三阴性乳腺癌EGFR、Ki-67、P53及CTC表达与预后的关系研究

目的探讨三阴性乳腺癌表皮生长因子受体(EGFR)、细胞核增殖相关抗原Ki-67(Ki-67)、P53及循环肿瘤细胞(CTC)表达与预后的关系。方法选取95例三阴性乳腺癌患者,免疫组化检测病理组织标本中EGFR、Ki-67、P53表达;所有患者接受8个周期化疗,采用膜滤过分离肿瘤细胞技术(ISET)检测化疗前后的CTC表达,并分析化疗前后CTC表达与化疗疗效的关系;分析CTC与EGFR、Ki-67、P53表达的关联性;随访患者无进展生存期(PFS),采用COX回归分析三阴性乳腺癌进展的危险因素。结果EGFR、Ki-67、P53阳性检出率分别为44.21%(42/95)、63.16%(60/95)、56.84%(54/95);化疗后患者的CTC阳性检出率(14.74%)低于化疗前(61.05%,P<0.05);化疗疗效与化疗后CTC阳性表达呈负相关(P<0.001);COX回归分析显示,临床分期为Ⅲ期、EGFR阳性、化疗后CTC阳性是三阴性乳腺癌进展的独立危险因素(P<0.05);不同临床分期患者PFS比较,Ⅰ期>Ⅱ期>Ⅲ期,EGFR阳性患者PFS短于阴性患者,化疗后CTC阳性患者PFS短于阴性患者(P<0.05)。结论化疗前EGFR阳性表达、化疗后CTC阳性表达与三阴性乳腺癌患者预后差有关,化疗后CTC阳性率越低患者化疗疗效越好。

组织中P53、人表皮生长因子受体2表达与乳腺癌患者临床病理特征的关系

目的:探讨组织中P53、人表皮生长因子受体2(HER2)表达与乳腺癌患者临床病理特征的关系.方法:选取2019年2月至2023年2月于本院采取手术治疗的60例乳腺癌患者作为研究对象.检测其组织中P53、HER2表达,分析其阳性表达与乳腺癌患者不同临床病理特征的相关性.结果:60例乳腺癌患者肿瘤组织中,P53、HER2阳性率分别为53.33%(32/60)和45%(27/60).Ⅲ期、组织低分化、发生淋巴结转移乳腺癌患者的P53、HER2阳性率,显著高于Ⅰ/Ⅱ期、组织中高分化、未发生淋巴结转移者,差异均有统计学意义(P<0.05).乳腺癌患者肿瘤组织中P53、HER2阳性表达,与肿瘤分期、淋巴结转移情况呈正相关关系(r>0,P<0.05),与组织分化程度呈负相关关系(r<0,P<0.05).结论:乳腺癌患者肿瘤组织中P53、HER2多呈阳性表达.肿瘤分期、组织分化程度、淋巴结转移情况,可能与P53、HER2表达有关.

卡瑞利珠单抗联合伊立替康治疗胃癌效果及对血清BARD1、STAT1影响

目的探讨卡瑞利珠单抗联合伊立替康治疗胃癌的效果及对血清乳腺癌1号基因相关环指蛋白(BARD1)和转录活化蛋白1(STAT1)的影响。方法选取2016年4月—2021年11月收治的胃癌120例,按照治疗方法不同将其分为观察组和对照组2组各60例。观察组给予卡瑞利珠单抗联合伊立替康治疗,对照组给予卡瑞利珠单抗治疗。比较2组治疗后临床效果,治疗后1年生存和复发情况,治疗前后血清肿瘤标志物、免疫功能指标、血清BARD1和STAT1,以及治疗期间毒副作用情况。结果治疗后,观察组总有效率(85.0%,51/60)高于对照组(70.0%,42/60)(P<0.05)。治疗后1年,观察组生存期长于对照组,复发率低于对照组(P<0.05,P<0.01)。治疗后,CD4+、CD4+/CD8+和STAT12组高于治疗前,且观察组高于对照组;血清糖类抗原199、癌胚抗原、CD8+、BARD12组低于治疗前,且观察组低于对照组(P<0.05)。治疗期间,2组毒副作用总发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论卡瑞利珠单抗联合伊立替康治疗胃癌患者临床效果较好,可降低血清肿瘤标志物水平,改善免疫功能,还可下调BARD1,上调STAT1,且安全性较好。

TRAIP基因沉默对TNBC细胞增殖和侵袭迁移影响

目的研究肿瘤坏死因子受体相关因子相互作用蛋白(TRAIP)在人三阴性乳癌(TNBC)中的表达及其对细胞增殖和侵袭迁移的影响。方法应用免疫组化方法,检测75例TNBC癌及癌旁组织中TRAIP的表达,并分析其与病人临床病理特征的关系。采用Western blot技术检测人TNBC细胞系MDA-MB-468、MDA-MB-231及HCC1937中TRAIP的表达水平。构建TRAIP慢病毒干扰载体并检测干扰效率。应用3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5-二苯四唑溴化铵(MTT)和Celigo细胞计数方法检测细胞增殖能力,Transwell侵袭实验和创面愈合法检测细胞的侵袭迁移能力。结果TNBC组织中TRAIP的表达水平明显高于癌旁组织(Z=-6.460,P<0.001);与原发灶相比,淋巴结转移灶中TRAIP呈高表达(Z=-3.448,P<0.001),并且这种高表达水平与肿瘤的复发密切相关(Z=-2.077,P<0.05)。Western blot检测显示,MDA-MB-231和HCC1937细胞株TRAIP蛋白表达均显著高于MDA-MB-468细胞(F=34.96,P<0.01);TRAIP基因敲除后,MDA-MB-231和HCC1937细胞中TRAIP的蛋白表达水平被明显抑制(t=15.66、19.39;P<0.01)。相较于对照组,TRAIP基因敲除组细胞的增殖能力明显减弱(F=71.63~218.07,P<0.01);Transwell侵袭及创面愈合实验表明,TRAIP基因敲除显著抑制细胞的侵袭迁移能力(t=7.39~32.16,P<0.01)。结论TRAIP在TNBC组织及淋巴结转移灶中高表达并与肿瘤的复发密切相关,敲除TRAIP基因可显著抑制细胞的增殖、侵袭迁移等生物学特性。

热休克蛋白70在乳腺癌中的表达及其与预后的关系

目的 探讨热休克蛋白 70 ( heat shock protein70 ,HSP70 )在乳腺癌中的表达 ,评估其在乳腺癌预后中的作用。方法 用免疫组化方法检测 6 2例手术切除的乳腺癌组织中 HSP70的表达 ,研究其与临床病理特征的关系及对预后的影响。结果 ( 1) HSP70在乳腺癌组织中的阳性表达率为 5 6 .5 % ( 35 / 6 2 )。 ( 2 ) HSP70表达与肿瘤大小( P=0 .0 2 1)及腋窝淋巴结转移 ( P=0 .0 15 )存在相关性 ,而与月经状况、组织学分级之间均无相关性。 ( 3) HSP70阴性表达组的无病生存期 ( DFS)及总生存期 ( OS)均明显优于阳性表达组。 ( 4 ) Cox回归单因素分析显示腋窝淋巴结转移个数、组织学分级、肿瘤大小、TNM分期及 HSP70阳性表达与 DFS及 OS明显相关 ;Cox回归多因素分析表明仅有腋窝淋巴结转移个数、组织学分级及肿瘤大小与 DFS及 OS明显相关 ,而 TNM分期及 HSP70阳性表达进入 Cox回归模型。结论 HSP70在乳腺癌组织中有一定程度的表达 ,HSP70阳性表达与乳腺癌患者生存期的缩短有关 ,由于多因素回归分析未能显示 HSP70表达与 DFS和 OS相关 ,因此

天花粉蛋白抑制人乳腺癌MDA-MB-231细胞生长及逆转syk基因甲基化的研究

目的:研究天花粉蛋白(trichosanthin,TCS)抑制人乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖和诱导细胞凋亡过程中脾酪氨酸激酶(spleen tyrosine kinase,syk)基因甲基化状态的改变,以寻找新的去甲基化药物。方法:采用MTT法分析TCS对MDA-MB-231细胞增殖的影响,Giemsa染色法观察TCS作用后细胞形态学的变化,FCM检测不同浓度TCS作用48h后MDA-MB-231细胞凋亡和细胞周期分布情况,甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR,MSP)法检测MDA-MB-231细胞经TCS作用前后syk基因甲基化状态的改变,RT-PCR方法分析TCS作用后MDA-MB-231细胞中syk、Dnmts和MBD2 mRNA表达量的变化,比色法检测TCS对MDA-MB-231细胞DNA甲基转移酶活性的影响。结果:TCS体外对MDA-MB-231细胞增殖具有显著抑制作用(P<0.05),并呈时间和浓度依赖性;TCS可诱导MDA-MB-231细胞出现空泡样变性、核固缩和核碎裂等细胞凋亡形态学改变,能使MDA-MB-231细胞凋亡并可诱导细胞生长周期阻滞,凋亡率明显高于对照组(P<0.05),并呈时间和浓度依赖性。TCS可以逆转MDA-MB-231细胞syk基因启动子区甲基化状况;MDA-MB-231细胞syk mRNA表达阴性,经TCS作用后,syk mRNA表达阳性;MDA-MB-231细胞经TCS作用48h前后Dnmts和MBD2 mRNA表达量没有明显变化(P>0.05),但Dnmts活性降低。结论:TCS在抑制MDA-MB-231细胞增殖、诱导细胞凋亡过程中对syk基因具有明显的去甲基化作用,因而可能成为新型的去甲基化药物。

乳腺癌组织中PTEN和p27^(kip1)蛋白的表达及其相互关系

目的:探讨PTEN和p27kip1在乳腺癌组织中的表达规律及其相互关系。方法:采用免疫组化SP法检测64例乳腺癌组织中PTEN和p27kip1蛋白的表达。结果:乳腺癌组织PTEN(34/64)和p27kip1(33/64)蛋白表达显著低于正常乳腺组织(15/15),P值分别为0·0082和0·0078。有腋淋巴结转移、远处转移及ER阴性组PTEN表达分别为13/33、3/11和16/38,明显低于无腋淋巴结转移(21/31)、无远处转移(31/53)和ER阳性组(18/26),P值分别为0·0240、0·0063和0·03475。p27kip1在乳腺癌有腋淋巴结转移、远处转移及ER阴性组的表达分别为7/33、2/11和8/38,明显低于无腋淋巴结转移(15/31)、无远处转移(20/53)和ER阳性组(14/26),P值分别为0·0230、0·0440和0·0071。两者表达均与肿瘤大小无关。两种蛋白表达水平具有显著的相关性,P=0·0041。结论:PTEN、p27kip1表达异常与乳腺癌转移及恶性程度密切相关,两种基因蛋白表达强度一致,显示其在乳腺癌演进中具有协同作用。

COX-2与突变型p53蛋白在乳腺癌组织中的表达及临床意义

目的研究COX-2蛋白和突变型p53蛋白在乳腺癌组织中的表达情况,探讨两者在乳腺癌发生、发展中的作用、相互关系及与临床病理学特征之间的关系。方法运用链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶免疫组织化学方法(S-P)对99例乳腺癌组织中COX-2蛋白和突变型p53蛋白的表达进行检测。结果99例乳腺癌中COX-2蛋白表达阳性率为69.7%(69/99),COX-2蛋白表达与患者年龄、原发肿瘤大小、腋淋巴结转移状况、TNM临床分期、激素受体状况均无显著相关(P>0.05),而与C-erbB-2蛋白表达呈显著相关(P<0.05)。99例乳腺癌中突变型p53蛋白表达阳性率为48.5%(48/99),突变型p53蛋白表达与患者年龄、TNM临床分期、激素受体状况无显著相关(P>0.05),而与原发肿瘤大小、腋淋巴结转移状况、C-erbB-2蛋白表达呈显著相关(P<0.05)。COX-2蛋白表达与突变型p53蛋白在乳腺癌组织中的表达呈正相关(r=0.288,P<0.05),两者共表达与肿瘤大小、腋淋巴结转移状况呈显著相关(P<0.05)。结论COX-2蛋白和突变型p53蛋白在乳腺癌组织中高表达,COX-2蛋白与突变型p53蛋白在乳腺癌组织中的表达呈正相关,两者在乳腺癌的发生、发展中可能起协同作用,是反映乳腺癌生物学行为的重要指标。

p16蛋白在乳腺癌中的表达及其临床意义

目的 :探讨肿瘤抑制基因 MTS1的产物 p16蛋白在乳腺癌 ,乳腺良性疾病中的表达及其临床意义。方法 :采用 S- P免疫组织化学方法 ,检测 p16蛋白在 30例乳腺良性疾病及 5 0例乳腺癌中的表达。结果 :p16蛋白在乳腺良性疾病中 10 0 %高强度表达 ,在乳腺癌中仅有 5 0 %阳性表达率 ,且表达强度低。p16蛋白表达与乳腺癌的组织学分级、TNM分期、淋巴结转移及预后有关。结论 :MTS1基因在抑制乳腺癌的发生发展过程中可能起重要作用。p16蛋白可作为乳腺癌的一种新的标志物。

Ki-67、p53蛋白在乳腺癌组织的表达及临床意义

目的探讨Ki-67、p53蛋白在乳腺癌及癌旁组织中的表达及两者之间的关系和临床意义。方法应用免疫组化S-P法检测80例乳腺癌组织及其癌旁的正常乳腺组织中Ki-67、p53蛋白的表达,分析其与临床病理因素的关系及两者的相关性。结果80例乳腺癌组织中Ki-67蛋白阳性表达率为63.8%,高于癌旁乳腺组织8.8%(P<0.05),其表达与患者年龄、肿瘤大小、ER、PR表达无关,与肿瘤的分期、腋窝淋巴结转移、C-erbB-2表达相关。乳腺癌组织p53蛋白阳性表达率为68.8%,高于癌旁乳腺组织11.3%((P<0.05),其表达与年龄、肿瘤大小、分期、ER、PR表达无关,与腋窝淋巴结转移、C-erbB-2表达相关。Ki-67蛋白与p53蛋白表达之间无关。结论Ki-67、p53蛋白可通过抑制细胞凋亡,对乳腺癌发生和发展起重要作用,是判断乳腺癌生物学行为、预测转移趋势有价值的参考指标。

nm23、CerbB-2和p53蛋白表达对乳腺癌预后的多因素分析

【目的】探讨乳腺癌组织中nm23、C erbB 2和p53基因蛋白表达及其与临床病理指标和预后的关系。 【方法】应用免疫组化S P方法检测157例乳腺癌石蜡切片中nm23、C erbB 2和p53蛋白的表达;应用Kaplan Meier法及多变量Cox比例风险模型分析3种蛋白表达与预后的关系。【结果】①nm23表达率为58.0%,与肿 瘤大小、TNM分期、腋淋巴结状态和远处转移有关;C erbB 2表达率为40.8%,与患者年龄、月经状况、肿瘤大 小、TNM分期和腋淋巴结状态相关;p53表达率为42.7%,与TNM分期和腋淋巴结状态及远处转移有关;② nm23阳性表达与C erbB 2阳性表达呈负相关,与p53阳性表达呈正相关;C erbB 2阳性表达与p53阳性表达 呈负相关;③nm23阳性组生存率高于阴性组;C erbB 2阳性组生存率低于阴性组;p53阳性组生存率高于阴性 组;④多因素Cox回归分析显示,nm23、C erbB 2不同表达及TNM分期3项指标反映乳腺癌预后情况,危险度 分别为0.395、2.009及1.446。【结论】nm23、C erbB 2表达和TNM分期是乳腺癌的独立的预后指标,检测 nm23、C erbB 2有助于筛选出具有高复发及转移危险的患者。

MTA1蛋白在乳腺癌中的表达及临床意义

目的探讨肿瘤转移相关基因1(M TA 1)蛋白表达与乳腺癌生物学行为之间的关系。方法应用免疫组化SP法检测56例乳腺癌组织中M TA 1蛋白及雌激素受体(ER)的表达。结果56例乳腺癌组织中39例M TA 1蛋白阳性表达,阳性率为69.6%(39/56)。M TA 1高表达与乳腺癌组织学分级、临床分期和淋巴结转移有关(P<0.05),与年龄和ER状况无关(P>0.05)。结论M TA 1蛋白可作为诊断乳腺癌转移复发的参考指标,并有望成为乳腺癌基因治疗的新靶点。

抑癌基因产物Rb蛋白在乳腺癌中的表达及其临床意义

目的:研究乳腺癌组织中Rb蛋白的表达及其临床意义。方法:采用S-P免疫组织化学染色法对52例乳腺癌组织和20例良性乳腺病变组织中Rb蛋白的表达进行检测。结果:Rb蛋白阴性表达率在乳腺癌组中为76.9%(40/52),显著高于良性乳腺病变组织[15.00%(3/20)](P<0.01);Rb蛋白的阴性表达与乳腺癌临床病理参数间无关联(P>0.05)。随访46例乳腺癌患者,38例Rb蛋白阴性表达者局部复发或远处转移为10.5%,而8例Rb蛋白阳性表达者则为0,两者比较差异有显著性(P<0.01)。结论:Rb蛋白的阴性表达与乳腺癌的发生有关;作为抑癌基因产物,Rb蛋白可以在蛋白质水平估计乳腺癌的病情,为临床制定治疗方案、估计病情及预后提供一个有意义的客观指标。

肺癌和乳腺癌组织中RhoE的表达及其临床意义

背景与目的Rho家族蛋白与肿瘤细胞的生长、分化、转移有着密切的关系。本研究通过观察RhoE在肺癌、乳腺癌以及相应癌旁组织中的表达情况及其与临床病理分级的关系,为探索RhoE的生物学功能和临床意义提供依据。方法运用免疫组化SABC法检测62例肺癌和34例乳腺癌及相应癌旁组织中RhoE的表达水平。结果RhoE在乳腺和肺正常组织中普遍表达,但在肿瘤组织表达低下或缺失,而且这种差异在乳腺组织中要高于肺组织。RhoE在乳腺癌组织中的染色平均值为3.65±0.62,在相应癌旁组织中为10.53±0.44,明显高于肿瘤组织(t=12.402,P<0.001);在肺癌组织中的染色平均值为2.19±0.19,在癌旁组织中为4.11±0.24,高于相应肿瘤组织(t=7.123,P<0.005),并且随着肿瘤分化程度的降低染色强度有下降的趋势(x^2=26.536,P<0.005)。结论RhoE在肿瘤组织中表达下降,结合前期实验结果及国外新近的研究成果,可以认为RhoE在肺癌和乳腺癌的发生发展中具有明显的负调控作用,因此对RhoE进行进一步研究将为肿瘤的分子靶向治疗提供新的靶点。

乳腺癌APC基因甲基化状况及其蛋白表达

背景与目的:结肠腺瘤性息肉病基因(adenomatous polyposis coli,APC)蛋白表达产物是Wnt信号转导途径重要组成部分,该基因失活使β-catenin蛋白降解障碍,从而使Tcf/Lef激活,引起基因异常转录,最终产生癌变。启动子区甲基化是导致抑癌基因转录失活的重要机制。本研究探讨乳腺癌APC基因启动子1A区甲基化状态与其蛋白表达的关系,并分析APC基因异常甲基化与乳腺癌临床病理特征的关系。方法:应用甲基化特异性PCR和免疫组织化学方法检测76例乳腺癌及相应癌旁乳腺组织中APC基因启动子1A区甲基化状态以及蛋白表达。结果:癌旁乳腺组织中均未发现APC基因启动子1A区甲基化,乳腺癌组织中APC基因启动子1A区甲基化率为36.8%。癌旁乳腺组织中APC蛋白阳性率为100%,乳腺癌中APC蛋白阳性率为52.4%。乳腺癌组织中APC基因甲基化与APC蛋白表达呈负相关(r=-0.351,P<0.05),与TNM分期呈正相关(r=0.335,P<0.05)。结论:乳腺癌发展过程中APC基因启动子1A区出现异常甲基化,是导致该蛋白表达缺失的主要原因,是导致该基因失活的重要机制之一。

ATRA耐药基因HA117相关蛋白在肺癌和乳腺癌组织中的表达特点及临床意义

目的探讨全反式维甲酸(ATRA)耐药基因HA117相关蛋白在肺癌和乳腺癌组织中的表达特点及临床意义。方法随机选择23例肺癌组织和21例乳腺癌组织作为实验组,9例非癌肺组织和11例非癌乳腺组织作为对照组,应用免疫组化S-P法检测HA117相关蛋白在上述组织切片中的表达,并结合其临床资料进行回顾性分析。结果 HA117相关蛋白在肺癌组织、乳腺癌组织、非癌肺组织及非癌乳腺组织中的阳性表达率分别为60.9%(14/23)、57.1%(12/21)、11.1%(1/9)及0.0%(0/11)。HA117相关蛋白在肺癌和乳腺癌组织中的阳性表达明显高于非癌组织(P<0.05)。HA117相关蛋白的表达水平与肺癌及乳腺癌患者的年龄、肿瘤分级、病理分型、淋巴结转移及有无术前化疗方面无明显相关性(P>0.05)。结论 HA117相关蛋白在肺癌和乳腺癌的高表达提示二者对ATRA具有较强的耐药性。

C-erbB-2、p53和PCNA对乳腺浸润性癌预后价值的Cox回归分析

目的探讨癌基因。ｃ－ｅｒｂＢ－２产物、抑癌基因ｐ５３突变型蛋白的过度表达以及增殖细胞核抗原标记指数（ＰＣＮＡ－ＬＩ）与乳腺浸润性癌临床病理指标的联系及其预后价值。方法随机收集７９例临床随访资料齐备的病人，用免疫组化ＡＢＣ法检测其ｃ－ｅｒｂＢ－２、ｐ５３和ＰＣＮＡ的表达情况，用Ｃｏｘ回归分析其预后意义。结果ｃ－ｅｒｂＢ－２和ｐ５３过度表达的阳性率分别为３１．７％和４８．１％。ＰＣＡＮ－ＬＩ中位数为１７．６％。ｃ－ｅｒｂＢ－２与ｐ５３过度表达之间以及其与ＰＣＮＡ－ＬＩ、肿瘤大小、组织学分级、腋淋巴结状态等指标间均无明确的相互关联。ＰＣＮＡ－ＬＩ与组织学分级呈正相关，但高ＰＣＮＡ－ＬＩ与不良预后无明显关联。Ｃｏｘ回归分析显示，腋淋巴结、ｃ－ｅｒｂＢ－２和ｐ５３过度表达等３项指标反映不良预后，危险度分别是３．３０６、１．４１９６、１．４９８４。结论ｃ－ｅｒｂＢ－２和ｐ５３过度表达是两项危险度仅次于腋淋巴结状态的反映乳腺浸润性癌不良预后的指标，ＰＣＮＡ－ＬＩ无预后价值。

乳腺癌组织p21^(WAF1)基因多态性与蛋白表达的关系

目的 :探讨乳腺癌组织p2 1WAF1DNA多态性与蛋白表达的关系。方法 :分别采用聚合酶链反应单链构象多态性技术 (PCR -SSCP)和免疫组化S -P法检测 10 0例乳腺癌石蜡包埋组织和 4 0例乳腺良性病变组织p2 1WAF1DNA多态性和蛋白表达。结果 :18% (18/ 10 0 )的乳腺癌组织和 5 % (2 / 4 0 )对照组组织分别出现两种p2 1WAF1DNA多态性 ,前者明显高于后者 ,组间有显著差异 (χ2 =3 94 ,P <0 0 5 ) ;5 0 % (5 0 / 10 0 )的乳腺癌组织和 12 5 % (5 / 4 0 )对照组组织表达p2 1WAF1蛋白 ,前者明显高于后者 ,组间有显著差异 (χ2 =16 84 ,P <0 0 1) ;10 0 % (18/ 18例 )的具有p2 1WAF1DNA多态性的乳腺癌组织p2 1WAF1蛋白表达阳性 ,39% (32 / 82 )的无p2 1WAF1DNA多态性乳腺癌组织蛋白表达阳性 ,p2 1WAF1DNA多态性组明显高于无多态性组 ,组间有显著差异 (χ2 =2 1 95 ,P <0 0 1) ;p2 1WAF1DNA多态性与p2 1WAF1蛋白表达呈正相关 (r =0 5 76 ,P <0 0 1)。结论 :乳腺癌组织p2 1WAF1DNA多态性可能产生不同的转录本并生成相应的蛋白质分子。

MCF-7/BCRP细胞系的建立及其生物学特征

目的:建立表达乳腺癌耐药蛋白(BCRP)的耐药细胞系MCF-7/BCRP。方法:提取MCF-7细胞的总RNA,设计BCRP基因上下游引物,用RT-PCR法克隆出BCRP基因全长并连接到真核表达载体pcDNA3.1穴-雪上,转染MCF-7细胞后以G418筛选细胞。采用米托蒽醌外排实验、细胞毒性实验、细胞群体倍增时间、免疫荧光法鉴定构建的耐药细胞系。结果:MCF-7/BCRP对米托蒽醌耐药指数增加至14.72;外排米托蒽醌的作用增强;细胞群体倍增时间较亲代细胞延长;MCF-7/BCRP细胞能表达一定量的BCRP。结论:MCF-7/BCRP细胞能够表达BCRP并具有BCRP的耐药表型。

乳腺癌FHIT基因微卫星不稳定性及其蛋白表达的研究

目的分析乳腺癌脆性三联组氨酸基因(FHIT)微卫星不稳定性发生情况及与FHIT蛋白表达缺失的关系,以探讨乳腺癌发生的机制。方法选取FHIT基因的D3S1234、D3S1300位点,采用PCR、聚丙烯酰胺凝胶电泳、银染法,对66例乳腺癌患者肿瘤组织进行微卫星不稳定性(MSI)检测,用免疫组化方法检测FHIT蛋白的表达情况。结果30.3%(20/66)的乳腺癌组织至少在一个位点出现MSI;59.1%(39/66)的肿瘤组织发生FHIT蛋白表达缺失或明显下降,17例MSI(+)病例发生FHIT蛋白低水平表达或缺失,MSI(+)与FHIT蛋白表达缺失有相关性(P<0.05)。FHIT蛋白表达缺失与肿瘤组织学分级有相关性(P<0.05)。结论FHIT基因位点的微卫星不稳定性是FHIT蛋白表达下调的可能的分子机制之一,FHIT基因在乳腺癌的发生发展中起重要作用。