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支链氨基酸转氨酶1基因沉默对缺血脑损伤大鼠的保护作用
1
作者
曹艳
李恒希
+5 位作者
吴抖威
李佳丽
凌腾晗
蒋鸿雁
李坪
郭小兵
《神经解剖学杂志》
CAS
CSCD
2022年第3期321-326,共6页
目的:探讨支链氨基酸转氨酶1(BCAT1)基因沉默对大鼠缺血性脑损伤的保护作用。方法:选取40只成年雄性SD大鼠随机分为假手术组(sham)、MCAO模型组(MCAO)、MCAO+空白质粒脑室注射组(NC-shRNA)、MCAO+BCAT1干扰质粒脑室注射组(BCAT1-shRNA)...
目的:探讨支链氨基酸转氨酶1(BCAT1)基因沉默对大鼠缺血性脑损伤的保护作用。方法:选取40只成年雄性SD大鼠随机分为假手术组(sham)、MCAO模型组(MCAO)、MCAO+空白质粒脑室注射组(NC-shRNA)、MCAO+BCAT1干扰质粒脑室注射组(BCAT1-shRNA),利用大脑中动脉栓塞法(MCAO)制备脑缺血模型,通过神经功能缺损评分判断大鼠神经功能损伤情况;real time RT-PCR检测大鼠脑缺血部位BCAT1 mRNA的表达水平;利用商品化试剂盒测定缺血脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量;TUNEL染色检测缺血脑组织细胞凋亡情况。结果:MCAO组大鼠神经功能缺损评分升高(P<0.05),BCAT1 mRNA表达水平升高(P<0.05),脑组织梗死灶增大,SOD活性降低(P<0.05),MDA水平升高(P<0.05),TUNEL染色阳性细胞数量增多(P<0.05)。而BCAT1基因沉默可降低缺血性脑损伤后大鼠神经功能缺损评分(P<0.05),降低BCAT1 mRNA表达水平(P<0.05),缩小脑组织梗死灶范围,上调SOD活性(P<0.05),下调MDA含量(P<0.05),减少细胞凋亡(P<0.05)。结论:大鼠脑缺血可导致BCAT1表达上调,BCAT1基因沉默具有一定神经保护作用。
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关键词
支链氨基酸转氨酶
1
缺血性脑损伤
神经保护
大鼠
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职称材料
微小RNA-135a-5p对胰腺癌增殖、迁移和耐药的影响
被引量:
2
2
作者
宋仕军
李忠廉
《中华实验外科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第11期2038-2041,共4页
目的观察微小RNA(miRNA,miR)-135a-5p对胰腺癌细胞增殖、迁移和对顺铂化疗敏感性的影响。方法采用聚合酶链反应检测胰腺癌患者肿瘤组织和癌旁组织,正常胰腺导管上皮细胞HPDE和人源胰腺癌Panc1和AsPc-1细胞中miR-135a-5p的表达;采用脂质...
目的观察微小RNA(miRNA,miR)-135a-5p对胰腺癌细胞增殖、迁移和对顺铂化疗敏感性的影响。方法采用聚合酶链反应检测胰腺癌患者肿瘤组织和癌旁组织,正常胰腺导管上皮细胞HPDE和人源胰腺癌Panc1和AsPc-1细胞中miR-135a-5p的表达;采用脂质体将miR-135a-5p mimic瞬时转染至Panc1和AsPc-1细胞中,采用细胞计数试剂盒(CCK-8)增殖实验和划痕实验检测各组细胞增殖能力和迁移能力;用不同浓度梯度的顺铂处理Panc1和AsPc-1细胞,酶标仪检测各组细胞吸光度值变化,以比较各组细胞顺铂化疗敏感性;使用在线软件预测miR-135a-5p下游靶基因,并使用双荧光素酶报告基因系统进行验证;蛋白质印迹法(Western blot)检测各组细胞支链氨基酸转氨酶1(BCAT1)的表达水平。应用SPSS 18.0统计软件分析,计量数据以均值±标准差(Mean±SD)表示,组间比较使用单因素方差分析。结果胰腺癌组织中miR-135a-5p的表达显著低于癌旁组织(0.23±0.08比1.03±0.18),人源胰腺癌Panc1和AsPc-1细胞中miR-135a-5p的表达显著低于正常胰腺导管上皮细胞HPDE(0.30±0.13,0.56±0.09比0.97±0.12,P<0.05);miR-135a-5p mimic组Panc1和AsPc-1细胞增殖能力和迁移能力受到明显抑制(P<0.05),细胞中BCAT1蛋白表达水平明显降低,双荧光素酶报告基因实验证实miR-135a-5p可靶向调控BCAT1基因的表达。miR-135a-5p mimic组Panc1细胞对顺铂化疗敏感性明显提高(P<0.05)。Panc1细胞共转染miR-135a-5p mimic和BCAT1过表达载体,可部分逆转miR-135a-5p上调介导的细胞增殖、迁移能力减弱和对顺铂化疗敏感性的增加。结论miR-135a-5p在胰腺癌中低表达,上调miR-135a-5p可通过靶向BCAT1基因抑制胰腺癌细胞增殖、迁移,增加顺铂化疗敏感性。
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关键词
微小RNA-
1
35a-5p
支链氨基酸转氨酶
1
胰腺癌
耐药
原文传递
题名
支链氨基酸转氨酶1基因沉默对缺血脑损伤大鼠的保护作用
1
作者
曹艳
李恒希
吴抖威
李佳丽
凌腾晗
蒋鸿雁
李坪
郭小兵
机构
昆明医科大学人体解剖学与组织胚胎学系
遂宁市中心医院病理科
出处
《神经解剖学杂志》
CAS
CSCD
2022年第3期321-326,共6页
基金
国家自然科学基金(82060241,81960817)
云南省教育厅科学研究基金(2017zDX164)
+1 种基金
昆明医科大学联合专项(202101AY070001-037)
昆明医科大学联合重点专项(202101AY070001-002)。
文摘
目的:探讨支链氨基酸转氨酶1(BCAT1)基因沉默对大鼠缺血性脑损伤的保护作用。方法:选取40只成年雄性SD大鼠随机分为假手术组(sham)、MCAO模型组(MCAO)、MCAO+空白质粒脑室注射组(NC-shRNA)、MCAO+BCAT1干扰质粒脑室注射组(BCAT1-shRNA),利用大脑中动脉栓塞法(MCAO)制备脑缺血模型,通过神经功能缺损评分判断大鼠神经功能损伤情况;real time RT-PCR检测大鼠脑缺血部位BCAT1 mRNA的表达水平;利用商品化试剂盒测定缺血脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量;TUNEL染色检测缺血脑组织细胞凋亡情况。结果:MCAO组大鼠神经功能缺损评分升高(P<0.05),BCAT1 mRNA表达水平升高(P<0.05),脑组织梗死灶增大,SOD活性降低(P<0.05),MDA水平升高(P<0.05),TUNEL染色阳性细胞数量增多(P<0.05)。而BCAT1基因沉默可降低缺血性脑损伤后大鼠神经功能缺损评分(P<0.05),降低BCAT1 mRNA表达水平(P<0.05),缩小脑组织梗死灶范围,上调SOD活性(P<0.05),下调MDA含量(P<0.05),减少细胞凋亡(P<0.05)。结论:大鼠脑缺血可导致BCAT1表达上调,BCAT1基因沉默具有一定神经保护作用。
关键词
支链氨基酸转氨酶
1
缺血性脑损伤
神经保护
大鼠
Keywords
branched-chain
amino
acid
aminotransferase
1(
bcat
1)
ischemic brain injury
neuroprotection
rat
分类号
R743.3 [医药卫生—神经病学与精神病学]
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职称材料
题名
微小RNA-135a-5p对胰腺癌增殖、迁移和耐药的影响
被引量:
2
2
作者
宋仕军
李忠廉
机构
天津市南开医院肝胆胰外科
出处
《中华实验外科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第11期2038-2041,共4页
文摘
目的观察微小RNA(miRNA,miR)-135a-5p对胰腺癌细胞增殖、迁移和对顺铂化疗敏感性的影响。方法采用聚合酶链反应检测胰腺癌患者肿瘤组织和癌旁组织,正常胰腺导管上皮细胞HPDE和人源胰腺癌Panc1和AsPc-1细胞中miR-135a-5p的表达;采用脂质体将miR-135a-5p mimic瞬时转染至Panc1和AsPc-1细胞中,采用细胞计数试剂盒(CCK-8)增殖实验和划痕实验检测各组细胞增殖能力和迁移能力;用不同浓度梯度的顺铂处理Panc1和AsPc-1细胞,酶标仪检测各组细胞吸光度值变化,以比较各组细胞顺铂化疗敏感性;使用在线软件预测miR-135a-5p下游靶基因,并使用双荧光素酶报告基因系统进行验证;蛋白质印迹法(Western blot)检测各组细胞支链氨基酸转氨酶1(BCAT1)的表达水平。应用SPSS 18.0统计软件分析,计量数据以均值±标准差(Mean±SD)表示,组间比较使用单因素方差分析。结果胰腺癌组织中miR-135a-5p的表达显著低于癌旁组织(0.23±0.08比1.03±0.18),人源胰腺癌Panc1和AsPc-1细胞中miR-135a-5p的表达显著低于正常胰腺导管上皮细胞HPDE(0.30±0.13,0.56±0.09比0.97±0.12,P<0.05);miR-135a-5p mimic组Panc1和AsPc-1细胞增殖能力和迁移能力受到明显抑制(P<0.05),细胞中BCAT1蛋白表达水平明显降低,双荧光素酶报告基因实验证实miR-135a-5p可靶向调控BCAT1基因的表达。miR-135a-5p mimic组Panc1细胞对顺铂化疗敏感性明显提高(P<0.05)。Panc1细胞共转染miR-135a-5p mimic和BCAT1过表达载体,可部分逆转miR-135a-5p上调介导的细胞增殖、迁移能力减弱和对顺铂化疗敏感性的增加。结论miR-135a-5p在胰腺癌中低表达,上调miR-135a-5p可通过靶向BCAT1基因抑制胰腺癌细胞增殖、迁移,增加顺铂化疗敏感性。
关键词
微小RNA-
1
35a-5p
支链氨基酸转氨酶
1
胰腺癌
耐药
Keywords
MicroRNA-
1
35a-5p
Branched chain
amino
acid
aminotransferase
1
Pancreatic cancer
Drug resistance
分类号
R [医药卫生]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
支链氨基酸转氨酶1基因沉默对缺血脑损伤大鼠的保护作用
曹艳
李恒希
吴抖威
李佳丽
凌腾晗
蒋鸿雁
李坪
郭小兵
《神经解剖学杂志》
CAS
CSCD
2022
0
下载PDF
职称材料
2
微小RNA-135a-5p对胰腺癌增殖、迁移和耐药的影响
宋仕军
李忠廉
《中华实验外科杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2019
2
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