关于几种蛋白氧化后羰基含量的对比研究

羰基含量的测定一直是反应蛋白质氧化程度的重要理化指标,近年来,蛋白中的羰基含量往往采用较简便的DNPH比色法进行检测,但在实际测定过程中存在着蛋白含量不好精确定量、不同种类蛋白紫外吸收波长不统一等问题。且以往研究均是针对单一蛋白的氧化程度进行,鲜有系统性的针对不同种类的蛋白质进行氧化程度与羰基含量相关性研究的报道。针对此问题分别对牛肌原纤维蛋白、牛血清白蛋白以及豌豆蛋白进行了一系列氧化实验及其羰基含量测定,并且在蛋白羰基含量测定方面优化了DNPH比色法,使其可操作性更强,数据稳定性更高。

冻干甲型肝炎减毒活疫苗成品检定方法的优化

目的对冻干甲肝减毒活疫苗成品检定中关键性项目的检定方法进行优化。方法(1)感染性滴度检测:建立微量免疫荧光法,并与常规组织培养ELISA法比较;(2)牛血清白蛋白残留量检测:比较反向间接血凝法、酶联免疫法的重复性、精确性;(3)水分含量测定:建立助溶剂加入法,并比较助溶剂加入前后冻干疫苗水分含量检测结果。结果(1)微量免疫荧光法灵敏度与常规组织培养ELISA法相仿(P>0.05),重复性佳,可提前1周左右出结果;可用Leica Qwin荧光定量分析系统标定化判断结果。(2)反向间接血凝法测定结果不稳定,2批疫苗5次测定结果的变异系数(CV)为39.12%,34.23%;酶联免疫法的重复性,精确性均较佳(CV)为2.12%,2.82%,回收率为101.73%。(3)助溶剂加入前后2批疫苗5次测定结果的CV分别由8.32%,9.03%降为1.85%,1.82%。结论微量免疫荧光法有望代替常规组织培养ELISA法用于疫苗滴度检测;牛血清白蛋白残留量测定中酶联免疫法优于反向间接血凝法;加入助溶剂有利于提高疫苗水分含量检测的重复性。

忆思捷等营养保健产品多肽含量测定方法学研究

研究忆思捷蛋白饮等营养保健产品多肽含量测定方法的适用性。采用福林酚法测定忆思捷蛋白饮等多肽类产品的多肽含量,进行线性、精密度、专属性、准确度考察,并选取已上市同类多肽产品进行多肽含量测定验证,分析该法是否适用于忆思捷蛋白饮等多肽类产品多肽含量测定。多肽线性范围是47~235μg/mL,r=0.998(n=5),线性关系良好。精密度试验和准确度试验的RSD均<2%,精密度、准确度均良好。用辅料进行干扰试验,证明辅料对多肽含量测定无明显影响,该含量测定法专属性较好。福林酚含量测定法适用于测定忆思捷蛋白饮等营养保健产品多肽含量。