纳洛酮对创伤性脑损伤患者血浆ET,CGRP,S-100B含量的影响

【目的】观察纳洛酮对创伤性脑损伤 (TBI)患者血浆内皮素 (ET)、降钙素基因相关肽 (CGRP)、神经组织蛋白 (S 10 0B)含量的影响 ,探讨纳洛酮对急性TBI患者的治疗效果。【方法】用放射免疫测定法测定TBI患者血浆ET 1、CGRP的含量变化 ,用酶联免疫吸附实验测定S 10 0B的含量变化。【结果】①脑损伤后患者血浆ET 1(d1、d3 、d5)明显升高 ,病情越重升高越明显 ;②纳洛酮治疗后血浆ET 1含量下降较对照组显著 ,CGRP早期 (d1)较对照组明显升高 ;③TBI患者血浆中脑损伤特异性蛋白S 10 0B明显升高 ,脑损伤程度越重 ,升高越明显。【结论】①TBI患者血浆ET 1及S 10 0B水平升高 ,与病情严重程度有关。②ET、CGRP平衡失调在TBI的病理过程中起到重要作用。③早期应用纳洛酮可以显著降低ET 1及S 10 0B血浆含量 ,提高CGRP水平 。

探讨神经元烯醇化酶及脑活性肽100β蛋白在毒蕈中毒患者中的应用

目的探讨脑损伤标志物神经元烯醇化酶(NSE)及脑活性肽100β蛋白(S-100β)在急性毒蕈中毒患者诊治中的应用价值,为临床诊疗及预后判断提供循证支持。方法对134例毒蕈中毒患者按PSS评分分为四组,化学发光免疫分析法测定患者血清NSE及S-100β水平,PEMS医学统计分析四组与正常对照组的差异性以及与中毒程度的相关性。结果四个中毒组NSE及S-100β水平均高于正常对照组,其差异具有统计学意义(P<0.05),并且经Pearson分析,分别于0.01和0.05水平与中毒严重程度正相关。结论检测NSE及S-100β,可从循证医学角度反映毒蕈中毒患者的脑损伤程度,并对判断预后有一定作用。日常工作中,应当重视NSE及S-100β等脑损伤标志物的临床应用,及早应对或预防脑损伤所致的脑功能后遗症或死亡,对指导患者救治及判断预后具有一定意义。

脱脂羊脑蛋白水解多肽的分离纯化及抗氧化活性

为制备羊脑蛋白抗氧化肽,本实验对脱脂羊脑蛋白含量及氨基酸组成进行了分析;采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)对枯草芽孢杆菌中性蛋白酶不同酶解时间的酶解液分子质量进行了分析;采用交联葡聚糖凝胶Sephadex G-25和Sephadex G-15对羊脑酶解产物进行了逐级分离纯化,以羟自由基(·OH)和亚硝酸根离子清除能力为指标对分离组分进行抗氧活性评价,并对纯化后的组分抗氧化活性进行了测定。结果表明,脱脂羊脑粉中蛋白含量为60.55%,在测定的17种氨基酸中,谷氨酸和天冬氨酸这两种酸性氨基酸含量最高,且含有7种必需氨基酸;羊脑蛋白经酶解后,分子质量集中在10 k D以下;经Sephadex G-25纯化后,得到了6个组分,其中组分F4的抗氧化活性最强,组分F4经Sephadex G-15纯化后,得到3个组分,其中组分F4-2的抗氧化活性最强,组分F4-2对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基、·OH、超氧阴离子自由基(O_2^-·)、亚硝酸根离子的半数抑制率IC_(50)分别为1.64、2.47、7.98、5.14 mg/m L。

降钙素基因相关肽对大鼠全脑缺血再灌注后海马CA1区活化蛋白-1 DNA结合活性的影响

探讨降钙素基因相关肽 (CGRP)对活化蛋白 - 1(AP - 1)在缺血性脑损伤中的影响及其神经保护作用的机制。方法 采用颈动脉负压分流法制备大鼠全脑缺血再灌注模型 ,用EMSA法和组织化学法观察海马CA1区AP - 1的DNA结合活性以及神经元形态改变。结果 ①缺血再灌 3h ,CGRP能不同程度的增加AP - 1的结合活性 ,其中C4.0组较NS组明显增强 (P <0 .0 5 ) ,C2 .0组也有增强 ,活性由假手术组的 2 .7倍增加为 3 .1倍 ,但较NS组无显著性差异。同时CGRP能不同程度的减轻再灌 72h和 7d的神经元损伤 ,CA1区存活细胞数目较NS组明显增加 (P <0 .0 5 )。结论 CGRP能明显提高缺血后海马CA1区AP - 1的DNA结合活力 ,CGRP的神经保护作用可能与其调节AP -

肺炎合并全身炎性反应综合征患者CRP、NT-proBNP水平变化研究

目的观察肺炎合并与未合并全身炎性反应综合征(SIRS)患者C反应蛋白(CRP)、N-末端脑钠肽前体(NT-proBNP)水平变化情况及临床意义。方法选取2012年9月至2014年2月该院呼吸科收治的肺炎患者60例以及本院同期健康体检者30例,按照是否合并SIRS,分为SIRS组30例,非SIRS组30例以及健康体检组(对照组)30例。全部患者均于入院时抽取静脉血,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定2组患者的血清CRP、NT-proBNP水平,并行肺炎严重指数评分,以住院最后1d资料判断多系统器官功能衰竭(MSOF)。结果入院24h血糖、CRP以及NT-proBNP水平比较,SIRS组明显高于非SIRS组与对照组(P<0.01),而非SIRS组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),CRP水平明显高于对照组(P<0.01);肺炎患者NT-proBNP水平与患者体温、心率、CO2分压、中性粒细胞分数、肺炎严重度指数(PSI)评分密切相关。结论患者血糖和CRP水平与肺炎严重程度密切相关,临床上联合应用CRP和血糖这2项指标对于判断肺炎的转归和疗效具有一定的意义;合并有SIRS的患者NTproBNP水平明显超过普通肺炎患者和健康者,可依据NT-proBNP的水平对肺炎是否合并有SIRS加以区分,临床意义重大。

重组人脑利钠肽的纯化与活性测定

目的:建立重组人脑利钠肽(BNP)的纯化方法,筛选疏水作用层析纯化介质并优化纯化条件。方法:根据带有6×His标签的Dsb A-BNP融合蛋白的特性,采用金属螯合亲和层析(IMAC)、凝血酶酶切去除His-Dsb A、阳离子交换层析等步骤进行粗纯;利用BNP的疏水性,分别选用不同疏水性质的介质Hi Trap Butyl FF、Hi Trap Phenyl(HS)及Source 15进行精纯;用SDS-PAGE和HPLC检测纯化获得的BNP的含量及纯度;用细胞法对BNP进行活性检测。结果:经IMAC、酶切去除标签蛋白及阳离子交换层析纯化后,获得纯度为60%的BNP;Hi Trap Butyl FF、Hi Trap Phenyl(HS)等疏水介质与BNP的吸附效果不佳,而经Source 15反相层析后,BNP的纯度可达98.98%,活性检测与对照品一致。结论:利用Source 15反相层析可获得高纯度、活性优的BNP原液,可满足后期制剂处方实验的要求,为后续研究奠定了基础。

依达拉奉联合丁苯酞对急性脑梗死患者的预后影响

目的探讨依达拉奉联合丁苯酞对急性脑梗死患者血清氨基末端脑钠肽前体(NT-proBNP)、C反应蛋白(CRP)水平变化及预后的影响。方法选择商丘市中心医院96例急性脑梗死患者,建档顺序分为治疗组和对照组各48例。2组均予以常规治疗,于此基础上对照组仅采取依达拉奉治疗,观察组联合丁苯酞治疗,均持续治疗2周。统计对比2组治疗前、治疗2周后神经功能缺损评分(NIHSS)、日常生活能力评分(BI),检测2组治疗前、治疗2周后血清NT-proBNP、CRP水平,观察2组临床疗效和不良反应发生情况。结果 2组治疗前NIHSS评分、BI评分及血清NT-proBNP、CRP水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05);治疗2周后观察组BI评分较对照组升高,NIHSS评分及血清NT-proBNP、CRP水平较对照组下降,差异均有统计学意义(P<0.05);观察组总有效率为89.58%(43/48)高于对照组70.83%(34/48),差异有统计学意义(P<0.05);观察组不良反应发生率6.25%(3/48)与对照组4.17%(2/48)相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论急性脑梗死患者联合应用依达拉奉与丁苯酞治疗效果显著,可有效降低患者血清氨基末端脑钠肽前体、C反应蛋白水平,提高其日常生活能力,且安全性较高。

血清suPAR、BNP、CRP水平检测与ICU重症血流感染患者预后相关性研究

目的探讨血清可溶性尿激酶型纤溶酶原激活物受体(suPAR)、B型脑钠肽(BNP)、C反应蛋白(CRP)水平检测在重症加强护理病房(ICU)重症血流感染患者病情诊断及预后评估中的价值。方法选取自2017年10月至2018年10月收治的78例血流感染患者纳入感染组,根据感染组患者治疗28 d的预后情况分为存活组(n=53)和病死组(n=25);选取同期ICU病房收治的50例非血流感染患者纳入非感染组。检测各组患者的血清suPAR、BNP及CRP水平,比较患者第1、3、5天的急性生理与慢性健康评分系统(APACHEⅡ)评分,并分析suPAR、BNP、CRP水平与APACHEⅡ间的相关性及其对预后的评估价值。结果感染组患者suPAR、BNP及CRP水平均显著高于非感染组,两组间比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。存活组患者suPAR、BNP及CRP水平均明显低于病死组,两组间比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。存活组患者第1、3、5天的APACHEⅡ评分呈递减趋势,且明显低于病死组患者,两组间比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。ICU重症血流感染患者的suPAR、BNP、CRP水平与APACHEⅡ评分呈正相关(r=0.502、0.561、0.496,P<0.05)。受试者工作特征曲线结果显示,suPAR、BNP及CRP对ICU重症血流感染患者预后均有一定的预测作用(P<0.05)。结论血清suPAR、BNP及CRP水平检测对ICU重症血流感染患者的病情程度及其预后具有较好的评估作用。

rhBNP治疗脓毒症相关性脑病患者对S-100β、NSE水平的影响

目的:研究重组人脑利钠肽(rhBNP)治疗脓毒症相关性脑病患者对S-100β蛋白(S-100β)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)水平的影响。方法:选取我院接受治疗的90例脓毒症相关性脑病患者,按照随机数字表法将其随机分为观察组和对照组,每组45例,对照组采用常规方式进行治疗,观察组在对照组基础上注射rhBNP,比较两组临床疗效,治疗前后血流动力学[平均动脉压(MAP)、心脏指数(CI)、中心静脉压(CVP)]、神经细胞因子[S-100β、NSE、N端脑钠肽前体(NT-proBNP)],以及治疗期间不良反应发生情况。结果:观察组治疗总有效率为84.44%,显著高于对照组64.44%。观察组治疗后MAP、CVP水平显著低于治疗前及对照组,CI水平显著高于治疗前及对照组。观察组治疗后S-100β、NSE、NT-proBNP水平显著低于治疗前及对照组。两组治疗期间不良反应总发生率分别为24.44%、15.56%。结论:rhBNP能有效改善脓毒症相关性脑病患者的S-100β、NSE水平,并且具有良好的临床安全性。

重组人脑利钠肽调控丝裂原活化蛋白激酶信号通路减轻心肌缺血再灌注损伤的作用及机制

目的 研究重组人脑利钠肽(recombinant human brain natriuretic peptide,rh-BNP)调控丝裂原活化蛋白激酶信号通路(mitogen activated protein kinase pathway,MAPK)通路减轻心肌缺血再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)损伤的作用及机制。方法 选择无特定病原体级成年雄性Sprague-Dawley大鼠128只。将大鼠按照随机数字表分为假手术(Sham)组、I/R组、I/R+rh-BNP组、阴性对照腺病毒(negative control adenovirus,AdNC)+Sham组、Ad-NC+I/R组、Ad-NC+I/R+rh-BNP组、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinase,p38MAPK)的腺病毒(p38MAPK adenovirus,Ad-p38MAPK)+I/R组、Ad-p38MAPK+I/R+rh-BNP组,每组各16只。采用左冠状动脉前降支结扎的方法建立心肌I/R损伤模型,造模前给予rh-BNP腹腔注射或腺病毒心肌多点注射。再灌注180 min后,检测血清乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)和磷酸肌酸激酶同工酶(creatine kinase isoenzyme,CK-MB)的含量,心肌梗死面积,心肌中活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的含量及磷酸化p38MAPK(phosphorylated p38MAPK,pp38MAPK)、磷酸化JNK(phosphorylated JNK,p-JNK)、磷酸化细胞外调节蛋白激酶1/2(phosphorylated extracellular regulated protein kinases 1/2,p-ERK1/2)的表达水平。结果 I/R组血清LDH和CK-MB含量、心肌梗死面积、心肌中TNF-α和ROS含量及p-p38MAPK、p-JNK的表达水平均高于Sham组,p-ERK1/2的表达水平低于Sham组(P<0.05);I/R+rh-BNP组血清LDH和CK-MB含量、心肌梗死面积、心肌中TNF-α和ROS含量及pp38MAPK的表达水平均低于I/R组(P<0.05),p-JNK及p-ERK1/2的表达水平与I/R组比较无差异(P>0.05);Ad-p38MAPK+I/R+rh-BNP组血清LDH和CK-MB含量、心肌梗死面积、心肌中TNF-α和ROS含量及pp38MAPK的表达水平均高于Ad-NC+I/R+rh-BNP组(P<0.05)。结论 rh-BNP具有减轻心肌I/R损伤的作用,该作用与抑制p38MAPK通路、减轻炎症反应及氧化应激反应有关。

阿托伐他汀钙片与介入溶栓术对早期脑梗死患者的临床研究

目的观察阿托伐他汀钙片与介入溶栓术对早期脑梗死患者过氧化物酶体增生物激活受体γ(PPARγ)、同型半胱氨酸(Hcy)的影响。方法将我院神经内科168例脑卒中患者随机分为试验组及对照组,每组84例。对照组给予阿托伐他汀钙片10 mg,每天1次,口服,持续治疗7 d,试验组在对照组基础上给予介入溶栓术治疗。比较2组患者的血清PPARγ、Hcy、脑钠肽(BNP)、血脂、S100B和高迁移率族蛋白B1(HMGB1)水平。结果治疗后,试验组患者高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和HMGB1水平分别为(1.49±0.41),(9.82±1.65)mmol·L^-1,对照组分别为(1.18±0.29),(7.64±1.48)mmol·L^-1,差异有统计学意义(P<0.05)。试验组患者血清PPARγ、Hcy、BNP、S100B、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平分别为(12.37±3.41)pg·m L^-1,(14.43±2.39)μmol·L^-1,(153.71±45.11)ng·m L^-1,(21.16±3.93)mmol·L^-1,(1.76±0.28)mmol·L^-1,(3.43±0.95)mmol·L^-1,(2.15±0.32)mmol·L^-1,对照组分别为(18.36±4.85)pg·m L^-1,(19.14±3.16)μmol·L^-1,(243.76±78.59)ng·m L^-1,(33.51±5.45)mmol·L^-1,(2.27±0.36)mmol·L^-1,(4.82±1.17)mmol·L^-1,(3.47±0.52)mmol·L^-1,差异均有统计学意义(均P<0.05)。治疗期间,对照组药物不良反应发生率为2.38%,包括恶心2例;试验组药物不良反应发生率为3.57%,包括乏力1例,恶心2例,2组药物不良反应发生率差异无统计学意义(P>0.05)。结论对早期脑梗死患者应用介入溶栓术联合阿托伐他汀钙片治疗,能尽早溶栓,调节患者血脂水平,减少缺血缺氧对脑组织损伤,改善患者预后。

益气活血方对射血分数保留型心力衰竭患者血清BNP、hs-CRP及心功能的影响

目的:观察益气活血方对射血分数保留型心力衰竭(HFpEF)患者进行干预后,其心功能、脑钠肽(BNP)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)的变化情况。方法:将84例HFpEF患者按照随机数字表法分为治疗组和对照组,每组各42例。对照组采用西医标准化治疗方案,治疗组在对照组基础上给予益气活血方治疗,2组疗程均为4周。观察2组治疗前后心功能指标[包括心室收缩末期内径(LVESD)、左心室舒张末期内径(LVEDD)、左室射血分数(LVEF)、6 min步行试验(6MWT)]、BNP及hs-CRP的变化,并评价综合疗效。结果:总有效率治疗组为90.48%(38/42),对照组为80.95%(34/42),2组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后2组LVESD、LVEDD及血清BNP、hs-CRP水平均较治疗前降低,LVEF较治疗前升高,6MWT较治疗前增加,且治疗组各项指标改善情况均优于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:益气活血方能够抑制HFpEF患者体内BNP和hs-CRP的表达,改善心功能指标,增加6MWT距离。

人脑钠肽与人血清白蛋白融合蛋白在毕赤酵母中的分泌表达及其活性

目的在毕赤酵母中表达重组人脑钠肽(BNP)与人血清白蛋白(HSA)融合蛋白,并检测其活性。方法重叠PCR法拼接BNP二联体与HSA基因,插入表达载体pPIC9K,电穿孔法转化毕赤酵母GS115,甲醇诱导表达,并对表达产物进行SDS-PAGE分析、Western blot鉴定及活性检测。结果融合基因(BNP)2-HSA经测序正确,重组表达质粒经双酶切鉴定构建正确。诱导72h,融合蛋白表达量最高,可达200mg/ml,且具有良好的反应原性,其活性为rhBNP标准品的1%。结论已在毕赤酵母中成功表达了具有一定生物活性的(BNP)2-HSA融合蛋白,为开发BNP长效药物奠定了基础。

活化蛋白C、脑钠肽及APACHEⅡ评分在老年重症肺炎患者中的动态变化及与预后的相关性

目的探讨活化蛋白C(APC)、脑钠肽(BNP)及急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ(APACHEⅡ)评分在老年重症肺炎患者中的动态变化,并分析其与预后的相关性。方法选取2016年6月至2018年6月于成都市西区医院诊治的288例老年重症肺炎患者为研究对象,根据患者28天生存情况分为生存组(168例)和死亡组(120例)。用化学发光法和酶联免疫吸附法检测各组患者血清APC和BNP表达水平,用APACHEⅡ评分评估各组患者预后,分析两组患者入组后第1天、第4天和第7天APC、BNP和APACHEⅡ评分的动态变化;应用Logistic回归分析影响老年重症肺炎预后的危险因素,采用ROC曲线分析3项指标联合预测老年重症肺炎预后的价值。结果与死亡组患者相比,生存组患者入组后第1天、第4天和第7天BNP水平[(494.62±34.82)pg/ml、(318.42±27.42)pg/ml和(274.61±20.84)pg/ml]和APACHEⅡ评分[(24.05±4.82)、(18.62±3.71)和(12.13±2.62)]显著增高,差异均有统计学意义(P均<0.001),但APC水平[(289.34±18.39)ng/ml、(357.64±32.71)ng/ml和(427.25±18.45)ng/ml]则显著降低,差异均有统计学意义(t=5.512、35.499、78.552,P均<0.001)。生存组患者随住院时间延长,其BNP水平与APACHEⅡ评分逐渐降低(F=24.538、P<0.001;F=12.945、P<0.001),而APC水平则逐渐升高(F=23.947、P<0.001)。死亡组患者随住院时间的延长,其BNP水平[(749.14±42.92)pg/ml、(814.62±50.47)pg/ml和(904.25±57.15)pg/ml]与APACHEⅡ评分[(28.34±5.17)、(34.51±6.35)和(39.55±7.32)]逐渐升高,差异有统计学意义(F=15.302、P<0.001,F=10.389、P<0.001);而APC水平[(276.23±21.84)ng/ml、(226.38±28.26)ng/ml和(183.43±33.81)ng/ml]逐渐下降,差异有统计学意义(F=34.165、P<0.001)。生存组和死亡组在吸烟史[36.90%(62/168)vs.53.33(64/120)]、慢性呼吸系统病史[(46.43(78/168)vs.65.83(79/120)]、氧分压[(83.27±6.92)mmHgvs.(76.82±8.65)mmHg]及机械通气方面[35.12(59/168)vs.52.50(63/120)],差异均有统计学意义(χ^2=7.677、P=0.006,χ^2=10.630、P=0.001,t=9.881、P<0.001,χ^2=8.661、P=0.003)。Logistic回归分析显示,机械通气(OR=4.627,P<0.001)、APC(OR=2.637,P=0.012)、BNP(OR=3.325,P=0.005)和APACHEⅡ评分(OR=4.831,P<0.001)均为影响老年重症肺炎预后的独立危险因素。ROC曲线显示,与APC、BNP或APACHEⅡ评分单项指标预测比较,3项指标联合预测老年重症肺炎死亡的敏感性、特异性、阳性预测值及阴性预测值(89.42%、81.61%、84.72%和86.03%)均显著升高。结论APC、BNP和APACHEⅡ评分在老年重症肺炎疾病转归中变化明显,为影响老年重症肺炎预后的独立危险因素,3项指标联合可显著提高其预后预测价值。