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免疫组织化学方法检测牛海绵状脑病(BSE)和羊痒病(Scrapie)
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作者 刘雨田 吴晓东 +1 位作者 邹艳丽 王志亮 《中国动物检疫》 CAS 2004年第3期20-23,共4页
按照本实验室建立的牛海绵状脑病免疫组织化学方法 ,将自制单克隆抗体4C11与PK酶消化处理的牛海绵状脑病阳性切片和羊痒病阳性切片进行反应 ,发现单抗4C11不仅能与牛海绵状脑病阳性切片发生强烈的免疫反应 ,而且也能与羊痒病阳性切片发... 按照本实验室建立的牛海绵状脑病免疫组织化学方法 ,将自制单克隆抗体4C11与PK酶消化处理的牛海绵状脑病阳性切片和羊痒病阳性切片进行反应 ,发现单抗4C11不仅能与牛海绵状脑病阳性切片发生强烈的免疫反应 ,而且也能与羊痒病阳性切片发生强烈的免疫反应。从阳性切片和阴性切片的实验来看 ,单克隆抗体4C11没有非特异性染色反应 ,并且也没有背景染色。用瑞士进口单抗6H4进行的对照实验获得了同样的结果。因此 ,可以用自制的单克隆抗体4C11替代昂贵的进口单抗6H4来监测我国的牛海绵状脑病和羊痒病。 展开更多
关键词 免疫组织 化学方法 牛海绵状脑病 bse 羊痒病 SCRAPIE 检测技术
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Correlation between the Insertion/Deletion Mutations of Prion Protein Gene and BSE Susceptibility and Milk Performance in Dairy Cows 被引量:1
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作者 Shen-rong Hu Yong-tao Huai +3 位作者 Chuan-ying Pan Chu-zhao Lei Hong Chen Xian-yong Lan 《国际感染病学(电子版)》 CAS 2013年第4期153-162,共10页
Objective To investigate the 23 bp and 12 bp insertion/deletion(indel)mutations within the bovine prion protein(PRNP)gene in Chinese dairy cows,and to detect the associations of two indel mutations with BSE susceptibi... Objective To investigate the 23 bp and 12 bp insertion/deletion(indel)mutations within the bovine prion protein(PRNP)gene in Chinese dairy cows,and to detect the associations of two indel mutations with BSE susceptibility and milk performance.Methods Based on bovine PRNP gene sequence,two pairs of primers for testing the 23 bp and 12 bp indel mutations were designed.The PCR amplification and agarose electrophoresis were carried out to distinguish the different genotypes within the mutations.Moreover,based on previous data from other cattle breeds and present genotypic and allelic frequencies of two indels mutations in this study,the corrections between the two indel mutations and BSE susceptibility were tested,as well as the relationships between the mutations and milk performance traits were analyzed in this study based on the statistical analyses.Results In the analyzed Chinese Holstein population,the frequencies of two"del"alleles in 23 bp and 12 bp indel muations were more frequent.The frequency of haplotype of 23del-12del was higher than those of 23del-12ins and 23ins-12del.From the estimated r2and D’values,two indel polymorphisms were linked strongly in the Holstein population(D’=57.5%,r2=0.257).Compared with the BSE-affected cattle populations from the reported data,the significant differences of genotypic and allelic frequencies were found among present Holstein and some BSE-affected populations(P<0.05 or P<0.01).Similarly,there were significant frequency distribution differences of genotypes and alleles among Chinese Holstein and several previous reported healthy dairy cattle(P<0.05 or P<0.01).Moreover,association of genotype and combined genotypes of two indel polymorphisms with milk performance and resistant mastitis traits were analyzed in Holstein population,but no significant differences were found(P>0.05).Conclusions These observations revealed that the influence of two indel mutations within the bovine PRNP gene on BSE depended on the breed and they did not affect the milk production traits,which layed the foundation for future selection of resistant animals,and for improving health conditions for dairy breeding against BSE in China. 展开更多
关键词 Dairy cows Prion protein(PRNP) gene bovine spongiform encephalopathy(bse) Insertion/deletion(indel) mutation Association Milk performance
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文山高峰牛朊蛋白基因(PRNP)23 bp和12 bp插入/缺失多态性分析研究
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作者 种玉晴 和晓明 +8 位作者 邓文宝 农胜虎 方云霞 梁昌兴 何祖春 刘萍丹 岳丹 邓卫东 席冬梅 《家畜生态学报》 北大核心 2024年第4期15-21,共7页
为探讨文山高峰牛朊蛋白基因(prion protein gene,PRNP)启动子区23 bp和第一内含子区12 bp插入/缺失多态性特征,本研究采用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)和琼脂糖凝胶电泳的方法对文山高峰牛PRNP基因23 bp和12 bp位点... 为探讨文山高峰牛朊蛋白基因(prion protein gene,PRNP)启动子区23 bp和第一内含子区12 bp插入/缺失多态性特征,本研究采用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)和琼脂糖凝胶电泳的方法对文山高峰牛PRNP基因23 bp和12 bp位点进行基因分型,得出其多态性数据;通过与文献所报道的牛PRNP数据进行比较分析,得出文山高峰牛对疯牛病抗病性的强弱。结果表明:文山牛PRNP基因启动子区23 bp等位基因频率以缺失型为主(0.654);第一内含子区12 bp等位基因频率分别为插入型0.913,缺失型0.087;缺失型单倍型频率极低(0.082);与德国、英国以及瑞士3个国家所报道的患BSE病牛和健康牛相比较存在显著差异(P<0.05),12 bp等位基因插入/缺失频率与水牛不存在显著差异(P>0.05)。由此可见,较高的12 bp插入型等位基因和极低的缺失型单倍(23 bp插入-12 bp缺失)频率,使得文山高峰牛对BSE疾病具有较好抗病力,通过抗病育种分析能够有效预防疯牛病的发生;对中国地方牛种质资源进行相关抗病性评估,有利于为牛的抗病分子选育提供数据支撑。 展开更多
关键词 文山高峰牛 朊蛋白基因(PRNP) 疯牛病(bse) 多态性
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免疫印迹法检测牛海绵状脑病和羊瘙痒病 被引量:12
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作者 李运敏 田波 +1 位作者 张宝云 董小平 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期494-497,共4页
用大肠杆菌表达的牛朊病毒正常成熟蛋白 (BoPrPC)免疫新西兰白兔 ,获得了与朊病毒蛋白 (PrP)反应的抗体T1。根据致病型朊病毒 (PrPSC)能抵抗蛋白酶消化的特性 ,用蛋白酶K消化脑组织提取物 ,以抗体T1进行免疫印迹反应 ,结果表明从接种羊... 用大肠杆菌表达的牛朊病毒正常成熟蛋白 (BoPrPC)免疫新西兰白兔 ,获得了与朊病毒蛋白 (PrP)反应的抗体T1。根据致病型朊病毒 (PrPSC)能抵抗蛋白酶消化的特性 ,用蛋白酶K消化脑组织提取物 ,以抗体T1进行免疫印迹反应 ,结果表明从接种羊瘙痒病朊病毒 2 6 3K的金黄地鼠脑组织提取物内检测到抗蛋白酶K消化的致病型PrPSC ,而正常金黄地鼠脑组织中没有抗蛋白酶消化的蛋白。以我国正常牛羊为材料 ,制备其脑组织提取物 ,用上述方法和抗体T1进行检测 ,结果没有发现抗蛋白酶K的任何蛋白存在 ,说明没有牛海绵状脑病和羊瘙痒病存在。用 1A8抗体也获得了同样的结果。这些结果表明可以用自制的抗血清检疫牛海绵状脑病和羊瘙痒病 。 展开更多
关键词 牛海绵状脑病 羊瘙痒病 抗体 免疫印迹
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进口肉骨粉中牛成分检测研究 被引量:35
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作者 潘良文 陈家华 +4 位作者 丁燕 潘爱虎 袁政 梁婉琪 张大兵 《生物技术通报》 CAS CSCD 2001年第5期23-26,共4页
根据 18S核糖体基因保守序列设计引物 ,对牛骨粉、鱼粉、牛肉、羊肉、猪肉、鸡肉、鸭肉、鱼肉的DNA样品进行PCR扩增 ,均得到 13 7bp的扩增片段 ;根据牛线粒体的特异基因片段设计引物 ,对上述材料DNA样品进行PCR扩增 ,结果只在牛肉和牛... 根据 18S核糖体基因保守序列设计引物 ,对牛骨粉、鱼粉、牛肉、羊肉、猪肉、鸡肉、鸭肉、鱼肉的DNA样品进行PCR扩增 ,均得到 13 7bp的扩增片段 ;根据牛线粒体的特异基因片段设计引物 ,对上述材料DNA样品进行PCR扩增 ,结果只在牛肉和牛骨粉中出现 2 71bp的扩增。本实验建立了从进口肉骨粉中检测牛成分的PCR方法 ,检测灵敏度达到牛成分含量为 0 .1% (W/W )的水平。用建立起来的方法对进口肉骨粉、鱼粉和饲料添加剂进行了检测 ,结果在 5批肉骨粉中检测出含有可能导致疯牛病的牛成分。 展开更多
关键词 疯牛病 肉骨粉 牛成分 线粒体DNA PCR 检测
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牛朊蛋白基因多态性对疯牛病影响的研究进展 被引量:3
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作者 陈婷 刘万洪 +3 位作者 杨春玲 李强飞 郝甜甜 席冬梅 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第5期150-156,共7页
朊蛋白(prion protein,PRNP)是近年来已证明的人和部分哺乳动物传染性海绵状脑病(transmissible spongiformencephalopathy,TSE)的主要根源,该蛋白编码基因的多态性显著影响了人和动物对TSE的易感性或抗病性。牛传染性海绵状脑病俗称&qu... 朊蛋白(prion protein,PRNP)是近年来已证明的人和部分哺乳动物传染性海绵状脑病(transmissible spongiformencephalopathy,TSE)的主要根源,该蛋白编码基因的多态性显著影响了人和动物对TSE的易感性或抗病性。牛传染性海绵状脑病俗称"疯牛病"。作者分析了疯牛病的起源、监测和预防措施;简要介绍了牛PRNP基因的结构与功能;系统分析了牛科动物PRNP基因非编码区多态性与抗病性作用;总结了牛科动物PRNP基因启动子区域内23bp插入/缺失和第1内含子区域内12bp插入/缺失对疯牛病易感性的影响,为牛的抗病分子育种提供指导。 展开更多
关键词 牛脑部海绵状病(bse) 朊蛋白基因(PRNP) 多态性 抗性
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疯牛病感染因子的检测 被引量:2
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作者 马贵平 张宝云 +2 位作者 李冰玲 田海燕 董小平 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期394-397,共4页
研究目的是对北京某公司研制的一种牛血源性生物制品进行疯牛病感染因子的检测。通过对供体牛及其产地牛进行疯牛病流行病学调查及免疫细胞化学、Westernblot和组织病理学检测,确认这些供体牛没有感染疯牛病,以其血液作为原料研制的生... 研究目的是对北京某公司研制的一种牛血源性生物制品进行疯牛病感染因子的检测。通过对供体牛及其产地牛进行疯牛病流行病学调查及免疫细胞化学、Westernblot和组织病理学检测,确认这些供体牛没有感染疯牛病,以其血液作为原料研制的生物制品没有携带疯牛病病原的危险,本研究也为在我国进一步建立牛源性药品、生物制品中疯牛病感染因子的检测和评估提供了科学资料。 展开更多
关键词 疯牛病 感染因子 检测技术 血源性生物制品 流行病学 组织病理学
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英国保守党政府的疯牛病对策 被引量:5
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作者 魏秀春 《史学月刊》 CSSCI 北大核心 2003年第7期67-71,共5页
自 1 98 6年英国首先确诊疯牛病以来 ,疯牛病在英国横行十余年。在疯牛病问题上 ,英国保守党政府不仅没有正确处理好经济利益与公共健康的关系 ,使公共健康受到疾病的严重威胁 ;而且也没有很好地承担起国际责任 ,导致疯牛病扩散至其他... 自 1 98 6年英国首先确诊疯牛病以来 ,疯牛病在英国横行十余年。在疯牛病问题上 ,英国保守党政府不仅没有正确处理好经济利益与公共健康的关系 ,使公共健康受到疾病的严重威胁 ;而且也没有很好地承担起国际责任 ,导致疯牛病扩散至其他国家。 展开更多
关键词 疯牛病 保守党政府 对策
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韩国解禁美国牛肉引发政治危机对我国的启示 被引量:1
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作者 高彦生 《中国畜牧兽医》 CAS 2008年第8期5-8,共4页
作者剖析了韩国因解禁美国牛肉而引发政治危机事件的发生原因,认为韩国的进口牛肉风波对我国如何科学防范疯牛病牛海绵状脑病传入、妥善处理牛肉解禁问题有着重要的启示意义:①疯牛病已经发展成为社会经济问题,事关国家经济安全和社会... 作者剖析了韩国因解禁美国牛肉而引发政治危机事件的发生原因,认为韩国的进口牛肉风波对我国如何科学防范疯牛病牛海绵状脑病传入、妥善处理牛肉解禁问题有着重要的启示意义:①疯牛病已经发展成为社会经济问题,事关国家经济安全和社会政局稳定;②疯牛病问题是一个科学问题,任何与疯牛病相关国际贸易的决策都要以科学为基础;③应警惕美国通过各种外交途径施加压力,强行采用政治手段解决牛肉贸易纠纷;④有必要根据疯牛病的最新科学证据和国际流行病学状况,适时调整疯牛病防控政策,掌握解禁主动权以最大限度保护国家利益;⑤应坚持正确的舆论导向,普及疯牛病科学知识,增强社会公众的心理承受能力。 展开更多
关键词 国际贸易纠纷 政治危机 牛肉 食品安全 公共卫生 牛海绵状脑病
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Prions朊病毒的研究进展 被引量:2
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作者 林键 《中山大学研究生学刊(自然科学与医学版)》 2003年第4期20-29,共10页
朊病毒(Proteinaceous Infectious Particales简称Prions)病是一种人和动物共患的亚急性海绵状脑病,其病原是一种具有传染性的不含核酸的病原体,故称为感染性朊病毒蛋白(PrP)。但它是如何复制成为异常PrPSc,并沉积在脑组织而引起发病,... 朊病毒(Proteinaceous Infectious Particales简称Prions)病是一种人和动物共患的亚急性海绵状脑病,其病原是一种具有传染性的不含核酸的病原体,故称为感染性朊病毒蛋白(PrP)。但它是如何复制成为异常PrPSc,并沉积在脑组织而引起发病,目前还是生物医学的一大课题,也是指引我们寻找治疗方案的思路。本文就朊病毒的历史背景、发病机制与症状等研究进展进行了综述,并就其预防措施及治疗方案提出了新的思路。 展开更多
关键词 朊病毒 PRIONS 亚急性海绵状脑病 病原体 感染性朊病毒蛋白 发病机制 预防措施 治疗方案 克-雅氏病 PRP
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秦川黄牛成熟朊蛋白单克隆抗体的制备及鉴定
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作者 朱小玲 刘永生 +5 位作者 张杰 吴润 陈豪泰 姜海霞 路伟 谢庆阁 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第9期851-854,共4页
目的制备及鉴定抗秦川黄牛成熟朊蛋白的单抗。方法用重组成熟朊蛋白免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0细胞融合,以间接ELISA方法筛选能够稳定分泌抗成熟朊蛋白的单抗的杂交瘤细胞株。以亲和层析法纯化腹水抗体,检测其Ig类和亚类、效价... 目的制备及鉴定抗秦川黄牛成熟朊蛋白的单抗。方法用重组成熟朊蛋白免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0细胞融合,以间接ELISA方法筛选能够稳定分泌抗成熟朊蛋白的单抗的杂交瘤细胞株。以亲和层析法纯化腹水抗体,检测其Ig类和亚类、效价、相对亲和力以及特异性,并用基因片段表达作图法初步分析抗原表位。结果获得了能够稳定分泌抗牛成熟朊蛋白的杂交瘤细胞株N64,分泌的抗体属于IgG2a,腹水效价为1×105,相对亲和力为0.15μg/ml,Western blot表明该单抗具有较强的特异性。表位分析显示N64单抗仅与羧基端重组朊蛋白反应。结论抗牛成熟朊蛋白的腹水单抗N64效价高、亲和力和特异性强,可以作为疯牛病免疫诊断的核心试剂。 展开更多
关键词 牛海绵样脑病 成熟朊蛋白 单克隆抗体 间接ELISA
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疯牛病研究现状 被引量:1
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作者 魏锁成 《西北民族学院学报(自然科学版)》 2001年第2期55-58,共4页
对目前严重危害世界许多国家和地区的疯牛病的病因、传播途径、检测方法、人类新型克雅氏病及与疯牛病关系的研究进展有必要做详细介绍 。
关键词 疯牛病 新克雅氏病 病因 传播途径 可传播性海绵状脑病 检测方法
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朊病毒与牛海绵状脑病
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作者 李家瑞 陈旭春 《黄冈职业技术学院学报》 2001年第1期88-89,87,共3页
朊病毒是一种裸露的、小分子量、有侵染性的RNA或蛋白质分子。人和哺乳动物的多种神经系统疾病与朊病毒有关。牛海绵状脑病(Bovin spongiform encephalopathy,BSE)病毒与目前在英国发现的一种新型的人防病毒(vCJDV),是同一种病毒。
关键词 朊病毒 牛海绵状脑病 VCJD
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疯牛病与朊蛋白的研究进展 被引量:3
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作者 何炜 李向臣 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2007年第25期7853-7854,7865,共3页
论述了疯牛病的发病历史与现状、疯牛病的临床症状与检测、朊蛋白与蛋白假说和疯牛病的致病机理等。此外,还讨论了治愈疯牛病的可能性。
关键词 疯牛病 朊蛋白 朊蛋白基因
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牦牛朊蛋白基因(Prnp)两个位点多态性与疯牛病抗性关系研究
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作者 王荔华 席冬梅 +1 位作者 李国治 胡建宏 《家畜生态学报》 北大核心 2014年第2期15-20,共6页
为探索牦牛Prnp基因多态对疯牛病抗性的影响,收集288头牦牛肝脏DNA样品,利用PCR、酶切和电泳方法鉴定牦牛Prnp基因启动子区域23bp和第一内含子区域12bp插入/缺失(+/-)多态。结果表明,牦牛23bp插入-插入、插入-缺失和缺失-缺失基因型的... 为探索牦牛Prnp基因多态对疯牛病抗性的影响,收集288头牦牛肝脏DNA样品,利用PCR、酶切和电泳方法鉴定牦牛Prnp基因启动子区域23bp和第一内含子区域12bp插入/缺失(+/-)多态。结果表明,牦牛23bp插入-插入、插入-缺失和缺失-缺失基因型的频率分别为0.027、0.113和0.860,其插入和缺失等位基因的频率分别为0.133和0.867;12bp插入-插入、插入-缺失和缺失-缺失基因型的频率分别为0.627、0.355和0.018,其插入和缺失等位基因的频率分别为0.804和0.196。试验表明,牦牛12bp多态位点具有较高的插入频率,而23bp多态位点具有极低的插入频率;牦牛单倍体以23-12+D23I12为主,频率为0.692;Prnp基因23bp和12bp多态显著影响Prnp基因的表达量(P<0.05),而性别、年龄和毛色对Prnp基因的相对表达量无显著差异(P>0.05)。本结果为今后进一步筛选抗疯牛病牦牛奠定了基础。 展开更多
关键词 牦牛 朊蛋白基因 多态性 疯牛病 抗性
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“疯牛病”威胁进口化妆品卫生安全 被引量:1
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作者 杨哲 《中国卫生监督杂志》 2002年第4期201-204,共4页
通过介绍国内外“疯牛病”致病机理、传播途径的研究进展 ,以及新型变异型CJD的研究进展情况 ,结合化妆品中易受污染的动物提取物原料的应用情况 ,研究讨论我国从疫区进口的化妆品可能受到“疯牛病”致病原污染的可能性。全面禁用含有... 通过介绍国内外“疯牛病”致病机理、传播途径的研究进展 ,以及新型变异型CJD的研究进展情况 ,结合化妆品中易受污染的动物提取物原料的应用情况 ,研究讨论我国从疫区进口的化妆品可能受到“疯牛病”致病原污染的可能性。全面禁用含有发生“疯牛病”地区牛、羊等动物源性原料成分的化妆品 ,有利于防止“疯牛病”传入我国 ,保护广大消费者的健康。为我国卫生行政部门对可能受到“疯牛病”致病原污染的进口化妆品进行严格监督管理提供参考。 展开更多
关键词 疯牛病 新型变异型CJD 化妆品 卫生监督 致病机理
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