EFFECTS OF NEOADJUVANT CHEMOTHERAPY ON MDR1 AND MRP GENE EXPRESSION IN PRIMARY BREAST CANCER

Objective: To investigate the effects of neoadjuvant chemotherapy on the expression of drug resistance genes, multidrug resistance-1 (MDR1) and multidrug resistance-associated protein (MRP), in patients with primary breast cancer. Methods: MDR1 and MRP expression were detected by semi-quantitative RT-PCR in 20 patients with primary breast cancer, before and after chemotherapy. Results: Before chemotherapy, MDR1 and MRP expression can be detected in 15 cases (75%) and 18 cases (90%) respectively. After chemotherapy, expression of MDR1 is not significantly different from that before chemotherapy, but expression of MRP is significantly different from that before chemotherapy. Conclusion: Expression of drug resistance gene MRP, but not MDR1, is enhanced in patients with primary breast cancer submitted to neoadjuvant chemotherapy.

乳腺癌组织耐药相关蛋白的表达及其临床意义

目的:探讨乳腺癌组织耐药相关基因表达及其与临床病理学因素之间的关系。方法:应用流式细胞术检测多药耐药蛋白P-糖蛋白(P-gP)、谷胱苷肽-S-转移酶(GST-π)、肺耐药蛋白(LRP)、多药耐药相关蛋白(MRP)和O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)在64例乳腺癌组织中的表达情况,分析其与患者临床分期、年龄、肿瘤大小、腋窝淋巴结转移、雌孕激素受体(ER、PR)表达状态等因素的关系及5种耐药基因间的相关性。结果:P-gp、GST-π、LRP、MGMT和MRP在原发性乳腺癌组织中均有一定水平表达,P-gp和GST-π的表达与腋窝淋巴结转移有关(P值分别为0.007和0.031),MG-MT的表达在年龄<50岁组明显升高,P=0.018。GST-π、MRP和MGMT的表达在肿瘤体积较大组中明显升高(P值分别为0.042、0.000和0.015),5种耐药基因的表达与ER、PR表达相关差异均无统计学意义,P>0.05。乳腺癌组织中各耐药基因之间存在共表达现象,P-gp和GST-π的表达及LRP与MRP的表达均存在正相关性(r=0.66,P=0.000;r=0.434,P=0.004)。结论:乳腺癌组织中耐药蛋白的表达与患者肿瘤体积、年龄、淋巴结转移状况有关,耐药蛋白高表达,均提示为乳腺癌的不良预后指标。乳腺癌组织中各耐药蛋白之间存在共表达现象。

Ki-67、p53蛋白在乳腺癌组织的表达及临床意义

目的探讨Ki-67、p53蛋白在乳腺癌及癌旁组织中的表达及两者之间的关系和临床意义。方法应用免疫组化S-P法检测80例乳腺癌组织及其癌旁的正常乳腺组织中Ki-67、p53蛋白的表达,分析其与临床病理因素的关系及两者的相关性。结果80例乳腺癌组织中Ki-67蛋白阳性表达率为63.8%,高于癌旁乳腺组织8.8%(P<0.05),其表达与患者年龄、肿瘤大小、ER、PR表达无关,与肿瘤的分期、腋窝淋巴结转移、C-erbB-2表达相关。乳腺癌组织p53蛋白阳性表达率为68.8%,高于癌旁乳腺组织11.3%((P<0.05),其表达与年龄、肿瘤大小、分期、ER、PR表达无关,与腋窝淋巴结转移、C-erbB-2表达相关。Ki-67蛋白与p53蛋白表达之间无关。结论Ki-67、p53蛋白可通过抑制细胞凋亡,对乳腺癌发生和发展起重要作用,是判断乳腺癌生物学行为、预测转移趋势有价值的参考指标。

乳腺癌组织中CyclinD1及p16蛋白表达的联合检测及其意义

目的:探讨乳腺癌中Cyclin D1及p16蛋白表达的相关性及其临床意义。方法:LSAB法检测多种乳腺组织中Cyclin D1及p16蛋白的表达情况,结合有关临床资料,分析Cyclin D1和p16蛋白表达异常与乳腺癌中重要的临床病理因素的关系。结果:62例乳腺癌组织中,Cyclin D1蛋白过度表达占48·4%,其表达与乳腺癌组织学分级呈明显正相关,且Cyclin D1蛋白过度表达更常见于ER、PR阳性的乳腺癌中。乳腺癌旁组织中Cyclin D1蛋白过度表达为20·0%,其他几种乳腺组织很少有CyclinD1蛋白的过度表达。p16蛋白仅在58·1%的乳腺癌组织中有表达,且p16的表达与组织学分级程度有负相关关系。正常乳腺组织中未见p16蛋白的异常。结论:乳腺癌组织中存在着Cyclin D1蛋白的过度表达及p16蛋白的异常,二者对乳腺癌组织的增殖分化有一定的影响。

survivin、MDR_1、MRP在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的探讨survivin、MDR1(P-糖蛋白)、MRP蛋白在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及意义。方法观察50例非小细胞肺癌患者survivin、MDR1、MRP蛋白表达差异及相关性,分析survivin表达与预后的关系。结果78.0%的NSCLC表达survivin阳性和阴性患者1年生存率分别为43.5%、72.7%,两者差异有统计学意义(P<0.05);MDR、蛋白表达率为66.0%,与survivin蛋白显著相关(P<0.05),而MRP表达与survivin表达无明显相关(P>0.05)。结论(1)survivin蛋白在NSCLC中表达上调提示其在NSCLC发生、发展及预后中起重要作用,survivin可成为肺癌基因治疗靶点;(2)MDR1、MRP蛋白可与survivin蛋白共同存在于肺癌组织中,可能参与肿瘤耐药。

ATRA耐药基因HA117相关蛋白在肺癌和乳腺癌组织中的表达特点及临床意义

目的探讨全反式维甲酸(ATRA)耐药基因HA117相关蛋白在肺癌和乳腺癌组织中的表达特点及临床意义。方法随机选择23例肺癌组织和21例乳腺癌组织作为实验组,9例非癌肺组织和11例非癌乳腺组织作为对照组,应用免疫组化S-P法检测HA117相关蛋白在上述组织切片中的表达,并结合其临床资料进行回顾性分析。结果 HA117相关蛋白在肺癌组织、乳腺癌组织、非癌肺组织及非癌乳腺组织中的阳性表达率分别为60.9%(14/23)、57.1%(12/21)、11.1%(1/9)及0.0%(0/11)。HA117相关蛋白在肺癌和乳腺癌组织中的阳性表达明显高于非癌组织(P<0.05)。HA117相关蛋白的表达水平与肺癌及乳腺癌患者的年龄、肿瘤分级、病理分型、淋巴结转移及有无术前化疗方面无明显相关性(P>0.05)。结论 HA117相关蛋白在肺癌和乳腺癌的高表达提示二者对ATRA具有较强的耐药性。

MCF-7/BCRP细胞系的建立及其生物学特征

目的:建立表达乳腺癌耐药蛋白(BCRP)的耐药细胞系MCF-7/BCRP。方法:提取MCF-7细胞的总RNA,设计BCRP基因上下游引物,用RT-PCR法克隆出BCRP基因全长并连接到真核表达载体pcDNA3.1穴-雪上,转染MCF-7细胞后以G418筛选细胞。采用米托蒽醌外排实验、细胞毒性实验、细胞群体倍增时间、免疫荧光法鉴定构建的耐药细胞系。结果:MCF-7/BCRP对米托蒽醌耐药指数增加至14.72;外排米托蒽醌的作用增强;细胞群体倍增时间较亲代细胞延长;MCF-7/BCRP细胞能表达一定量的BCRP。结论:MCF-7/BCRP细胞能够表达BCRP并具有BCRP的耐药表型。

长链非编码RNA RP11-770J1.3和跨膜蛋白25对紫杉醇耐药人乳腺癌细胞株耐药性的影响

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)RP11-770J1.3和跨膜蛋白25(TMEM25)对紫杉醇耐药人乳腺癌细胞株耐药性的影响。方法:利用实时定量PCR检测lncRNA RP11-770J1.3和TMEM25在人乳腺癌细胞MCF-7和紫杉醇耐药细胞株(MCF-7/PR)中的表达。在MCF-7/PR中转染lncRNA RP11-770J1.3和TMEM25的干扰片段,磺酰罗丹明B法检测MCF-7/PR对紫杉醇药物敏感性的变化,并运用实时定量PCR和蛋白质印迹法检测多药耐药相关蛋白(MRP)、乳腺癌耐药蛋白(BCRP)、多药耐药基因1(MDR1)及其编码产物P-gp mRNA和蛋白水平的改变。结果:lncRNA RP11-770J1.3和TMEM25在MCF-7/PR中表达上调(P<0.05或P<0.01)。与空白对照组和紫杉醇阴性对照组比较,干扰lncRNA RP11-770J1.3和TMEM25的表达可以提高MCF-7/PR对紫杉醇的药物敏感性,并下调耐药相关基因MRP、BCRP、MDR1及其编码产物P-gp的表达(均P<0.05);与单独干扰lncRNA RP11-770J1.3或TMEM25比较,同时干扰lncRNA RP11-770J1.3和TMEM25的作用更加明显(P<0.05)。结论:MCF-7/PR中lncRNA RP11-770J1.3和TMEM25的表达上调,联合干扰lncRNA RP11-770J1.3和TMEM25的表达可以提高MCF-7/PR对紫杉醇的敏感性。

CXC趋化因子受体4通过S期激酶相关蛋白2调控乳腺癌细胞周期的机制

目的:探讨CXC趋化因子受体4(CXCR4)通过PI3K/Akt和ERK信号通路调控S期激酶相关蛋白2(Skp2)的表达,进而影响乳腺癌细胞周期的机制。方法:利用干扰及过表达技术下调或上调CXCR4的表达后,通过实时定量PCR和蛋白质印迹法检测CXCR4与Skp2调控的关联性;蛋白质印迹法检测CXCR4干扰及过表达后对信号蛋白及Skp2下游相关基因表达的影响;通过碘化丙啶(PI)染色法检测CXCR4、PI3K/Akt通路抑制剂LY294002及ERK通路抑制剂U0126对乳腺癌细胞周期的影响。结果:干扰CXCR4后,Skp2表达下调;过表达CXCR4后,Skp2表达上调。CXCR4可通过对信号蛋白的调控影响Skp2及Skp2下游相关基因的表达。干扰CXCR4后,G_0/G_1期细胞比例增加,S期细胞比例相应减少,CXCR4与LY294002及U0126联合作用对细胞周期的阻断更加明显。结论:CXCR4能够通过对信号蛋白PI3K/Akt及ERK的调控,影响Skp2及Skp2下游相关基因的表达,阻断CXCR4/Akt/Skp2或CXCR4/ERK/Skp2信号通路后可有效诱导细胞周期阻滞,从而抑制乳腺癌细胞的增殖。

浸润性乳腺癌患者谷胱苷肽S-转移酶-π和肺耐药蛋白表达及其与DNA倍体的关系

目的:探讨谷胱苷肽S-转移酶-π(GST-π)、肺耐药蛋白(LRP)及DNA倍体在乳腺癌患者中的表达意义。方法:应用流式细胞术(FCM)定量分析56例原发浸润性乳腺癌GST-π、LRP蛋白表达及DNA倍体的状况。结果:乳腺癌组织GST-π和LRP表达的相对荧光强度(RFI)以中位数(M)表示分别为1·18和0·56,而相应癌旁组织分别为0·80和0·23,癌组织GST-π和LRP蛋白表达与相应癌旁组织比较差异有统计学意义,P<0·05。癌组织DNA指数(DI)、S期比例(SPF)和增殖指数(PI)显著高于相应癌旁组织,P<0·05。GST-π和LRP蛋白表达及DI、SPF、PI在不同年龄、不同肿瘤大小、不同病理类型、不同临床分期和雌、孕激素受体阴性与阳性患者间的表达差异均无统计学意义,P>0·05。有淋巴结转移组患者GST-π和LRP表达水平及DI、SPF、PI值显著高于无淋巴结转移组患者,P<0·05。异倍体与二倍体乳腺癌GST-π和LRP表达差异无统计学意义,P>0·05。结论:GST-π和LRP蛋白表达及DNA含量在乳腺癌发生、发展中起重要作用。GST-π和LRP蛋白表达及DI、SPF和PI与淋巴结转移有关。GST-π和LRP蛋白表达与DNA含量可作为预测乳腺癌预后的指标。

P-糖蛋白与肺耐药蛋白在乳腺癌组织中的表达及其与预后的关系

背景与目的:肿瘤细胞的多药耐药(multidrugresistance,MDR)现象是化疗失败的常见原因。P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)和肺耐药蛋白(lungresistanceprotein,LRP)的过度表达在乳腺癌的MDR中起着重要作用。本研究探讨P-gp与LRP在乳腺癌组织中的表达及其与预后的关系。方法:采用免疫组织化学LSAB法检测151例乳腺癌石蜡包埋组织和40例乳腺正常组织的P-gp和LRP表达水平,并将结果与临床病理资料和预后结合起来进行分析。结果:在151例乳腺癌组织中P-gp阳性62例(40.8%),40例正常乳腺组织中P-gp阳性1例(2.5%),两组间差异有显著性(χ2=21.27,P<0.01);151例乳腺癌组织中LRP阳性121例(80.1%),40例正常乳腺组织中LRP阳性22例(55.0%),两组间差异有显著性(χ2=10.62,P<0.01)。P-gp表达与患者年龄、肿块大小、组织学类型、淋巴结转移、组织学分级、临床分期、ER状态和预后等因素无关。在有淋巴结转移的70例乳腺癌组织中LRP阳性62例(88.6%),无转移的81例中LRP阳性59例(72.8%),两组间差异有显著性(χ2=4.891,P<0.05)。在LRP阳性的121例乳腺癌组织中中P-gp阳性55例(45.5%),LRP阴性的30例中P-gp阳性7例(23.3%),两组间差异有显著性(χ2=3.990,P<0.05)。LRP的表达与淋巴结转移(r=0.197,P<0.05)和P-gp表达(r=0.179,P<0.05)呈正?

乳腺癌新辅助化疗对耐药基因MDR1和MRP表达的影响

目的 :探讨乳腺癌新辅助化疗对耐药基因MDR1和MRP表达的影响。方法 :采用半定量RT -PCR方法检测 2 0例乳腺癌病人新辅助化疗前、后肿瘤组织中耐药基因MDR1和MRP的表达情况 ,并采用自身对照研究新辅助化疗对耐药性的影响。结果 :化疗前 2 0例乳腺癌组织中有 1 5例 (75 % )MDR1表达 ,1 8例 (90 % )MRP表达。化疗后 ,经自身对照检测发现 ,MDR1的表达无显著差异 ,而MRP的表达与化疗前相比有显著差异。结论 :在乳腺癌中新辅助化疗对耐药基因MDR1的表达无影响 。

肿瘤耐药相关标志物在乳腺癌中的表达及与预后的关系

目的:检测乳腺癌组织中耐药蛋白P-gp、BCRP及LRP的表达,探讨其在乳腺癌复发转移及预后中的作用。方法:采用免疫组织化学方法检测126例乳腺癌组织、42例癌旁组织中P-gp、BCRP及LRP的表达。结果:①乳腺癌组织中P-gp、BCRP及LRP阳性表达率分别为41.26%、38.89%和65.87%,明显高于癌旁组织中的表达(14.28%,16.67%和19.05%),差异有统计学意义(P<0.05);②乳腺癌组织中有2个耐药蛋白共表达率为54.50%;2个或3个耐药蛋白共表达率为65.17%,明显高于单独耐药蛋白阳性表达率23.59%,5年总生存率分别为41.38%及41.67%低于单个或三者均阴性耐药蛋白表达者(84.62%、88.89%),差异有统计学意义(P<0.05)。③P-gp阳性表达者5年复发转移率为58.97%,高于P-gp阴性表达者(P<0.01)。结论:乳腺癌组织中耐药是单个耐药蛋白和多个耐药蛋白协同作用,以多个耐药蛋白共表达为主,联合检测耐药蛋白可预测乳腺癌的复发转移及预后。

ATRA耐药基因HA117相关蛋白在四种恶性肿瘤的表达及临床意义

目的探讨ATRA耐药基因HA117相关蛋白在肠腺癌、肺癌、乳腺癌及神经母细胞瘤组织中的表达特点及临床意义。方法以肠腺癌标本20例、肺癌标本23例、乳腺癌标本21例以及神经母细胞瘤标本20例手术切除组织为实验组；以巨结肠手术切除扩张段近切H缘的正常结肠组织10例、手术切除的肺癌癌旁组织9例、乳腺癌癌旁组织11例及神经母细胞瘤瘤旁组织14例为对照组；应用免疫组化S-P法检测HA117蛋白在上述组织切片中的表达，并结合临床资料进行回顾性分析。结果HA117在肠腺癌、肺癌、乳腺癌以及神经母细胞瘤组织中阳性表达明显高于非癌组织，差异具有统计学意义（P〈0．05）；HA117蛋白的阳性表达与肠腺癌、肺癌及乳腺癌患者的肿瘤分期、病理分型、淋巴结转移无明显相关性（P〉0．05），与神经母细胞瘤的病理分型和淋巴结转移有显著相关性（P〈0．05）。结论HA117蛋白在肠腺癌、肺癌、乳腺癌以及神经母细胞瘤组织的高表达提示这四种恶性实体肿瘤对ATRA具有较强的耐药性。

多药耐药相关蛋白、P53蛋白在乳腺癌中的表达

目的:探讨人乳腺癌组织中多药耐药相关蛋白(MRP)与P53蛋白的表达及关系。方法:采用免疫组化方法检测43例手术切除的乳腺癌标本中MRP与P53蛋白的表达,17例乳腺纤维腺瘤标本作为对照。结果:乳腺癌组织中MRP、P53蛋白的阳性率显著高于乳腺纤维腺瘤组(P<0.05);MRP的表达水平与年龄、月经状况、肿瘤大小、有无淋巴结转移、病理类型及TNM分期无关(P>0.05);P53蛋白的表达在有淋巴结转移时显著高于无淋巴结转移时,与年龄、月经状况、肿瘤大小、病理类型及TNM分期无关(P>0.05);MRP的阳性表达率与P53蛋白表达高低呈正相关(r=0.396)。结论:MRP表达程度不受乳腺癌病程发展的影响,P53蛋白与乳腺癌的发生、发展有关,对评估患者预后可能具有重要意义,P53蛋白对乳腺癌中MRP的表达可能起调控作用。

Survivin在乳腺癌新辅助化疗中的预期意义

目的:探讨Survivin在乳腺癌新辅助化疗中的预期意义及化疗对其表达的影响。方法:免疫组化SP法检测化疗前空芯针穿刺标本和化疗后手术切除的60例乳腺癌组织的Survivin的表达情况。化疗方案为CAF(CTX600mg/m2,ADM50mg/m2,5-FU500mg/m2)、CMF(CTX600mg/m2,MTX30mg/m2,5-FU500mg/m2)和TA(艾素75mg/m2,THP30mg/m2),疗程≥3个疗程,每3周1个疗程。化疗疗效采用体检、乳腺B超、钼靶检测及术后病理分析综合判断。结果:60例患者中CR3例,PR40例,SD17例,总有效率(CR+PR)为71.7%(43/60)。其中pCR1例,全组无恶化病例。60例患者中Sur-vivin阳性表达占51.7%(31/60),其中疗效明显占58.1%(18/31);Survivin阴性表达占48.3%(29/60),其中疗效明显占86.2%(25/29)。化疗前后均检测了Survivin的57例患者中阳性率从50.9%(29/57)升高至71.9%(41/57),其中有21.0%(12/57)患者由阴性表达转变为阳性表达。结论:Survivin可能是乳腺癌新辅助化疗反应的一个可靠指标,且化疗后其表达增强。

多药耐药相关蛋白在乳腺浸润性导管癌中的表达

目的探讨多药耐药基因产物P-糖蛋白(P-gp)、拓扑异构酶(TOPOⅡ)、谷胱甘肽转移酶(GST-π)、肺耐药蛋白(LRP)在乳腺浸润性导管癌中的表达及其临床意义。方法应用免疫组化SP法,对80例乳腺浸润性导管癌的主要耐药指标P-gp、TOPOⅡ、GST-π、LRP进行检测,并分析其与临床病理特征之间的关系。结果P-gp、TOPOⅡ、GST-π、LRP在乳腺浸润性导管癌的阳性表达率分别为40%、55%、65%、80%,P-gp、TOPOⅡ、GST-π、LRP在乳腺浸润性导管癌的表达无相关性。结论联合检测LRP、GST-π、TOPOⅡ、LRP对乳癌化疗药物的选择具有指导作用,对预后的判断有参考价值。

c-erbB-2、VEGF-c及激素受体在乳腺癌中的表达

目的 :探讨 c- erb B- 2、VEGF- c、ER、PR在乳腺癌组织中的表达及与临床病理特征之间的关系。方法 :采用PV- 90 0 0二步法分别检测 12 8例乳腺癌、2 5例乳腺良性病变中 c- erb B- 2、VEGF- c、ER、PR的表达。结果 :c- erb B- 2、VEGF- c、ER、PR的表达在乳腺良、恶性病变之间均有显著性差异 (P<0 .0 1) ,c- erb B- 2、VEGF- c的表达与乳腺癌淋巴结转移密切相关 (P<0 .0 1) ;ER、PR与 c- erb B- 2、VEGF- c的表达呈负相关 (P<0 .0 5 ) ;四种蛋白的表达均与乳腺癌发病年龄、肿瘤大小、是否浸润无关 (P>0 .0 5 )。结论 :c- erb B- 2、VEGF- c的过度表达预示着乳腺癌具有较强的转移能力 ,二种蛋白可能在乳腺癌的浸润转移过程中起协同作用。联合检测 c- erb B- 2、VEGF- c、ER、PR对预测乳腺癌的淋巴结转移、判断预后、指导临床治疗具有十分重要的意义。

新辅助化疗对乳腺癌ER、PR、P-gp、GST-π表达的影响

目的:探讨新辅助化疗对乳腺癌ER、PR、P-gp、GST-π表达的影响。方法:采用免疫组织化学法检测91例乳腺癌患者在新辅助化疗前后乳腺癌灶组织ER、PR、P-gp、GST-π的表达。结果:新辅助化疗前后ER有9例由阳性转为阴性,6例由阴性转阳性,P>0.05;PR有9例由阳性转为阴性,有11例由阴性转为阳性,P>0.05;P-gp在化疗前后的阳性表达率分别为41.75%和64.83%,差异有统计意义(P<0.05);GST-π在化疗前后的阳性表达率分别为49.45%和54.94%,差异无统计意义(P>0.05)。结论:新辅助化疗对乳腺癌组织ER、PR表达状态无显著影响;新辅助化疗后P-gp表达显著升高,对乳腺癌新辅助化疗疗效有一定预测价值。

p27蛋白在乳腺癌中的表达及预后关系

目的 :探讨p2 7蛋白在乳腺癌中的表达及其与预后的关系。方法 :采用免疫组化方法检测 60例乳腺癌组织p2 7蛋白的表达 ,分析与临床病理学特征的关系。结果 :p2 7在乳腺癌中的高表达率为61 67% (37 60 ) ,低表达率为 38.33% (2 3 60 )。p2 7低表达与乳腺癌肿瘤直径、分期、淋巴结转移、远处转移、预后差相关。结论 :p2 7蛋白的检测对鉴定无淋巴结转移但预后较差的乳腺癌患者 。