博宁霉素(Z-893)的分离纯化和结构测定

目的 博宁霉素 (Z- 893)的分离、纯化和结构测定。方法 从轮枝链霉菌平阳变种 (Streptomycesverticillus var.Pingyangensis n.sp)发酵产物争光霉素复合物中分离、纯化博宁霉素 (Z- 893)并通过各种光谱分析确证其化学结构。结果 其化学结构为乙酰博安霉素 (乙酰博来霉素 A6 )。结论 证明博宁霉素 (Z- 893)为一新化合物。

博宁霉素对银屑病试验模型的影响

目的考察博宁霉素对银屑病试验模型的影响。方法1.①博宁霉素分别以5和10mg/kg的剂量,对雌激素期的小鼠腹腔注射,每日一次,连续3d;②分别用含0.1%和0.05%的博宁霉素软膏涂抹雌性小鼠阴道,每日一次,连续3d,考察阴道上皮基底细胞的有丝分裂指数。2.①博宁霉素分别以5和10mg/kg的剂量对小鼠腹腔注射,每日一次,连续15d;②分别用含0.1%和0.05%的博宁霉素软膏涂抹小鼠尾部,连续15d。考察小鼠尾表皮厚度和颗粒层形成的情况。3.分别以1000、100、10、1.0、0.1、0.01μg/ml的博宁霉素作用于小鼠脾细胞悬液,考察T淋巴细胞的增殖程度。结果博宁霉素对雌激素期小鼠阴道上皮有丝分裂有明显的抑制作用,对小鼠尾部表皮增厚和颗粒形成具有明显的促进作用,对T淋巴细胞增殖具明显抑制作用且呈剂量依赖性。结论博宁霉素具有改善和逆转银屑病病理模型的作用。

博宁霉素霜剂对牛乳头瘤病毒所致奶牛乳头瘤的疗效观察

目的 观察博宁霉素霜剂对牛乳头瘤病毒所致奶牛乳头瘤的疗效。方法 将临床患病牛随机分为 2组每次将药物和基质分别涂于试验牛及对照牛乳头皮肤的肿瘤上 ,每日 3次 ,连续进行 10 d。结果 试验组 2例指状乳头状瘤分别于第 6天和第 9天完全脱落 ;4例扁平瘤虽未脱落 ,但瘤体表面均发生明显的剥蚀 ;对照组均未发生此类现象。结论 博宁霉素霜剂对奶牛乳头的皮肤无损害作用 ,但可选择性地使指状乳头瘤脱落 ,扁平瘤剥蚀、脱皮 ,呈现良好的治疗作用。

盐酸博宁霉素对人表皮角质形成细胞、宫颈鳞癌细胞和表皮癌细胞增殖的影响

目的:探讨盐酸博宁霉素对人角质形成细胞HaCaT、人宫颈上皮癌细胞HeLa及人表皮癌细胞A431增殖的影响。方法:采用MTT法检测盐酸博宁霉素处理后培养的HaCaT细胞、HeLa细胞和A431细胞的增殖率。结果:盐酸博宁霉素能剂量依赖性抑制HaCaT细胞和HeLa细胞的增殖,IC_(50)值分别为11.57 μg/mL和16.47μg/mL,但对A431细胞增殖的抑制作用较弱。结论:盐酸博宁霉素的细胞毒性是抗尖锐湿疣药物的治疗学基础。

博宁霉素产生菌-轮枝链霉菌高产株筛选与应用

采用微波辐射7 min与丁胺菌素30μg/mL抗性复合诱变技术,选育博宁霉素产生菌-轮枝链霉菌B03菌株,结果获得一株高产量诱变株HB42,通过生产罐放大应用后,发酵效价与发酵指数均较出发菌株提高95%;经提纯精制后,博霉宁霉素总收率提高5.3%,成品有效组分含量提高4.7%,生产水平与精品质量得到较大幅度提高.该方法操作简便,筛选效果佳,在微生物育种工程中,具有推广应用价值.

博宁霉素注射剂对宠物犬脂溢性皮炎和银屑病病变的疗效观察

目的 观察博宁霉素注射剂治疗宠物犬脂溢性皮炎和银屑病 (牛皮癣 )病变的疗效。方法 经临床诊断的患犬皮下注射给药 ,隔日一次 ,5次为一疗程 ,1～ 2疗程。结果 对脂溢性皮炎 ,在 2 1个病例中总治愈率 5 7% ,总有效率 90 .5 % ;对 3例银屑病变的患犬第 2疗程后 ,1例痊愈 ,2例 80 % ,以上皮损消退。结论 博宁霉素注射液对宠物犬脂溢性皮炎和银屑病均有疗效 ,对脂溢性皮炎效果更明显。

博宁霉素对宫颈人乳头瘤病毒感染患者L1壳蛋白表达及血清免疫因子水平的影响

目的探讨博宁霉素对宫颈人乳头瘤病毒感染L1壳蛋白的表达及其免疫效果。方法选取宫颈人乳头瘤病毒感染患者60例,根据用药不同分为实验组和对照组,每组各30例,对照组患者给予重组人干扰素α2b,10万IU/次,隔天1次,经期停用;实验组患者给予博宁霉素300 mg肌肉注射,隔天1次。治疗10次为1个疗程,连续2个疗程。治疗结束后比较患者HPVL1壳蛋白,血清TNF-α、IL-2、IFN-α水平以及HPV的阳性率。结果治疗后,与对照组比较,实验组患者HPVL1壳蛋白百分比明显上升(P<0.05),实验组患者TNF-α、IFN-α水平升高(P<0.05),IL-2水平降低(P<0.05),实验组患者HPV的阳性率降低(P<0.05)。结论博宁霉素能够降低宫颈人乳头瘤病毒感染患者L1壳蛋白百分比,升高血清TNF-α、IFN-α水平,降低IL-2水平,降低HPV的阳性率。

博宁霉素引起肿瘤细胞衰老的特征

鉴于细胞衰老是抑制肿瘤的重要步骤,考察博宁霉素引起人肿瘤细胞衰老的特征。采用MTT法和克隆形成率实验检测细胞增殖抑制作用;衰老相关的β-半乳糖苷酶染色检测细胞衰老;流式细胞仪测定细胞周期分布以及细胞内活性氧自由基水平;Western blotting检测蛋白的表达水平。结果表明,博宁霉素对人口腔上皮癌KB细胞的作用,明显强于人非小细胞肺癌A549细胞。与阳性对照药多柔比星的作用相似,博宁霉素可引起这两种细胞均出现衰老特征,这与细胞阻滞在G2/M期、细胞内活性氧自由基增加有关。0.1μmol·L-1博宁霉素可以诱导KB细胞衰老,检测到衰老标志蛋白P21的表达明显增加;而高浓度的博宁霉素激活细胞凋亡通路。本研究结果表明:博宁霉素引起细胞衰老,也是其抑制肿瘤细胞增殖的机制之一。

确定盐酸博宁霉素中成盐比例

目的:采用新型混合模式离子交换柱建立新的HPLC-ELSD法确定一类新药盐酸博宁霉素中成盐比例。方法:采用HPLC-ELSD法,采用新型混合模式离子交换柱Acclaim Trinity P1(100 mm×3.0 mm,5μm),以30 mmol·L-1醋酸铵缓冲液(取醋酸铵4.59 g,加水1 900 mL使溶解,用冰醋酸调节pH至5.2,加入乙腈100 mL)-乙腈(50∶50)为流动相,流速为0.3 mL·min-1,柱温为25℃;蒸发光散射检测器的漂移管温度为90℃,氮气作为载气,流速为2.6 mL·min-1;分析18批盐酸博宁霉素中氯离子含量,折算成盐酸含量,并进行了方法学验证。结果:在19.0～308.7μg·mL-1范围内,氯离子浓度与峰面积呈对数相关关系(r=0.999 6),加样回收率分别为91.1%,99.4%,98.6%,RSD分别为2.3%,1.2%,1.3%(n=3),18批盐酸博宁霉素中氯离子含量折算成以盐酸计,平均含量为6.73%。结论:本研究新建的HPLC-ELSD方法专属性强、线性范围宽、耐用性好,通用性很好,能适用于测定盐酸博宁霉素中氯离子含量,进而折算成盐酸含量,在此生产条件下,博宁霉素与盐酸成盐比例为1∶3。

博宁霉素克服人肿瘤细胞多药耐药性的机制

目的:研究博来霉素族新抗生素博宁霉素能否克服肿瘤细胞的多药耐药性。方法:选用耐多柔比星的人乳腺癌MCF-7细胞(MCF-7/DOX)、耐长春新碱的人口腔上皮癌KB细胞(KBV200)及其相应的敏感细胞。MTT法检测细胞增殖的抑制作用;流式细胞仪检测细胞周期的变化以及细胞内活性氧自由基的水平;DNA特异染料Hoechst 33342染色检测染色质凝集;Western blot检测蛋白的表达。结果:MTT法检测到博宁霉素抑制MCF-7/DOX和敏感MCF-7细胞的IC50值分别为0.17和0.10μmol·L-1;抑制KBV200和敏感细胞的IC50值分别为0.38和0.21μmol·L-1。耐药细胞对博宁霉素没有交叉耐药性。博宁霉素使耐药细胞停滞在G2/M期,细胞内活性氧自由基水平增加,染色质发生凝集,引起细胞凋亡,Western blotting检测到降低多药耐药相关蛋白P-糖蛋白的含量。结论:博宁霉素能克服肿瘤细胞的多药耐药性,其作用机制与引起细胞凋亡和降低P-糖蛋白表达有关。