乳腺癌细胞条件培养基对骨髓间充质干细胞生物学行为的影响

目的探讨MCF-7乳腺癌细胞条件培养基对骨髓间充质干细胞(BMSC)增殖、凋亡和迁移的影响及分子机制。方法正常环境下培养的BMSC为对照组,以MCF-7细胞条件培养基培养的BMSC为MCF-7条件培养基组,向MCF-7条件培养基组添加10 nmol/L GSK690693(Akt抑制剂)为Akt抑制剂组,向MCF-7条件培养基组添加10µmol/L Reparixin(CXCR1/2抑制剂)为CXCR1/2抑制剂组。MTT实验检测各组BMSC增殖情况,Annexin V-FITC/PI双标记流式细胞凋亡实验检测各组BMSC凋亡率,Transwell细胞迁移实验检测各组BMSC的迁移能力,酶联免疫吸附试验检测两种细胞培养上清液和MCF-7细胞条件培养基中白细胞介素(IL)-8蛋白含量,Western blot检测各组BMSC的蛋白激酶B(Akt)/磷酸化Akt(p-Akt)和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)/磷酸化mTOR(p-mTOR)蛋白表达。结果与对照组相比,MCF-7条件培养基组BMSC的细胞增殖水平、迁移数目以及p-Akt和p-mTOR蛋白相对表达量均增高,细胞凋亡率降低(P<0.05);与MCF-7条件培养基组相比,CXCR1/2抑制剂组和Akt抑制剂组BMSC的细胞增殖水平、迁移数目以及p-Akt和p-mTOR蛋白相对表达量均降低,细胞凋亡率增加(P<0.05);MCF-7细胞条件培养基和MCF-7培养上清液中IL-8蛋白含量均较BMSC培养上清液中IL-8蛋白含量高(P<0.05)。结论MCF-7细胞条件培养基通过激活Akt-mTOR信号通路促进BMSC增殖和迁移,抑制BMSC凋亡,其中IL-8-CXCR1/2轴发挥关键作用。

国医大师张震疏调气机学术思想在肉芽肿性乳腺炎的运用

国医大师张震教授是我国中医证候学系统研究的先驱学者之一,张老结合自身70多年的中医临床与科研经验,创立了云岭中医疏调学派。其创立的疏调气机学术思想不局限于传统的疏肝理气,而是以疏理肝气、调护脾肾为基础,同时兼顾其他有关证候的统筹调治,即以肝为主体、脾肾为侧翼,兼顾其他治疗法则。疏调气机的核心或关键在于舒展肝气,恢复、调整、激活其疏泄功能,以保持人体气机的条畅运行。作者有幸拜于张老门下,受益匪浅,运用张老疏调气机学术思想治疗肉芽肿性乳腺炎取得了较好的效果。

自主呼吸控制技术在左侧乳腺癌放疗中对心脏及其亚结构的保护研究

目的:探讨自主呼吸控制(ABC)技术在左侧乳腺癌放疗中对心脏及其亚结构的保护。方法:回顾性选取2020年8月至2022年5月深圳市人民医院收治的50例左侧乳腺癌放疗患者,分别在其ABC深吸气屏气(ABC-DIBH)CT和自由呼吸(FB)CT影像上行调强放疗计划设计,比较两种状态下心脏以及心脏亚结构左心室(LV)、左心房(LA)、右心室(RV)、右心房(RA)、左主干(LMCA)、左前降支(LAD)、左回旋支(LCX)、右冠状动脉(RCA)等危及器官(OARs)的剂量参数。结果:对比FB,ABC-DIBH状态下心脏的2%体积剂量(D2)、平均剂量(Dmean)、剂量覆盖的百分比体积(V30、V20、V10、V5)分别降低32.91%[绝对降低(1 279.11 cGy)]、36.12%(195.94 cGy)、58.95%(2.8%)、54.32%(3.58%)、50.14%(5.56%)、46.22%(9.67%),差异均具有统计学意义(t=10.28、12.81、9.16、10.28、12.82、12.24,P<0.01)。心脏亚结构LV、LA、RV、RA、LMCA、LAD、LCX、RCA的Dmean分别降低37.64%(285.92 cGy)、15.38%(23.68 cGy)、34.12%(118.93 cGy)、9.72%(12.52 cGy)、22.17%(47.99 cGy)、31.81%(820.63 cGy)、16.51%(34.72 cGy)、14.86%(34.11 cGy),差异均具有统计学意义(t=9.50、3.71、6.20、8.65、3.18、10.92、4.26、6.71,P<0.01)。结论:ABC技术通过深吸气屏气扩大心脏与靶区之间的距离,极大程度降低了心脏及其亚结构所受剂量,可对心脏及其亚结构形成有效保护,能够消除呼吸运动造成的乳腺癌靶区位置的动态变化,避免靶区漏照、正常组织多照、剂量偏差等问题。

MRI联合扩散峰度成像对乳腺良恶性病变的鉴别诊断价值研究

目的 探索磁共振成像(MRI)联合扩散峰度成像(DKI)对乳腺良恶性病变的鉴别诊断价值。方法 82例乳腺病变患者,均进行MRI检查及DKI检查。比较乳腺良、恶性病变患者的DKI参数值;以病理检查为金标准,比较MRI单独检查与联合DKI检查的诊断效能(特异度、灵敏度、准确度)。结果 病理学检查显示:恶性病变患者50例,良性病变患者32例。恶性病变患者的平均峰度系数(MK)、横向峰度系数(AK)、径向峰度系数(RK)、各向异性系数(FA)分别为(0.83±0.09)、(0.99±0.14)、(1.07±0.30)、(0.28±0.06),均高于良性病变患者的(0.50±0.11)、(0.51±0.16)、(0.63±0.18)、(0.18±0.03),平均扩散系数(MD)(1.07±0.14)×10^(-3) mm^(2)/s低于良性病变患者的(1.73±0.50)×10^(-3) mm^(2)/s,差异有统计学意义(P<0.05)。良、恶性病变患者的径向扩散系数(RD)比较,差异无统计学意义(P>0.05)。以病理检查为金标准,MRI联合DKI检查诊断乳腺恶性病变的特异度、灵敏度、准确度分别为96.88%、92.00%、93.90%,均高于MRI单独检查的75.00%、76.00%、75.61%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 MRI联合DKI检查对乳腺良恶性病变具有较高的鉴别诊断价值,可提高诊断特异度、灵敏度及准确度。

lncRNA SNHG 1对乳腺癌细胞迁移、侵袭和上皮-间质转化的影响及其机制

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)核仁小分子RNA宿主基因1(SNHG 1)对乳腺癌细胞迁移、侵袭和上皮-间质转化(EMT)的影响及其作用机制。方法收集20例乳腺癌患者的癌组织与癌旁正常组织,培养人正常乳腺上皮细胞MCF-10A及乳腺癌细胞MCF-7、BT-549、MDA-MB-231和MDA-MB-468,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)方法检测组织和细胞中SNHG 1与miR-641表达量。以BT-549细胞为研究对象,分为A~D组,分别转染si-NC(A组)、si-SNHG1(B组)、si-SNHG1+anti-miR-641-NC(C组)、si-SNHG1+anti-miR-641(D组),采用RT-qPCR检测细胞中SNHG 1和miR-641表达量,采用Transwell实验检测细胞侵袭和迁移能力,用Western blot检测细胞EMT相关蛋白E-cadherin、N-cadherin和Vimentin表达量。将BT-549细胞分为E~H组,分别共转染SNHG1-WT与miR-641 mimics(E组)、SNHG1-WT与miR-NC(F组)、SNHG1-MUT与miR-641 mimics(G组)以及SNHG1-MUT与miR-NC(H组),采用双荧光素酶报告基因实验验证SNHG 1和miR-641间是否存在互作。结果SNHG 1在乳腺癌组织中高表达(t=4.81,P<0.05),miR-641在乳腺癌组织中低表达(t=7.96,P<0.05)。与正常乳腺上皮细胞MCF-10A相比,4种乳腺癌细胞中SNHG 1表达明显上调(t=8.11~10.79,P<0.05),而miR-641表达明显降低(t=9.16~11.17,P<0.05)。相较于A组,B组BT-549细胞的迁移及侵袭能力降低,N-cadherin和Vimentin蛋白表达量降低,E-cadherin蛋白和miR-641表达升高(t=3.95~19.45,P<0.05)。相较于C组,D组BT-549细胞迁移、侵袭能力增强,N-cadherin和Vimentin蛋白表达升高,E-cadherin蛋白表达降低(t=3.59~13.83,P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验结果显示,E组荧光素酶活性低于F组(t=8.37,P<0.05),G组与H组荧光素酶活性比较无统计学差异(P>0.05)。结论SNHG 1在乳腺癌组织和细胞中高表达,下调其表达可通过靶向miR-641抑制乳腺癌细胞迁移、侵袭及EMT过程。

新型Hsp90/HDAC双靶点抑制剂对乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖、侵袭和迁移的影响及其机制

目的 研究新型热休克蛋白90(Hsp90)/组蛋白去乙酰化酶(HDAC)双靶点抑制剂FXX-W-12-4对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响及其机制。方法 采用CCK-8实验检测FXX-W-12-4对MDA-MB-231细胞活力的影响,并计算其半致死浓度(IC50)作为后续实验中浓度设定的参考值。以IC50值为依据,在MDA-MB-231细胞中分别加入终浓度为0、100、200、300 nmol/L的FXX-W-12-4(分别设为A、B、C、D组),采用划痕实验、Transwell实验分别检测FXX-W-12-4对各组MDA-MB-231细胞侵袭以及迁移能力的影响。采用Western Blot实验检测各组MDA-MB-231细胞中ac-H3、Hsp70等蛋白的相对表达量。结果 CCK-8实验结果显示,随着FXX-W-12-4浓度的升高,MDA-MB-231细胞活力逐渐下降(F=2 663.00,P<0.05)。划痕实验结果显示,与A组相比,B~D组MDA-MB-231细胞在第12、24、48小时时迁移能力均明显降低(F=86.47~212.59,P<0.05)。Transwell实验结果显示,与A组相比,随着FXX-W-12-4浓度的升高,B~D组MDA-MB-231细胞的侵袭能力均受到了抑制(F=68.67,P<0.05)。Western Blot检测结果显示,与A组比较,随着FXX-W-12-4浓度的增加,B~D组MDA-MB-231细胞中ac-H3、Hsp70蛋白相对表达量显著性增高(F=645.60、1 017.00,P<0.05),而p-Akt、p-mTOR蛋白表达量显著性下降(F=480.30、14.32,P<0.05)。结论 新型Hsp90/HDAC双靶点抑制剂FXX-W-12-4可有效抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖、侵袭和迁移,其抑制作用可能是通过调节Akt/mTOR通路实现的。

运动速度及文胸支撑强度对乳房运动的影响

为探究在运动中不同支撑强度文胸对乳房晃动的影响,本文选择3名75C罩杯女性和3件不同支撑强度文胸,利用QUALISYS动态捕捉仪采集了受试者在3种运动速度下的乳房位移数据。通过建立躯干坐标系,获得乳房相对躯干的位移,并运用SPSS进行统计分析。结果表明:随着运动速度的增加,乳房相对位移极差在X、Y、Z方向上均随之增大,且当速度从6 km/h增加到8 km/h时,乳房在Z方向上的增幅约为X方向的2倍;相较于普通文胸,高支撑运动文胸可减少乳房X、Y方向上约30%~50%的晃动,Z方向约20%~40%,总体优于中支撑运动文胸约5%~15%。对C罩杯女性而言,运动时穿着高支撑运动文胸可有效减小乳房三维晃动幅度,尤其是前后和左右方向的晃动。

miR-429对乳腺癌细胞增殖和迁移的影响及其机制

目的探讨miR-429对乳腺癌细胞增殖和迁移的影响及其机制。方法采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法和免疫印迹法,分别检测乳腺癌MCF-7、MDA-MB-231、MDA-MB-468、BT-549细胞及正常乳腺上皮细胞MCF-10A的eIF4E mRNA和蛋白相对表达量。在MCF-7细胞中转染miR-429 mimics(A组)、mimics NC(B组)、miR-429 inhibitors(C组)及inhibitors NC(D组),采用RT-qPCR法、CCK8法、细胞划痕实验和免疫印迹法检测A~D组细胞miR-429表达情况、细胞增殖和迁移情况、eIF4E mRNA和蛋白相对表达量。在293T细胞中转染eIF4E-3′UTR-Wt+miR-429 mimics(E组)、eIF4E-3′UTR-Wt+mimics NC(F组)、eIF4E-3′UTR-Mut+miR-429 mimics(G组)、eIF4E-3′UTR-Mut+mimics NC(H组),检测E~H组细胞相对荧光素酶活性,分析miR-429对eIF4E的靶向调控作用。结果RT-qPCR与免疫印迹检测结果显示,MCF-7、MDA-MB-231、MDA-MB-468、BT-549细胞中的eIF4E mRNA以及蛋白的相对表达量均明显高于正常乳腺上皮细胞MCF-10A(F=74.414、1981.243,P<0.01)。RT-qPCR法检测结果显示,A组细胞的miR-429相对表达量明显高于B组(t=25.390,P<0.01),而eIF4E mRNA相对表达量明显低于B组(t=-6.363,P<0.05),C组细胞miR-429相对表达量明显低于D组(t=-4.652,P<0.05),而eIF4E mRNA相对表达量明显高于B组(t=-2.928,P<0.05)。CCK8实验检测结果显示,与B组细胞相比,A组细胞第24、48、72小时时的增殖活力明显降低(F=26.148~40.997,P<0.01);与D组细胞相比,C组细胞第24、48、72小时增殖活力明显增高(F=6.410~82.593,P<0.05)。细胞划痕实验显示,A组细胞愈合率明显低于B组(t=-22.584,P<0.01),C组细胞愈合率明显高于D组(t=11.464,P<0.01)。免疫印迹法检测结果显示,A组细胞中eIF4E蛋白相对表达量明显低于B组(t=-20.355,P<0.01),C组细胞eIF4E蛋白相对表达量明显高于D组(t=3.622,P<0.01)。双荧光素酶报告基因实验结果显示,各组细胞相对荧光素酶活性比较差异具有显著性(F=366.823,P<0.05),而且E组细胞相对荧光素酶活性显著低于F组(t=-42.961,P<0.01)。结论miR-429或通过靶向调控eIF4E基因进而抑制乳腺癌细胞的增殖和迁移。

行走过程中左右侧乳房运动的不对称性研究

探讨左右侧乳房的运动学特征和差异,为运动中如何保护乳房及运动文胸的研究和设计提供理论依据和建议。方法:运用Qualisys红外光动作捕捉系统测试12名C罩杯女性在6km/h行走过程中裸胸及穿运动文胸状态下左右两侧乳房的运动学特征,采集频率为200 Hz。结果:两侧乳房在着运动文胸和裸胸2种状态下有相似的运动轨迹;裸胸走时两侧乳房的运动范围差异较大,着运动文胸走时两侧乳房的运动范围差异较小。结论:裸胸时两侧乳房的运动范围存在显著性差异,左侧乳房的运动范围明显大于右侧乳房;着运动文胸时两侧乳房的运动范围差异减小,左侧乳房位移减小率明显大于右侧乳房位移减小率,着运动文胸可以减小两侧乳房运动范围的差异。

基于BP和GRNN神经网络的乳房运动轨迹预测

用科学预测模型对乳房运动轨迹进行准确的预测,可以节约大量的计算和分析时间。分别建立BP和GRNN神经网络模型,将乳头点的运动坐标作为输入值,预测乳房其他4个部位的运送轨迹。结果表明,两种预测模型都可以较好地实现乳房运动轨迹的预测。BP神经网络可以预测出乳房4个测量点的运动轨迹,但要求样本量必须足够大,且网络参数不好确定,乳房轨迹预测时所需时间较长,效率低;GRNN神经网络克服了BP神经网络的缺点,预测值更接近真实值,4个测量点预测值分别比BP神经网络高出5.95%,5.33%,6.37%,6.97%,可以较好地预测乳房运动轨迹,其预测值分别达到了真实均值的94.68%,93.87%,93.76%,94.79%。

CD73对人乳腺癌细胞侵袭力和运动力的影响

目的:探讨CD73在乳腺癌细胞中的表达特征及其与乳腺癌细胞侵袭转移的相关性。方法:①采用半定量RT-PCR法和高压液相层析法检测6种乳腺癌细胞株CD73的mRNA表达及CD73的活性。②构建CD73真核表达载体pcDNA-NT5E,采用脂质体转染法将其导入无侵袭力、CD73低表达的乳腺癌细胞T47D,同时以空载体质粒pcDNA和未转染细胞作为对照。利用Transwell体外侵袭力实验和运动力实验,观察转染pcDNA-NT5E对T47D细胞侵袭力和运动力的影响。结果:①高度恶性乳腺癌细胞的CD73mRNA水平和CD73活性均显著高于低度恶性细胞(P<0·05)。②转染后细胞T47D的CD73基因转录、CD73酶活性、细胞的侵袭力和运动力明显高于转染前。结论:乳腺癌细胞的恶性程度与CD73表达呈正相关。CD73可增强人乳腺癌细胞的侵袭力和运动力。提示在乳腺癌转移过程中CD73发挥重要的促进作用。

不同运动状态下塑身内衣对乳房运动的影响

为了解不同运动状态下,女性在穿着塑身内衣前后乳房的运动规律,采用三维运动捕捉的方法,测试受试者在穿着塑身内衣和裸胸状态下的乳房的相关数据,并通过Excel和SPSS进行数据分析,得出在不同运动状态下乳房的运动规律以及塑身内衣对乳房运动的影响.研究发现,乳房各标记点在三维空间的不同方向上的相对位移极差为Y>X>Z;乳房上各点之间的相对位移极差变化无显著差异;在同一运动状态下,着装后乳房与躯干运动的时间差的绝对值小于裸胸状态;在不同运动状态下,乳房在垂直方向上的相对位移极差最大;运动状态Ⅱ时相对位移极差减小率为49%;乳房的相对时间差随着运动步频的增大而增大,相同步频下纵跳大于跑步,运动时穿着塑身内衣可有效减小乳房的相对运动程度.

显性负性ⅠκBα对乳腺癌细胞株核因子κB通路和运动迁移的影响

目的:探讨在高转移人乳腺癌细胞中,核因子κB活性对肿瘤生长及运动迁移能力的影响。方法:转染显性负性突变的ⅠκBα重组质粒入高转移乳腺癌细胞MDA-MB-231、MDA-MB-435,筛选并鉴定稳定转染的细胞株;凝胶迁移实验观察核因子κB活性,细胞生长曲线、平板集落形成试验及Millicell-PCF培养小室观察质粒转染对细胞生长和趋化运动的影响。结果:乳腺癌MDA-MB-231、MDA-MB-435细胞中存在高NF-κB组成型激活,稳定转染显性负性的ⅠκBα质粒后,细胞NF-κB活性下调,在不明显影响细胞生长、克隆形成的情况下,抑制高转移乳腺癌细胞株的运动能力。结论:在体外,抑制NF-κB通路,可明显抑制高转移乳腺癌细胞株的运动迁移能力。

磷脂酰肌醇-3-激酶/丝苏氨酸蛋白激酶信号通路参与核因子-κB受体活化因子配体诱导的MDA-MB-231乳腺癌细胞迁移

目的探讨磷脂酰肌醇-3-激酶/丝苏氨酸蛋白激酶(PI3K/Akt)信号通路在核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)诱导的乳腺癌细胞迁移中的作用。方法 Transwell法测定RANKL刺激后MDA-MB-231细胞迁移能力的改变。蛋白印迹法检测MDA-MB-231细胞表面RANK蛋白的表达及RANKL刺激后pAkt及Akt的表达;检测数据用x珚±s表示,采用SPSS 16.0软件进行t检验。结果 MDA-MB-231细胞表达RANK蛋白,RANKL诱导MDA-MB-231细胞迁移能力增强,RANKL的圈套受体骨保护素(OPG)可阻断RANKL诱导的细胞迁移(P<0.01)。RANKL刺激后MDA-MB-231细胞p-Akt表达升高,PI3K抑制剂LY294002抑制RANKL诱导的细胞迁移(P<0.01)。结论 PI3K/Akt信号通路参与RANKL诱导的乳腺癌细胞MDA-MB-231迁移。

小剂量表柔比星对乳腺癌细胞Ezrin表达和迁移的抑制作用

目的:探讨小剂量表柔比星(epirubicin,EPI)对人乳腺癌细胞MDA-MB-231中Ezrin表达和迁移能力的影响,以期为临床合理用药提供新的思路。方法:应用RT-PCR、Western印迹法和免疫细胞化学方法分别从基因、蛋白和细胞水平检测在小剂量EPI作用下,人乳腺癌细胞MDA-MB-231中Ezrin的表达水平及细胞迁移能力的变化,以及Ezrin与E-cadherin和CD44表达的相关性。结果:在不同浓度(1.0、2.5、5.0、10.0μg/mL)EPI作用4h后,乳腺癌细胞的迁移能力受到明显抑制。小剂量EPI以剂量依赖方式从蛋白和基因2个水平抑制乳腺癌细胞中Ezrin和CD44的表达,并且以剂量依赖性方式提高E-cadherin的表达。结论:小剂量EPI可以通过抑制Ezrin的表达,进而降低乳腺癌细胞的迁移能力,这一作用并不依赖其特有的细胞毒性。

Grb2-相关蛋白2参与RANKL诱导的乳腺癌细胞MDA-MB-231迁移的机制研究

目的探讨Grb2-相关蛋白2(Gab2)在核因子-κB受体活化因子配体(RANKL)诱导的乳腺癌细胞MDA-MB-213迁移中的作用。方法流式细胞术检测MDA-MB-231细胞表面RANK的表达。Transwell法测定RANKL刺激后细胞迁移能力的改变。免疫沉降及Western-blot检测RANKL刺激后p-Tyr-Gab2和Gab2的表达。结果 MDA-MB-231细胞表达RANK蛋白,RANKL诱导MDA-MB-231细胞迁移能力增强。RANKL刺激后MDA-MB-231细胞p-Tyr-Gab2表达一过性升高。结论 Gab2参与RANKL诱导的乳腺癌细胞MDA-MB-231迁移。

基于动态的胸部不舒适研究现状与展望

运动有利于身心健康,但是运动过程中的胸部不舒适是阻碍女性进行体育运动的原因之一。运动过程中的胸部不舒适主要由两个原因造成,一是过多的胸部位移引起的胸部不舒适,二是穿着文胸引起的胸部不舒适。研究胸部不舒适的原因,并采取有效措施,可以提高女性在运动过程中的舒适度,从而提高女性参与体育锻炼的积极性,但目前对该方面的研究比较有限。通过分析基于动态的胸部不舒适研究现状及不足,发现进一步进行该领域研究的切入点,以便进一步发现女性运动过程中胸部不舒适的有效解决方案。

应用俯卧位磁共振成像预测仰卧位乳腺肿瘤位置信息的可能性研究

目的:通过俯卧位和仰卧位磁共振成像(MRI),定量评估体位改变时乳腺肿瘤的位置及形态变化,以供保乳术参考。方法:选取医院收治的27例乳腺肿瘤患者,所有患者完成标准俯卧位MRI扫描后,立即进行仰卧位Dixon序列扫描。肿瘤分割后对两种体位上各肿瘤的体积和位置进行评估,测量两种体位上乳腺肿瘤的体积;以剑突中心点为原点,分析不同体位下肿瘤位置的变化;测量肿瘤中心到胸壁的距离,并评估此距离与肿瘤位置变化的相关性。结果:俯卧位和仰卧位肿瘤体积的平均值分别为(9.797±9.390)cm^(3)和(9.795±9.4131)cm^(3),两者比较差异无统计学意义(t=0.711,P>0.05)。从俯卧位到仰卧位,以剑突中心点为原点平均移动(63.1±26.2)mm,且与肿瘤中心至胸壁的距离密切相关(r=0.669,P<0.05)。结论:由俯卧位向仰卧位移动时,以剑突中心点为原点,在冠状面上肿瘤趋向于从身体正中矢状线向外移动;在矢状面上向身体内侧移动;在横轴位上向外、向下移动并靠近体表。俯卧位MRI预测仰卧位乳腺肿瘤位置信息有助于外科医生利用标准俯卧位MR图像定位手术时肿瘤的位置。

CCL18通过整合素聚集促进乳腺癌SK-3^(rd)细胞浸润和迁移

目的探讨整合素在CCL18促进乳腺癌SK-3rd细胞浸润和迁移过程中的作用,以阐明CCL18促进乳腺癌细胞浸润和迁移的分子机制。方法用流式细胞检测技术检测CCL18作用下乳腺癌SK-3rd细胞表面整合素的聚集;采用Western blot检测黏着斑激酶(FAK)的激活;用浸润迁移实验检测乳腺癌SK-3rd细胞的浸润迁移。用siRNA转染检测沉默SK-3rd细胞整合素β1的表达。结果 CCL18促进乳腺癌SK-3rd细胞表面整合素的聚集;从而促进整合素介导的FAK磷酸化激活。在CCL18作用下,乳腺癌SK-3rd细胞浸润和迁移的细胞数增多10倍(P<0.01);用siRNA转染检测沉默SK-3rd细胞整合素β1的表达,可以使CCL18作用下的SK-3rd细胞浸润和迁移数量明显减少。结论 CCL18通过整合素聚集可促进乳腺癌细胞浸润和迁移。

SHP-2野生型基因可促进乳腺癌转移而其突变型基因可抑制转移

目的:探讨含2个Src同源区2的蛋白酪氨酸磷酸酶(Src homology 2 domain-containing tyrosine phosphatase,SHP-2)在乳腺癌MCF-7细胞体内外移动和转移中的作用。方法:首先构建重组质粒SHP-2-绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)基因及SHP-2C>S-GFP(SHP-2突变体),并分别转入乳腺癌MCF-7细胞中,建立2种细胞,即SHP-2-GFP-MCF-7和SHP-2C>S-MCF-7。利用荧光显微镜技术观察细胞移动情况,动物实验观察不同细胞移植组裸小鼠的肿瘤生长情况,从而确定蛋白酪氨酸磷酸酶SHP-2在乳腺癌细胞移动、侵袭和转移中的作用。结果:SHP-2转染的乳腺癌MCF-7细胞的体外移动能力增强,且在注射此组细胞的裸鼠中有肿瘤生长;而转染了SHP-2C>S-GFP的乳腺癌MCF-7细胞的移动能力明显减弱,且注射此组细胞的裸鼠未发现肿瘤生长。结论:SHP-2可促进乳腺癌MCF-7细胞在体外的移动及体内的侵袭和转移。