞对多巴胺能神经元的作用 被引量:1
11
作者 姜晓兵 赵洪洋 +3 位作者 周凤 刘如恩 周伟 张建国 《中风与神经疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期311-313,i001,共4页
目的 制备胶质细胞源性神经生长因子 ( GDNF)基因修饰的骨髓基质干细胞 ( MSCs) ,观察其对多巴胺能神经元的作用 ,探索治疗帕金森氏病的新途径。方法 应用逆转录聚合酶链反应 ( RT- PCR)方法从新生小鼠大脑皮层细胞克隆出 GDNF c DNA... 目的 制备胶质细胞源性神经生长因子 ( GDNF)基因修饰的骨髓基质干细胞 ( MSCs) ,观察其对多巴胺能神经元的作用 ,探索治疗帕金森氏病的新途径。方法 应用逆转录聚合酶链反应 ( RT- PCR)方法从新生小鼠大脑皮层细胞克隆出 GDNF c DNA片断 ,以 p EGFP- C1为载体导入 MSCs,制备稳定表达 GDNF基因的 MSCs工程细胞 ,采用联合培养的技术通过倒置显微镜和免疫组织化学的方法观察 MSCs和 GDNF基因修饰的 MSCs工程细胞与多巴胺能神经元之间的相互作用。结果  MSCs和 GDNF基因修饰的 MSCs工程细胞均能促进多巴胺能神经元的存活和生长 ,MSCs工程细胞作用更强。结论 成功构建了 GDNF基因修饰的 MSCs工程细胞 ,该细胞对多巴胺能神经元有明显营养保护作用 。 展开更多
关键词 基因表达 GDNF基因 骨髓基质干细胞 多巴胺能神经元 胶质细胞源性神经营养因子
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兔骨髓源血管内皮祖细胞的体外培养与鉴定 被引量:2
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作者 程铖 韩莲花 +3 位作者 吕海涛 李红霞 周亚峰 杨向军 《江苏医药》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期815-817,F0003,共4页
目的体外分离、培养、扩增血管内皮祖细胞(EPCs),观察EPCs生长分化过程并对其生物学特性进行鉴定。方法采用密度梯度离心法从兔骨髓中提取单个核细胞,贴壁筛选法分离EPCs,于添加了Singlequotes的EBM-2培养液中扩增培养,对培养10d的细... 目的体外分离、培养、扩增血管内皮祖细胞(EPCs),观察EPCs生长分化过程并对其生物学特性进行鉴定。方法采用密度梯度离心法从兔骨髓中提取单个核细胞,贴壁筛选法分离EPCs,于添加了Singlequotes的EBM-2培养液中扩增培养,对培养10d的细胞进行免疫荧光及免疫组织化学分析。结果培养4d,光电显微镜可见细胞集落形成,梭形贴壁细胞从集落中央以放射状向外周生长;培养7-10d,细胞集落相互连接,呈典型的“鹅卵石”样外观;2周左右可见细胞排列成条索状结构。贴壁细胞呈DIL-ac-LDL及FITC-UEA-1双荧光阳性,阳性率为(65.0±4.0)%;贴壁细胞表达vWF,VEGFR-2和VE-cadherin的阳性率分别为(90.0±2.1)%,(77.0±4.1)%和(78.1±8.2)%。结论骨髓中富含EPCs,成功建立了一整套骨髓源EPCs的分离、体外扩增培养的方法,且操作简便具有较好的可重复性。 展开更多
关键词 骨髓 血管内皮祖细胞
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神经肽YY1受体拮抗剂促进大鼠BMSCs成骨分化和股骨缺损修复 被引量:4
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作者 刘松 吴建群 +5 位作者 胡稷杰 王簕 王钊 孟欢 卓灵剑 郑健雄 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期669-676,共8页
目的探索神经肽Y Y1受体拮抗剂(PD160170)对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨分化以及骨缺损修复的影响。方法第三代大鼠BMSCs成骨分化诱导培养,随机分为4组,对照组(等体积PBS),终浓度分别为10^(-6)、10^(-7)、10^(-8)mol/L Y1受体拮抗... 目的探索神经肽Y Y1受体拮抗剂(PD160170)对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨分化以及骨缺损修复的影响。方法第三代大鼠BMSCs成骨分化诱导培养,随机分为4组,对照组(等体积PBS),终浓度分别为10^(-6)、10^(-7)、10^(-8)mol/L Y1受体拮抗剂三浓度梯度组,在干预7、14 d时,分别进行碱性磷酸酶(ALP)和茜素红染色;在干预7、21 d时,采用q-PCR和Westen blot检测I型胶原(COLI)、骨钙素(OCN)和Runt相关转录因子2(Runx2)基因和蛋白的表达。采用300±20 g雄性SD大鼠构建股骨髁上骨缺损模型,直径为2.5 mm,随机分为3组,每组6只,分别每日局部注射0.2 m L溶液等体积PBS(对照组)、10^(-6)mol/L和10^(-8)mol/L Y1受体拮抗剂溶液,28 d后处死,Micro-CT检测观察骨缺损修复情况。结果 ALP和茜素红染色发现,Y1受体拮抗剂组细胞胞浆内棕色颗粒、细胞外周基质矿化结节均高于对照组,且具有浓度特异性,以10^(-8)mol/L最为明显;q-PCR及Westem blot检测发现,在成骨分化诱导第7天,10^(-8)mol/L Y1受体拮抗剂组COLI m RNA和蛋白表达水平均显著高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);在第21天,10^(-8)mol/L Y1受体拮抗剂组OCN、Runx2 m RNA和蛋白表达明显高于对照组(P<0.05)。通过micro-CT分析发现,在局部注射10^(-6)Y1受体拮抗剂28 d后,骨缺损BV/TV、骨密度、骨小梁数量高于对照组,差异均具有统计学意义(P<0.05);而骨小梁厚度(P=0.07)、骨体积(P=0.35)在各组之间差异无统计学意义。结论神经肽Y Y1受体拮抗剂可促进BMSCs成骨分化以及骨缺损的修复,提示阻断Y1受体信号传导具有预防或治疗骨折、骨质疏松症等潜力,为临床药物研究提供一定的实验依据。 展开更多
关键词 神经肽Y Y1受体拮抗剂 骨髓间充质干细胞 成骨分化 骨缺损
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免疫磁珠法纯化小鼠CD34^+造血干细胞 被引量:3
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作者 林芸 孟凡义 杨艺 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2001年第12期908-909,共2页
目的探讨免疫磁珠法(MiniMACS)能否用于纯化小鼠骨髓CD34+造血干细胞。方法应用免疫磁珠纯化小鼠骨髓CD34+细胞,流式细胞仪(FACS)评估纯化效率,检测纯化后的细胞活力。结果纯化后CD34+细胞纯度81.5%(范围76.80%~85.38%),回收率47.54%(范... 目的探讨免疫磁珠法(MiniMACS)能否用于纯化小鼠骨髓CD34+造血干细胞。方法应用免疫磁珠纯化小鼠骨髓CD34+细胞,流式细胞仪(FACS)评估纯化效率,检测纯化后的细胞活力。结果纯化后CD34+细胞纯度81.5%(范围76.80%~85.38%),回收率47.54%(范围40.50%~54.31%),纯化前后细胞活力不受影响(P=0.169)。结论应用MiniMACS纯化小鼠骨髓可获得高纯度CD34+细胞,并不影响细胞活力。 展开更多
关键词 CD34^+ 免疫磁珠法 纯化 骨髓 造血干细胞 移植物抗宿主病
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同种异体脱蛋白骨复合纤维蛋白胶体内构建组织工程骨 被引量:2
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作者 缪旭东 裴国献 +2 位作者 闫乔生 贾晶 许有 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2013年第16期2869-2873,共5页
背景:已有实验证明复合纤维蛋白胶的异体骨在体外培养中更适合种子细胞生长和增殖。目的:观察复合纤维蛋白胶的脱蛋白骨与单纯脱蛋白骨作为骨髓间充质干细胞支架材料的差异。方法:将28只新西兰大白兔随机分为3组,实验组在兔背部植入复... 背景:已有实验证明复合纤维蛋白胶的异体骨在体外培养中更适合种子细胞生长和增殖。目的:观察复合纤维蛋白胶的脱蛋白骨与单纯脱蛋白骨作为骨髓间充质干细胞支架材料的差异。方法:将28只新西兰大白兔随机分为3组,实验组在兔背部植入复合纤维蛋白胶的脱蛋白骨与自体骨髓间充质干细胞,对照组在兔背部植入单纯脱蛋白骨与自体骨髓间充质干细胞,空白组在兔背部植入单纯脱蛋白骨。结果与结论:随着植入时间的延长,各组植入物碱性磷酸酶活性逐渐增强,但实验组强于对照组与空白组(P<0.01)。实验组与对照组术后4,8周均有新骨形成,且实验组成骨量高于对照组(P<0.01),空白组未见新骨形成。表明复合纤维蛋白胶的脱蛋白骨新骨形成能力优于单纯脱蛋白骨,可作为骨髓间充质干细胞的复合型载体构建于组织工程骨。 展开更多
关键词 生物材料 组织工程骨材料 同种异体 脱蛋白骨 纤维蛋白胶 骨髓间充质干细胞 骨组织工程
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氟脲嘧啶促进Egr-1启动子上调人骨髓基质细胞GM-CSF的表达 被引量:1
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作者 杜楠 裴雪涛 +3 位作者 孙君重 付艳 赵晖 王希良 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2008年第5期428-432,共5页
目的:探索氟脲嘧啶(5-FU)对Egr-1启动子上调人骨髓基质细胞造血因子GM-CSF表达的促进作用,以寻找促进化疗所致造血损伤恢复的方法。方法:构建携带Egr-1调控序列启动的GM-CSF和EGFP双顺反子基因的重组真核表达载体(pCIneo-Egr-1-EGFP-IRE... 目的:探索氟脲嘧啶(5-FU)对Egr-1启动子上调人骨髓基质细胞造血因子GM-CSF表达的促进作用,以寻找促进化疗所致造血损伤恢复的方法。方法:构建携带Egr-1调控序列启动的GM-CSF和EGFP双顺反子基因的重组真核表达载体(pCIneo-Egr-1-EGFP-IRES-GM-CSF,Egr-EG),通过脂质体转染骨髓基质细胞系HFCL,挑出G418抗性的阳性克隆(HFCL/EG)。采用RT-PCR检测5-FU处理的HFCL/EG细胞GM-CSFmRNA表达,用FACS和倒置荧光显微镜观察5-FU诱导HFCL/EG细胞EGFP表达的阳性细胞。在加入5-FU的HFCL/EG细胞培养体系中,用ELISA方法检测GM-CSF的含量;将从脐血中分离的单个核细胞接种于5-FU处理后的HFCL/EG培养上清液培养基中,观察其对GM-CFU的增殖作用;采用活性氧抑制剂N-乙酰半胱氨酸检测5-FU通过活性氧诱导Egr-1启动子CArG序列调控下游基因表达的特异性。结果:构建了Egr-1调控序列启动的双顺反子基因表达载体Egr-EG,获得其转染细胞HFCL/EG。在5-FU处理的HFCL/EG细胞中,RT-PCR显示其GM-CSFmRNA表达增强,流式细胞术证实有EGFP的显著表达。在5-FU处理后,HFCL/EG细胞培养上清液GM-CSF含量和GM-CFU形成数量分别较未处理细胞能明显增高(P<0.01);在5-FU处理的HFCL/EG细胞中,N-乙酰半胱氨酸能明显减少GM-CSF含量(P<0.01)。结论:5-FU能促进Egr-1启动子上调人骨髓基质细胞GM-CSF基因的表达,从而对化疗后的造血损伤产生一定的恢复作用。 展开更多
关键词 EGR-1 5-氟脲嘧啶 粒-巨噬细胞集落刺激因子 骨髓基质细胞 活性氧中间物
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全骨髓贴壁法培养兔骨髓间充质干细胞体外定向成骨诱导分化及鉴定 被引量:13
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作者 肖仕辉 韦庆军 +3 位作者 赵劲民 薄占东 韦积华 李伟岸 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2013年第6期1069-1074,共6页
背景:流式细胞仪分离法和免疫磁珠分离法对细胞活性影响较大,密度梯度离心法虽然能够获得纯度高的单核细胞,但由于多次离心可造成细胞的大量流失且对细胞活性有一定的影响使其应用值得商榷。目的:采用全骨髓贴壁法分离兔骨髓间充质干细... 背景:流式细胞仪分离法和免疫磁珠分离法对细胞活性影响较大,密度梯度离心法虽然能够获得纯度高的单核细胞,但由于多次离心可造成细胞的大量流失且对细胞活性有一定的影响使其应用值得商榷。目的:采用全骨髓贴壁法分离兔骨髓间充质干细胞进行成骨诱导分化及鉴定。方法:采用全骨髓贴壁法体外分离培养兔骨髓间充质干细胞,倒置显微镜下观察细胞形态学特征。在成骨诱导剂作用下,通过碱性磷酸酶染色试剂盒行碱性磷酸酶染色,Ⅰ型胶原免疫细胞化学染色,VonKossa法及茜素红进行矿化结节染色以及电镜下检测兔骨髓间充质干细胞成骨诱导后的形态结构。结果与结论:经诱导后细胞出现与成骨细胞相似的形态学特征,碱性磷酸酶染色阳性,Ⅰ型胶原免疫细胞化学染色,Von-Kossa法及茜素红矿化结节染色阳性。表明经成骨诱导剂诱导后全骨髓贴壁法体外分离纯化培养的兔骨髓间充质干细胞能向成骨细胞方向分化增殖。 展开更多
关键词 干细胞 干细胞培养与分化 全骨髓贴壁法分离法 骨髓间充质干细胞 细胞培养 成骨分化 组织工 程骨 省级基金 干细胞图片文章
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猪髓核基质成分诱导骨髓间充质干细胞分化为脊索样细胞 被引量:3
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作者 李德芳 江增鑫 +2 位作者 曾庆敏 吴靖平 谢晓诚 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第33期5366-5371,共6页
背景:脊索细胞对椎间盘内严酷的内环境有良好的抵抗性,或许是治疗椎间盘退变性疾病合适的种子细胞来源。猪髓核终生含有大量脊索细胞,其基质内含有多种细胞因子可以促进骨髓间充质干细胞向脊索样细胞分化。目的:观察猪髓核基质对骨髓间... 背景:脊索细胞对椎间盘内严酷的内环境有良好的抵抗性,或许是治疗椎间盘退变性疾病合适的种子细胞来源。猪髓核终生含有大量脊索细胞,其基质内含有多种细胞因子可以促进骨髓间充质干细胞向脊索样细胞分化。目的:观察猪髓核基质对骨髓间充质干细胞分化的影响。方法:体外分离、培养、鉴定猪骨髓间充质干细胞;制备猪髓核粉末,并用配置好的DMEM完全培养基重悬粉末制备成含猪髓核组织的DMEM培养基,对骨髓间充质干细胞进行诱导3周,RT-PCR检测脊索细胞标记性基因鼠短尾突变体表型(T)、细胞角蛋白8及细胞角蛋白18的表达。该实验经复旦大学附属金山医院动物实验伦理委员会批准。结果与结论:(1)原代培养的骨髓间充质干细胞具有贴壁生长能力,在特定诱导条件下具有成骨、成脂分化能力,且能表达间充质干细胞表面标记物CD90、CD105;(2)在猪髓核基质成分诱导下骨髓间充质干细胞形态发生变化,表达鼠短尾突变体表型、细胞角蛋白8、细胞角蛋白18;(3)结果显示,猪髓核基质成分能诱导骨髓间充质干细胞分化为具有脊索细胞表型的脊索样细胞,为椎间盘退行性疾病治疗提供可靠的种子细胞。 展开更多
关键词 椎间盘退变 骨髓间充质干细胞 髓核 脊索细胞 全骨髓培养法 鼠短尾突变体表型基因
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人羊膜间充质干细胞移植骨髓抑制小鼠的造血功能 被引量:3
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作者 姚观平 余丽梅 +6 位作者 范振海 方宁 任飞 罗娇 张小雨 王钰莹 刘金伟 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2013年第23期4248-4255,共8页
背景:大剂量化疗药物可造成严重的骨髓损伤,除药物治疗外,干细胞移植已越来越多的用于骨髓损伤的治疗。目的:观察人羊膜间充质干细胞移植对顺铂所致骨髓抑制小鼠造血功能恢复的影响。方法:体外培养人羊膜间充质干细胞,雌性ICR小鼠被随... 背景:大剂量化疗药物可造成严重的骨髓损伤,除药物治疗外,干细胞移植已越来越多的用于骨髓损伤的治疗。目的:观察人羊膜间充质干细胞移植对顺铂所致骨髓抑制小鼠造血功能恢复的影响。方法:体外培养人羊膜间充质干细胞,雌性ICR小鼠被随机分为3组,除空白组外,其余小鼠腹腔注射顺铂诱导ICR小鼠制备骨髓抑制模型,建模后人羊膜间充质干细胞移植组小鼠尾静脉注射人羊膜间充质干细胞3.0×105/g,空白组和模型组注射等量PBS。结果与结论:连续给予顺铂7d后,ICR小鼠体质量明显降低,但模型组与人羊膜间充质干细胞移植组之间差异无显著性意义。模型组小鼠外周血白细胞、淋巴细胞、单个核细胞、红细胞、血红蛋白、红细胞压积和血小板等水平明显低于空白组(P<0.01),于首次给顺铂后第21天开始恢复。人羊膜间充质干细胞移植组外周血的上述指标较模型组提前7d开始恢复,第21天时,已接近或达到空白组水平;与空白组相比,人羊膜间充质干细胞移植后的一两天及移植后的2周出现了一过性的白细胞增高和血小板数增加。第24天,人羊膜间充质干细胞移植组小鼠股骨髓腔冲洗液有核细胞数明显高于模型组(P<0.05),骨髓组织病理学检查结果也显示,人羊膜间充质干细胞移植组小鼠股骨骨髓组织结构明显改善,与空白组相似,骨髓细胞数明显增多,可见较多的巨核细胞,且人羊膜间充质干细胞移植组后2周,骨髓组织可见分布较广的小鼠抗人核单克隆抗体-FITC阳性的移植细胞定植。以上结果表明,人羊膜间充质干细胞移植治疗较早地改善顺铂所致骨髓抑制小鼠的造血功能。 展开更多
关键词 干细胞 干细胞移植 人羊膜间充质干细胞 顺铂 骨髓抑制 造血功能 小鼠 白细胞 红细胞 巴细胞 单个核细胞 血红蛋白 红细胞压积 血小板 国家自然科学基金 干细胞图片文章
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小鼠骨髓间充质干细胞、骨髓单核细胞和胚胎成纤维细胞重编程为诱导性多能干细胞的效率比较
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作者 王尧 王雷 +4 位作者 陆玉华 范向军 朱铭岩 朱沙俊 王志伟 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期1304-1311,共8页
目的比较小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)、小鼠骨髓单核细胞(BM-MNCs)和小鼠胚胎成纤维细胞(MEFs)重编程为诱导性多能干细胞(iPS细胞)的效率。方法用慢病毒LV-ef1a-mOct4-IRES-EGFP、LV-ef1amSox2-IRES-EGFP、LV-ef1a-mKlf4-IRES-EGFP和LV... 目的比较小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)、小鼠骨髓单核细胞(BM-MNCs)和小鼠胚胎成纤维细胞(MEFs)重编程为诱导性多能干细胞(iPS细胞)的效率。方法用慢病毒LV-ef1a-mOct4-IRES-EGFP、LV-ef1amSox2-IRES-EGFP、LV-ef1a-mKlf4-IRES-EGFP和LV-ef1a-mc-Myc-IRES-EGFP感染BMSCs、BMMNCs和MEFs,通过计算碱性磷酸酶染色阳性克隆数比较这3种细胞重编程为iPS细胞的效率。用胚胎干细胞表面标记检测、胚胎干细胞内源基因检测、拟胚体形成实验和畸胎瘤形成实验验证重编程获得的iPS细胞的多能性。结果起源于小鼠BMSCs、BM-MNCs及MEFs的3种iPS细胞均能形成边缘光整的致密克隆,可表达干性基因Nanog、Rex-1、SSEA-1,并能在体内外分化为三胚层组织。但是BMSCs来源的碱性磷酸酶阳性克隆数低于BM-MNCs和MEFs来源的克隆数。结论小鼠BMSCs、BM-MNCs及MEFs均可重编程为iPS细胞,但BMSCs重编程为iPS细胞的效率低于BM-MNCs和MEFs。 展开更多
关键词 诱导性多潜能干细胞 重编程效率 骨髓间充质干细胞 骨髓单核细胞 小鼠胚胎成纤维细胞
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